豬流行性腹瀉病的發(fā)病趨勢及防控

摘要：豬流行性腹瀉是由豬流行性腹瀉病毒引起的豬的一種急性高度接觸性傳染病，以引發(fā)豬只嘔吐、腹瀉、脫水及哺乳仔豬高死亡率為特征。本文對近些年國內(nèi)豬流行性腹瀉病的發(fā)病情況進行總結(jié)，并從疫苗免疫、生物安全和飼養(yǎng)管理等方面對該病的防控展開探討，以期能為養(yǎng)豬業(yè)同行提供參考。

關(guān)鍵詞：豬流行性腹瀉病毒；發(fā)病趨勢；診斷；防控

豬流行性腹瀉（porcine epidemic diarrhea，PED），作為豬場的常見多發(fā)病，在世界范圍內(nèi)廣泛流行。該病毒僅感染豬，并且各個年齡和品種的豬群均易感，其中新生仔豬及哺乳仔豬最為嚴重，且死亡率較高。自2018 年8 月我國暴發(fā)非洲豬瘟后，隨著國內(nèi)各大養(yǎng)殖公司生物安全措施升級優(yōu)化，以及腹瀉疫苗的廣泛使用，該病得到了一定程度的控制。但是，伴隨豬流行性腹瀉病毒（PEDV）毒株的不斷變異，該病在一些地區(qū)呈現(xiàn)地方流行的趨勢。因此，該病的防控受到新的挑戰(zhàn)。本文對近些年國內(nèi)PED的發(fā)病情況進行總結(jié)，并從疫苗免疫、生物安全和飼養(yǎng)管理等方面對該病的防控展開探討，以期能為養(yǎng)豬業(yè)同行提供參考。

1 PED 的病原學及臨床特征

引發(fā)豬流行性腹瀉的病原為PEDV，根據(jù)遺傳和抗原特征，PEDV屬于尼多病毒目冠狀病毒科琢冠狀病毒屬成員，該病毒為單股正鏈RNA 病毒，其基因組全長約為28kb，主要的結(jié)構(gòu)蛋白為纖突糖蛋白（S 蛋白）、小膜蛋白（E 蛋白）、膜蛋白（M 蛋白）和核衣殼蛋白（N蛋白）[1]。其中S 蛋白是病毒的囊膜蛋白，其主要作用結(jié)合細胞受體啟動感染并誘導中和體內(nèi)抗體、與病毒的組織嗜性和毒力改變相關(guān)，S 蛋白的突變（特別是缺失和/或插入）可能改變冠狀病毒的致病性和嗜向性，其中S基因1（S1）包含病毒主要的中和表位和受體結(jié)合域，S1 基因的變化影響PEDV 變異，所以，S1 基因常被用于PEDV的基因測序及遺傳進化分析中的目的基因。根據(jù)對全基因組的進化樹分析，全球PEDV 毒株分為兩大類：即上世紀70年代歐洲首次出現(xiàn)的經(jīng)典PEDV 毒株（GI 型）和2010 年后出現(xiàn)的PEDV 毒株（G域型），其中新出現(xiàn)的PEDV 毒株根據(jù)S 糖蛋白中有不同的插入或缺失情況又分為“non-S-INDEL”（主要為強毒株）和“S-INDEL”亞群。PEDV 僅有一個血清型，不同毒株之間存在一定的交叉保護。N基因在各個結(jié)構(gòu)蛋白中保守性最高，所以，N基因常用在該病的病毒鑒定診斷中[2]。

該病感染豬群后最典型的臨床表現(xiàn)為豬只嘔吐、水樣腹瀉、脫水、厭食和精神沉郁。引起7日齡以內(nèi)新生哺乳仔豬100%的發(fā)病率和死亡率，育肥豬和母豬群多呈一過性感染，發(fā)病時采食量降低、不食，出現(xiàn)黃色水樣糞便，一般一周左右自行康復。規(guī)模化豬場暴發(fā)PEDV 后，由于分娩和斷奶仔豬數(shù)量大且為連續(xù)生產(chǎn)，該病毒則通過感染斷奶時喪失初乳免疫的下一窩仔豬而存活，因而導致了該病在規(guī)模化豬場的持續(xù)發(fā)病，造成了大量的仔豬的死亡和嚴重的經(jīng)濟損傷。患病豬是主要傳染源，病毒由糞口途徑進入腸道后，在腸絨毛上皮細胞和腸系膜淋巴結(jié)復制，然后經(jīng)后腸糞便排出到環(huán)境中，導致豬舍內(nèi)環(huán)境、飼料、飲水、交通工具及用具等污染。該病的感染途徑是直接或間接糞-口傳播，還有空氣傳播，其中糞-口傳播是其最主要的傳播方式。豬流行性腹瀉的發(fā)生具有明顯的季節(jié)性，在我國以9月至次年的4月寒冷季節(jié)多發(fā)，但受PEDV變異株的出現(xiàn)及豬場管理水平差異影響，該病季節(jié)性發(fā)病的特征逐漸減弱。

