血清絲氨酸蛋白酶抑制劑KazalⅠ型、胸苷激酶1、四跨膜蛋白超家族成員1水平在不同TNM分期老年直腸癌患者預后的評估分析

楊夕陽 別桂鳳

1)河南原陽縣人民醫院檢驗科 原陽 453500; 2)河南原陽縣疾病預防控制中心 原陽 453500

直腸癌(rectal cancer,READ)是常見的一種消化道惡性腫瘤,早期癥狀較為隱匿,大部分患者確診時已進展至中晚期,因此早期預判直腸癌患者的預后,對擬定治療方案和提高患者生存率具有重要意義[1-2]。絲氨酸蛋白酶抑制劑KazalⅠ型(SPINK1)是蛋白酶抑制劑家族成員之一,能抑制多種胰腺絲氨酸蛋白酶活性,與細胞增殖、炎癥及癌癥的發生、發展過程有緊密聯系。其在卵巢癌、胰腺癌、肝細胞癌、結直腸癌、前列腺癌等惡性腫瘤的發生、發展,以及預后中發揮重要作用[3]。有報告稱,SPINK1在結直腸癌進展和轉移過程中可能具有重要作用[4]。四跨膜蛋白超家族成員1(TM4SF1)是一種四聯體跨膜結構域表面蛋白,屬于L6四聚糖超家族成員,可參與腫瘤細胞新陳代謝、微環境形成,并在腫瘤細胞增殖、侵蝕及遷移等過程中起調控作用[5]。文獻報道,TM4SF1在結直腸癌組織及細胞系中顯著高表達,其水平與腫瘤分期、淋巴結轉移、脈管侵犯呈正相關[6]。胸苷激酶1(TK1)是基因合成的關鍵酶類,其表達與細胞增殖速度有關,可反映READ患者病情嚴重程度,為臨床制定、調整治療方案提供參考。本研究通過分析115例老年READ患者血清SPINK1、TK1及TM4SF1聯合檢測的相關資料,探討其對READ患者的預后和病情嚴重程度評估的臨床應用價值。

1 資料與方法

1.1一般資料選取我院2019-01—2021-06收治的115例老年READ患者。納入標準:(1)均符合直腸癌的診斷和臨床分期標準[7],并經術后病理檢查證實。(2)認知和交流功能正常,治療依從性良好,臨床和隨訪資料齊全。排除標準:(1)伴有嚴重心、腦、腎等臟器功能不全,以及免疫、血液系統疾病。(2)合并其他部位惡性腫瘤者,存在相關家族遺傳史者。根據入院時臨床TNM分期將患者分為Ⅰ～Ⅱ期組(20例)、Ⅲ期組(53例)、Ⅳ期組(42例),3組患者的性別和年齡差異無統計學意義(P>0.05)。見表1。

表1 3組患者的基線資料比較

1.2方法(1) 治療方法:采用FOLFIRI方案進行化療,每2周重復1次,治療3個周期后復查并評價療效。(2) 檢測方法:入院時清晨抽取空腹靜脈血5 mL,室溫下靜置使血液自然凝固。離心15 min(半徑8 cm、轉速3 000 r/min)取上層清液,貯存﹣20℃待測。采用酶免疫點印跡化學發光法測定血清TK1水平;采用酶聯免疫吸附法檢測血清SPINK1、TM4SF1水平。嚴格參照說明書進行操作。

1.3效果評價(1)血清SPINK1、TK1、TM4SF1水平與TNM分期的關系。(2)依據實體瘤治療療效評價標準[5]評估預后(病灶完全消失或瘤體最大徑之和減少>30%,且維持4周為預后良好。瘤體最大徑之和減少<30%或直徑增加,或出現新病灶為預后不良)。預后良好組72例,預后不良組43例。比較不同預后組患者的血清SPINK1、TK1、TM4SF1水平。(3)分析聯合檢測血清SPINK1、TK1、TM4SF1對不同預后的預測價值。

2 結果

2.1入院時不同TNM分期患者血清SPINK1、TK1、TM4SF1的水平Ⅳ期組患者的血清SPINK1、TK1、TM4SF1水平高于Ⅰ～Ⅱ期組和Ⅲ期組,Ⅲ期組患者高于Ⅰ～Ⅱ期組,差異均有統計學意義(P<0.05)。見表2。

