孟魯司特鈉片聯合糠酸氟替卡松治療支氣管哮喘患兒的療效及對miRNA-21、miRNA-26a水平的影響*

閆鮮鵬,韓 偉△,王潔英,李 婷,陳 蓉

1.陜西省人民醫院兒童病院,陜西西安 710068;2.陜西省人民醫院干部體檢中心,陜西西安 710068

吸入型糖皮質激素(ICS)是相關指南中推薦的治療支氣管哮喘的藥物,但其給藥為一日兩次,患兒依從性差,對于部分患兒的療效不佳[1]。有研究發現糠酸氟替卡松作為新型的糖皮質激素,對支氣管哮喘的療效不亞于常規療法[2]。孟魯斯特鈉是一種白三烯受體拮抗劑,有研究表明孟魯斯特鈉聯合糖皮質激素可顯著提升臨床療效,但目前尚較缺乏糠酸氟替卡松聯合孟魯斯特鈉治療兒童支氣管哮喘的研究[3]。微小RNA(miRNA)是一類長度為18～25個核苷酸的內源性非編碼RNA分子,具有調節基因表達的作用[4]。有研究顯示,miRNA-21(miR-21)和miRNA-26a(miR-26a)參與支氣管哮喘的發生和發展[5],還有研究顯示其表達水平可能與支氣管哮喘的嚴重程度有關[6]。因此本文使用前瞻性方法,探究糠酸氟替卡松聯合孟魯斯孟鈉對支氣管哮喘患兒的療效,以及對血清miR-21及miR-26a水平的影響,現報道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2020年3月至2022年3月在陜西省人民醫院兒童病院就診的支氣管哮喘患兒120例作為研究對象,其中男63例,女57例,年齡5～13歲。按照隨機數字表法分為兩組,各60例。對照組男32例,女28例;平均年齡(10.04±0.85)歲;平均發病時間(1.38±0.32)年。觀察組男31例,女29例;平均年齡(9.87±0.88)歲;平均發病時間(1.41±0.34)年。本研究已經獲得陜西省人民醫院兒童病院醫學倫理委員會批準(審批號:2020-09),患兒監護人均簽署知情同意書。納入標準:(1)符合支氣管哮喘的相關診斷標準[7];(2)輕中度支氣管哮喘;(3)就診前3個月內未進行激素治療。排除標準:(1)合并呼吸衰竭;(2)曾接受過肺部手術;(3)合并肺部感染或全身感染性疾病。

1.2方法

1.2.1治療方法 所有患兒均進行常規基礎治療,保持患兒的呼吸道通暢,避免發生呼吸道堵塞,必要時給予患兒吸氧支持,并注意糾正水和電解質失衡。在此基礎上,對照組患兒接受布地奈德(上海信誼藥廠有限公司,國藥準字H20010552)霧化吸入治療,每次0.3～0.5 mg,每日2次。觀察組使用孟魯司特鈉片(四川大冢制藥有限公司,國藥準字H20064370)聯合糠酸氟替卡松(Glaxo Operations UK Ltd.,批準文號:H20170105)治療。孟魯司特鈉片為咀嚼片,每次2片,每日2次;糠酸氟替卡松鼻內給藥,每噴用量55 μg,每側鼻孔1噴,每日1次。在治療1個月后進行評估。

1.2.2檢測方法 (1)肺功能指標:采用肺功能儀檢測第1秒用力呼氣容積(FEV1)和最大呼氣流量(PEF)。(2)血清炎癥因子:抽取所有患兒空腹外周靜脈血5 mL,使用ELISA檢測超敏C反應蛋白(hs-CPR)和白細胞介素(IL)-6,試劑盒購于武漢塞培生物有限公司。(3)血清miR-21和miR-26a:使用Trizol regent(Invitrogen,美國)按照制造商的說明書從5 mL血液樣本中分離含有miRNA的總RNA。miRNA的反轉錄通過miRNA反轉錄合成試劑盒(Tiangen,中國)進行。并使用miRcute miRNA qPCR檢測試劑盒(Tiangen,中國)在ABI Quant Studio 3中檢測miR-21和miR-26a水平。以U6作為miRNA的內參,使用2-ΔΔCt法計算miR-21和miR-26a的表達水平,引物序列見表1。

表1 miR-21和miR-26a及對照引物序列

1.3臨床療效判斷 判斷方法如下。顯效:聽診檢查患兒的哮鳴音基本消失,咳嗽、氣喘以及喘憋等臨床癥狀基本消失;有效:哮鳴音發生情況有所好轉,各項臨床癥狀顯著改善;無效:各項臨床癥狀無好轉甚至惡化。有效率=(顯效例數+有效例數)/總例數×100%。

1.4觀察指標 (1)比較兩組的臨床療效。(2)比較兩組治療前、治療1個月后肺功能指標FEV1、PEF。(3)比較兩組治療前、治療1個月后血清hs-CPR和IL-6水平。(4)比較兩組治療前、治療1個月后miR-21和miR-26a表達水平。(5)比較兩組不良反應發生情況。在患兒的治療期間密切關注患兒頭痛、鼻竇炎、咽炎等不良反應發生情況并及時處理。

2 結 果

2.1兩組臨床療效比較 觀察組的有效率為91.66%,對照組的有效率為80.00%。觀察組有效率高于對照組(P<0.05)。見表2。

表2 兩組臨床療效比較

2.2兩組肺功能指標比較 治療前兩組FEV1、PEF比較,差異無統計學意義(P>0.05),治療后兩組FEV1、PEF均顯著升高(P<0.05),觀察組顯著高于對照組(P<0.05)。見表3。

