腹腔鏡下疝環(huán)閉合術(shù)輔助益生菌與腹腔鏡下疝環(huán)閉合術(shù)治療小兒腹股溝斜疝臨床對(duì)比研究

單星燃

河南安陽市婦幼保健院小兒外科 安陽 455000

在胚胎發(fā)育過程中,睪丸逐漸下移,隨之下移的腹膜形成一鞘突。嬰兒出生后不久,鞘突下段成為睪丸固有鞘膜,其余部分則閉鎖為纖維索帶,若閉鎖不全或未閉鎖,就成為先天性腹股溝斜疝的疝囊,是小兒外科的常見病,發(fā)病率約為4.8 %,以右側(cè)較多[1-2]。由于1歲以下嬰幼兒的腹肌隨軀體生長逐漸強(qiáng)壯,疝可能自愈,故可暫不手術(shù)。對(duì)1歲以上的嬰幼兒,亦無須修補(bǔ),單純疝囊高位結(jié)扎即可獲得滿意效果[3]。開放性疝囊高位結(jié)扎術(shù)是腹股溝疝的傳統(tǒng)術(shù)式,通過小切口完成手術(shù),但損壞腹股溝管處解剖結(jié)構(gòu),延長術(shù)后康復(fù)進(jìn)程[4]。隨著醫(yī)療技術(shù)進(jìn)展,腹腔鏡下疝環(huán)閉合術(shù)更符合微創(chuàng)理念,有利于術(shù)后康復(fù),已廣泛應(yīng)用于臨床。但氣腹及手術(shù)創(chuàng)傷仍可引發(fā)機(jī)體的炎性反應(yīng)和影響腸道功能。基于此,我們開展此項(xiàng)小樣本前瞻性研究,以初步探討腹腔鏡下疝環(huán)閉合術(shù)輔助益生菌與腹腔鏡下疝環(huán)閉合術(shù)治療小兒腹股溝斜疝的臨床效果。

1 資料和方法

1.1一般資料本研究已獲院倫理委員會(huì)審批。納入我院2019-11—2022-12收治的腹股溝斜疝患兒作為研究對(duì)象。納入標(biāo)準(zhǔn):(1)均依據(jù)病史、臨床表現(xiàn),以及超聲檢查確診為易復(fù)性腹股溝斜疝,并符合腹腔鏡疝環(huán)閉合術(shù)的指征[2]。(2)男性、單側(cè)發(fā)病,均擬行腹腔鏡疝環(huán)閉合術(shù)。(3)家屬簽知情同意書。排除標(biāo)準(zhǔn):(1)年齡<1歲,>13歲。(2)有下腹部手術(shù)史。(3)難復(fù)性疝、嵌頓疝,以及合并隱睪、包莖或包皮過長的患兒。(4)合并凝血功能障礙及重要臟器功能異常的患兒。退出標(biāo)準(zhǔn):(1)未按計(jì)劃完成有關(guān)指標(biāo)檢測。(2)術(shù)中改變手術(shù)方案者。根據(jù)治療方法不同分為腹腔鏡下疝環(huán)閉合術(shù)組(對(duì)照組)和腹腔鏡下疝環(huán)閉合術(shù)輔助益生菌治療組(觀察組)。

1.2方法2組均在氣管插管靜吸復(fù)合麻醉下經(jīng)臍環(huán)中心置入5 mm Trocar和腹腔鏡。鏡下采用雙鉤疝針帶結(jié)扎線經(jīng)腹膜外間隙環(huán)形套扎內(nèi)環(huán)口(2次)閉合疝環(huán)。具體步驟參考文獻(xiàn)[5]。觀察組:枯草桿菌二聯(lián)活菌顆粒(批號(hào):S20020037,京韓美藥品有限公司)于術(shù)后在應(yīng)用抗生素2 h后,≤40℃溫水沖服,1次/d,1 g/次。連續(xù)用藥3 d。

1.3觀察指標(biāo)(1)術(shù)后臨床指標(biāo):首次排氣時(shí)間、下床活動(dòng)時(shí)間、住院時(shí)間、并發(fā)癥。(2)術(shù)前、術(shù)后第3 天,取晨起空腹外周靜脈血3 mL,3 500 r/min離心10 min,取上清液,酶聯(lián)免疫吸附法檢測炎性反應(yīng)指標(biāo):血清白細(xì)胞介素(IL-6)、C反應(yīng)蛋白(CRP)水平。檢測腸道微生態(tài)指標(biāo): 通過無菌離心管收集新鮮糞便標(biāo)本,放于-80℃冰箱內(nèi)保存。取糞便樣本200 mg,凍融,于-20℃下保存待用。依據(jù)說明書步驟提取細(xì)菌DNA,按照基因庫內(nèi)雙歧桿菌、大腸桿菌的16SrDNA基因序列進(jìn)行引物設(shè)計(jì),經(jīng)公司合成,分別于數(shù)據(jù)庫內(nèi)予以對(duì)比。雙歧桿菌游引物為5-GATTCTGGCTCAGGATGAACGC-3、下游引物為5-CTGATAGGACGCGACCCCAT-3,擴(kuò)增片段是230 bp;大腸桿菌的上游引物為5-CATGCCGCGTGTATGAAGAA-3,下游引物為5-CGGGTAACGTCAATGAGCAAA-3,擴(kuò)增片段為95 bp。檢測引物的特異性,行熒光定量PCR,反應(yīng)體系為1 μL的上游引物、1 μL的下游引物、9 μL的SYBR Green、7 μL的DNA模板、2 μL的ddH2O;反應(yīng)條件為95℃預(yù)變性5 min,95℃40 s,55℃20 s,68℃40 s,循環(huán)40次,72℃延伸10 min結(jié)束。取10 μL的PCR產(chǎn)物、2 μL的LoadingBuffer予以混勻上樣,電泳瓊脂糖凝膠,能見PCR擴(kuò)增產(chǎn)物顯示特異性條帶;提取DNA,特異性引物擴(kuò)增,產(chǎn)物按照DNA瓊脂糖凝膠回收試劑盒說明純化回收,測純化產(chǎn)物的吸光度、濃度,換算為標(biāo)準(zhǔn)品1 μL的拷貝數(shù)制作曲線;提取DNA分別行16SrRNA的熒光定量PCR。設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品實(shí)施校正、ddH2O替代DNA模板作陰性對(duì)照,依據(jù)溶解曲線分析PCR產(chǎn)物特異性,Light Cycler PCR儀分析結(jié)果。含量用拷貝數(shù)/g濕便代表,即雙歧桿菌、大腸桿菌。

