血清S-100β NSE MBP動態變化對新生兒顱內出血預后的評估價值

云 磊 劉 軍 付 杰

亳州市人民醫院，安徽 亳州 236800

顱內出血（intracerebral hemorrhage，ICH）是腦血管破裂引起血液外溢至顱腔所致［1］。新生兒ICH由早產、產傷或缺氧引起，可損害中樞神經系統功能，致死、致殘率較高，且存活者可遺留神經系統后遺癥［2］。故早期評估預后對治療決策至關重要。近年來，S-100β蛋白（serum S-100β protein，S-100β）、神經元特異性烯醇化酶（neuron specific enolase，NSE）、髓鞘堿性蛋白（myelin basic protein，MBP）是新型神經特異性血清標志物，與ICH 的關系日益受到醫學界的關注。S-100β是表達于中樞神經系統的鈣結合蛋白，可營養神經、平衡細胞內外鈣離子濃度、傳導細胞內外的信號。當腦損傷時，S-100β從胞液中滲出進入腦脊液，再經受損血-腦脊液屏障進入血液，釋放炎癥介質，使腦組織受損，故S-100β可反映神經功能損傷［3-4］。NSE是存在于神經內分泌組織中的烯醇化酶，在腦細胞中活性最高，可維持細胞興奮性、增強神經細胞對缺氧的耐受。正常情況下血液中NSE含量低，腦損傷時神經細胞崩解、破壞，該酶進入腦脊液和血液后劇增，故可判斷腦損傷程度［5-6］。MBP 是中樞神經系統中的蛋白質，其水平升高是急性腦損傷和脫髓鞘改變的生化指標［7］。研究表明MBP水平參與顱腦損傷的發生發展［8］。但此類研究在新生兒中較少見，本研究探討血清S-100β、NSE、MBP 動態變化對新生兒顱內出血預后的評估價值，旨在改善患兒預后。

1 資料與方法

1.1 一般資料選取2019-06—2023-06 亳州市人民醫院收治的85 例ICH 新生兒作為觀察組，并選取同期分娩的健康新生兒70 例作為對照組。納入標準：（1）新生兒ICH 符合相關［9］診斷，并經頭顱超聲確診；（2）患兒家屬知情同意。排除標準：（1）遺傳代謝性疾病者；（2）先天性心臟病、腎臟疾病者；（3）低血糖腦病、膽紅素腦病、中樞神經系統感染等特定中樞神經系統疾病者。觀察組男46 例，女39 例，胎齡30～42（37.75±2.60）周；出生體質量1 560～3 650（3 066.71±38.49） g；出 生 至 就 診 時 間12～70（28.50±7.64）h；出血分度：Ⅰ度20例，Ⅱ度35例，Ⅲ度25 例，Ⅳ度5 例；出血部位：室管膜下43 例，腦實質22 例，硬膜下12 例，腦室內8 例。對照組男41例，女29 例，胎齡32～42（38.02±2.55）周；出生體質量1 640～3 665（3 074.20±38.57）g。2組患兒一般資料比較差異無統計學意義（P ＞0.05），具有可比性。根據觀察組患兒預后情況分為痊愈組（n=55）和未愈組（n=30）。本研究經亳州市人民醫院倫理委員會批準。

1.2 方法

1.2.1 新生兒腦內出血分級［10］：Ⅰ級：出血限于室管膜下，不伴腦室內出血；Ⅱ級：不伴腦室擴張的ICH；Ⅲ級：ICH（＞50%腦室區域）伴腦室擴大；Ⅳ級：腦室內出血合并腦實質出血或腦室周圍出血性梗死。

1.2.2 血清S-100β、NSE、MBP水平測定：抽取新生兒靜脈血5 mL，3 000 r/min下離心15 min，分離上清液后采用酶聯免疫吸附法（enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA）測定血清S-100β、NSE、MBP 水平。

