分枝列當(dāng)寄生甜瓜時(shí)吸器形成過(guò)程中內(nèi)源激素的動(dòng)態(tài)變化

田芳 張學(xué)坤 姚兆群 董雪 曹小蕾 趙思峰

摘要

本研究采用石蠟切片和顯微觀察分析分枝列當(dāng)寄生甜瓜時(shí)的吸器形成過(guò)程，利用液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用?（LCMS）?檢測(cè)吸器形成過(guò)程中24種植物內(nèi)源激素變化。結(jié)果表明：分枝列當(dāng)種子在接種甜瓜根部第3?天開始萌發(fā)，接種第7?天分枝列當(dāng)吸器頂端穩(wěn)固地附著在寄主根部，吸器侵入甜瓜根皮層，并在甜瓜根皮層細(xì)胞內(nèi)擴(kuò)展，擴(kuò)展過(guò)程中形成大量的爪狀結(jié)構(gòu)，接種第11?天時(shí)分枝列當(dāng)吸器細(xì)胞與寄主根維管束連接。共有17種植物激素參與了吸器形成過(guò)程，其中生長(zhǎng)素類吲哚3甲醛含量在列當(dāng)吸器形成過(guò)程中降低了83.36%，細(xì)胞分裂素類反式玉米素核苷的含量在增長(zhǎng)了5.02倍;油菜素內(nèi)酯含量增長(zhǎng)了481.95倍，推測(cè)這3類植物激素在分枝列當(dāng)吸器形成過(guò)程中可能起到重要的調(diào)控作用。

關(guān)鍵詞

分枝列當(dāng);?甜瓜;?吸器;?內(nèi)源激素

中圖分類號(hào)：?S?451

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：?A

DOI：?10.16688/j.zwbh.2022696

Dynamic?change?of?endogenous?hormones?during?the?formation?of?haustorium?of?Orobanche?aegyptiaca?parasitizing?melon

TIAN?Fang，?ZHANG?Xuekun，?YAO?Zhaoqun，?DONG?Xue，?CAO?Xiaolei，?ZHAO?Sifeng*

（Key?Laboratory?at?the?Universities?of?Xinjiang?Uygur?Autonomous?Region?for?Oasis?Agricultural?Pest?Management?

and?Plant?Protection?Resource?Utilization，?College?of?Agriculture，?Shihezi?University，?Shihezi?832003，?China）

Abstract

In?this?study，?the?formation?process?of?haustorium?of?Orobanche?aegyptiaca?was?analyzed?by?paraffin?section?and?microscopic?observation，?and?the?dynamic?changes?of?endogenous?hormones?in?O.aegyptiaca?at?different?stages?of?haustorium?formation?during?parasitism?to?melon?roots?were?detected?by?liquid?chromatography?mass?spectrometry?（LCMS）.?The?results?show?that?the?seeds?of?O.aegyptiaca?began?to?germinate?on?the?third?day?after?inoculation，?the?haustorium?top?was?firmly?attached?to?the?melon?root?on?the?7th?day，?and?then?haustorial?cell?invaded?the?cortex?of?melon?root，?forming?a?large?number?of?clawlike?structures?in?the?cell?layer?of?the?cortex?of?melon?root.?On?the?11th?day，?haustorial?cells?were?connected?with?host?vascular?bundle.?Phytohormone?test?results?showed?that?a?total?of?17?phytohormones?were?involved?in?the?formation?process?of?haustorium?in?O.aegyptiaca，?and?the?contents?of?auxin，?cytokinin?and?brassinolide?changed?significantly.?The?content?of?auxin?indole3carboxaldehyde?decreased?by?83.36%，?the?content?of?cytokininlike?transzeatinriboside?increased?by?5.02?times?and?brassinolide?increased?by?481.95?times?in?the?formation?process?of?haustorium.?These?three?phytohormones?might?play?an?important?role?in?regulating?haustorium?formation?in?O.aegyptiaca.