2 豬流行性腹瀉在我國的發(fā)病趨勢

豬流行性腹瀉病毒在我國的流行情況，大致可以分為兩個階段，即20 世紀70 年代末至2010 年之間的經(jīng)典PED 流行階段和自2010年至今的在中國新出現(xiàn)的PEDV毒株（G域型）流行階段。20 世紀70 年代末，在中國首次出現(xiàn)關(guān)于PED 的報道；直到1984 年，首次證實了PED 在中國的存在，給很多省份造成了嚴重的損失。2010 年，由non-S INDEL高毒力毒株導致的嚴重PED 疫情在中國發(fā)生，導致1 年內(nèi)損失100 萬頭仔豬以上。隨后，新出現(xiàn)的S INDEL毒株也在中國被發(fā)現(xiàn)[2]。Su等[3]研究了2015—2018年來自全國22個省份的543份腹瀉仔豬組織樣品，發(fā)現(xiàn)PED 陽性率為66.85%，對陽性樣本的147個毒株進行遺傳進化分析發(fā)現(xiàn)：43 株屬于GIIa亞組，其余104 株被歸為GIIb 亞組。2017—2018 年中國流行毒株中91.13% ）（72/79）PEDV 株屬于GIIb 亞群。顏忠等[4]采用RT-PCR 檢測方法對2018—2020 年采集于全國11 個省市318 個規(guī)模化豬場的2，391份樣品進行PEDV 核酸檢測，對30 份陽性樣品進行S1全基因擴增與測序分析發(fā)現(xiàn)：2018—2020年，豬場PEDV核酸陽性率分別為48.57%、10.96%和4.72%，獲得的30 株毒株全部為G域基因型，其中17 株毒株為G域a 基因亞型、5 株毒株為G域b 亞型、8 株毒株為G域c 亞型，G域a 基因亞型毒株為2018-2020年流行的主要毒株類型。Li 等[5]從2017—2021年，從中國303個農(nóng)場收集了882 份腹瀉樣本，以調(diào)查PEDV 的流行病學。結(jié)果表明，約52.15%（158/303）的農(nóng)場PEDV陽性，樣本總檢出率為63.95%（564/882）。對104株S基因的S1片段進行測序，進行系統(tǒng)發(fā)育分析發(fā)現(xiàn)：71株P(guān)EDV毒株（68.27%）被歸入主要的G2c亞組，而新定義的G2d 毒株（9.62%）在中國三個省份被鑒定出來。可見，從2017—2021年，G2c亞群是中國流行的主要分支。2021年，陳勝男等[6]對廣東省16個地市采集的379份豬場樣品進行PCR 方法檢測，樣品陽性率達到13.19%。對獲得的8株S基因與參考序列進行比較，發(fā)現(xiàn)其與疫苗株（CV777、DR13、AJ1102、LW、ZJ08）同源性較低，而與流行株（SDFQ、SDSJ、SXZJ、JXTQ）同源性較高，基因序列分析表明，該8株陽性樣品的S 基因均屬于G2，可見，G2 是廣東省PEDV流行的主要基因型。2021 年，李相釗等[7]對來自全國296 個豬場的686 份病料檢測發(fā)現(xiàn)，其中294 份病料豬流行性腹瀉病毒抗原呈陽性，陽性率達42.9%，通過測序分析發(fā)現(xiàn)，294 份病料豬流行性腹瀉毒株均屬于G2亞群。

另外，豬流行性腹瀉病在我國的流行情況除上述毒株的變化特點外，該病還常常與豬繁殖與呼吸綜合征、豬傳染性胃腸炎，豬輪狀病毒感染等病毒病混合感染。同時，仔豬發(fā)生豬流行性腹瀉病時也常常與豬大腸桿菌、豬鏈球菌、豬副豬嗜血桿菌病等細菌病混合感染，使得對該病的防治更加復雜。

由上可知，我國自2010 年P(guān)EDV 變異株的出現(xiàn)，近幾年的流行毒株主要為G2 亞群毒株，PEDV通過基因的插入、缺失和重組等方式不斷發(fā)生演化和變異，導致高致病力毒株、變異毒株不斷出現(xiàn)，各類毒株之間的存在差異，不同年份主要流行的毒株也存在差異，由G域a、G域b、G域c 等不斷發(fā)生變化，且各毒株之間的交叉保護不好。加之，各類引發(fā)腹瀉的細菌、病毒之間存在混合感染，導致豬群發(fā)生PED的情況更加復雜。

