37.5%噻蟲嗪·氟蟲腈懸浮劑的高效液相色譜分析

王曉玉，李二潤，譚頭云，楊水苗

(浙江永農生物科學有限公司，浙江 紹興 312000)

噻蟲嗪(thiamethoxam)是一種高效、低毒的第2代煙堿類殺蟲劑，具有胃毒、觸殺和內吸活性，常用于種子處理及葉片噴霧[1-2]，其對蚜蟲、飛虱、葉蟬、薊馬、白粉虱以及馬鈴薯甲蟲的防治效果較好，且穩定性好，持效期長[3]。氟蟲腈(fipronil)是一種高效、廣譜的新型苯基吡唑類殺蟲劑，對蚜蟲、飛虱具有較好的殺蟲活性，可用于棉花、玉米、水稻、蔬菜及果樹等多種作物的害蟲防治[4-5]。目前，關于噻蟲嗪、氟蟲腈單劑或與其他藥劑復配的液相分析方法已有報道，但2 者復配制劑產品分析方法未見報道。基于此，本文采用高效液相色譜儀實現了37.5%噻蟲嗪·氟蟲腈懸浮劑中有效成分的分離與測定，且具有方便、快速、準確的特點。

1 材料與方法

1.1 儀器和試劑

美國Agilent 1260型高效液相色譜儀配DAD檢測器、自動進樣器及Agilent 1260色譜工作站；KH7200DE型超聲波清洗器(昆山禾創超聲儀器有限公司)；SQP型電子天平(賽多利斯公司)。

乙腈(色譜純，美國阿斯頓技術有限公司)；純凈水(娃哈哈水)；噻蟲嗪標準品、氟蟲腈標準品(≥98.0%，沈陽國家農藥質量檢測中心)；37.5%噻蟲嗪·氟蟲腈懸浮劑(其中噻蟲嗪17.5%、氟蟲腈20.0%，永農生物科學有限公司)。

1.2 色譜操作條件

Eclipse Plus-C18不銹鋼柱色譜柱為250 mm×4.6 mm，粒徑5μm；流動相：乙腈∶水＝70∶30(體積比)；檢測波長：280 nm；流速：1.0 mL/min；進樣體積：5μL；柱溫：35 ℃。保留時間：噻蟲嗪約為3.1 min，氟蟲腈約為7.7 min。

上述色譜操作條件系典型操作條件，檢測時可根據儀器特點的不同，對方法中給定的操作參數做適當的調整，以獲得最佳效果。典型的標樣和試樣液相色譜圖見圖1。

圖1 37.5%噻蟲嗪·氟蟲腈懸浮劑標準品及樣品的高效液相色譜圖

1.3 溶液配制

1.3.1 標樣溶液的配制

稱取噻蟲嗪標準品0.035 g、氟蟲腈標準品0.04 g(精確至0.000 1 g)，置于100 mL容量瓶中，用流動相溶解并定容，超聲振蕩5 min使樣品充分溶解，冷卻至刻度，搖勻。

1.3.2 試樣溶液的配制

準確稱取試樣0.2 g(精確至0.000 1 g)，置于100 mL容量瓶中，用流動相溶解并定容，超聲波振蕩5 min使樣品充分溶解，冷卻至刻度，搖勻，過0.45μm有機系濾膜，備用。

1.4 測定

在上述色譜操作條件下，待儀器運行基線穩定后，先注入數針標樣溶液，直至噻蟲嗪(氟蟲腈)連續2針進樣的峰面積相對偏差不大于1%時，按照標樣溶液、試樣溶液、試樣溶液、標樣溶液順序進樣。

2次平行測定結果之差，噻蟲嗪、氟蟲腈分別應不大于0.5%，取其算術平均值，作為測定結果。

1.5 計算

將2針試樣溶液及試樣溶液前后2針標樣溶液噻蟲嗪和氟蟲腈的峰面積分別進行平均，試樣中噻蟲嗪(氟蟲腈)質量分數X1按下式計算：

式中：A1為標樣溶液中，噻蟲嗪或氟蟲腈峰面積的平均值；A2為試樣溶液中，噻蟲嗪或氟蟲腈峰面積的平均值；m1為噻蟲嗪或氟蟲腈標樣的質量(g)；m2為試樣的質量(g)；P為標樣中噻蟲嗪或氟蟲腈的質量分數(%)。

2 結果與討論

2.1 檢測波長的選擇

通過Agilent 1260高效液相色譜儀DAD檢測器的光譜數據采集功能，于190～400 nm的波長范圍內掃描，見圖2。可見，在280 nm處，噻蟲嗪或氟蟲腈的峰面積和峰高的差距最小，且無明顯雜質和助劑干擾。

圖2 噻蟲嗪和氟蟲腈的DAD掃描圖

2.2 流動相的選擇

試驗選擇Eclipse Plus-C18色譜柱，選用不同比例的乙腈+水、甲醇+水、甲醇+乙腈+水作為流動相進行試驗，結果發現以乙腈∶水=70∶30(體積比)作為流動相、流速1.0 mL/min時，出峰時間短，分離效果好，峰形尖銳，且無其他雜質的干擾。

2.3 分析方法的線性關系曲線

分別配制5個不同質量濃度的噻蟲嗪(或氟蟲腈)標準溶液，在上述條件下對噻蟲嗪(或氟蟲腈)進行分析，取2次測定的峰面積平均值作為測定結果。以噻蟲嗪(或氟蟲腈)質量濃度(mg/mL)為橫坐標，峰面積為縱坐標繪制標準曲線，見圖3。噻蟲嗪(或氟蟲腈)質量濃度與其響應值之間呈現出良好的線性關系，其回歸方程分別為：噻蟲嗪y=5 629.6x+42.829，R2=0.999 4；氟蟲腈y=4 792.1x+42.616，R2=0.999 3。

圖3 噻蟲嗪、氟蟲腈質量濃度與其響應值之間的線性關系圖

2.4 分析方法的精密度

對同一樣品稱取10個試樣在上述色譜操作條件下進行平行測定，結果見表1。噻蟲嗪和氟蟲腈的標準偏差分別為0.06和0.05；變異系數分別為0.36%和0.25%，說明此方法的精密度良好。

表1 37.5%噻蟲嗪·氟蟲腈懸浮劑精密度測定

2.5 分析方法的準確度

在已知含量的試樣中加入一定量的噻蟲嗪、氟蟲腈的標樣，按上述色譜操作條件進行測定，計算每個樣品的回收率并計算其平均回收率，結果見表2。噻蟲嗪的回收率為99.68%～100.35%，平均回收率為99.94%；氟蟲腈的回收率為99.65%～100.15%，平均回收率為99.84%，說明該方法具有較高的準確度，滿足定量分析要求。

表2 37.5%噻蟲嗪·氟蟲腈懸浮劑準確度測定

3 結論

本文采用高效液相色譜法建立了37.5%噻蟲嗪·氟蟲腈懸浮劑有效成分的定性定量分析方法，具有分離效果好、精密度和準確度較高以及省時、簡便、準確等特點，可以滿足生產企業生產中該產品的質量控制要求。