1.2.3 治療方法及預后判斷標準：觀察組采取對癥治療，包括止血、降壓、抗驚厥等，必要時可采取高壓氧治療。治愈：臨床癥狀、體征消失；未愈：（1）癥狀有所改善，但存在神經系統癥狀；（2）癥狀無明顯改善甚至加重；（3）死亡［11］。

1.3 統計學方法采用SPSS 20.0軟件處理數據，計量資料以均數±標準差（±s）表示，行單因素方差分析及LSD-t 檢驗，采用受試者工作特征曲線（receiver operating characteristic，ROC）分析血清S-100β、NSE、MBP水平對新生兒顱內出血患兒預后不良的預測價值，其中AUC＜0.5 無價值，0.5～0.7 診斷價值較低，0.7～0.9 診斷價值中等，＞0.9 診斷價值較高，P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 2 組患兒出生后不同時間血清S-100β、NSE、MBP 水平比較觀察組出生后24 h、72 h、7 d 的血清S-100β、NSE、MBP 水平高于對照組（P＜0.05），觀察組出生后72 h 血清S-100β、NSE、MBP 水平最高，出生后7 d開始下降，但與對照組比較差異有統計學意義（P＜0.05），見表1。

表1 2組患兒出生后不同時間血清S-100β、NSE、MBP水平比較 （μg/L,±s）Table 1 Comparison of serum S-100β，NSE and MBP levels between the two groups at different time after birth （μg/L,±s）

表1 2組患兒出生后不同時間血清S-100β、NSE、MBP水平比較 （μg/L,±s）Table 1 Comparison of serum S-100β，NSE and MBP levels between the two groups at different time after birth （μg/L,±s）

組別觀察組對照組t值P值n S-100 β NSE MBP 85 70出生后24 h 1.91±0.48 0.15±0.08 30.316＜0.001出生后72 h 2.72±0.78 0.17±0.12 27.075＜0.001出生后7 d 1.60±0.24 0.16±0.10 46.935 0.507出生后24 h 22.48±6.93 7.86±2.03 17.050＜0.001出生后72 h 28.43±8.28 8.10±3.01 19.500＜0.001出生后7 d 21.66±6.33 7.99±2.11 13.451＜0.001出生后24 h 4.59±0.76 2.40±0.12 23.852＜0.001出生后72 h 11.89±1.80 2.44±0.18 43.720＜0.001出生后7 d 4.12±0.49 2.42±0.14 28.084＜0.001

2.2 不同分級ICH 患兒血清S-100β、NSE、MBP 水平比較ICH Ⅳ級患兒出生后24 h、72 h、7 d的血清S-100β、NSE、MBP 水平高于ICH Ⅲ級、Ⅱ級和Ⅰ級患兒，ICH Ⅲ級患兒出生后24 h、72 h、7 d 的血清S-100β、NSE、MBP 水平高于ICH Ⅱ級和Ⅰ級患兒，ICH Ⅱ級患兒出生后24 h、72 h、7 d 的血清S-100β、NSE、MBP水平高于ICH Ⅰ級患兒（P＜0.05），見表2。

表2 不同分級ICH患兒血清S-100β、NSE、MBP水平比較 （μg/L,±s）Table 2 Comparison of serum S-100β，NSE and MBP levels in ICH children with different grades （μg/L,±s）

注：與Ⅳ級比較，aP＜0.05；與Ⅲ級比較，bP＜0.05；與Ⅱ級比較，cP＜0.05。

組別Ⅰ級Ⅱ級Ⅲ級IV級F值P值n S-100β NSE MBP出生后7 d 2.25±0.14abc 3.21±0.29ab 5.14±0.70a 6.77±1.02 256.336＜0.001 20 25 28 12出生后24 h 1.05±0.14abc 1.73±0.45ab 2.34±0.65a 2.70±0.69 47.361＜0.001出生后72 h 2.09±0.44abc 2.55±0.60ab 3.12±1.01a 3.20±1.17 14.527＜0.001出生后7 d 1.00±0.10abc 1.35±0.31ab 2.01±0.43a 2.19±0.60 54.352＜0.001出生后24 h 17.50±4.36abc 21.36±6.02ab 25.04±8.13a 27.16±10.33 12.036＜0.001出生后72 h 22.65±6.49abc 27.15±7.42ab 31.44±9.04a 33.69±11.25 12.964＜0.001出生后7 d 17.12±4.16abc 20.32±5.69ab 24.11±7.44a 26.33±8.69 13.088＜0.001出生后24 h 2.73±0.20abc 3.70±0.41ab 5.66±1.17a 7.05±1.49 99.882＜0.001出生后72 h 8.22±0.60abc 10.92±1.56ab 13.66±2.08a 15.92±3.64 67.889＜0.001