3 診斷方法

豬流行性腹瀉的癥狀，在臨床上與豬傳染性胃腸炎，輪狀病毒感染極易混淆，不易區(qū)分。因此，對于該病的診斷通常采用PEDV膠體金快速試劑條檢測和熒光定量或者普通PCR方法。膠體金快速試劑條法：該方法操作方便，可隨時應用于養(yǎng)豬現(xiàn)場。具體方法采集豬只糞便或者剖檢的腸道勻漿液，滴加在PEDV 膠體金快速試劑條的待檢口中檢測，如果出現(xiàn)兩條紅線，則表示樣品為PEDV病原陽性。熒光定量或者普通PCR方法：收集腹瀉的糞便以及剖檢仔豬腸道送實驗室進行檢測，經(jīng)過組織勻漿研磨，12 000 轉(zhuǎn)，離心3 min后取上清液，提取核酸后，進行熒光定量或者普通PCR，出現(xiàn)ct值或相應的條帶，則表示樣品為PEDV 病原陽性，并進行測序，以排除其他腹瀉疾病。

4 防治措施

4.1 生物安全消毒措施

引種環(huán)節(jié)中，要重視PEDV 的檢測，冬季減少或不引種，引種后的后備母豬做好PEDV 的馴化，通常使用高胎齡的經(jīng)產(chǎn)母豬或發(fā)病豬的糞便進行馴化，同時結(jié)合疫苗免疫，另外，受到非瘟的影響，馴化時返飼一般不推薦使用。針對車輛管控，冬季車輛是最大的風險，不易消毒徹底，應高壓熱水清洗+烘干；產(chǎn)房空欄時間最好控制在7 d以上，盡可能增加空欄時間。豬場發(fā)病時，對發(fā)病豬舍采取嚴格的消毒、隔離，防止繼續(xù)傳染。

4.2 疫苗接種

對于豬流行性腹瀉的免疫，目前多采取活疫苗+滅活苗的方式進行。給母豬噴鼻病料或后海穴注射PEDV疫苗的方法，使妊娠母豬血清中含有足量的抗體，初生仔豬通過吃初乳的方式獲得母源抗體，獲得被動免疫，從而提高仔豬抗病力。

4.3 加強飼養(yǎng)管理

定期開展PEDV的抗體和抗原的檢測，降低飼養(yǎng)過程中的發(fā)病風險；對發(fā)病豬群，施行隔離飼養(yǎng)，人員單獨居住，與其它豬，m！#xm！舍人員分開。同時，收集含有該病母源抗體的初乳，給發(fā)病仔豬灌服已獲得該病抗體，對腹瀉脫水的豬只灌服補液鹽、抗生素、益生菌等進行對癥治療。

綜上所述，我國自2010 年P(guān)EDV PEDV通過基因的插入、缺失和重組等方式不斷發(fā)生演化和變異，導致高致病力毒株、變異毒株不斷出現(xiàn)，各類毒株之間的存在差異。近幾年的流行毒株主要為G2 亞群毒株，該病的控制和凈化形勢依然嚴峻，對于該病的防治尚無特效藥治療，疫苗免疫、飼養(yǎng)管理和生物安全等措施，是防控豬流行性腹瀉關(guān)鍵措施。

參考文獻：

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[3] Su M， Li C， Qi S， et al. A molecular epidemiological investigation ofPEDV in China： Characterization of co-infection and genetic diversity ofS1-based genes [J]. Transboundary and Emerging Diseases， 2019， 67（3）：1129-1140.

[4] 顏忠， 楊漢春.2018-2020年中國部分省市豬流行性腹瀉病毒S1 基因的監(jiān)測及遺傳變異分析[J].中國畜牧獸醫(yī)，2022，49（2）：424-434

[5] Li Xiaowen， Li Yang， Huang Jiapei， et al. Isolation and oral immunogenicityassessment of porcine epidemic diarrhea virus NH-TA2020 strain： Oneof the predominant strains circulating in China from 2017 to 2021[J]. VirologicaSinica， 2022， 8（2）：140-147.

[6] 陳勝男，胡柱祺，林金森，等.2021 年廣東省豬流行性腹瀉病毒分子監(jiān)測和部分S基因序列分析[J].中國動物保健，2022，24（9）：101-103.

[7] 李相釗，朱紹偉，李秀娟，等.2021年豬流行性腹瀉檢測分析與防控建議[J].豬業(yè)科學，2022，39（3）：73-76.