HIV/AIDS 合并機會性感染患者IP-10、SAA、hs-CRP、PCT、CD4+ T 細胞計數檢測的意義

趙 靜 李永勤 李 艷 范偉光 楊學剛

（1. 保定市人民醫院感染科，河北 保定 071000；2. 保定市人民醫院檢驗科，河北 保定 071000）

機會性感染（opportunistic infection，OI）是指當人體免疫功能下降時，寄生于人體中的一些非致病性微生物導致的感染或對致病微生物的易感性增加而發生的感染。OI是導致獲得性免疫缺陷綜合征（acquired immunodeficiency syndrome，AIDS）患者死亡的重要原因，是人類免疫缺陷病毒（human immunodeficiency virus，HIV）感染和AIDS（簡稱HIV/AIDS）患者管理的關鍵，有超過50%的HIV/AIDS患者死亡與OI有關[1-2]。由于病毒和宿主、抗病毒啟動的時機差異，不同患者表現出不同的免疫狀態。本研究擬通過檢測HIV/AIDS患者外周血中γ-干擾素誘導蛋白10（interferon-gamma induced protein 10，IP-10）、高敏C反應蛋白（high-sensitivity C-reactive protein，CRP）、血清淀粉樣蛋白A（serum amyloid A，SAA）、降鈣素原（procalcitonin，PCT）、CD4+T細胞計數，探討OI對AIDS病程進展的影響。

1 材料和方法

1.1 研究對象

采用回顧性病例對照方式，選取2019年5月—2021年2月在保定市人民醫院接受治療和隨訪的HIV/AIDS患者187例，其中男165例、女22例，年齡（39.15±12.92）歲。根據是否合并OI將187例患者分為OI組[63例，其中男57例、女6例，年齡（39.07±13.19）歲]和無OI組[124例，其中男108例、女16例，年齡（39.30±12.47）歲]；合并OI的HIV/AIDS患者根據隨訪結果分為預后良好組（45例）和預后不良組（18例）。追蹤所有患者感染途徑，經性傳播途徑感染169例（90.37%）。OI涉及的疾病有馬爾尼菲青霉菌病、細菌性肺炎、結核病、口腔念珠菌病、卡氏肺孢子菌肺炎、巨細胞病毒感染、皰疹病毒感染、新型隱球菌腦膜炎，有40例合并2種及以上感染。納入標準：經保定市疾病預防控制中心采用蛋白免疫印跡法確診為HIV-1抗體陽性，OI的診斷參照《中國艾滋病診療指南（2021年版）》[3]中的診斷標準。本研究經保定市人民醫院醫學倫理委員會審核批準[【2020】科倫審字（07）號]，所有患者均簽署知情同意書。

1.2 方法

采集所有患者就診（治療前）和復診（治療4周后）時的靜脈血樣本，檢測SAA、PCT、hs-CRP水平，另檢測所有患者治療前的CD4+T細胞計數。剩余靜脈血樣本分離血漿后-80 ℃凍存，統一檢測IP-10和HIV RNA。

采用FS-301全自動免疫熒光定量檢測儀（廣州萬孚公司）和配套試劑（免疫熒光法）檢測SAA、PCT、hs-CRP。采用FACS Calibur流式細胞儀（美國BD公司）和配套試劑進行CD4+T細胞計數。采用酶聯免疫吸附試驗檢測血漿IP-10水平，試劑盒（檢測限為3.5 pg/mL，線性范圍為31.25～2 000.00 pg/mL）購自杭州聯科生物技術有限公司，檢測儀器為Multiskan MK3酶標儀（美國ThermoFisher Scientific公司）。采用cobas TaqMan全自動病毒載量分析系統（瑞士羅氏公司）和配套試劑檢測HIV RNA載量，檢測下限和定量下限均為20拷貝/mL。嚴格按儀器和試劑說明書進行操作。

1.3 統計學方法

采用SPSS 25.0軟件進行統計分析。采用GraphPad Prism 9.0軟件作圖。呈非正態分布的計量資料以中位數（M）[四分位數（P25～P75）]表示，2個組之間比較采用Mann WhitneyU檢驗，多組間比較采用Kruskal-Wallis檢驗。采用Logistic回歸分析評估HIV/AIDS患者合并OI的危險因素。采用Spearman秩相關分析評估各項指標之間的相關性。采用受試者工作特征（receiver operating characteristic，ROC）曲線評估各指標診斷HIV/AIDS患者合并OI的效能，以P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 各組治療前后SAA、PCT、hs-CRP和IP-10水平比較

治療前預后良好組和預后不良組SAA、PCT、hs-CRP和IP-10水平均顯著高于無OI組（P<0.05），預后不良組治療前IP-10水平高于預后良好組（P<0.05）。預后良好組和無OI組治療4周后SAA、PCT、hs-CRP和IP-10水平均低于治療前（P<0.05），而預后不良組治療前后各項指標差異均無統計學意義（P>0.05）。見表1。

表1 各組治療前后SAA、PCT、hs-CRP和IP-10水平比較

2.2 SAA、PCT、hs-CRP和IP-10診斷HIV/AIDS患者OI的效能

以無OI組為對照，ROC曲線分析結果顯示，SAA、PCT、hs-CRP和IP-10診斷OI的曲線下面積（area under curve，AUC）分別為0.849、0.707、0.793、0.760。見圖1、表2。

