膽南星的炮制、成分分析及藥理研究進展

雷欣荷，藍金權，李國衛(wèi)，索彩仙，潘禮業(yè)，孟江，林晗

（1.廣東藥科大學中藥學院，廣東 廣州 510006；2.廣東一方制藥有限公司/廣東省中藥配方顆粒企業(yè)重點實驗室，廣東 佛山 528244）

膽南星為天南星科植物天南星（Arisaemaerubescens）、異葉天南星（A.heterophyllum）或東北天南星（A.amurense）的干燥塊莖與膽汁炮制加工而成的炮制品。味苦微辛，性涼，歸肺、肝、脾經，具清熱化痰、息風定驚的功效，用于痰熱咳嗽、咯痰黃稠、中風痰迷、癲狂驚癇[1]。

膽南星具有900 多年的炮制應用歷史，主要炮制方法為發(fā)酵法和非發(fā)酵法兩類[2-4]。《中國藥典》2020年版記載“膽南星為制天南星的細粉與牛、羊或豬膽汁經加工而成，或為生天南星細粉與牛、羊或豬膽汁經發(fā)酵加工而成”[1]。天南星生品和制天南星辛溫燥烈且有毒性，散結消腫作用較強，一般外用治癰腫、蛇蟲咬傷，經膽汁制后性味發(fā)生改變，性由溫轉涼，味由辛轉苦，具有清化熱痰和息風定驚等功效[5-6]。

目前，關于膽南星炮制的研究主要集中在成分和藥理作用方面。本文概述了古代炮制歷史沿革到現(xiàn)代炮制規(guī)范，對膽南星的炮制工藝和輔料、主要成分及物質基礎、炮制工藝、質量分析技術和藥理作用等方面進行綜述，擬為該藥的進一步開發(fā)利用提供參考。

1 炮制歷史沿革

1.1 古代炮制沿革

宋代《小兒藥證直訣》記載“臘月釀牛膽中陰干百日”是膽南星最早的炮制方法[7]。同時期的《圣濟總錄》載：“黃牛膽內浸三宿焙，牛膽煮一伏時暴干”[8]，這可能是膽南星發(fā)酵制法的最早來源。炮制輔料主要是牛膽汁，后世本草中還記載了混合法，炮制輔料增加了豬膽汁和羊膽汁，具體描述見表1。可見，歷代膽南星的炮制方法以發(fā)酵法居多，發(fā)酵時間短則1 月至數(shù)月，長則1 a 至數(shù)年，炮制輔料基本上為牛膽汁且多為“臘月牛膽”，宋代《普濟本事方》首次提到“羊膽制”，后未見相關古籍記載。

表1 歷代本草對膽南星炮制的記載Table 1 Records on the processing of Arisaema cum Bile in herbal medicines of past dynasties

1.2 《中國藥典》和各地炮制規(guī)范收載情況

對比歷版《中國藥典》和全國各省市炮制規(guī)范，對膽南星的炮制工藝部分內容進行梳理與總結，見表2。

表2 膽南星在歷版《中國藥典》及各地方炮制規(guī)范中收載情況Table 2 Records of Arisaema cum Bile in Chinese Pharmacopoeia and processing specifications

對比歷版《中國藥典》，1988 版《全國中藥炮制規(guī)范》和全國22 個省市的地方炮制規(guī)范可知，膽南星有多種不同的炮制工藝。膽南星炮制的原藥材為生天南星和制天南星，炮制工藝分為發(fā)酵法和非發(fā)酵法兩種，發(fā)酵法中除了上海市選用的是制天南星外，其他炮制規(guī)范均選用生天南星。此外，各省市的炮制工藝、膽汁種類、輔料種類和發(fā)酵時間等均存在差異。歷版《中國藥典》記載了膽南星為生天南星與牛、羊或豬膽汁發(fā)酵加工而成，或制天南星與牛、羊或豬膽汁加工而成，并沒有描述膽南星具體的炮制工藝，天津、河南、黑龍江省則執(zhí)行與歷版《中國藥典》相同的炮制標準。關于炮制工藝的描述，江蘇、安徽、陜西省沿用了1988 版《全國中藥炮制規(guī)范》中的炮制工藝，《1980年版甘肅省中藥飲片炮制規(guī)范》只記載了非發(fā)酵法，上海、四川、廣東、貴州、湖南、云南、吉林、北京只記載了發(fā)酵法，其余各地發(fā)酵法和非發(fā)酵法均有記載。江西、云南、湖南、福建的發(fā)酵方法規(guī)定日曬夜露，其中福建、云南經日曬夜露后還需蒸制，江西和湖南則干燥即可。混合法除了甘肅采用生天南星為原料以外，其他地區(qū)均采用制天南星，且炮制時間大大縮短，一般蒸制半小時到數(shù)小時即可。在膽汁種類方面，云南省的炮制方法規(guī)定使用牛膽汁，四川、甘肅、北京3 地僅說明為膽汁，其余各地則規(guī)定可使用豬、牛或羊膽汁。在炮制輔料方面，部分省市如廣東、甘肅、福建、江西、北京，除了用膽汁外還加了酒、川貝末、姜汁或明礬等輔料。

