TCT檢查中不同級別宮頸病變患者的陰道微生態特征研究

劉 洋 邵武市立醫院婦產科,福建省邵武市 354000

人乳頭瘤病毒(Human papilloma virus,HPV)感染是誘發宮頸癌、宮頸上皮內瘤變的重要原因,但部分HPV陰性患者仍被診斷為宮頸癌,表明HPV感染可作為宮頸上皮內瘤變、宮頸癌發生、轉歸的必要條件,但并不能作為唯一原因,尋找宮頸上皮內瘤變發生、轉歸的影響因素是目前此領域研究的熱門課題[1]。臨床研究發現,局部微環境在腫瘤的發生發展中發揮著重要作用,宮頸主要暴露在陰道環境中,女性陰道內環境作為一個復雜的免疫微環境體系,易受到外界因素干擾出現失衡,長時間處于失衡狀態可提高患者感染、生殖道疾病發生的危險性,故可將陰道微生態作為疾病診斷的輔助手段[2]。通過查閱相關文獻資料發現關于不同級別宮頸病變患者陰道微生態特征的研究報道較少,存在一定的爭議[3]。鑒于此,本文就宮頸液基薄層細胞學檢查(TCT)中不同級別宮頸病變患者的陰道微生態特征進行分析,現將結果詳細報道如下。

1 對象和方法

1.1 觀察對象 選擇2022年1—12月在本院接受宮頸病變篩查的患者200例,按照TCT檢查結果分為五組,其中未見上皮內病變細胞和惡性細胞(NILM)或炎癥患者的TCT檢查結果為陰性,無明確診斷意義的不典型鱗狀細胞(ASC-US)、不能排除高級別鱗狀上皮內病變不典型鱗狀細胞(ASC-H)、高級別鱗狀上皮內病變(HSIL)及低級別鱗狀上皮內病變(LSIL)患者的TCT檢查結果為陽性。NILM組141例,年齡25～65歲,平均年齡(40.74±5.62)歲。ASC-US組28例,年齡35～69歲,平均年齡(42.86±5.28)歲。ASCUS-H組7例,年齡34～55歲,平均年齡(42.00±5.14)歲。HSIL組4例,年齡44～62歲,平均年齡(49.00±5.03)歲。LSIL組20例,年齡19～62歲,平均年齡(42.55±5.18)歲。五組一般資料對比無顯著差異(P>0.05)。

1.2 選擇標準 納入標準:ASC-US組、ASC-H組、HSIL組、LSIL組經TCT、陰道鏡或病理檢查分別診斷為ASC-US、ASC-H、HSIL、LSIL,且符合《預防宮頸癌:WHO宮頸癌前病變篩查和治療指南(第二版)》[4]的診斷標準;年齡>18歲;有性生活史者;入組前3d不能做陰道沖洗或使用陰道內藥物;檢查前24h不能同房;月經規律、未停經或月經結束3～7d者;對此次研究流程全部知情,同意加入研究者。排除標準:無性生活史;入組前24h內沖洗陰道或陰道用藥者;入組前1個月內接受過宮頸癌放化療或抗生素治療者;存在陰道疾病治療史或子宮全切術史者;精神異常或存在語言障礙、聽力障礙者。

1.3 方法 所有患者均接受陰道微生態指標檢測,詳細方法為:指導患者采取膀胱截石位,使用干凈棉簽沿著陰道壁1/3部位輕輕刮取分泌物作為檢測標本。第一步,干化學:取稀釋管加稀釋液(廠家:山東仕達思生物產業有限公司)7～8滴,將棉簽至于其中取得樣品液,隨后將樣品液滴于聯檢板反應孔對照比色檢查pH值、過氧化氫、白細胞酯酶、唾液酸苷酶、凝固酶;第二步,取稀釋管加稀釋液10～12滴將標本洗脫制成渾濁懸液,濕片模式下用顯微鏡(廠家:山東仕達思生物產業有限公司;型號:Comet-600)高倍鏡40×,Ph3相差視野觀察,對清潔度、線索細胞、VVC、滴蟲檢查;第三步,染片,使用革蘭氏染色對載玻片進行染色,然后再使用顯微鏡檢查菌群密集度、菌群多樣性、乳酸桿菌、加德納菌/擬桿菌、形似動彎桿菌、革蘭陽性球菌、革蘭陰性桿菌,計算Nugent及AV評分等。