Key?words

Orobanche?aegyptiaca;?melon;?haustorium;?endogenous?hormones

分枝列當(dāng)?Orobanche?aegyptiaca?Pers.可寄生甜瓜、西瓜、向日葵、番茄等重要經(jīng)濟(jì)作物并造成嚴(yán)重經(jīng)濟(jì)損失［12］，其通過(guò)吸器與寄主建立寄生關(guān)系并從寄主中獲取生長(zhǎng)發(fā)育所需要的水分和各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。吸器對(duì)分枝列當(dāng)?shù)纳L(zhǎng)發(fā)育至關(guān)重要［34］。列當(dāng)種子感受到寄主植物根系分泌物后開始萌發(fā)，萌發(fā)后朝向寄主根部生長(zhǎng)，胚根貼附到寄主根表后，在黃酮類、酚酸類、醌類、細(xì)胞分裂素以及cyclohexene?oxides等寄主分泌的誘導(dǎo)因子作用下開始形成吸器，吸器的形成是列當(dāng)由自養(yǎng)生長(zhǎng)階段向異養(yǎng)生長(zhǎng)階段（寄生狀態(tài)）轉(zhuǎn)變的重要步驟［58］。在列當(dāng)吸器形成的不同階段，吸器內(nèi)部的氨基酸、糖類、酚類、酶等物質(zhì)會(huì)發(fā)生顯著變化［3］。生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素是具有拮抗作用的植物激素，兩者在大麻列當(dāng)O.ramosa吸器發(fā)育早期高表達(dá)從而調(diào)節(jié)吸器發(fā)育［5］?，采用RNAi技術(shù)沉默分枝列當(dāng)乙烯合成路徑相關(guān)基因PaACS，調(diào)控寄主向寄生物傳遞養(yǎng)分的基因Pam6PR和列當(dāng)感知寄主分泌物信號(hào)的基因PaPrx1、PaACS和Pam6PR后，分枝列當(dāng)產(chǎn)生的瘤節(jié)數(shù)量和生物量顯著降低［6］。細(xì)胞分裂素及一種苔蘚植物內(nèi)生真菌Diplodia?cupressi分泌的兩種環(huán)氧環(huán)己烷類的植物毒素可誘導(dǎo)彎管列當(dāng)Orobanche?crenata和向日葵列當(dāng)O.cumana的吸器發(fā)育［9］;用細(xì)胞分裂素處理O.ramosa愈傷組織后將其與番茄根共培養(yǎng)，愈傷組織的侵襲力顯著增強(qiáng)，且與細(xì)胞分裂素相關(guān)的吸器誘發(fā)基因PrRR5、PrCKX2、PrCKX4、PrTRN2和PrZFP6表達(dá)量迅速增加，說(shuō)明細(xì)胞分裂素與吸器形成密切相關(guān)［5］。

馬來(lái)酰肼是一種能在植物韌皮部和木質(zhì)部傳遞的植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑，可干擾瓜列當(dāng)吸器的形成，被用于番茄上防治瓜列當(dāng)，并已在以色列登記使用［7］。

為了明確分枝列當(dāng)侵染甜瓜時(shí)吸器的形成過(guò)程及參與吸器形成的內(nèi)源激素含量的變化，在分枝列當(dāng)萌發(fā)和寄生甜瓜的不同階段連續(xù)取樣，采用石蠟切片技術(shù)和顯微觀察分析分枝列當(dāng)吸器形成過(guò)程，明確分枝列當(dāng)吸器形成的細(xì)胞學(xué)特征;同時(shí)利用液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)（LCMS）檢測(cè)分枝列當(dāng)侵染甜瓜時(shí)吸器形成過(guò)程中植物激素的種類及含量，探究植物激素在分枝列當(dāng)吸器形成過(guò)程中的作用。為進(jìn)一步明確分枝列當(dāng)吸器形成機(jī)制以及為后續(xù)建立有效列當(dāng)防治措施提供理論依據(jù)。

1?材料與方法

1.1?材料

供試甜瓜品種‘K1076?’由新疆農(nóng)業(yè)科學(xué)院哈密瓜研究中心提供，分枝列當(dāng)種子采集于新疆昌吉呼圖壁縣軍戶農(nóng)場(chǎng)，經(jīng)形態(tài)學(xué)和分子生物學(xué)鑒定為分枝列當(dāng)。

1.2?試驗(yàn)方法

1.2.1?甜瓜幼苗培育

甜瓜種子用2%的次氯酸鈉溶液處理15?min，再用75%乙醇處理3?min，最后用無(wú)菌水沖洗5次后放入裝有200?mL無(wú)菌水的三角瓶中，置于恒溫?fù)u床中在27℃和170?r/min條件下培養(yǎng)，24?h后選取露白的種子播種于裝有純蛭石的128孔穴盤中，保濕并置于溫室（溫度28℃、光照強(qiáng)度10?000?lx，?L∥D=16?h∥8?h）中培養(yǎng)2～3周。待幼苗長(zhǎng)出第一片真葉后，用蒸餾水沖洗甜瓜幼苗根部，隨后將其根平鋪在根室（直徑15?cm培養(yǎng)皿中依次放入一層12?cm×12?cm無(wú)菌海綿和2張直徑15?cm濾紙）中，并用錫箔紙覆蓋根室遮光，加水繼續(xù)培養(yǎng)［10］。