表2 SAA、PCT、hs-CRP和IP-10診斷HIV/AIDS患者OI的效能

2.3 HIV/AIDS 患者合并OI的危險因素分析

2.3.1 單因素分析

根據SAA、PCT、hs-CRP和IP-10的最佳臨界值分別分組。單因素分析結果顯示，OI組和無OI組不同CD4+T細胞、SAA、PCT、hs-CRP和IP-10水平所占比例差異均有統計學意義（P<0.05）。不同年齡、性別、感染途徑和HIV RNA載量所占比例2個組之間差異均無統計學意義（P>0.05）。見表3。

表3 OI組與無OI組之間各項指標的單因素分析

2.3.2 多因素Logistic回歸分析

多因素Logistic回歸分析結果顯示，CD4+T細胞計數減少和SAA、PCT、hs-CRP、IP-10升高是HIV/AIDS患者合并OI的危險因素[比值比（odds ratio，OR）值分別為0.028、15.606、25.499、9.147、10.303，95%CI分別為0.006～0.128、3.224～75.532、1.544～421.002、1.705～49.071、2.582～41.118，P<0.05]。見表4。

表4 HIV/AIDS患者合并OI的危險因素分析

2.4 IP-10、SAA、hs-CRP、PCT與CD4+ T細胞計數的相關性

IP-10、SAA、hs-CRP、PCT與CD4+T細胞計數均呈負相關（r值分別為-0.297、-0.390、-0.348、-0.264，P<0.05）。

3 討論

HIV/AIDS患者的OI病原體種類繁多，常發生混合性感染，癥狀不典型，易復發，臨床診治較為困難[4]，且OI是AIDS患者死亡的重要原因。因此，早期發現和識別AIDS患者的OI非常重要。

CD4+T細胞是一種輔助性T淋巴細胞，是HIV進入人體后感染的主要靶細胞，可引起CD4+T細胞進行性減少。MOORE等[5]發現，CD4+T細胞數量減少是AIDS患者合并OI的主要原因。目前，CD4+T細胞計數已成為判定AIDS患者病情、預測臨床進展和評價抗病毒治療療效的重要指標[6]。本研究結果顯示，CD4+T細胞計數減少是HIV/AIDS患者發生OI的危險因素（OR=0.028，95%CI為0.006～0.128），相對于CD4+T細胞<200個/μL的HIV/AIDS患者，CD4+T細胞≥200個/μL的患者發生OI的風險降低97.2%。本研究中，OI組和無OI組HIV RNA載量差異無統計學意義（P>0.05），與BOULWARE等[7]的報道一致，與王政等[8]的報道不一致，可能是由于統計方法不同所致。研究AIDS患者HIV RNA載量下降的程度更有意義[9]，但本研究由于隨訪患者較少而未進行分析，這也是本研究的不足之處。

當機體受到細菌、病毒、真菌、原蟲等的刺激后，會產生一系列的病理生理變化，如白細胞介素1、白細胞介素6、腫瘤壞死因子α調控表達升高，促使肝臟合成大量淀粉樣蛋白A和CRP，在急性感染期，SAA、CRP可升高達1 000倍；PCT由甲狀腺C細胞產生，細菌感染時會被大量釋放入血液[10]。SAA是細菌、病毒感染的雙敏感因子[11]，PCT、CRP只對細菌感染敏感[12]。本研究結果顯示，合并OI的HIV/AIDS患者治療前SAA、PCT、hs-CRP、IP-10水平顯著高于未合并OI的患者（P<0.05），治療4周后，預后良好組和無OI組SAA、PCT、hs-CRP、IP-10水平均顯著降低（P<0.05），但是預后不良組治療前后差異無統計學意義（P>0.05），SAA、PCT、hs-CRP和IP-10升高是HIV患者合并OI的危險因素[OR值分別為15.606、25.499、9.147、10.303，95%CI分別為3.224～75.532、1.544～421.002、1.705～49.071、2.582～41.118，P<0.05]，與文獻報道[14-15]一致。CRP、SAA、PCT水平與HIV疾病進展和OI有關，基線CRP、SAA、PCT水平較高的HIV/AIDS患者更易發生OI，對HIV/AIDS患者預后評估也有一定的價值[13-14]。

IP-10是目前研究較多的一種γ干擾素誘導趨化因子，屬于一種促炎因子，參與了白細胞遷移至炎癥組織的過程，維持炎癥反應，在炎癥性組織損傷中起關鍵作用，是很多感染性疾病、自身免疫性疾病和腫瘤進展相關的標志物[15-17]。本研究結果顯示，預后不良組、預后良好組、無OI組IP-10水平依次升高（P<0.05），這與CRP、SAA、PCT等急性時相反應蛋白的表現不同。ROC曲線分析結果顯示，IP-10診斷OI的Youden指數最高（0.703），說明IP-10判定OI的真實性優于急性時相反應蛋白。這可能是由于IP-10不僅募集、活化T細胞等免疫細胞，參與炎癥反應，導致一些細胞因子水平發生變化；還參與了HIV的復制過程，促進靜息記憶CD4+T細胞中潛伏的HIV激活；另外，高水平的IP-10會抑制T細胞的增殖能力和自然殺傷細胞的功能，不僅增加了HIV高危人群對HIV的易感性，也增加了對其他病原體的易感性[18-19]。

本研究結果還顯示，IP-10、SAA、hs-CRP、PCT與CD4+T細胞計數均呈負相關（r值分別為-0.297、-0.390、-0.348、-0.264，P<0.05）。進一步說明SAA、PCT、hs-CRP、IP-10與HIV/AIDS患者合并OI有關。

綜上所述，SAA、PCT、hs-CRP、IP-10在HIV/AIDS患者合并OI的診斷和預后評估中均有一定價值。由于本研究樣本量較小，且缺乏隨訪數據，因此研究結論尚需大樣本、多中心研究進一步驗證。