1.4 觀察指標 比較五組的陰道微生態指標,分析五組陰道清潔度、密集度及多樣性。

2 結果

2.1 五組陰道微生態指標對比 五組在形似動彎桿菌陽性率、VVC占比、pH值≥4.6占比、凝固酶陽性率上對比差異無統計學意義(P>0.05);五組在BV陽性率、加德納菌/擬桿菌陽性率、Nugent評分、AV評分、乳酸桿菌陽性率、過氧化氫酶陽性率、白細胞酯酶陽性率及唾液酸苷酶陽性率上對比差異顯著(P<0.05),見表1。

表1 五組陰道微生態指標對比

2.2 五組陰道清潔度、密集度及多樣性對比 NILM組在陰道清潔Ⅲ度占比上低于ASC-US組、ASC-H組、LSIL組、HSIL組(P<0.05);五組在密集度、多樣性占比上對比無顯著差異(P>0.05),見表2。

表2 五組陰道清潔度、密集度及多樣性對比[n(%)]

3 討論

宮頸癌是臨床常見的惡性腫瘤,也是危害我國女性健康和生命的重要疾病[5]。而早期宮頸癌缺乏顯著癥狀,隨著病情進展可出現陰道排液、陰道流血、息肉或菜花狀贅生物等癥狀[6]。隨著對宮頸癌的深入研究,宮頸癌前病變發展至宮頸癌需要10～20年,在該階段給予科學有效的治療方案,有利于預防宮頸癌的發生,提高生存質量。故臨床加強對宮頸癌前病變的早期診治是十分必要的。

HPV感染與宮頸病變的發生、發展關系密切,且目前已證實接種HPV疫苗可有效預防宮頸癌的發生[7]。雖然高危HPV持續感染是宮頸癌發生的重要原因,但持續HPV感染只有不到1%可進展為HSIL甚至宮頸癌,因此除了HPV感染這一重要原因外,尚有一些其他輔助因素共同作用促進病變發展。隨著深入研究分子生物學,陰道微生態與宮頸癌的相關性引起臨床關注。陰道微生態也可以直接影響著宮頸病變的發生和發展,亦有研究表明,無論有無HPV感染,陰道微生態失衡可以增加宮頸病變的發生風險[8]。陰道微生態是一種生態系統,主要包括陰道微生物群、陰道解剖結構、宿主內分泌系統、陰道局部免疫系統等。陰道pH值、過氧化氫酶、乳酸桿菌、陰道清潔度、凝固酶是臨床評價陰道微生態的重要指標,其中陰道pH值異常升高會增加HPV感染的風險性;過氧化氫酶對于HPV病毒在宮頸上皮細胞生長具有抑制作用;凝固酶主要來自葡萄球菌,在評估細菌性陰道炎癥具有重要作用[9]。健康女性陰道內擁有200多種微生物,其中乳酸桿菌為其陰道內重要的微生物的占比高達95%,其產生的過氧化氫等抗微生物因子對于致病微生物的生長具有抑制作用,且能防止致病微生物寄存在陰道上皮細胞,從而維持陰道微生態平衡。同時,乳酸桿菌分泌的有益物質能保護陰道黏膜上皮,抑制致病菌,提升陰道的抗感染能力,防止發生病變。林蓉蓉等[10]研究發現陰道微生態變化與宮頸病變的發生息息相關,是HPV持續感染的危險因素,這與本文結果相似。本文結果顯示,NILM組的乳酸桿菌陽性率高于ASC-US組、ASC-H組、LSIL組、HSIL組,陰道清潔Ⅲ度占比、過氧化氫酶陽性率、Nugent評分、AV評分、白細胞酯酶陽性率低于其他四組(P<0.05),且LSIL組較于HSIL組,其BV陽性率、Nugent評分、加德納菌/擬桿菌陽性率、過氧化氫酶陽性率、白細胞酯酶陽性率、唾液酸苷酶陽性率越低,pH值≥4.6占比越高。由此可知,陰道微生態與宮頸病變的發生關系密切,尤其與陰道內乳酸桿菌減少息息相關,且宮頸病變級別越高,陰道微生態失衡越明顯。陰道微生態失衡不僅是誘發宮頸癌前病變的重要原因,也是宮頸癌前病變發生后的結果,臨床應重視陰道微生態環境,叮囑女性注意清潔,維持陰道微生態平衡,這對于防治宮頸病變乃至宮頸具有重要意義。

綜上所述,陰道微生態紊亂與宮頸病變的發生息息相關,特別是高度鱗狀上皮內病變的陰道微環境失衡狀態明顯,可將陰道微生態指標作為評估不同宮頸病變的輔助指標,及時診斷和處理宮頸病變,防止宮頸病變惡化至宮頸癌,改善預后結局,具有較高的臨床推廣意義。