1.2.2?列當(dāng)種子接種甜瓜

選取完全成熟的分枝列當(dāng)種子，用1%的次氯酸鈉溶液處理15?min，75%乙醇處理2?min，再用無(wú)菌水沖洗4次備用。待根室中甜瓜幼苗培養(yǎng)1周后，在每株甜瓜幼苗新根周圍接種0.08?g列當(dāng)種子。

1.2.3?列當(dāng)寄生過(guò)程觀察

分枝列當(dāng)種子接種甜瓜根部后3?d開始萌發(fā)，在顯微鏡下觀察分枝列當(dāng)初始吸器狀態(tài)（S0：接種第5天）、附著狀態(tài)（S1：接種第7天）、吸器基部開始膨大（S2：接種第9天）及寄生基部膨大形成小瘤，與寄主建立寄生關(guān)系（S3：接種第11天）4個(gè)發(fā)育階段的組織形態(tài)。分別選取4個(gè)發(fā)育階段的分枝列當(dāng)與甜瓜連接部位組織，將其置于2.5%戊二醛固定液中固定，制作石蠟切片，在顯微鏡下觀察寄生甜瓜根部的分枝列當(dāng)?shù)募?xì)胞結(jié)構(gòu)。石蠟切片的制作參照白金瑞的方法［11］：將樣品置于2.5%戊二醛固定液中固定24?h，依次用75%、85%、90%、95%及100%乙醇進(jìn)行脫水處理，隨后用二甲苯溶液處理15?min，將樣品置于融化的石蠟液與二甲苯溶液的混合液（V∶V=1∶1）中，在45℃的烘箱中浸蠟4?h，隨后置于純蠟液中于65℃烘箱中浸蠟8?h。用包埋機(jī)包埋樣品，于-20℃下冷卻，以10?μm的厚度連續(xù)切片，并置于45℃的烘箱中烤片。將烤過(guò)的切片依次置于二甲苯溶液7?min，二甲苯溶液5?min、無(wú)水乙醇5?min、無(wú)水乙醇5?min進(jìn)行脫蠟，清水沖洗干凈，最后用加拿大樹膠進(jìn)行封片，在光學(xué)顯微鏡下觀察和拍照。

1.2.4?列當(dāng)寄生過(guò)程中植物激素的檢測(cè)

待分枝列當(dāng)生長(zhǎng)到S0、S1、S2、S3階段時(shí)，剪取列當(dāng)與甜瓜幼苗根連接部位組織的樣品，每個(gè)階段3個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)取約0.15?g連接組織，將其迅速置于液氮中冷凍，于-80℃保存，委托諾禾致源科技股份有限公司進(jìn)行LCMS/MS檢測(cè)，具體操作如下：

準(zhǔn)確稱取24種植物激素標(biāo)準(zhǔn)品，制備成混標(biāo)母液，用甲醇將其稀釋一系列濃度的工作液。配制一定濃度的indole3acetic?acidD4、jasmonic?acidD5、N6isopentenyladenineD6、dihydrozeatinD3、gibberellin?A1D4、salicylic?acidD4、abscisic?acidD6溶液得到內(nèi)標(biāo)溶液（IS）。線性、內(nèi)標(biāo)和質(zhì)控的母液及工作溶液均保存于-20℃冰箱。

液氮研磨組織樣本，迅速稱取100?mg粉末置于2?mL離心管，加入400?μL預(yù)冷的含混合內(nèi)標(biāo)的提取液（50%乙腈），渦旋混勻，4℃低溫萃取30?min，經(jīng)12?000?r/min離心10?min后，取上清液并將其緩慢經(jīng)過(guò)Oasis?PRiME?HLB小柱;再次加入1?mL?30%乙腈，緩慢經(jīng)過(guò)小柱，收集溶液，將兩次溶液合并到1個(gè)離心管中，混勻后通過(guò)LCMS分析。色譜柱：Waters?XSelect?HSS?T3（2.1?mm×150?mm，2.5?μm）;A相：含0.01%甲酸的水;B相：含0.01%甲酸的乙腈;柱溫45℃，進(jìn)樣量：10?μL;流速：0.3?mL/min。質(zhì)譜條件：電噴霧電離（ESI），離子源溫度550℃，負(fù)模式離子源電壓-4?500?V，正模式離子源電壓4?500?V，氣簾氣35?psi，霧化氣60?psi，輔助氣60?psi。采用多反應(yīng)監(jiān)測(cè)（MRM）進(jìn)行掃描，對(duì)標(biāo)準(zhǔn)液的濃度系列分別進(jìn)行?LCMS?檢測(cè)。

