不規則抗體篩查陽性患者抗體分布與Rh 抗原分布情況研究

李 楠 張 焱 梁國艷 謝雙鋒 孫 武

中山大學孫逸仙紀念醫院輸血科（廣東廣州 510000）

紅細胞不規則抗體是指不符合ABO血型系統Landsteriher法則的血型抗體，也就是抗A、抗B以外的血型抗體，多次輸血、妊娠、移植等都可能導致不規則抗體的產生［1］。不規則抗體可能會影響患者血型結果判讀，導致交叉配血失敗，引發溶血性輸血不良反應及胎兒或新生兒溶血病，嚴重時可危及患者生命，因此不規則抗體的篩查與鑒定具有重要的意義［2］。不規則抗體的出現頻率及其特異性抗體分布具有地區及種族的差異性［3］。了解本地區不規則抗體分布規律，對保證輸血安全有重要的意義。Rh血型系統是一種復雜的紅細胞血型系統，該系統中的不規則抗體在臨床上較為多見，具有重要的臨床價值［4］。我國2000年版《臨床輸血技術規范》只要求輸血患者檢測ABO血型（正、反定型）和RhD抗原，對Rh血型系統另外四種主要抗原C、c、E、e無明確要求，由于我國人群中RhE、RhC、Rhe、Rhc的陰性頻率均高于RhD的陰性頻率［5］，患者輸血前如未進行相關抗原檢測及配合性輸注，通過輸血的反復刺激，將會導致不規則抗體的產生，產生的抗體常會導致交叉配血困難及溶血性輸血反應的發生。本研究回顧性分析了廣州市一間三甲級綜合醫院2019年10月1日—2022年12月31日期間34 796例患者抗體篩查的結果，同時總結分析不規則抗體篩查陽性患者的抗體分布及Rh抗原分布情況，總結其地域分布規律，為該地區輸血科日常工作提供理論依據。

1 資料與方法

1.1 研究對象

以2019年10月1日—2022年12月31日在中山大學孫逸仙紀念醫院進行抗體篩查的34 796例患者為研究對象，年齡0～99歲，其中男16 840例，女17 956例。本研究已通過醫院倫理委員會批準，并豁免患者個人知情同意書 。

1.2 試劑與儀器

主要試劑包括：微柱凝膠抗人球蛋白卡（達亞美有限責任公司），不規則抗體篩查紅細胞試劑盒（達亞美有限責任公司），抗體鑒定譜細胞（匈牙利REAGENS公司），Rh分型卡（天津德祥生物技術有限公司），以上所需的實驗試劑均檢驗合格且在有效期內。主要儀器有全自動血型配血分析儀（伯樂生命醫學產品上海有限公司）、卡式專用離心機（伯樂生命醫學產品上海有限公司）、恒溫水浴箱（上海一恒科技有限公司）等。

1.3 實驗方法

對2019年10月1日—2022年12月31日中山大學孫逸仙紀念醫院34 796例申請輸血患者的血樣使用全自動血型配血分析儀進行不規則抗體篩查。抗體篩查陽性患者血樣外送至廣州市血液中心進行抗體鑒定。不規則抗體的鑒定采用微柱凝膠卡手工法，使用譜細胞與待測血漿反應，根據反應格局判斷抗體類型。Rh抗原的分型使用Rh抗原分型卡，將10 μL 3%待檢紅細胞懸液加入每柱中，然后使用專用離心機離心5 min后，判斷抗原分型。

1.4 統計學方法

采用SPSS 27.0統計學軟件分析和處理數據，計數資料采用例數或百分率（%）表述，組間比較采用χ2檢驗。檢驗水準α＝0.05。

2 結 果

2.1 237抗體篩查陽性患者抗體類型分析

34 796例患者中，不規則抗體篩查陽性237例，陽性率為0.68%。其中23例患者含有兩種抗體，故檢測到陽性抗體數量為260例。紅細胞同種特異性抗體中，MNS血型系統抗體例數最高，為83例（占31.93%），其中抗-Mia檢出例數最多，有53例（占20.39%）；其次為Rh血型系統，抗體例數為70例（占26.93%），其中抗-E檢出例數最多，有54例；Lewis血型系統抗體有14例（占5.39%）；Kidd血型系統抗體有5例（占.92%）；P血型系統抗體有5例（占1.92%）。同種非特異性抗體共79例（占30.38%）。見表1。