表2 3組血清SPINK1、TK1、TM4SF1水平比較

2.2相關性分析入院時血清SPINK1、TK1、TM4SF1水平與TNM分期均呈正相關,差異有統計學意義(P<0.05)。見表3。

表3 相關性分析

2.3不同預后患者血清SPINK1、TK1、TM4SF1水平不同預后患者入院時的血清SPINK1、TK1、TM4SF1水平差異無統計學意義(P>0.05)。與預后良好組患者比較,化療1個周期后、2個周期后,預后不良組患者的血清SPINK1、TK1、TM4SF1水平較高,差異有統計學意義(P<0.05)。見表4。

表4 不同預后組患者血清SPINK1、TK1、TM4SF1水平比較

2.4化療后ROC分析以預后不良組患者為陽性標本,以預后良好組患者為陰性樣本,繪制ROC曲線。結果顯示,化療1個周期后血清SPINK1、TK1、TM4SF1水平聯合預測老年READ患者預后不良的AUC為0.762,最佳預測敏感度、特異度分別為88.37%、63.89%;化療2個周期后血清SPINK1、TK1、TM4SF1水平聯合預測老年READ患者預后不良的AUC為0.832,最佳預測敏感度、特異度分別為95.35%、70.83%。見表5。

表5 化療后ROC分析

3 討論

手術是早期READ的主要治愈方法,但其發病隱匿,大部分患者就診時已處于中晚期,導致READ術后復發率和病死率居高不下[2,8]。TNM分期系統是國際腫瘤病理分期及預后的判斷標準,需獲取組織標本通過病理學檢查確診,且相同病理分期個體間預后的差異也較大[9]。因此,尋找區別于腫瘤分期且能于術前預測READ預后的標志物,盡早明確READ病情嚴重程度,判斷預后,并給予針對性干預,對提高療效有重要意義。

隨著生物學技術的不斷發展,利用血清學指標評估惡性腫瘤患者的預后成為研究熱點[10]。本研究結果顯示,3組不同TNM分期患者入院時的血清SPINK1、TK1、TM4SF1水平比較為:Ⅰ～Ⅱ期組<Ⅲ期組<Ⅳ期組,提示血清SPINK1、TK1、TM4SF1水平與READ患者病情嚴重程度關系密切。SPINK1結構類似表皮生長因子(EGF),通過結合EGF受體(EGFR),啟動EGFR/磷脂酰基醇3-激酶/蛋白酶B信號轉導通路參與上皮細胞向間質細胞轉化的生物學過程(EMT),成為惡性腫瘤發生轉移的主要原因。此外,SPINK1與EGFR協同通過p38絲裂原活化蛋白激酶-ERK-c-Jun氨基末端激酶通路,使上皮鈣黏蛋白受到抑制,導致EMT,癌細胞轉移。有研究表明,血清SPINK1 水平升高與腫瘤侵襲不良預后相關[11]。TK1可通過催化胸苷(dTdR)轉化為脫氧胸苷單磷酸(dTMP),利于提高癌基因的激活程度,促進癌細胞內轉錄調控基因的上調程度,從而參與DNA合成過程[12]。健康人體TK1合成效率低,而READ腫瘤細胞可無限增殖,TK1大量表達,血清TK1水平升高,并使腫瘤持續惡變和轉移,故TK1可作為評價READ嚴重程度和預后的指標。TM4SF1的主要作用是調控EMT、參與細胞生長。有研究報道,TM4SF1可通過被募集到TERM區及相關的泛素化修飾而促進腫瘤細胞發生遷移,其高表達與結直腸癌的侵襲轉移密切相關[13]。本研究結果顯示,入院時患者的血清SPINK1、TK1、TM4SF1水平與TNM分期均呈正相關,進一步證實了血清SPINK1、TK1、TM4SF1水平與病情嚴重程度有緊密聯系。

本研究中,化療1個周期后、2個周期后,預后良好患者的血清SPINK1、TK1、TM4SF1水平低于預后不良患者,說明血清SPINK1、TK1、TM4SF1水平可作為臨床評估預后的指標。通過 ROC分析說明1個周期后、2個周期后血清SPINK1、TK1、TM4SF1水平聯合檢測均對不同預后有較好的預測價值。

綜上所述,血清SPINK1、TK1、TM4SF1水平與老年READ患者的病情嚴重程度及預后密切相關,可作為臨床判斷病情、評估預后的參考指標。本研究納入樣本量不大,受研究條件限制存在系統誤差及隨機誤差等偏倚可能性大,其確切結論仍需今后開展大樣本、多中心、前瞻性等高質量研究進一步驗證。