一例草魚水霉菌與指環蟲混合感染的診斷與治療

黎 英，王文成

(1.銅仁市碧江區農業農村局，貴州 銅仁 554300；2.銅仁市碧江區川硐農業服務中心，貴州 銅仁 554300)

草魚水霉病又稱為白毛病，其病原主要為水霉菌。該病一旦發生在魚群中傳播速率極快，可導致病魚體表鱗片脫落，病變部位出現棉絮狀白色菌絲，繼而引起組織發炎等癥狀且死亡率高。指環蟲是一種魚養殖過程中十分常見的寄生蟲。該病原主要寄生于魚的鰓部，可導致病魚消瘦、鰓絲分泌過多黏液而呼吸困難和繼發感染其他病原，繼而導致較高的死亡率，給養殖戶造成巨大的經濟損失。

銅仁市漁業資源豐富，近年來該地區養魚業發展迅速，越來越多農戶通過養魚實現小康，但隨著養殖密度的提高和養殖模式的改變，魚在養殖過程中發生多種病原混合感染較為常見，給疾病診斷和防治帶來巨大的困難，繼而造成嚴重的經濟損失。2022年8月初，銅仁市碧江區某漁場養殖的草魚群發生疫病，且導致較高的病死率，經過診斷確定該場魚群發病是水霉菌和指環蟲混合感染引起。根據診斷結果采取了系列防治措施，最終使疫情得到有效控制。

一、發病情況

該農戶擁有魚塘約8 畝，已從事草魚養殖約6 年，池塘水深為2 米左右，水源為附近河流水。2022年4月初外購草魚種苗約400千克，引入種苗后有部分魚苗出現疑似水霉病癥狀，將種苗進行消毒后飼養，僅極少數魚苗死亡，遂未引起該農戶的重視。2022 年8 月初，部分草魚出現活動遲緩、呼吸困難，對外界刺激反應遲鈍等現象，且部分發病魚群表面出現白色絮狀物質且魚鱗脫落等。漁場負責人向池塘噴灑聚維碘酮溶液進行消毒，但治療效果較差，且每天均有病魚死亡。

二、臨床癥狀及病理變化

觀察瀕臨死亡病魚臨床癥狀，可見病魚頭部有類似霉變的白色絮狀物，手按病處可感受到肌肉無力；病魚表面無光澤，且魚鰓處黏液較多，鰓絲有大量出血或充血點。剖檢病魚可見病變部位主要集中于魚鰓部和表皮，內部器官病變較少或不明顯。

三、實驗室診斷

1.細菌分離試驗

為確定該場魚群發病是否由細菌性病原感染引起，于是采集病魚鰓部組織、黏液、水霉、部分組織器官樣品(如肝臟和腸組織)放入離心管內，加入適量滅菌PBS溶液后勻漿。離心管靜置后用滅菌接種環蘸取少量上清分別在鮮血瓊脂培養基和普通瓊脂培養基表面進行平板劃線，將平板置于37℃恒溫箱內培養24 小時后觀察表面是否出現疑似菌落。結果發現，兩種平板表面均未出現疑似菌落，提示該場草魚發病不是由細菌性病原感染引起。

2.寄生蟲檢測

為探究該場魚群發病是否由寄生蟲感染所導致，于是采集病魚鰓部組織及黏液樣品與少量生理鹽水混勻。用移液器吸取少量上清滴加在載玻片上，放置于光學顯微鏡下觀察是否有疑似寄生蟲或蟲卵(卵囊)等，并根據其形態學特征進行初步鑒定。結果在顯微鏡下可見大量扁平呈柳葉狀蟲體，其后吸器在體后端，可見較明顯的邊緣小鉤等。根據蟲體形態學特征可將其鑒定為指環蟲。筆者還采集了病原腸組織內容物和肝臟等，采用水洗沉淀法和飽和鹽水漂浮法分別對樣品處理后檢測是否存在寄生蟲蟲卵或卵囊，發現未見疑似蟲卵和卵囊。

3.草魚水霉病的病原檢測

由于細菌分離和寄生蟲檢測均不能確定草魚水霉病的致病原，筆者建議該場負責人將病魚送至專業的病原分子診斷實驗室進行檢測。該診斷實驗室工作人員通過PCR 技術擴增了水霉病原ITS基因部分序列，其后將PCR產物測序后進行序列比對，最終確定導致草魚水霉病的致病原為寄生水霉菌。

