25%嘧環·咯菌腈懸浮劑的分析方法研究

唐薇，熊宇，高立明，王廣成，許艷秋

(1.眉山市農業質量檢測中心，四川 眉山 620020；2.四川省農業農村廳植物保護站，成都 610041)

嘧菌環胺(cyprodinil)是由先正達公司開發的一類嘧啶胺類殺菌劑，可抑制真菌水解酶的分泌和病原菌細胞中蛋氨酸的合成，從而發揮殺菌作用[1]。嘧菌環胺兼具保護和治療活性，對灰霉病、斑點落葉病、黑星病等有很好的防治效果，與三唑類、咪唑類、嗎啉類、二羧酸亞胺類、苯基吡咯類殺菌劑無交互抗性，對敏感或抗性病原菌均有優異的活性[2]。咯菌腈(fludioxonil)是新型苯基吡咯類殺菌劑，通過抑制葡萄糖磷酰化的有關運轉以及病菌孢子的萌發，進而干擾真菌菌絲體的生長，促使病原菌死亡[3]。咯菌腈具有廣譜、高效、低毒、低殘留的特點，與現有殺菌劑無交互抗性，被廣泛用于多種農作物種子處理，防治種子帶菌及土壤傳播的真菌病害[4-5]。為最大限度發揮2 種單劑的殺菌效果，減少使用劑量，延緩病原菌抗藥性的產生，減少農民用藥成本，通過科學復配了嘧環·咯菌腈混劑，在農業生產中主要用于防治灰霉病和菌核病等。隨著不同嘧環·咯菌腈混劑的生產、銷售和使用，農藥質量問題應引起關注，混劑的質量檢測很有必要。目前，有關63%咯菌腈·嘧菌環胺水分散粒劑的液相色譜分析方法已有文獻報道[6]，但未見25%嘧環·咯菌腈懸浮劑的檢測方法，也未看到該2 種農藥制劑的氣相色譜檢測方法報道，因此，本文采用氣相色譜建立了一種能夠同時高效、準確地測定嘧環·咯菌腈懸浮劑中有效成分含量的方法，可用于嘧環·咯菌腈懸浮劑等相關產品的質量控制和檢測。

1 材料與方法

1.1 儀器

7890A 型氣相色譜儀，FID 檢測器，配自動進樣器(美國安捷倫科技有限公司)；HLPT-5A 型空氣發生器、HLPT-50 型氫氣發生器(北京匯龍昌海科貿有限公司)；BCE224-1CCN 型分析天平[賽多利斯科學儀器(北京)有限公司]。

1.2 試劑

99.0 %嘧菌環胺標準品(北京北納創聯生物技術研究所)；98.5%咯菌腈標準品(北京北方偉業計量技術研究所)；25%嘧環·咯菌腈懸浮劑(杭州宇龍化工有限公司，市售)；丙酮、磷酸三苯酯(成都市科隆化學品有限公司)，均為分析純。

1.3 色譜操作條件

檢測器為FID；檢測器溫度為280 ℃；色譜柱為DB-1 毛細管色譜柱，30 m×0.32 mm×0.25 μm；程序升溫為120 ℃，保持2 min，以10 ℃/min 升至280 ℃，保持5 min；進樣口溫度為280 ℃；柱流速(N2)為1.0 mL/min；氫氣(H2)流量為40 mL/min；空氣(Air)流量為400 mL/min；尾吹(N2)為30 mL/min；分流比為50∶1；進樣體積為1.0 μL。采用內標法定量。在該色譜操作條件下嘧菌環胺、咯菌腈和磷酸三苯酯的保留時間分別約為13.89、14.70、16.76 min，嘧環·咯菌腈+內標的典型色譜圖如圖1。

圖1 嘧環·咯菌腈+內標的氣相色譜圖(進樣質量濃度：嘧菌環胺2.65 g/L，咯菌腈1.72 g/L，磷酸三苯酯1.28 g/L)

