2型糖尿病伴干眼癥病人血清和淚液分泌型卷曲相關蛋白5、脂肪酸結合蛋白4水平與病情嚴重程度的相關性

張震英，田春雨，趙樂，閆小藝，鄭繼香

作者單位：1唐山市眼科醫院眼肌科，河北 唐山063000；2唐山市開平醫院五官科，河北 唐山063021

糖尿病（DM）是一種繼心腦血管疾病、癌癥之后的常見慢性疾病，其中2型DM（T2DM）病人占DM總患病人數的90%以上［1］。T2DM可導致神經病變、視網膜病變、心血管疾病、腎病等并發癥，而干眼癥正是其常見并發癥之一［2］。干眼癥是一種眼表疾病，輕者表現為眼部不適，較為嚴重時可損傷視力，甚至導致失明，給病人的工作和生活帶來極大的困擾［3］。目前，關于T2DM 伴干眼癥發病機制仍不清晰明確，臨床可行干預措施有限。因此，迫切需要闡明T2DM伴干眼癥的發病機制，以探索新的治療策略。

分泌型卷曲相關蛋白（SFRP）-5 是由脂肪組織產生的SFRP 家族成員，是一種抗炎脂肪因子，已有研究表明SFRP-5 參與糖脂代謝，在T2DM 及T2DM相關并發癥如腎病、冠狀動脈病變中低表達，是一種保護因子［4-6］。而關于SFRP-5 在T2DM 伴干眼癥疾病中的作用目前仍未可知。FABP4，即脂肪酸結合蛋白4 主要表達于脂肪細胞和巨噬細胞中，其作為細胞內脂質伴侶，參與調節糖脂代謝和炎癥反應［7］。血清FABP4 水平升高與肥胖、T2DM 及T2DM相關并發癥如腎病、視網膜病變的發生進展密切相關，靶向FABP4 可能是治療這些疾病的一種新的治療方法［8-10］。基于上述內容，本探究通過采集T2DM伴干眼癥病人的血清和淚液標本，檢測SFRP-5、FABP4 的表達水平，并分析二者與病情嚴重程度的相關性，對其臨床意義進行初步探討。

1 資料與方法

1.1 一般資料選取唐山市眼科醫院2020年12月至2021 年12 月收治的T2DM 病人145 例，其中單純T2DM病人84例168眼（T2DM組），伴干眼癥病人61例122 眼（T2DM 伴干眼癥組）。納入標準：符合《中國2 型糖尿病防治指南（2020 年版）》［11］中T2DM 診斷標準；符合《中國干眼專家共識：檢查和診斷（2020 年）》［12］中干眼癥診斷標準；年齡≤70 歲；病歷資料齊全；病人或其近親屬知情同意。排除標準：合并惡性腫瘤、血液系統疾病、感染性疾病；合并其他器官嚴重病變；有腦、心血管疾病史；大量酗酒、吸煙；有眼部外傷或手術史；除T2DM 外伴有其他影響淚腺分泌淚液疾病；有角膜接觸鏡佩戴史。另選取同期體檢健康者50 例100 眼作為對照組，無眼部不適感。本研究經唐山市眼科醫院倫理委員會批準（批號2020-0814）。

干眼癥病人嚴重程度判斷標準［13］：輕度主觀癥狀，無角膜熒光素染色，即為輕度（輕度組，29 例）；中度主觀癥狀，伴有角膜熒光素染色，即為中度（中度組，17 例）；重度主觀癥狀，伴有明顯的角膜熒光素染色，即為重度（重度組，15 例）。主觀癥狀采用眼表疾病指數量表（OSDI）進行評估，該量表包含眼睛干澀、眼癢、眼痛、眼脹、異物感、灼熱感、畏光、視物不持久、眼睛充血、易疲勞、眼分泌物增多12項內容，根據出現頻率分別計為0～4分（0分：從未出現；1分：偶爾出現；2分：一半時間出現；3分：大部分時間出現；4 分：總是出現）。OSDI 積分計算公式為12 項內容積分之和×25∕12，滿分100 分。根據OSDI 積分將病人的主觀癥狀分為輕度主觀癥狀（13～22 分）、中度主觀癥狀（23～32分）、重度主觀癥狀（≥33分）。

1.2 方法

1.2.1 標本采集與檢測 所有受試者于采集標本前禁食8～10 h。血清采集：采集5 mL 肘靜脈血，經離心（3 000 r∕min，15 min）后收集血清，-80 ℃保存、待檢。淚液采集：輕拉并微后壓下瞼結膜，于穹窿結膜、球結膜交界處放置毛細玻璃管，收集、合并左、右眼淚液，-80 ℃保存、待檢。利用酶聯免疫吸附法測定血清和淚液中SFRP-5、FABP4 水平，所用試劑盒購自武漢菲恩生物科技有限公司。

1.2.2 一般資料收集 收集所有受試者的一般資料，主要包括性別、年齡、身體質量指數（BMI）、T2DM 病程、胰島素抵抗指數（HOMA-IR）、糖化血紅蛋白（HbA1c）、收縮壓（SBP）、舒張壓（DBP）、三酰甘油（TG）、總膽固醇（TC）。