四、診斷結果

根據該場病魚臨床特征、病情變化結合實驗室診斷結果，可判定由水霉菌和指環蟲混合感染引起的草魚發病。

1.主要防治措施

系列診斷結果表明，該場發病是由水霉菌和指環蟲混合感染所引起，故筆者建議漁場負責人對兩種病原采取針對性治療。

2.指環蟲的治療措施

采取“先殺蟲、再殺菌”的策略，首先針對指環蟲病進行了治療。將“指環清”兌水稀釋(100 克/畝)后向池塘均勻噴灑，并開增氧機提高水中溶氧；在飼料中添加恩諾沙星和電解多維，防止魚群繼發感染其他細菌性病原，且提高免疫力。注意拌喂之前需停止飼喂1天，使魚群處于半饑餓狀態，提高魚對拌喂飼料的采食量。此外，還引入了部分活水，并向池塘中噴灑消毒劑進行消毒。

3.水霉病的治療措施

對于水霉菌感染引起的水霉病，由于已有部分發病魚群表面出現明顯癥狀，霉菌已入侵病魚組織中，依靠傳統水上潑灑藥物治療效果可能較差。在實施針對指環蟲病治療措施3天后，該場負責人將全場魚群打撈上來，并無害化處理部分發病嚴重魚群，將其他魚群浸泡于高濃度的高錳酸鉀溶液中20 分鐘后放入池塘；為防止有部分病魚未打撈上來和進一步鞏固治療效果，向池塘中潑灑了生石灰(70千克/畝)進行水體消毒；兩周后向水中再次潑灑復方中草藥制劑粉末(主要成分為金銀花、菊花、苦參和黃柏等)對水體進行持續性消毒，提高魚群抵抗力。

4.治療結果

實施針對指環蟲病治療措施3天后，出現呼吸困難的魚群明顯減少，且死亡魚也明顯減少；對魚群進行高錳酸鉀溶液“洗浴”后2天，病魚體表“白毛”現象明顯減少，顯示對水霉病治療效果較好，兩周后魚群基本恢復健康，采食量恢復至正常水平，魚群未出現疑似水霉病和呼吸困難等癥狀。

五、討論

近年來，水產動物(如草魚和鯇魚等)集約化養殖模式在國內部分地區較為常見，高密度養殖容易導致養殖環境惡化，魚群免疫力下降導致病原感染，如2015 年江西省水產養殖因病原感染造成的經濟損失超過5億元，因此經濟魚病原感染給水產養殖業造成巨大的經濟損失。本文通過系列診斷措施確定了碧江區某草魚群發生疫病是由水霉菌和指環蟲混合感染引起，根據診斷結果立即采取了相應的防治措施，使疫情得到有效控制，減少了養殖戶的經濟損失。

草魚水霉病也稱為膚霉病，其病原屬于真菌，且可導致水霉病的真菌有多種，其中最為常見的真菌是綿霉菌和水霉菌。水霉病四季可發，其病原可感染不同品種和不同發育階段的魚(包括魚卵、幼魚和成魚)。水霉菌孢子在水體中廣泛存在，高密度魚群在養殖或運輸過程中容易受傷，水霉菌孢子可通過傷口入侵魚體，在受傷組織處繁殖且吸收營養，造成組織發炎甚至病魚死亡。因此，在魚群運輸、拉網和飼養過程中應盡量減少魚體受傷，且運輸或拉網魚群下塘前需要進行消毒處理，如高濃度高錳酸鉀或聚維酮碘溶液洗浴消毒等，以降低感染水霉病的風險。

指環蟲是一種水產養殖中十分常見的寄生蟲，該病原主要寄生于魚鰓部，刺激魚鰓分泌黏液，且寄生蟲可破壞魚鰓組織，不但引起魚呼吸困難，還可繼發感染其他病原，導致魚較高的死亡率。對于指環蟲病的防控，在引種前需對種苗進行病原檢測，做好池塘和種苗消毒工作等，給予魚群優質的品牌飼料，提高魚群免疫力，降低指環蟲病感染概率。對于該病的治療可采用優質驅蟲藥，但驅蟲藥對指環蟲卵殺滅效果差，需對魚群進行多次用藥，但也需要注意穿梭用藥，以免指環蟲出現耐藥性。