1.2.5?數(shù)據(jù)處理

試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用Excel?2010和IBM?SPSS?statistics?20進(jìn)行方差統(tǒng)計(jì)分析。用Duncan氏新復(fù)極差法檢驗(yàn)不同發(fā)育階段之間的差異顯著性（P<0.05），利用Origin?2020軟件進(jìn)行繪圖。

2?;結(jié)果與分析

2.1?分枝列當(dāng)寄生甜瓜過(guò)程觀察

在根室條件下，分枝列當(dāng)種子在接種至甜瓜根部后第3?天開始萌發(fā)，第5?天芽管頂端膨大形成初始吸器（S0時(shí)期，圖1a），第7?天時(shí)穩(wěn)固地貼附在寄主根部（S1時(shí)期，圖1b），第9?天時(shí)列當(dāng)寄生基部開始膨大（S2時(shí)期，圖1c），接種后第11?天，寄生部位形成瘤節(jié)（S3時(shí)期，圖1d），形成完整的寄生體系。

2.2?分枝列當(dāng)吸器形成過(guò)程中細(xì)胞結(jié)構(gòu)觀察

石蠟切片結(jié)果表明，接種后第7天，分枝列當(dāng)成功附著在甜瓜根上，此時(shí)分枝列當(dāng)?shù)奈骷?xì)胞貼附在甜瓜根表皮（圖2a）。接種后第8天和第9天吸器細(xì)胞在甜瓜根皮層細(xì)胞間隙擴(kuò)展，侵入根表皮組織（圖2b，?c），在此過(guò)程中吸器會(huì)特化形成一個(gè)爪狀的結(jié)構(gòu)，利于吸器侵入細(xì)胞后在甜瓜根皮層組織中固著（圖2d）。接種后第11天，列當(dāng)吸器的侵入細(xì)胞呈柵欄狀整齊排列在寄主維管束周圍（圖2e），與寄主維管束建立連接關(guān)系，在此基礎(chǔ)上列當(dāng)吸器侵入細(xì)胞繼續(xù)擴(kuò)展到寄主維管束的另一端與維管束連接（圖2f），完全建立起寄生關(guān)系。

2.3?吸器形成過(guò)程中內(nèi)源激素變化情況

2.3.1?分枝列當(dāng)吸器形成過(guò)程中生長(zhǎng)素類激素含量變化

分枝列當(dāng)吸器形成過(guò)程中生長(zhǎng)素類激素吲哚3甲醛（indole3carboxaldehyde，?IND）、3吲哚甲酸（indole3carboxylic?acid，?ICA）、吲哚丁酸（3indolebutyric?acid，?IBA）和吲哚3乙酸（indole3acetic?acid，?IAA）等生長(zhǎng)素類激素含量變化情況見圖3。IND、IAA、IBA在S0時(shí)期的含量顯著高于S1、S2、S3時(shí)期。在S0、S1、S2、S3時(shí)期IND含量分別為179.9、49.95、42.21?ng/g和29.93?ng/g，從形成初始吸器（S0時(shí)期）到吸器細(xì)胞與維管束連接（S3時(shí)期）IND含量降低83.36%;在S0～S3時(shí)期IAA含量依次為26.21、7.21、8.71?ng/g和11.67?ng/g，S0時(shí)期的IAA含量為S1時(shí)期的3.6倍。S0～S3時(shí)期IBA含量依次為15.61、5.77、6.16?ng/g和7.71?ng/g，IBA在S0時(shí)期的含量比S1時(shí)期高1.71倍。ICA含量在吸器形成過(guò)程中變化不明顯。

