徐志旺,周佳俊,徐曉薇,解雷,張永普
(1. 溫州大學 生命與環境科學學院,浙江 溫州 325035;2. 溫州大學 生物多樣性保護與利用研究所,浙江 溫州 325035;3. 浙江省森林資源監測中心,浙江 杭州 310020;4. 溫州市林業技術推廣和野生動植物保護管理站,浙江 溫州 325000)
關鍵字:浙江省;翼手目;小黃蝠;COI 基因
小黃蝠ScotophiluskuhliiLeach,1821 隸屬于翼手目Chiroptera 蝙蝠科Vespertilionidae 黃蝠屬Scotophilus哺乳動物,國內主要分布于福建、廣東、香港、海南、廣西、云南和臺灣地區[1]。2022 年6 月,在溫州市陸生野生動物資源調查中,發現溫州高教園區多株絲葵Washingtoniafilifera上有集群分布的翼手目物種,種群規模達數十只,并采集2 只該翼手目物種標本,經形態特征與分子標記比對后確定該物種為小黃蝠,系浙江省首次記錄。
2022 年6 月17 日,在浙江省溫州市高教園區(27°54′57.96″N,120°41′44.72″E,海拔20 m)的一株絲葵上,用網兜捕獲了2 只翼手目蝙蝠標本。將標本帶回實驗室后,用75%酒精溶液固定后保存于溫州大學生命與環境科學學院動物標本室,標本號為WZU Ma22061701 和WZU Ma22061702。該種翼手目蝙蝠主要棲息于絲葵的宿存枯葉間(圖1A),樹下地面和草叢可見其黑褐色長粒狀排泄物(圖1B,1C)。

圖1 小黃蝠棲息地生境(A)和排泄物(B,C)Fig. 1 Habitat (A) and excreta (B, C) of S. kuhlii
在實驗室將活體標本置于封閉容器, 用GL124-1SCN 數顯電子天平(德國賽多利斯,±0.01 g)稱量體質量;經乙醚麻醉后,用ABS Digimatic 數顯游標卡尺(日本Mitutoyo,±0.01 mm)測量吻肛長、耳長、耳寬、耳屏長、耳屏寬、前臂長、第3 掌骨長、第3 指第1 和第2 節長、第4 掌骨長、第4 指第1 和第2 節長、第5 掌骨長、第5 指第1 和第2 節節長、脛長、后足長、距長和尾長;用卷尺(±1 mm)測量翼長。
在酒精溶液固定標本前,剪取每個標本各1 份后肢肌肉組織用于系統發育分析,組織樣本編號分別為Ma01和Ma02,使用試劑盒(B518251,上海生工)分別提取兩個組織樣本的DNA,基于擎科生物技術有限公司合成的MammMt-5533F(5′-CYCTGTSYTTRRATTTACAGTYYAA-3′)和MammMt-7159R(5′-GRGGTTCRAWWCC TYCCTYTCTT-3′)引物[2]擴增標本的線粒體細胞色素C 氧化酶亞基I(COI)基因片段,將擴增產物結果送至擎科生物技術有限公司測序。將測序結果經拼接和校對后利用美國國家生物技術信息中心(NCBI)中的BLAST功能進行比對,并根據比對相似度進行物種鑒定。下載蝙蝠科其他物種的COI基因,以土色小家鼠Musterricolor為外群,使用Mrbayes-3.1.2 構建系統發育樹。
捕獲到的2 只蝙蝠標本均為雌性個體,體型中等(表1)。無鼻葉,鼻孔稍微向外突出,吻鼻部幾乎無毛,體背部毛呈黃棕色,毛尖端顏色較深,腹毛土淺黃色,毛被短而緊密,耳較頭部略小,耳廓短且寬,耳屏呈月牙狀,耳廓外緣基部有瘤狀突起(圖2)。經鑒定2只蝙蝠標本均為小黃蝠。

表1 小黃蝠形態測量Tab. 1 Morphological traits of S. kuhlii

圖2 小黃蝠(♀)活體照(周佳攝)Fig. 2 Living photo of S. kuhlii
本研究對Ma01和Ma02兩個組織樣本的COI基因進行了雙向測序,除去兩端雜亂序列后得到全長均為1 507 bp 的序列,并上傳至NCBI,其中WZU Ma22061701 和WZU Ma22061702 的COI基因序列號分別為OP437602和OP437603。運用NCBI 中的BLAST 程序,將這兩個樣本的COI基因片段序列與NCBI 數據庫中的同源序列進行比對,發現其均與小黃幅的COI基因序列相似度較高。基于COI基因構建了貝葉斯系統發育樹,結果顯示標本與小黃蝠序列聚在一起形成高支持率的一支(貝葉斯后驗概率為1),同時又與大黃蝠S.heathii形成姐妹群。綜上所述,分子標記結果支持本研究的樣本為小黃蝠(圖3)。

圖3 基于COI 基因序列構建貝葉斯系統發育樹Fig. 3 Bayesian phylogenetic tree based on COI gene
小黃蝠隸屬于黃蝠屬,目前全球已發現黃蝠屬物種21 種,主要分布于非洲和亞洲南部地區[3-4],國內僅有小黃蝠和大黃蝠2 種分布[1]。小黃蝠與大黃蝠的外表和習性兩者間差異較小,體型和前臂長兩者差異較大[1,5]。小黃蝠的體型小于大黃蝠,前臂長明顯短于大黃蝠。劉少英等[1]記錄小黃蝠的前臂長為47 ~ 56 mm,大黃蝠的前臂長為58 ~ 69 mm;Smith 和解焱[5]記錄小黃蝠的前臂長為44 ~ 55 mm,大黃蝠的前臂長為55 ~ 69 mm。本次采集的兩只標本的前臂長分別為53.34 和53.60 mm,與文獻記錄的小黃蝠特征相符。對小黃蝠生境和習性繼續觀察時發現,10 月份均未發現小黃蝠活動,可能于10 月前已遷移離開溫州高教園區的棲息地,這一遷移特征與吳毅等[6]的研究結果相吻合。分子系統學結果顯示兩只標本的COI基因序列與NCBI 庫中的小黃蝠序列聚為一支,大黃蝠序列聚為另一支,同時小黃蝠與大黃蝠序列一起聚為高置信度的一大支,符合小黃蝠和大黃蝠為同屬不同種的分類學特征,因此,分子系統學結果很好地支持了本研究的標本為小黃蝠。
《浙江動物志》(浙江動物志編輯委員會,1989)記錄了浙江翼手目物種3 科10 屬23 種[7],近年來浙江省翼手目新增記錄3 種,分別為中管鼻蝠Murinahuttoni[8]、毛翼管鼻蝠Harpiocephalusharpia[9]和無尾蹄蝠Coelopsfrithii[10]。福建省是小黃蝠分布的最北端[11-12]。迄今為止,浙江省未曾有黃蝠屬物種記錄。本次在浙江省發現小黃蝠,使該物種地理分布的最北緣從福建擴散到了浙江溫州,擴大了該物種的地理分布范圍。小黃蝠在浙江省的新發現很好地補充了其地理分布的生物學數據,對小黃蝠的地理分布及區系研究具有重要意義,并為浙江省翼手目物種多樣性的保護提供參考資料。