表1 抗體篩查陽性患者不規則抗體分布情況

2.2 抗體篩查陽性患者Rh抗原分型結果

237例抗體篩查陽性患者的Rh抗原分型結果見表2，其中抗原表型為CCDee的人數最多，為125例（占52.74%）；抗原表型為CcDEe有69例（占29.12%）。

表2 抗體篩查陽性患者Rh抗原表型分布

2.3 不規則抗體產生的影響因素分析

對34 796例患者的一般情況進行統計分析，比較抗體篩查陽性組與陰性組患者的性別、輸血史、妊娠史、年齡、血型構成，結果顯示2組患者的性別、輸血史、妊娠史構成比較差異有統計學意義（P＜0.05）。2組患者的年齡、血型構成比較差異無統計學意義（P＞0.05）。見表3。

表3 不規則抗體篩查陽性組與陰性組的一般情況比較［n（%）］

2.4 不同科室患者不規則抗體篩查陽性率比較

不同科室抗體篩查陽性率比較，差異有統計學意義（χ2=146.917，P＜0.01），風濕免疫科與血液科是不規則抗體篩查陽性率最高的科室。風濕免疫科患者共檢出不規則抗體21例，其中5例為同種特異性抗體、16例為自身抗體。血液科患者共檢出不規則抗體68例，其中31例為同種特異性抗體，18例為自身抗體，抗CD38有14例，抗CD47有5例。見表4。

表4 不同科室間不規則抗體篩查陽性率比較

3 討 論

本研究中共篩查出抗體陽性的患者237例，陽性率為0.68%，檢出不規則抗體共260例，其中有23例患者同時檢出2種抗體。檢出同種特異性抗體181例，其中MNS血型系統及Rh血型系統抗體占比最多，分別為31.93%及26.93%，與既往文獻報道一致［6-7］。檢出比例最高的抗體為抗-E，占20.77%，其次為抗-Mia，占20.39%；Lewis血型系統抗體占5.39%，Kidd、P、I、Kell、Duffy血型系統抗體均有檢出，但陽性率較低。檢出同種非特異性抗體79例，占30.38%，其中自身抗體有59例，藥物相關性抗體有20例，主要為抗-CD38與抗-CD47。

Rh血型系統是繼ABO血型系統后最復雜，也是臨床意義最大的一種血型系統，Rh血型系統內大概有50多種抗原，具有豐富的多態性［8］，與臨床密切相關的抗原主要有5種，其抗原性由強到弱依次為D＞E＞c＞C＞e［5］。行業標準中僅要求RhD抗原同型輸注，對E、e、C、c4種抗原并未有明確規定，輸血科日常工作中并未對受血者E、e、C、c抗原進行分型及配合性輸注，導致許多受血者因上述抗原的不匹配產生不規則抗體，當機體再次接觸相應抗原時可誘發產生嚴重的溶血反應。本研究中，檢測到Rh血型系統抗體共70例，占26.93%，其中僅1例為抗-D，抗-E有54例，占20.77%，其次為抗-cE，占3.46%，抗-Ce、抗-C均有檢出，該系統抗體所占比例較高，是疑難配血、免疫性溶血及新生兒溶血癥常見的原因，因此，實現RhD、C、c、E、e抗原相容性輸注，從源頭上降低因輸血產生不規則抗體的頻率，對臨床輸血工作有重要的意義［9］。由于實驗室條件有限，本研究未對所有待輸血患者進行Rh分型，僅對237例不規則抗體篩查陽性的患者進行了Rh分型及相容性輸注，分型結果顯示表型為CCDee占比最高，為52.74%；其次為CcDEe，占29.12%，CcDee表型占8.44%，與既往文獻報道一致［10-11］。本研究中，E抗原陰性的患者所占比例較高，有61.6%，再次說明了抗-E容易產生，需要關注。孕母Rh血型不合也可引起胎兒發生嚴重的新生兒溶血病，一般從第二胎開始發生，幾年來隨著二孩及三孩政策的開放，Rh血型不合的新生兒溶血病占比出現上升趨勢，這也提示對妊娠期婦女及配偶進行Rh血型系統的分析具有重要的臨床意義［12］。