2.3 觀察組不同預后患兒血清S-100β、NSE、MBP水平比較未愈組患兒出生后24 h、72 h、7 d的血清S-100β、NSE、MBP水平高于痊愈組患兒（P＜0.05），見表3。

表3 觀察組不同預后患兒血清S-100β、NSE、MBP水平比較 （μg/L,±s）Table 3 Comparison of serum S-100β，NSE and MBP levels in children with different prognosis in observation group （μg/L,±s）

表3 觀察組不同預后患兒血清S-100β、NSE、MBP水平比較 （μg/L,±s）Table 3 Comparison of serum S-100β，NSE and MBP levels in children with different prognosis in observation group （μg/L,±s）

組別痊愈組未愈組t值P值n S-100β NSE MBP 55 30出生后24 h 1.13±0.11 2.68±0.63 17.839＜0.001出生后72 h 1.93±0.52 3.34±0.85 9.492＜0.001出生后7 d 1.01±0.09 1.67±0.41 11.494＜0.001出生后24 h 16.56±4.17 19.69±5.32 2.995 0.004出生后72 h 24.77±6.90 30.02±10.15 2.826 0.006出生后7 d 18.65±5.27 25.89±8.90 4.716＜0.001出生后24 h 3.05±0.13 4.37±0.56 16.749＜0.001出生后72 h 4.58±0.41 11.04±2.65 17.778＜0.001出生后7 d 2.41±0.17 6.20±0.94 29.177＜0.001

2.4 血清S-100β、NSE、MBP 水平對新生兒顱內出血患兒預后不良的預測價值ROC 曲線分析顯示，出生后72 h的血清S-100β、NSE、MBP水平聯合預測新生兒顱內出血患兒預后不良的敏感度為93.35%，AUC 為0.922，均高于單獨檢測（P＜0.05），見表4 和圖1。

圖1 血清S-100β、NSE、MBP 水平預測新生兒顱內出血患兒預后不良的ROC曲線Figure 1 ROC curve of serum S-100β，NSE and MBP levels predicting poor prognosis in neonates with intracranial hemorrhage

表4 血清S-100β、NSE、MBP水平對新生兒顱內出血患兒預后不良的預測價值Table 4 Prognostic value of serum S-100β，NSE and MBP levels on poor prognosis of newborn children with intracranial hemorrhage

3 討論

ICH是新生兒常見的嚴重疾病，也是造成圍生新生兒死亡原因之一［12］。據報道，新生兒死亡原因分析中，ICH 占12%～19%［13］。少量出血預后較好，嚴重的ICH可導致腦功能受損，出血后腦積水，部分幸存兒常留有嚴重的中樞神經系統后遺癥，嚴重影響新生兒身體健康和腦發育［14-15］。故早期評估ICH等級及預后對治療決策具有重要意義。