2 炮制研究

2.1 炮制工藝研究

關于膽南星的炮制工藝研究以發(fā)酵法居多。有研究以膽酸、去氧膽酸為評價指標，考察不同輔料、發(fā)酵時間、發(fā)酵溫度和發(fā)酵濕度下的膽南星評價指標的含量變化，得出最佳的發(fā)酵條件為：以牛膽粉為原料，在37 ℃、25%濕度下發(fā)酵50 h[13]。也有學者以鵝去氧膽酸、豬去氧膽酸、豬膽酸等膽汁酸類化合物為指標，考察不同膽汁比例對小鼠解熱、祛痰、止咳的效果，結果顯示當膽汁與原料的比例大于1 時膽南星具有明顯的解熱和祛痰鎮(zhèn)咳作用[14]。施宇等[15]對膽南星發(fā)酵菌種進行分離鑒定，并對優(yōu)勢菌種進行篩選，發(fā)現(xiàn)腸球菌屬和鉛黃腸球菌作為優(yōu)勢復合菌種發(fā)酵的膽南星中膽酸類成分含量比傳統(tǒng)發(fā)酵要高，這說明目前膽南星的炮制工藝是選擇個別或不同的化學指標進行評價，菌種發(fā)酵工藝各項條件也尚未完善，得出的炮制工藝方法不盡相同，而且未對其炮制減毒指標進行考察。

以上均為實驗室小型試驗，未對工藝進行藥效驗證和放大工藝驗證，不能真正反映應用于大生產的實際情況。后續(xù)炮制研究可以繼續(xù)探索膽南星的不同炮制工藝如混合法，同時比較不同炮制方法之間的成分和藥效機制差異，并提高炮制方法的可行性和穩(wěn)定性，確保膽南星的質量和藥效達成一致。

2.2 減毒改性研究

膽南星由天南星炮制而成，天南星中的草酸鈣針晶和凝集素蛋白是其主要的刺激性毒性來源。王賀鵬等[16]對天南星及其炮制品中的草酸鈣針晶和凝集素蛋白進行測定，結果表明炮制品中的草酸鈣針晶含量顯著降低且凝集素蛋白未測到條帶。該課題組前期研究表明炮制過程中的礬制和加熱過程會使凝集素蛋白降解、草酸鈣針晶斷裂[17]，而膽南星炮制過程中發(fā)酵、蒸制工藝也可能會使毒性物質降解破壞，加入膽汁輔料后使藥性由溫轉涼。單麗倩等[18]比較了天南星炮制成膽南星前后的解熱作用和毒性，結果表明膽南星組對比模型組具有良好的解熱作用，能降低大鼠肛溫、肝臟能量代謝以及炎性因子水平，且在毒性實驗中膽南星組對比天南星組的致死率大大降低。Wang 等[19]比較了生天南星、制天南星和膽南星對大鼠腎毒性的影響，并采用代謝組學結合網絡藥理的方法分析其代謝產物，探討天南星炮制減毒的作用機制，結果表明長鏈脂肪酸、膽汁酸、甘油磷脂和氨基酸等成分可能與天南星誘導的腎毒性有關，并與炮制的減毒機制有關。