MNS血型系統也是極具多態性的一種血型系統，其復雜程度僅次于Rh血型系統，表達至少46種抗原［13］。Miltenberger 系列是MNS 血型系統的1組變異型，該系列的表型及抗原在歐洲人群中分布頻率較低，但是在亞洲人群中較為常見，在我國呈現由北向南分布頻率增高的趨勢，以香港、福建和廣東地區出現頻率最高［14］，該血型系統所對應的抗體主要為抗-Mia，該抗體常引起交叉配血不合、溶血性輸血反應及新生兒溶血病的發生，對其進行篩查有重要的臨床意義［15］。本研究中MNS血型系統不規則抗體共檢出83例，占31.93%，其中抗-Mia，就有53例，數量較多，值得關注。隨著全球化的加速，國內外各種族、地區人群的流動、遷移，使抗-Mia的臨床意義得到了廣泛的關注［14］。然而，目前國內市售的不規則抗體篩查細胞仍未包含Mia陽性紅細胞，存在漏檢可能性，為保證輸血安全，抗體篩查譜細胞中增加Mia陽性紅細胞顯得尤為重要［14］。

本研究進一步分析表明，抗體篩查陽性與患者性別、輸血史、妊娠史有關（P＜0.05），與患者年齡和ABO血型無關（P＞0.05），女性、有輸血史、有妊娠史的患者更容易出現不規則抗體陽性。異體輸血的患者接觸紅細胞異型抗原的概率高于無輸血史的患者［14］，接觸異型抗原的概率越大，產生不規則抗體的概率也就越大；女性患者在妊娠過程中，胎兒紅細胞可進入母體循環，可能會刺激母體產生同種特異性不規則抗體，IgG類型的抗體還能通過胎盤屏障進入胎兒體內引起胎兒及新生兒溶血癥［16］。因此，對于女性、有輸血史、有妊娠史的患者，再次輸血時要嚴格執行輸血前的抗體篩查，盡可能進行Rh五種主要抗原相容性輸注。

不同科室之間抗體篩查陽性率比較差異有統計學意義（P＞0.05），其中風濕免疫科與血液科患者不規則抗體篩查陽性率最高。本研究顯示，風濕免疫科患者同種非特異性抗體占比較高，自身抗體占76.19% ；同種特異性抗體占23.81%，風濕免疫科患者多存在自身免疫功能紊亂，其產生自身抗體概率較高，自身抗體的存在可能會干擾血型鑒定結果、掩蓋同種特異性抗體的檢出、影響交叉配血試驗的順利進行，需認真鑒別。血液科患者多伴有紅細胞計數下降、血紅蛋白含量降低，其輸注異體血的概率較高，產生同種特異性抗體的概率較大；近年來隨著分子靶向藥物的出現，抗-CD38與抗-CD47也開始廣泛地應用于惡性血液腫瘤，但這兩種藥物會對抗人球蛋白試驗造成干擾，影響患者抗體篩查試驗的結果，在臨床工作中需要謹慎進行鑒別；自身免疫性溶血性貧血的患者體內含有自身抗體，這些因素造成了血液科患者抗體篩查陽性率較高。

綜上所述，輸血前進行不規則抗體篩查，可及時發現患者體內不規則抗體情況，尤其是對多次輸血或有妊娠史的患者，能降低患者輸血不良反應的發生風險，提高輸血治療效果。國內輸血僅要求檢測ABO血型和RhD血型，對Rh系統其他抗原無檢出要求，這使多次輸血患者及孕婦容易發生不規則抗體引起的溶血性輸血反應。因此，輸血前不規則抗體篩查及Rh血型系統相容性輸注，對保障臨床輸血安全具有重要意義。