血、尿特定蛋白檢測(cè)在糖尿病腎病早期診斷中的價(jià)值

林永發(fā)

（永春縣中醫(yī)院檢驗(yàn)科，福建 泉州 362600）

糖尿病是一種高發(fā)病率的慢性代謝性疾病。患有糖尿病的人在長(zhǎng)時(shí)間的高血糖刺激下，極易造成腎功能的損害，糖尿病腎病的發(fā)病率高達(dá)30%～50%，是糖尿病最常見(jiàn)的并發(fā)癥之一[1]。近幾年來(lái)，糖尿病腎臟疾病的發(fā)病率呈逐年增加的趨勢(shì)，在終末期腎病中，糖尿病屬于第二大病因，具有很高的致殘率和死亡率[2]。早期發(fā)現(xiàn)、早期診斷、早期治療，是延長(zhǎng)患者生命與改善預(yù)后的關(guān)鍵。糖尿病腎病患者在發(fā)病早期表現(xiàn)不明顯，尿蛋白檢測(cè)多為陰性，容易造成漏診，耽誤最佳治療時(shí)間，并且一旦發(fā)生腎損害，僅靠藥物治療不能完全治愈，為疾病的整體治療帶來(lái)了一定的困難[3]。因此，臨床應(yīng)優(yōu)化診斷技術(shù)與方法，及早發(fā)現(xiàn)及早干預(yù)，才能更好地扭轉(zhuǎn)疾病轉(zhuǎn)歸，提高患者生活質(zhì)量。基于此，本研究分析了糖尿病腎病早期患者尿液微量白蛋白（microalbumin，mAlb）、β2微球蛋白（β2-microglobulin，β2-MG）、轉(zhuǎn)鐵蛋白（transferrin，TRF）與聯(lián)合血清胱抑素C（cystatin C，Cys-C）水平檢測(cè)的診斷價(jià)值，以期為臨床診療提供參考。

1 資料與方法

1.1 一般資料 本研究選取我院2021年10月至2022年10月期間收治的糖尿病腎病患者66例作為研究對(duì)象。

納入標(biāo)準(zhǔn)：①年齡區(qū)間位于35～80歲；②以病理結(jié)果為金標(biāo)準(zhǔn)，確診為糖尿病腎病，符合《中國(guó)糖尿病腎臟病防治指南》（2021年版）[4]的相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)；③臨床病史資料完整且有效；④所有患者簽署知情同意書(shū)。

排除標(biāo)準(zhǔn)：①伴有嚴(yán)重心腦血管疾病、惡性腫瘤和其他臟器器官受損的患者；②伴有認(rèn)知功能障礙、精神類疾病等無(wú)法進(jìn)行正常溝通的患者；③存在全身免疫性疾病的患者；④血流動(dòng)力學(xué)異常的患者；⑤對(duì)本研究所使用檢查方式存在禁忌的患者；⑥不愿參與本研究不予以充分配合的患者。本研究經(jīng)我院醫(yī)療倫理委員會(huì)審核后通過(guò)。

1.2 方法 納入66例糖尿病腎病患者。同時(shí)，選擇同期于我院進(jìn)行健康體檢的志愿者66名作為對(duì)照組研究對(duì)象。

所有受試者均進(jìn)行尿液mAlb、β2-MG、TRF檢測(cè)。具體方式為：選擇西門子Dimension RxL MaX全自動(dòng)生化分析儀、寧波普瑞柏試劑和配套校準(zhǔn)品做特定蛋白定量分析，收集患者隨機(jī)尿10 ml，采用3500 r/min的速率進(jìn)行離心操作，共離心10 min，取上層清液，立即檢測(cè)。詳細(xì)記錄尿液mAlb、β2-MG、TRF水平。

隨后進(jìn)行血清Cys-C檢測(cè)，具體方式為：選擇西門子Dimension RxL MaX全自動(dòng)生化分析儀、寧波普瑞柏試劑和配套校準(zhǔn)品做血清Cys-C分析，于清晨取患者空腹靜脈血5 ml，不抗凝，立即送檢，避免溶血，采用3500 r/min的速率進(jìn)行離心操作，離心10 min，取上層血清，立即檢測(cè)。記錄血清Cys-C水平。

1.3 觀察指標(biāo) 對(duì)尿液血液各指標(biāo)進(jìn)行檢測(cè)。

（1）比較兩組的mAlb、β2-MG、TRF、血清Cys-C水平：其中mAlb采用比濁法進(jìn)行檢驗(yàn)，正常參考范圍為：0～20 mg/L；β2-MG采用比濁法進(jìn)行檢驗(yàn)，正常參考范圍為：0～0.2 mg/L；TRF采用免疫散射比濁法檢測(cè)，正常參考范圍為0～2.12 mg/L；血清Cys-C采用膠乳增強(qiáng)免疫比濁法檢測(cè)，正常參考范圍為0.59～1.03 mg/L。