2 結(jié)果

2.1基線資料研究共納入符合納排標(biāo)準(zhǔn)的腹股溝斜疝患兒54例,每組27例。2組患兒的基線資料差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),見表1。

表1 2組患兒的基線資料比較

2.2術(shù)后臨床指標(biāo)觀察組患兒術(shù)后首次排氣時(shí)間、下床活動(dòng)時(shí)間、住院時(shí)間均短于對(duì)照組,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表2。2組術(shù)后均未發(fā)生疝囊積液、尿潴留、切口感染等并發(fā)癥。

表2 2組患兒術(shù)后臨床指標(biāo)比較

2.3炎性反應(yīng)指標(biāo)術(shù)前2組患兒的CRP、IL-6水平差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。術(shù)后第3 天,2組患兒的CRP、IL-6水平均較術(shù)前升高,其中觀察組患兒的CRP、IL-6 水平低于對(duì)照組,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表3。

表3 2組患兒手術(shù)前后的炎性反應(yīng)指標(biāo)比較

2.4腸道微生態(tài)指標(biāo)術(shù)前2組患兒的腸道微生態(tài)指標(biāo)水平差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。術(shù)后第3 天,2組患兒的雙歧桿菌低于術(shù)前,大腸桿菌高于術(shù)前、其中觀察組患兒的雙歧桿菌高于對(duì)照組、大腸桿菌低于對(duì)照組。差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表4。

表4 2組患兒腸道微生態(tài)指標(biāo)比較拷貝數(shù)/g濕便)

3 討論

與成年人腹腔鏡疝修補(bǔ)術(shù)比較,雖然小兒腹腔鏡腹股溝斜疝的疝環(huán)閉合術(shù)創(chuàng)傷更小[6],但其仍屬于有創(chuàng)操作,亦可引起機(jī)體劇烈的應(yīng)激反應(yīng),而影響腸黏膜的屏障功能,延緩術(shù)后康復(fù)[7-8]。腸道免疫功能依賴于完整的腸黏膜屏障,腸黏膜屏障功能可通過腸道雙歧桿菌、大腸桿菌反應(yīng)[9]。有研究指出,雙歧桿菌能利用Toll樣受體 2(TLR2)抑制肥大細(xì)胞,體外予以雙歧桿菌預(yù)防性干預(yù),可有效調(diào)節(jié)肥大細(xì)胞功能,增強(qiáng)免疫功能[10]。亦有報(bào)道指出,益生菌利用其免疫調(diào)節(jié)功能可促進(jìn)黏膜抗病原能力,甚至引起免疫耐受;并經(jīng)過作用至TLR2促進(jìn)細(xì)胞因子的形成,聚集/增強(qiáng)中性粒細(xì)胞功能,抑制促炎因子,減少黏附分子的表達(dá),增強(qiáng)免疫功能[11-12]。枯草桿菌二聯(lián)活菌顆粒能直接補(bǔ)充腸道處的益生菌,利用競爭作用阻止致病菌生長與繁殖,增加機(jī)體對(duì)于營養(yǎng)物質(zhì)吸收率,提高免疫力[13]。益生菌代謝產(chǎn)物可有助于調(diào)節(jié)腸道pH,抑制對(duì)有害物質(zhì)吸收,促進(jìn)腸道功能恢復(fù)[14]。

本研究通過病例對(duì)照分析,探討了腹腔鏡下疝環(huán)閉合術(shù)輔助枯草桿菌二聯(lián)活菌顆粒治療小兒腹股溝斜疝的效果。結(jié)果顯示,2組均未發(fā)生手術(shù)并發(fā)癥。觀察組患兒術(shù)后首次排氣時(shí)間、下床活動(dòng)時(shí)間以及住院時(shí)間均短于對(duì)照組;術(shù)后第3天時(shí)的CRP、IL-6水平低于對(duì)照組,雙歧桿菌高于對(duì)照組,大腸桿菌低于對(duì)照組。差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。充分說明腹腔鏡下疝環(huán)閉合術(shù)輔助枯草桿菌二聯(lián)活菌顆粒治療腹股溝斜疝患兒的良好效果和安全性。

綜上所述,腹腔鏡下疝環(huán)閉合術(shù)輔助枯草桿菌二聯(lián)活菌顆粒應(yīng)用于腹股溝斜疝患兒,可縮短康復(fù)進(jìn)程,抑制炎性反應(yīng),促進(jìn)胃腸黏膜功能恢復(fù)。但本次樣本量較少且收集區(qū)域、研究條件有限,其結(jié)論仍需進(jìn)一步開展更大樣本量的前瞻性、中心性隨機(jī)對(duì)照研究予以證實(shí)。