S-100β是酸性鈣結合蛋白，由星形膠質細胞合成、分泌，主要存在于神經膠質細胞中，能夠營養神經細胞，促進神經元生長，修復損傷，調節細胞內外鈣離子平衡，并參與細胞信號傳導及能量代謝。正常情況下，S-100β蛋白不能通過血-腦屏障進入血液，血液中含量低［16-19］。腦損傷時神經膠質細胞膜完整性破壞，釋放S-100β進入腦脊液，同時血-腦屏障破壞，通透性增高，使S-100β蛋白通過血-腦屏障進入血液，血中濃度迅速升高，因此用于評價腦損傷［20-21］。NSE 存在于神經元和神經內分泌細胞中，少量存在于紅細胞中，其在中樞神經系統中的活性高于周圍神經系統。NSE參與糖代謝、促進神經元成熟、增強神經細胞對缺氧的耐受性等，正常情況下，NSE在體液中穩定，但在缺血缺氧、損傷等狀態下，神經元壞死甚至髓鞘崩解，NSE進入細胞間質及腦脊液，使腦脊液中NSE 升高。腦損傷后，血-腦屏障功能受損，腦脊液釋放NSE進入血液；同時腦組織細胞能量代謝紊亂可誘導NSE表達，以維持細胞正常功能，致NSE升高。文獻報道NSE 參與腦損傷病理生理過程［22］。病理狀態下，NSE 可降解參與血-腦屏障基膜的層黏蛋白等成分，破壞血-腦屏障，當腦細胞中大量NSE激活時，會激活紅細胞中NSE，將釋放的血紅蛋白代謝成鐵、膽紅素和一氧化碳，通過氧化應激反應引起腦水腫。MBP 是神經組織特有蛋白質，通常存在于中樞神經系統，其他組織中含量低，難以測出。當外傷或疾病破壞神經組織細胞時，腦組織中的MBP 可釋放進入腦脊液，少部分進入血液；當腦屏障被破壞時，MBP 釋放進入血液，此時血液中MBP 增多，故BMP 可反映膠質細胞髓鞘損傷及血-腦屏障破壞程度。本研究結果顯示，觀察組出生后24 h、72 h、7 d的血清S-100β、NSE、MBP水平高于對照組，與LAN等［23］研究結果相符，說明血清S-100β、NSE、MBP 水平參與新生兒ICH 患兒發病過程，腦出血時神經元細胞膜功能受損，細胞損傷崩解，血-腦屏障通透性增加，血清NSE、MBP升高；且膠質細胞壞死后可增加S-100β合成、釋放，致S-100β升高。且在出生后72 h 血清S-100β、NSE、MBP 水平最高，出生后7 d 開始下降，血清S-100β、NSE、MBP水平隨發病時間發生顯著變化，由于血腫的破壞、炎癥介質釋放、腦水腫、缺血缺氧等繼發損傷可致其升高，之后由于受損神經細胞及血-腦屏障功能逐漸恢復，故血清S-100β、NSE、MBP水平逐漸降低。同時研究發現，ICH Ⅳ級患兒出生后24 h、72 h、7 d的血清S-100β、NSE、MBP水平高于ICH Ⅲ級、Ⅱ級和Ⅰ級患兒，ICH Ⅲ級患兒出生后24 h、72 h、7 d的血清S-100β、NSE、MBP水平高于ICH Ⅱ級和Ⅰ級患兒，ICH Ⅱ級患兒出生后24 h、72 h、7 d的血清S-100β、NSE、MBP水平高于ICHⅠ級患兒，提示血清S-100β、NSE、MBP 水平與ICH 分級有關，能夠為臨床治療方案制定提供參考。同時本研究分析上述指標與預后的關系發現，未愈組出生后24 h、72 h、7 d的血清S-100β、NSE、MBP水平高于痊愈組，提示血清S-100β、NSE、MBP水平越高，其預后越差，且ROC 曲線分析顯示，血清S-100β、NSE、MBP 水平聯合預測顱腦創傷預后不良的敏感度為93.35%，AUC 為0.922，均高于單獨檢測，說明血清S-100β、NSE、MBP 水平聯合預測顱腦創傷預后不良的價值較高，臨床應監測上述指標，并給予針對性干預，以期改善預后。

ICH 患兒血清S-100β、NSE、MBP 水平隨發病時間發生顯著變化，與ICH 分級、預后密切相關，且聯合檢測可提高對ICH 患兒預后的預測價值，故臨床應監測上述水平，并進行針對性干預，以改善患兒預后。由于本研究樣本量較小、且為單中心研究，新生兒腦出血的早期診斷與治療指標的探索仍需進一步研究予以驗證。