1.2.3 眼部檢查 淚膜破裂時間（BUT）：取熒光素鈉試紙，將其置于病人下瞼結膜囊中，3 s后取出，用藍鉆光照射并囑病人瞬目數次，記錄淚膜上第一次出現破裂點的時間，取連續測量3次的平均值作為觀察結果。淚液分泌試驗（SIT）：于下瞼結膜囊中外1∕3處放入試紙，囑病人向下看或輕輕閉眼5 min，取出試紙測量濕潤長度，取連續測量3次的平均值作為觀察結果。

1.3 統計學方法采用SPSS 25.0 進行統計學分析。計量資料以±s表示，多組間比較行One-way ANOVA，進一步兩兩比較行SNK-q檢驗；計數資料以（%）表示，行χ2檢驗；Pearson法分析T2DM伴干眼癥病人血清與淚液SFRP-5、FABP4 水平的相關性；Pearson 法或Spearman 法分析T2DM 伴干眼癥病人血清和淚液SFRP-5、FABP4 水平與臨床指標的相關性；logistic 回歸分析影響T2DM 病人干眼癥發生的相關因素。

2 結果

2.1 T2DM 伴干眼癥組、T2DM 組、對照組三組一般資料比較T2DM 伴干眼癥組、T2DM 組、對照組性別、年齡、BMI、SBP、DBP、TG、TC 均差異無統計學意義（P＞0.05）；T2DM伴干眼癥組、T2DM組T2DM病程、HOMA-IR、HbA1c 均長于或高于對照組（P＜0.05），T2DM 伴干眼癥組與T2DM 組組間比較差異無統計學意義（P＞0.05）。見表1。

2.2 T2DM伴干眼癥組、T2DM組、對照組血清和淚液SFRP-5、FABP4 水平比較T2DM 伴干眼癥組、T2DM 組、對照組血清和淚液SFRP-5、FABP4水平有明顯差異（P＜0.05）；其中T2DM伴干眼癥組、T2DM組血清和淚液SFRP-5 水平均低于對照組，T2DM 伴干眼癥組低于T2DM 組（P＜0.05）；T2DM 伴干眼癥組、T2DM 組血清和淚液FABP4 水平均高于對照組，T2DM伴干眼癥組高于T2DM組（P＜0.05）。見表2。

表2 T2DM病人145例與體檢健康者50例血清和淚液SFRP-5、FABP4水平比較∕（μg∕L， ± s）

表2 T2DM病人145例與體檢健康者50例血清和淚液SFRP-5、FABP4水平比較∕（μg∕L， ± s）

注：SFRP-5為分泌型卷曲相關蛋白-5，FABP4為脂肪酸結合蛋白4，T2DM為2型糖尿病。①與對照組相比，P＜0.05。②與T2DM組相比，P＜0.05。

組別例數 50血清SFRP-5 158.34±9.45 135.72±9.26①106.09±8.37①②469.66＜0.001淚液SFRP-5 54.61±5.85 41.28±5.56①28.85±5.13①②301.21＜0.001 FABP4 7.72±3.29 10.28±3.58①15.91±3.76①②79.52＜0.001對照組T2DM組84 T2DM伴干眼癥組F值P值61 FABP4 45.18±5.92 58.27±6.14①70.63±6.59①②229.77＜0.001

2.3 不同嚴重程度T2DM 伴干眼癥病人血清和淚液SFRP-5、FABP4水平及眼部指標比較不同嚴重程度T2DM 伴干眼癥病人血清和淚液SFRP-5、FABP4 水平、BUT、SIT 及OSDI 積分有明顯差異（P＜0.05）；其中重度組、中度組血清和淚液SFRP-5水平、BUT、SIT 低于輕度組，重度組低于中度組（P＜0.05）；重度組、中度組血清和淚液FABP4水平及OSDI積分高于輕度組，重度組高于中度組（P＜0.05）。見表3。

表3 不同嚴重程度T2DM伴干眼癥61例血清和淚液SFRP-5、FABP4水平及眼部指標比較∕x ± s

2.4 T2DM 伴干眼癥病人血清與淚液SFRP-5、FABP4 水平的相關性分析Pearson 分析結果顯示，T2DM 伴干眼癥病人血清與淚液SFRP-5 水平呈正相關（r=0.76，P＜0.001），血清與淚液FABP4 水平也呈正相關（r=0.70，P＜0.001）。

2.5 T2DM 伴干眼癥病人血清和淚液SFRP-5、FABP4 水平與臨床指標的相關性分析相關性結果顯示，T2DM 伴干眼癥病人血清和淚液SFRP-5 水平與T2DM 病程、HOMA-IR、HbA1c 及OSDI 積分均呈負相關，與BUT、SIT均呈正相關（P＜0.05）；血清和淚液FABP4 水平與T2DM 病程、HOMA-IR、HbA1c及OSDI 積分均呈正相關，與BUT、SIT 均呈負相關（P＜0.05）。見表4。

