你的病理報告為什么與染色密不可分

醫院里有個地方叫手術室，一般人都進不去；醫院里還有個地方叫病理科，一般人都不知道。病理學是研究疾病的形態結構、代謝和功能等方面的改變，從而揭示疾病的病因、發病機制和轉歸的醫學基礎學科，為疾病的診治和預防提供理論基礎。病理是醫學之本，是疾病診斷的金標準。今天，我們一起走進病理科，看看我們在手術臺切下來的“肉”，到底經歷了什么，又是如何變成一份病理報告的。

一病理標本的固定和取材

（一）病理標本的固定

外科醫生從手術臺切下的組織或器官，我們稱之為“病理標本”。首先，凡離體的組織或器官，如果需要進行病理組織學檢查，應盡快（30分鐘之內）放置于裝有固定液的容器里。固定液的量是被固定標本體積的5～10倍，置放標本的容器應根據送檢標本的大小進行選擇。外科醫生切取的組織或器官置放于容器中固定后，應第一時間轉送到病理科繼續充分固定。未能及時、充分固定的自溶標本或損毀標本（干涸或腐敗標本）不能再進行固定和用于制作切片。其次：常用的固定液為10%的中性福爾馬林（4%中性甲醛），應預先配備或提前購買成品，以備隨時固定使用。小標本（活檢或穿刺標本）固定時間為4～6小時，大標本（離體器官或局部切除標本）為18～24小時或更久。如果固定時間不夠或固定液不足，細胞就會自溶。想象一顆豆子如果被粉碎成粉末了，你還能看出來它是黃豆還是豌豆嗎？因此，如果固定不充分或不固定，就會影響病理醫師做出明確診斷。

（二）病理標本取材

如果說CT是把整體器官進行一層一層地觀察，那么病理就是進行微觀的細微觀察。那么這么細微的觀察，需要用光學顯微鏡從細胞角度、組織結構角度進行觀察。只有把組織切成很薄很薄的一層，病理醫師才能在顯微鏡下透過光看清楚組織結構。如果把手術切下的整個標本都制作成幾微米厚的切片，那我們要制作出多少張切片？全都制成切片是十分不合實際的。因此，在手術臺切下的小活檢或大標本組織，病理醫師需要切下其中最有診斷價值的組織塊（大小約2cm×1.5cm，厚度不超過3mm），即取材、脫水、透明、浸蠟、包埋、切片、染色，最后制作成切片。切下病變最具有代表性的部分，用來判斷疾病性質；如果是惡性腫瘤，我們對切緣的取材至關重要，只有切緣是陰性的，才能說明手術醫生已經把腫瘤“切干凈”了。那么病理醫生是如何切下最具有代表性的病變，即如何取材的呢？小標本和不完整的器官組織通常為活檢組織，包括經由內鏡切取或鉗取的黏膜組織、子宮內膜的刮取物、淺在或深在部位的穿刺物、皮膚組織等。

1活檢組織取材（小標本取材）

第一，應描述和記錄送檢標本的數量（少量時精確計數，多量時進行估量）、大小、形狀、色澤和質地等。

第二，少量的小標本，應全部取材制片。

第三，多量的小標本，原則上全部取材制片；當數量過多時可盡量多地取材制片，剩余的標本應置于4%的中性甲醛中妥善保存備用。

第四，黏膜和皮膚組織應予“立埋”，即將黏膜面與包埋盒的底面垂直，使其切片，同時顯示檢材的各層結構。

第五，使用鑷子夾取標本時要輕輕夾取，嚴防擠壓組織。

2大標本是手術切除或尸檢取出的器官和（或）腫瘤

第一，記錄切除標本的手術類型。

第二，描述和記錄標本的大?。ㄈS長度）、形狀、色澤、表面、質地等，球形或近于球形的結節狀標本可測其直徑。必要時稱重。

第三，檢查切面。通常沿標本長徑切開或剪開（囊性標本時），描述和記錄其性狀特點，例如實性和（或）囊性及其所占比例、色澤、質地、紋理、壞死；囊腫壁的厚度及其內外表面、囊腔內容物及其性狀等。有的臟器如前列腺、胰腺、甲狀腺等，應間隔一定距離做多個平行切面，檢查有無微小腫物。