（2）比較單一檢測(cè)和聯(lián)合檢測(cè)方式的陽(yáng)性檢出率：mAlb超出正常范圍視為單一檢測(cè)結(jié)果陽(yáng)性；在單一檢測(cè)陽(yáng)性結(jié)果的基礎(chǔ)上，β2-MG、TRF及血清Cys-C水平有至少1項(xiàng)超出正常參考范圍視為聯(lián)合檢測(cè)結(jié)果陽(yáng)性。以病理結(jié)果為依據(jù)，評(píng)價(jià)兩種方式的陽(yáng)性檢出率。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 本研究以SPSS 20.00作為數(shù)據(jù)分析統(tǒng)計(jì)工具，以表示計(jì)量資料，行t檢驗(yàn)，以例（n）和率（%）表示計(jì)數(shù)資料，比較采用卡方檢驗(yàn)；使用秩和檢驗(yàn)等級(jí)資料，采用Logistic多因素回歸分析與糖尿病腎病進(jìn)展相關(guān)的血、尿代謝因子，繪制ROC曲線分析單一檢測(cè)與聯(lián)合檢測(cè)糖尿病腎病的診斷效能，P＜0.05表示差異顯著，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 基線資料 共納入132例研究對(duì)象，每組66例。觀察組：男性39例，女性27例，平均年齡（62.19±9.81）歲；糖尿病平均病程（6.26±1.07）年。對(duì)照組：男性40例，女性26例，平均年齡（62.30±9.93）歲。兩組年齡、性別不存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＞0.05）。

2.2 觀察組與對(duì)照組mAlb、β2-MG、TRF與血清Cys-C水平比較 對(duì)照組的尿mAlb、β2-MG、TRF與血清Cys-C水平均處于正常范圍內(nèi)，而觀察組的每項(xiàng)指標(biāo)水平均高于對(duì)照組（均P＜0.05），見(jiàn)表1。

表1 觀察組與對(duì)照組尿mAlb、β2-MG、TRF與血清Cys-C水平比較（mg/L）

2.3 單一檢測(cè)和聯(lián)合檢測(cè)方式的陽(yáng)性檢出率比較 以病理結(jié)果為依據(jù)，觀察組糖尿病腎病患者，聯(lián)合檢測(cè)的陽(yáng)性檢出率為83.33%（55/66），較單一檢測(cè)的65.15%（43/66）更高（χ2＝5.705，P＝0.017）。

2.4 與糖尿病腎病進(jìn)展相關(guān)代謝因子的多因素分析 以尿mAlb、β2-MG、TRF與血清Cys-C水平表達(dá)為自變量；將糖尿病腎病作為因變量（輕度=0，重度=1），Logistic多因素回歸顯示，尿mAlb、β2-MG、TRF與血清Cys-C水平與糖尿病腎病進(jìn)展相關(guān)，見(jiàn)表2。

表2 與糖尿病腎病進(jìn)展相關(guān)代謝因子的多因素分析

2.5 單一檢測(cè)與聯(lián)合檢測(cè)糖尿病腎病的診斷效能 以尿mAlb、β2-MG、TRF與血清Cys-C水平為自變量，以糖尿病腎病為因變量（非糖尿病腎病=0，糖尿病腎病=1），繪制受試者工作特征（ROC）曲線，結(jié)果顯示，尿mAlb、β2-MG、TRF與血清Cys-C水平聯(lián)合診斷糖尿病腎病的曲線下面積（AUC）最大（0.985，95%CI0.825～0.938），靈敏度、特異度分別為95.36%、92.84%（P＜0.05）。見(jiàn)表3、圖1。

圖1 單一檢測(cè)與聯(lián)合檢測(cè)診斷糖尿病腎病的ROC曲線

表3 單一檢測(cè)與聯(lián)合檢測(cè)對(duì)糖尿病腎病的診斷效能

3 討論

糖尿病腎病是糖尿病微血管病變中最常見(jiàn)的一種，如果不及時(shí)、有效地進(jìn)行治療，會(huì)引起蛋白尿、腎功能損害，最終發(fā)展為腎衰竭，影響患者生活質(zhì)量及生命安全。這類疾病在發(fā)病初期具有很強(qiáng)的隱性特征，很多患者被發(fā)現(xiàn)時(shí)已經(jīng)是晚期，造成不可逆的腎損害，延誤了治療的最佳時(shí)機(jī)[5]。臨床上發(fā)現(xiàn)，糖尿病腎病患者多有血、尿等生化指標(biāo)異常，并與疾病的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)[6]。所以，在臨床上應(yīng)加強(qiáng)對(duì)患者血、尿生化檢測(cè)。