表3 兩組肺功能指標比較

2.3兩組血清hs-CPR和IL-6水平比較 治療前兩組hs-CPR和IL-6水平比較,差異無統計學意義(P>0.05),治療后兩組hs-CPR和IL-6水平均顯著降低(P<0.05),觀察組顯著低于對照組(P<0.05)。見表4。

表4 兩組血清hs-CPR和IL-6水平比較

2.4兩組miR-21和miR-26a表達水平比較 治療前兩組miR-21和miR-26a表達水平比較,差異無統計學意義(P>0.05),治療后兩組miR-21和miR-26a表達水平均顯著降低(P<0.05),觀察組顯著低于對照組(P<0.05)。見表5。

表5 兩組miR-21和miR-26a表達水平比較

2.5兩組不良反應發生情況比較 對照組的總發生率為8.33%,觀察組的總發生率為13.33%。見表6。

表6 兩組不良反應發生情況比較[n(%)]

3 討 論

支氣管哮喘是一種常見的呼吸道疾病,兒童是支氣管哮喘的主要發病人群,流行病學調查結果顯示中國兒童支氣管哮喘的發病率為1.97%[8]。支氣管哮喘是一個多因素共同參與、復雜的過程,過敏原、花粉刺激及致病基因均參與其發病過程。雖然目前對其具體的發病機制尚不完全清楚,但可以肯定的是淋巴細胞等多種免疫細胞參與了支氣管哮喘的發病,炎癥反應在支氣管哮喘的發生和進展中具有重要的作用,氣道炎癥是目前廣泛認可的發病機制[9]。支氣管哮喘的臨床治療目前尚無特效藥,臨床治療以改善患兒的咳嗽、喘氣和胸悶等癥狀為主。

ICS是治療兒童支氣管哮喘的首選藥物,但對于部分患兒療效欠佳,有研究認為由于霧化吸入布地奈德等糖皮質激素的劑量較大,并且每日要重復兩次,這會導致患兒用藥的依從性較差,嚴重影響療效[10]?？匪岱婵ㄋ墒且环N新型的糖皮質激素,其可通過抑制核轉錄因子-κB(NF-κB)通路降低腫瘤壞死因子(TNF)-α等炎癥因子水平從而起到抑制炎癥的作用。糠酸氟替卡松吸入后30～45 min可達到最高血藥濃度,并且半衰期為25～35 h,作用時間長[11]。國外的臨床研究顯示,糠酸氟替卡松對支氣管哮喘具有較好的臨床療效[12]。孟魯斯特鈉是強效半胱氨酰白三烯(CysLTs)的抑制劑,可直接阻斷CysLTs與受體結合從而減輕炎癥反應,緩解黏膜水腫、支氣管平滑肌痙攣[13]。林貫秋[14]的研究結果顯示,糠酸氟替卡松可顯著提高重度哮喘患兒的肺功能,緩解臨床癥狀并提高生存質量。李凌[15]認為糠酸氟替卡松具有較好的臨床療效,并且作為一種需要長期使用的藥物,糠酸氟替卡松用藥次數為每日1次,可有效提高依從性,對提高療效具有意義。安全性的系統評價顯示,糠酸氟替卡松單獨使用和聯合其他藥物使用均具有較好的安全性[16]。既往研究結果顯示,孟魯斯特鈉聯合糖皮質激素霧化吸入可顯著下調血清炎癥因子水平,提高臨床療效[17]。這提示糠酸氟替卡松聯合孟魯斯特鈉可通過抑制NF-κB通路和降低白三烯等釋放,緩解臨床癥狀,改善肺功能,對于小兒支氣管哮喘具有更好的臨床效果并具有一定的安全性。

近年來關于miRNA在哮喘中的作用機制被逐漸發現,miRNA可以通過特異性結合mRNA的3′非翻譯區來抑制或誘導信使RNA(mRNA)的降解,從而調節蛋白表達。有研究顯示支氣管哮喘患者miR-21和miR-26a表達水平顯著升高,并且miR-26a和miR-21表達水平與哮喘的嚴重程度有關[18]。在氣道炎癥中,miR-21可通過上調IL-12水平促進炎癥反應[19]。本研究結果顯示,觀察組采用的治療方法可以顯著影響患兒miR-21和miR-26a的表達水平。LU等[20]研究結果顯示,miR-21缺陷導致小鼠哮喘反應減弱。并且LEE等[21]研究顯示,抑制miR-21的表達水平可以改善哮喘小鼠的炎癥反應。厲蘭等[22]認為,miR-21可作為炎癥的血清標志物。WANG等[23]研究發現,通過下調miR-26a可減輕氣道平滑肌肥大、緩解哮喘癥狀。這說明miR-21和miR-26a可通過促進炎癥反應和刺激呼吸道參與支氣管哮喘的發生。而糠酸氟替卡松聯合孟魯斯特鈉可更顯著下調miR-21和miR-26a表達水平,提高療效。

糠酸氟替卡松聯合孟魯斯特鈉對兒童支氣管哮喘具有更好的臨床療效,可提高肺功能,并具有一定的安全性。此外,糠酸氟替卡松聯合孟魯斯特鈉可能通過下調miR-21和miR-26a表達水平抑制炎癥因子表達,提高療效。