第四，帶有臟器的標本，應描述和記錄病變處與有關臟器的毗鄰關系特點。

第五，必要時，繪簡圖說明巨檢病變的特點和解剖學關系，注明取材部位的編號，以便鏡檢時定位。

第六，切取具有代表性病變制片，包括與病變區域相鄰的“正常”組織，交界區域和壞死組織等。

第七，完整切除的腫瘤標本，切取的組織塊應包括其包膜，較大的腫瘤應酌情多處包膜取材。

第八，切取組織塊應避開擠壓嚴重的區域。

第九，切取組織塊的數量，應根據疾病程度選擇，一般以滿足病理診斷需要為準。組織塊的面積，通常在2×1.5厘米以內，厚度不超過3毫米（快速包埋制片時則應盡量薄些）。

第十，組織塊的切面應平整。需要指定組織塊的包埋面時，可將其非包埋面切出凹痕作為標記。管壁和囊壁組織應立埋。

第十一，標本攝影，必要時酌情進行（標本固定前或固定后）。

二制成切片需要幾個步驟，包括染色

一般經過脫水、透明、浸蠟、包埋，然后完成制片。然而，生物體組織內都含有不同比例的水分，這樣“軟趴趴”的組織不利于切成幾微米的薄片。因此，需要用脫水劑，把組織里的水脫掉，用石蠟取而代之，這樣才有足夠的硬度以便切片。經歷過這一番處理的組織，就可以浸到石蠟里面，制作成蠟塊了，就像琥珀那樣。這樣做出來的切片是沒有經過染色的，也就是沒有顏色的，我們稱之為“白片”。怎么才能在顯微鏡下觀察組織結構和細胞形態呢？聰明的人類想到了辦法———染色。但是浸了蠟的組織（即取材后的標本），不能被染料染上顏色。為能保存和切片，我們把它浸了蠟；切完片之后，為了染色觀察，我們又需要把蠟脫出來，最常用的一種染色手段，我們稱之為“蘇木素-伊紅染色法（即HE染色）”。染完色之后，我們需要封片，就是用封固劑把載玻片和蓋玻片封固。經歷這一系列煩瑣的工序，我們病理醫生才能拿到這一張小小的切片。這張小小的玻璃片到底蘊含著什么秘密，它能告訴我們什么，還需要病理醫師在顯微鏡下細細觀察。

三普通染色不夠用，還需要高級染色

在顯微鏡下做病理診斷其實并不容易，需要大量的病理知識和豐富的經驗積累。普通的HE染色，只是單純地把細胞染上了顏色。有時病理醫師需要特殊的染色技術，用來幫助顯示真菌或細胞內外的特殊化學物質等，比如細胞分泌的黏液、膠原等。

在很多情況下單純的傳統染色方法不能說明這是一種什么疾病，而且很難定性。隨著科技的發展人類發明了更高級的染色方法———免疫組化染色技術。簡單來說，免疫組化染色是可以把特定的細胞染上特定的顏色。是什么特定的細胞呢？就是表達某種特定抗原的細胞。想象一下：我把幼兒園里一個班的小朋友放到人海茫茫的南京路。然后我在南京路隨手拍一張人群的照片，怎么才能在照片中快速地把這群小朋友識別出來呢？有一個辦法：給這個班的小朋友帶上小紅帽再放走?？吹叫〖t帽，我就知道是那個班的小朋友。南京路的每一個人是一個細胞，免疫組化染色就是“小紅帽”。但是真實情況要比這復雜得多，有時候小朋友調皮沒戴帽子，有時候有不明真相的路人，自己買了帽子戴。所以，免疫組化染色的作用也只是提供給病理醫師更多的信息，無法將疾病一錘定音。具體是什么樣的診斷仍需要病理醫師綜合考慮。

從取材到HE切片制作完成，你大概明白：做一個“普通染色”還遠遠不夠，有可能還需要做“高級染色”。那我們為什么不把兩種染色一起做呢？答案是：不可能！為了識別各種各樣的可能性，目前商品化的免疫組化染色“染料”，已經有500余種，而且不斷有新的“染料”出現。就像生病不能把所有的藥都試吃一遍，這種染色也不可能把所有染料都“試染一遍”。因此，對“高級染料”的選擇是建立在對鏡下形態初步判斷的基礎之上的。所以我們還是需要等最開始的HE染色切片制作出來，才能做下一步的“高級染色”。有時，對于一些難以明確診斷的疑難病例，低年資的醫生根本無法做出明確診斷，需要更高年資的醫生進行會診甚至全科討論或院外會診，這時就需要做更多的工作來明確診斷，如免疫組化，必要時還需要分子檢測。

需要給大家說明的是：疑難病例不等同于惡性，因此不需要過度焦慮。疾病的種類多種多樣，紛繁復雜，請給病理診斷醫生更多的閱片時間，仔細考慮每一種疾病可能，充分地做好鑒別診斷，這是對每位患者的認真負責，而患者的耐心等待和理解，就是對自己生命的負責。

四結語

病理檢查是將手術后的人體疾病組織（腫塊）在病理科進行一系列的物理和化學處理，制成病理切片，病理醫生在顯微鏡下對疾病做出病理診斷，診斷這個腫塊是良性的，還是惡性的。如果腫塊是良性的，手術切除腫塊達到治愈的目的，如果是惡性的，僅僅手術切除腫塊是不夠的，還需要進一步擴大手術，手術結束后還要去腫瘤科放化療，防止惡性腫瘤的轉移和復發。

因此，病理醫生相當于一個法官，他的判決與患者的“生與死”密切相關。外科醫生根據病理檢查結果來決定是做一個局部腫塊切除的小手術，還是做一個根治的大手術。腫瘤內科醫生根據病理結果來給患者制定藥物治療方案。

（作者單位系四川省婦幼保健院病理科）