1.4 測定步驟

1.4.1 溶液的配制

內標溶液：稱取磷酸三苯酯6.4 g (精確至0.000 2 g)，置于1 000 mL 容量瓶中，加入適量丙酮溶解并稀釋至刻度，搖勻備用。

標準溶液：準確稱取嘧菌環胺和咯菌腈標準品分別為0.06 g、0.04 g(精確至0.000 2 g)，置于同一個25 mL 的容量瓶中，加入適量丙酮，使標樣完全溶解后，再準確加入5.00 mL 上述配制內標溶液，用丙酮稀釋至刻度，搖勻備用。

樣品溶液：稱取25%嘧環·咯菌腈懸浮劑樣品0.4 g(精確至0.000 2 g)，置于25 mL 容量瓶中，加入少量水分散，用適量丙酮完全溶解后，準確加入5.00 mL 上述配制內標溶液，用丙酮稀釋至刻度，搖勻備用。

1.4.2 測定

按照1.3 節色譜操作條件設置氣相色譜，待基線平穩后，連續進樣數針標準溶液，直至相鄰2 針嘧菌環胺(或咯菌腈)與內標物峰面積相對變化小于1.5%后，按照標準溶液、樣品溶液、樣品溶液、標準溶液的順序進樣測定。

1.5 計算

按照下式計算樣品中嘧菌環胺(或咯菌腈)的質量分數ω(%)：

式中：R1為標準溶液中，嘧菌環胺(或咯菌腈)與內標物峰面積比的平均值；R2為樣品溶液中，嘧菌環胺(或咯菌腈)與內標物峰面積比的平均值；m1為嘧菌環胺(或咯菌腈)標樣的質量(g)；m2為試樣的質量(g)；ω1為標樣中嘧菌環胺(或咯菌腈)的質量分數(%)。

2 結果與討論

2.1 分析方法的線性關系

分別稱取0.034 5g+0.020 7 g、0.052 2 g+0.033 4 g、0.067 0 g+0.043 7 g、0.078 6 g+0.057 8 g、0.0902 g+0.063 4 g，5 份不同質量的嘧菌環胺+咯菌腈標準品，按1.4.1 節方法配制成系列標準溶液后，在1.3 節色譜操作條件分別測定，以嘧菌環胺(或咯菌腈)和磷酸三苯酯的質量比為橫坐標，峰面積比值為縱坐標擬合方法線性相關性，結果表明供試藥劑質量比值與其響應值之間呈現出良好的線性關系，其線性回歸方程和相關系數分別為：嘧菌環胺y=1.132 5x-0.029 4，R2=0.998 2；咯菌腈y=0.705 1x+0.012 1，R2=0.999 8。

2.2 分析方法的精密度

準確稱取一定質量的嘧環·咯菌腈懸浮劑樣品6 份，按1.4.1 節方法配制成樣品溶液，測定嘧菌環胺和咯菌腈的質量分數，計算其對應的標準偏差和變異系數，結果見表1。可見，測得嘧菌環胺和咯菌腈質量分數的標準偏差和變異系數均小于修改的Horwitz 公式計算結果，說明該分析方法的精密度符合要求。

表1 分析方法的精密度測定

2.3 分析方法的準確度

準確稱取6 份嘧環·咯菌腈懸浮劑樣品，分別添加一定量的嘧菌環胺和咯菌腈標準品，按1.4.1 節方法配制成樣品溶液，測定嘧菌環胺和咯菌腈的質量分數，計算添加回收率，結果見表2。可見，測得嘧菌環胺和咯菌腈的添加回收率均在99.30%～100.04%，平均回收率分別為99.54%、99.70%，說明該分析方法的準確度高。

表2 分析方法的準確度測定

3 結論

本文采用GC-FID建立了同時檢測25%嘧環·咯菌腈懸浮劑中有效成分的定量分析方法，具有線性關系良好、重現性好、準確度高的優點，此方法準確、簡便、快捷，能滿足農藥產品質量分析有關標準的要求，可用于嘧環·咯菌腈產品的質量控制。