本研究結(jié)果顯示：且觀察組的尿mAlb、β2-MG、TRF與血清Cys-C水平均高于對(duì)照組（均P＜0.05）；尿mAlb、β2-MG、TRF與血清Cys-C是與糖尿病腎病進(jìn)展密切相關(guān)的代謝因子，提示臨床應(yīng)對(duì)這幾項(xiàng)生化指標(biāo)加以重視，一旦出現(xiàn)異常需及時(shí)作出評(píng)估診斷與治療。尿微量白蛋白在早期糖尿病腎病的診斷中有很高的敏感性，其是反映腎小球早期損傷的敏感指標(biāo)。正常人原尿中的白蛋白含量非常低，即使有少量濾出，也主要是被近曲小管重吸收。在病理狀態(tài)下，如果腎小管重吸收功能輕度下降，會(huì)出現(xiàn)尿中白蛋白小量升高；如果是明顯的腎小球病變，白蛋白濾出過(guò)多，會(huì)引起尿白蛋白明顯上升[7]。

β2-MG是由淋巴細(xì)胞合成和分泌的小分子蛋白，可以在腎小球?yàn)V過(guò)膜中自由穿行，并且在近曲小管中被完全地重吸收，并被分解成氨基酸，在血液中很少檢測(cè)到其表達(dá)[8]。尿液中β2-MG含量升高是腎小管內(nèi)皮細(xì)胞重吸收異常的表現(xiàn)，其對(duì)腎小管上皮細(xì)胞損傷具有較高的敏感性和特異性。在腎近曲小管損傷較輕的情況下，尿液中的β2-MG含量就升高，升高的程度與腎近曲小管的再吸收速率成正比。

轉(zhuǎn)鐵蛋白（TRF），是血液中的一種糖蛋白。正常情況下，尿TRF不能通過(guò)腎小球?yàn)V過(guò)膜，早期腎損傷的時(shí)候，腎小球基底膜發(fā)生改變，就會(huì)使這些微量的尿轉(zhuǎn)鐵蛋白漏出體外。所以尿液中檢測(cè)出轉(zhuǎn)鐵蛋白，是反映早期腎損傷的標(biāo)志之一[9]，相比尿微量白蛋白，TRF能更敏感地反映腎小球?yàn)V過(guò)膜選擇屏障的受損程度。

血清Cys-C是半胱氨酸蛋白酶的抑制劑，是一種低分子量、堿性、非糖基化的蛋白質(zhì)。循環(huán)中的Cys-C僅經(jīng)腎小球?yàn)V過(guò)而被清除，是一種反映腎小球?yàn)V過(guò)率變化的內(nèi)源性標(biāo)志物，在近曲小管重吸收，但重吸收后被完全代謝分解，不返回血液。因此，其血中濃度由腎小球?yàn)V過(guò)率決定，不依賴任何外來(lái)因素，如性別、年齡、飲食的影響，是一種反映腎小球?yàn)V過(guò)率變化的理想內(nèi)源性標(biāo)志物[10]。腎功能不全時(shí)，腎小球?yàn)V過(guò)能力降低，血中Cys-C含量會(huì)升高；如果腎小球?yàn)V過(guò)速率是正常的，但腎小管功能不全，就會(huì)阻止Cys-C在腎小管上的吸收和快速分解，會(huì)導(dǎo)致尿液中Cys-C的濃度升高。

本研究結(jié)果還顯示：聯(lián)合檢測(cè)的陽(yáng)性檢出率較單一檢測(cè)更高，診斷效能也較單一檢測(cè)更高（AUC為0.985，95%CI0.825～0.938,敏感度為95.36%，特異度為92.84%），說(shuō)明尿mAlb、β2-MG、TRF與血清Cys-C聯(lián)合檢驗(yàn)具有較高的診斷價(jià)值，能夠有效評(píng)估患者的疾病進(jìn)展情況，從而有利于做到早期診治。總之，對(duì)血清、血漿和尿液中的特定蛋白濃度進(jìn)行生化檢測(cè)，靈敏度高、檢測(cè)范圍寬、重復(fù)性好，在臨床診斷檢驗(yàn)中發(fā)揮著重要作用。

綜上所述，尿mAlb、β2-MG、TRF與血清Cys-C聯(lián)合檢測(cè)方式用于糖尿病腎病早期檢測(cè)中有較高的診斷價(jià)值，能夠有效評(píng)估疾病的進(jìn)展?fàn)顩r，為臨床診治提供有價(jià)值的參考依據(jù)，及時(shí)指導(dǎo)臨床診療，改善患者預(yù)后。