綜上所述，天南星炮制成膽南星后其內在成分發(fā)生變化，達到了“減毒改性”的效果。后續(xù)研究可以進一步探究膽南星炮制過程中的減毒機制，特別是礬制和加熱對毒性物質的作用機制。此外，研究膽南星的其他藥理作用和毒性的相互關系，以全面了解其安全性和有效性，還可以通過代謝組學和網絡藥理學的方法，深入研究膽南星代謝產物與其減毒機制之間的關系并揭示其分子機制。

3 質量分析技術研究

3.1 薄層色譜

薄層色譜（TLC）裝置簡單、操作便捷、靈活、通量高、成本低以及樣品前處理簡單，在許多行業(yè)的檢測中都有廣泛的應用[20]。不少研究人員利用薄層色譜法來識別膽南星中的膽汁酸，如張超等[21]使用異辛烷-乙醚-冰乙酸-正丁醇-水作為展開劑，從而鑒別出膽南星中的豬去氧膽酸、鵝去氧膽酸和膽酸；賁永光等[22]則使用環(huán)己烷、乙酸乙酯、冰乙酸作為展開劑，鑒別出膽南星中的豬去氧膽酸的特征成分；陳云等[23]以石油醚-丙酮-冰乙酸（11∶8∶0.8）為展開劑，建立薄層色譜方法鑒別膽南星中豬去氧膽酸、豬膽酸和鵝去氧膽酸3 個特征成分。

后續(xù)研究可以進一步優(yōu)化薄層色譜的方法，以提高其分析的準確性和靈敏度，同時結合其他分析技術如質譜聯(lián)用等，可以進一步拓展薄層色譜的應用范圍和功能，提高其在膽南星分析應用中的價值。

3.2 液相色譜

高效液相色譜法（HPLC）可用于成分的定性、定量檢測，分析簡便且結果準確可靠。已有研究采用HPLC 法同時測定多批膽南星中多個成分的含量，建立了混合制膽南星中甘氨豬去氧膽酸和甘氨鵝去氧膽酸含量分別不得少于0.35%和0.3%的質量標準，以及通過高效液相色譜-蒸發(fā)光散射檢測檢測法（HPLCELSD）同時建立了牛、羊和豬膽汁的指紋圖譜，并確定了其中的共有指紋峰，還指認了牛、羊和豬膽汁中的7個膽汁酸成分[24]。有研究表明，電霧式檢測器（CAD）的靈敏度和線性范圍比HPLC-ELSD 檢測器要高，并且CAD的響應因子的一致性與HPLC-ELSD相比更加良好[25]。趙啟苗等[26]采用HPLC-CAD 建立了膽南星中膽汁酸類化合物的含量測定方法，結果表明該方法簡便、準確、重復性好，可以作為一種檢測方式對膽南星進行質量控制。

后續(xù)可以進一步探索膽南星中其他成分的分析方法，并建立更全面的質量標準。此外，可以進一步研究牛、羊和豬膽汁中的其他成分，并對其進行鑒定和定量分析。另外考慮到CAD 的優(yōu)勢，在實際應用中可以比較CAD和ELSD在膽南星分析中各自的優(yōu)缺點。

3.3 其他

Tan 等[27]利用電子鼻與最小二乘支持向量機相結合的方法，預測膽南星中多糖含量、蛋白酶活性和淀粉酶活性，識別不同種類膽汁炮制的膽南星以及發(fā)酵時間，這種分析方法能夠快速有效地鑒別膽南星的種類、成分和炮制時間。

目前《中國藥典》2020 年版僅記載了膽南星的性狀和理化鑒別方式，難以全面檢查和評價膽南星的質量，現(xiàn)今膽南星的鑒別方法多為薄層色譜法，不同方法之間差異較大，選擇的展開劑配比和顯色劑種類均不一致[28]。因此還需對膽南星的鑒別方式規(guī)范化、質量評價指標統(tǒng)一化、分析技術創(chuàng)新化，為膽南星的質量控制提供標準。

4 成分及藥效物質基礎

中藥藥效物質基礎指中藥中具有藥理活性、能夠體現(xiàn)臨床療效的化學成分以及藥物進入體內產生的代謝產物[29]。在疾病治療中，中藥多種化學成分通過多途徑多靶點調節(jié)是其優(yōu)勢和特點之一，因此揭示膽南星中的化學成分及其藥效物質基礎，對其作用機制和臨床應用研究具有更好的指導意義。膽南星是由天南星藥材與膽汁炮制而成，所含的成分較復雜，主要有膽汁酸類、黃酮類、核苷類、酚類、糖類等[13，23，30-33]，部分成分信息見表3。