表4 T2DM伴干眼癥61例血清和淚液SFRP-5、FABP4水平與臨床指標的相關性分析

2.6 影響T2DM 病人干眼癥發生的因素分析以T2DM 病人是否伴干眼癥為因變量（是=1，否=0），以血清和淚液SFRP-5、FABP4 水平為自變量進行logistic 回歸分析。結果顯示，血清和淚液SFRP-5 水平是影響T2DM 病人干眼癥發生的獨立保護因素，而血清和淚液FABP4水平是影響T2DM病人干眼癥發生的獨立危險因素（P＜0.05）。見表5。

表5 影響T2DM病人干眼癥發生的因素分析（n=195）

3 討論

干眼癥是由于淚液分泌不足或蒸發過多，導致淚液的自然流動性、多少及質量出現異常，致使淚膜不穩定或不同程度的眼表損害，常伴隨眼部疲勞、干澀感、異物感等不適癥狀，影響病人視力和生活質量［14］。研究顯示，T2DM 與干眼癥之間存在緊密關聯，T2DM 是干眼癥發病的主要危險因素之一，T2DM 病人干眼癥患病率明顯高于正常人群［15］。因此，尋找與T2DM 伴干眼癥發病及病情嚴重程度相關的指標，可能對篩查T2DM 病人干眼癥的發生風險有一定幫助，從而采用對應的措施治療干眼癥，有利于指導臨床工作。

SFRP-5 是新近發現的一種抗炎脂肪因子，其在T2DM 及T2DM 相關并發癥病理過程中的作用備受關注，是影響糖脂代謝、炎癥和胰島素抵抗的獨立因素。已有研究證實，妊娠期糖尿病病人血清SFRP-5 水平明顯低于健康孕婦［16］。此外，翁坪燕［17］發現，糖尿病腎病病人血清SFRP-5 水平明顯低于T2DM 病人和健康受試者，且SFRP-5 水平是判斷病情嚴重程度的重要指標，有一定的臨床價值。金屏等［6］發現，血清SFRP-5 水平與老年T2DM 病人冠脈病變程度呈負相關，可用于評估大血管病變。在本研究中，我們觀察到，T2DM 伴干眼癥組、T2DM 組血清和淚液SFRP-5 水平均低于對照組，且T2DM 伴干眼癥組低于T2DM 組，表明SFRP-5 參與了T2DM 及伴干眼癥的發生。進一步分析發現，不同嚴重程度T2DM 伴干眼癥病人血清和淚液SFRP-5水平、BUT、SIT 有明顯差異，其中重度組、中度組血清和淚液SFRP-5水平、BUT、SIT均低于輕度組，重度組低于中度組，且相關性分析結果顯示，T2DM 伴干眼癥病人血清和淚液SFRP-5水平與OSDI積分均呈負相關，與BUT、SIT均呈正相關，由此推測，血清和淚液SFRP-5水平可在一定程度上反映T2DM伴干眼癥病人病情。

FABP 家族是一組在細胞中扮演脂肪酸轉運體角色的小分子蛋白，而FABP4 作為FABP 家族成員在脂質代謝中起著關鍵作用［18］。有研究表明，FABP4 在T2DM 中高表達，敲除FABP4 可增強胰島素敏感性［19］。姚佳麗等［20］報道，T2DM 病人FABP4水平與HOMA-IR呈顯著正相關，且是影響胰島素抵抗的危險因素。此外，趙宇等［10］報道，高表達的FABP4與T2DM 視網膜病變的發生密切相關。在本研究中，我們觀察到，T2DM 伴干眼癥組、T2DM 組血清和淚液FABP4 水平均高于對照組，且T2DM 伴干眼癥組高于T2DM 組，表明FABP4 參與了T2DM 及伴干眼癥的發生。進一步分析發現，T2DM 伴干眼癥重度組、中度組血清和淚液FABP4 水平均高于輕度組，重度組高于中度組，且相關性分析結果顯示，T2DM伴干眼癥病人血清和淚液FABP4水平與OSDI積分均呈正相關，與BUT、SIT 均呈負相關，由此推測，血清和淚液FABP4 水平與T2DM 伴干眼癥病人病情嚴重程度密切相關。另外，相關性分析顯示，T2DM 伴干眼癥病人血清與淚液SFRP-5 水平呈正相關，血清與淚液FABP4 水平也呈正相關，且血清和淚液SFRP-5 水平是影響T2DM 病人干眼癥發生的獨立保護因素，而血清和淚液FABP4 水平獨立危險因素，提示血清和淚液中SFRP-5、FABP4 水平均可作為評估T2DM 病人干眼癥發生的指標，可能共同參與干眼癥病情進展。

綜上所述，SFRP-5 在T2DM 伴干眼癥病人血清和淚液中均低表達，FABP4 均高表達，二者與病情嚴重程度密切相關。因此，對血清和淚液SFRP-5、FABP4 水平定期測定，有望成為T2DM 伴干眼癥病人病情評估及監測的可行方法。