表3 膽南星中主要的成分Table 3 The main volatile components in Arisaema cum Bile

Wu 等[34]為探討膽南星治療過敏性哮喘的可能機制，采用網絡藥理學、HPLC 和體內驗證方法對其潛在活性成分、靶點和通路進行分析，體內實驗表明膽南星對過敏性哮喘大鼠的ERK/JNK/p38MAPK信號通路有明顯的抑制作用，其中膽汁酸類成分能抑制炎癥因子的釋放，是其潛在的藥效物質基礎。曾平[35]采用UPLC-Q-TQF-MS/MS 技術分析得出膽南星水提物乙酸乙酯和正丁醇部位的主要成分為膽汁酸和有機酸成分，并采用細胞模型評價膽汁酸組分的藥效活性，結果表明膽汁酸成分能夠顯著降低LPS誘導的小膠質細胞炎癥模型的NO 含量和炎癥因子的mRNA 表達水平，證明膽汁酸成分具有抗炎作用且是抗熱驚厥的藥效成分之一。

目前，關于膽南星的藥效物質基礎研究較少，結合現(xiàn)有的研究進展來看，膽南星抑制炎癥和抗熱驚厥的物質基礎主要為膽汁酸類成分。

5 藥理作用

膽南星炮制后性味發(fā)生明顯的改變，燥性和毒性除去，性由溫轉涼，味由辛轉苦，具有良好的清熱作用，用于治療痰熱咳喘、驚風以及癲癇等癥[47]。藥理作用主要為解熱、抗炎、抗氧化、抗驚厥以及鎮(zhèn)痛等。

5.1 解熱作用

劉曉峰等[36]比較了發(fā)酵制和混合制膽南星對SD大鼠肛溫的影響，研究結果表明，膽南星具有顯著的解熱作用，能夠降低發(fā)熱大鼠體內的Na+/ K+ATPase、PGE2、IL-6、SDH 和IL-1β水平，而且藥材經過膽汁炮制后藥性發(fā)生了改變，膽南星的解熱效果更加顯著，這為深入研究膽南星的解熱作用提供了有力的依據(jù)。陳江寧等[30]比較了豬、牛、羊膽汁發(fā)酵制膽南星的解熱作用，結果顯示豬、牛、羊膽汁制的膽南星均有一定的解熱作用，且牛膽汁制和羊膽汁制膽南星的解熱作用更強，持續(xù)時間更長。武旭等[48]研究發(fā)現(xiàn)，天南星能提高寒癥模型大鼠血清中T4、TSH、TRH 等指標的含量，而膽南星可降低熱證模型組大鼠血清的cAMP、和肝臟中Na+/K+ATP酶等與代謝功能相關指標的含量，并且膽汁對相同模型的大鼠也有相似的功能，說明天南星經過膽汁炮制過后藥性產生由熱轉寒的變化，這些研究為進一步探究膽南星的解熱作用提供了有力的依據(jù)。

5.2 抗炎鎮(zhèn)痛作用

Ahn等[45]建立了脂多糖誘導的人單核細胞白血病細胞THP-1 炎癥模型，研究發(fā)現(xiàn)膽南星水提物可以有效抑制IL-1、IL-6 以及TNF-α 的mRNA 產生，且實驗結果與模型組相比差異有統(tǒng)計學意義；此外，膽南星水提物還能抑制LPS 誘導的NO 產生和環(huán)氧合酶-2 蛋白在THP-1 巨噬細胞的表達。崔小天等[49]研究發(fā)現(xiàn)，膽南星煎煮液具有抗炎鎮(zhèn)痛效果，在耳腫脹實驗中膽南星組小鼠的耳腫脹度抑制率與陽性對照組無明顯差異，在扭體實驗中膽南星組小鼠的痛閾值較模型組更高，且兩組之間差異有統(tǒng)計學意義，特別是在熱板實驗中，膽南星組小鼠的痛閾值比模型組有顯著的提高。

以上研究結果表明，膽南星具有抗炎作用并且具有鎮(zhèn)痛效果，提示膽南星是一種潛在的抗炎和鎮(zhèn)痛藥物，但仍需要進一步的研究來驗證其安全性和臨床應用范圍。

5.3 抗驚厥作用

生天南星藥材具有息風止痙的作用，能降低士的寧、戊四氮以及咖啡因所致的驚厥發(fā)生率[40]，但生品具有毒性，一般炮制后內服。經膽汁炮制后，生品天南星的毒性減弱且保留了良好的抗驚厥作用[50]。李瑤等[24]研究了不同膽南星炮制品對小鼠的抗驚厥作用，結果顯示天南星和膽南星均有抗驚厥作用，且膽南星可以延長驚厥潛伏期和小鼠的存活時間，發(fā)酵制膽南星和混合制膽南星在2 倍臨床劑量下，小鼠的驚厥潛伏期和存活時間能顯著延長且能顯著降低小鼠死亡率。Su 等[51]的研究證明膽南星對比模型組具有明顯的抗驚厥作用，且牛膽汁制膽南星作用優(yōu)于豬膽汁制膽南星，其機制可能與調節(jié)神經遞質、減輕海馬神經元損傷、通過抑制促炎細胞因子和TLR4/NF-κB 通路的表達而抑制神經炎癥有關，但混合制膽南星與發(fā)酵制膽南星、豬膽汁制和牛膽汁制的膽南星，在臨床上是否能混用還需進一步考證。

5.4 其他

有學者發(fā)現(xiàn)，膽南星的水提物具有抗氧化能力，對DPPH自由基和羥基自由基有較好的清除效果，且能抑制人成纖維細胞內活性氧以及脂質過氧化作用[46]。此外，也有研究表明，高劑量的膽南星能回調MPTP誘導的PD 模型小鼠腦黑質中IL-1β、TNF-α等炎癥因子水平，說明膽南星能抑制神經炎癥的發(fā)生[52]。這些研究結果表明膽南星具有潛在的藥用價值，可以用于治療與氧化應激和炎癥相關的疾病，然而還需要進一步的研究來驗證并深入了解其藥理機制和臨床應用前景。

6 結語

在歷代炮制本草書籍中，發(fā)酵法是膽南星的主要炮制方法，所用膽汁主要為牛膽汁，歷版《中國藥典》均收錄了發(fā)酵法和混合發(fā)酵法，豬、牛、羊膽汁均可作為膽汁來源，但具體炮制方法和輔料用量尚未記載。此外，各地方炮制規(guī)范也記載了發(fā)酵法和混合蒸制法，不同地區(qū)的膽南星炮制方法各不相同，同一炮制方法的炮制工藝如發(fā)酵天數(shù)和次數(shù)、輔料種類和用量等存在一定的差異。天南星生品能息風止痙但具有一定的毒性，不宜內服，經膽汁炮制后毒性降低也保留其原本的藥效。但目前關于膽南星炮制方面的研究較少，研究也僅限于比較炮制方法對個別成分含量的影響，且還沒有對膽南星的炮制工藝和質量標準進行規(guī)范化，不利于臨床用藥。關于膽南星的炮制減毒和相關藥效物質基礎研究不夠全面，減毒-增效之間的量效關系尚不明確，炮制工藝和質量標準還沒有明確的指標，未能反應膽南星炮制飲片的最佳工藝和質量標準。

后續(xù)研究可從以下幾方面進行：①根據(jù)臨床用藥經驗和相關藥效建立動物模型進行藥效學研究，得出生品與炮制品的藥效差異；②在明確藥效指標的前提下，優(yōu)化膽南星的最佳炮制工藝；③利用HPLC 等手段，建立膽南星成分指紋圖譜和含量測定方法，結合藥效實驗和譜效關系分析膽南星的藥效成分，初步確定膽南星炮制后“減毒增效”的藥效物質基礎；④建立LC-MS 檢測方法，對膽南星的特征化合物結構進行分析鑒定，研究其裂解規(guī)律，對膽南星中化合物的快速分析和檢定提供理論依據(jù)；⑤基于上述研究，確定膽南星的質量標志物，規(guī)范膽南星的炮制工藝和建立其質量標準，提供快速分析鑒定技術，為膽南星炮制“減毒增效”的科學內涵、炮制機理和臨床安全用藥提供客觀依據(jù)。