2.3.2?分枝列當(dāng)吸器形成過(guò)程中細(xì)胞分裂素類含量變化

本研究共檢測(cè)到了異戊烯基腺嘌呤（N6isopentenyladenine，?IP）、異戊烯基腺苷（isopentenyl?adenosine，?IPA）、反式玉米素核苷（transzeatinriboside，?TZR）和激動(dòng)素（kinetin，?KT）4種細(xì)胞分裂素，但未檢測(cè)到反式玉米素（transzeatin，?tZ）和雙氫玉米素（dihydrozeatin，?DhZ）。從分枝列當(dāng)初始吸器形成時(shí)期（S0時(shí)期）至吸器細(xì)胞與維管束連接時(shí)（S3時(shí)期），TZR含量依次為1.53、1.25、2.42?ng/g和9.21?ng/g，IPA含量依次為0.68、0.42、0.55?ng/g和4.09?ng/g，相比S0時(shí)期，S3時(shí)期TZR含量增加了約5.02倍，而IPA含量增加了約5.01倍。IP在S0～S3時(shí)期的含量依次為4.16、0.91、1.32?ng/g和1.87?ng/g，相比S0時(shí)期，S3時(shí)期IP的含量下降了約55%;KT在S0～S3時(shí)期的含量依次為2.28、1.35、2.07?ng/g和2.03?ng/g，其中S0時(shí)期的含量顯著高于S1時(shí)期（圖4）。

2.3.3?分枝列當(dāng)吸器形成過(guò)程中赤霉素類含量變化

共檢測(cè)到了GA1、GA3、GA4?3種赤霉素類激素，但未檢測(cè)到GA7。其中GA1在分枝列當(dāng)吸器形成（S0時(shí)期）至吸器細(xì)胞與維管束連接（S3時(shí)期）含量依次為6.32、3.86、7.11?ng/g和4.26?ng/g，S0時(shí)期的含量顯著高于S1時(shí)期。GA3在S0～S3時(shí)期含量依次為4.41、1.88、5.60?ng/g和5.08?ng/g，S0時(shí)期、S2時(shí)期、S3時(shí)期的含量顯著高于S1時(shí)期;而GA4含量在分枝列當(dāng)吸器形成過(guò)程中變化不顯著（圖5）。

2.3.4?分枝列當(dāng)吸器形成過(guò)程中茉莉酸類激素含量變化

茉莉酸類化合物在植物的生長(zhǎng)發(fā)育和抗逆性方面發(fā)揮重要作用。本研究檢測(cè)到了N茉莉酸異亮氨酸（Njasimonic?acidisoleucine，JAIle）、二氫茉莉酸（dihydrojasmonic?acid，H2JA）、茉莉酸［（±）jasmonic?acid，?JA］3種茉莉酸類激素。JAIle在分枝列當(dāng)吸器形成（S0時(shí)期）至吸器細(xì)胞與維管束連接（S3時(shí)期）含量依次為1.56、2.01、2.89?ng/g和2.32?ng/g，S2時(shí)期的含量顯著高于S1、S0、S3時(shí)期。H2JA在S0～S3時(shí)期含量依次為0.69、1.49、0.85?ng/g和0.86?ng/g，S1時(shí)期的含量顯著高于S0、S2、S3時(shí)期，JA在S0～S3時(shí)期含量依次為0.37、0.50、0.34?ng/g和1.38?ng/g，S3時(shí)期的含量顯著高于S0、S1、S2時(shí)期（圖6）。

2.3.5?分枝列當(dāng)吸器形成過(guò)程中脫落酸、乙烯、水楊酸、油菜素內(nèi)脂等激素含量變化

本研究檢測(cè)了分枝列當(dāng)吸器形成過(guò)程中脫落酸（abscisic?acid，ABA）、水楊酸（salicylic?acid，SA）、乙烯合成前體1氨基環(huán)丙烷羧酸（1aminocyclopropane1carboxylic?acid，ACC）、油菜素內(nèi)酯（brassinolide，BR）等4種激素的含量。結(jié)果（圖7）表明：SA在分枝列當(dāng)吸器形成過(guò)程中含量呈現(xiàn)上升的趨勢(shì)，在S3時(shí)期（61.24?ng/g）的含量顯著高于S0（22.99?ng/g）、S1（31.85?ng/g）、S2（23.02?ng/g）時(shí)期;ACC在S0時(shí)期（284.96?ng/g）的含量顯著高于S1（83.69?ng/g）、S2（83.69?ng/g）、S3（118.90?ng/g）時(shí)期;BR在S0時(shí)期的含量（237.04?ng/g），顯著低于S1時(shí)期（71?197.51?ng/g）、S2時(shí)期?（98?420.24?ng/g）、S3時(shí)期（114?241.46?ng/g）。

3?結(jié)論與討論

本研究采用顯微鏡觀察，明確了分枝列當(dāng)種子

接種到甜瓜根部第11?天時(shí)可完成種子萌發(fā)、侵入細(xì)胞和與甜瓜根部維管束建立連接的寄生過(guò)程。在列當(dāng)種子接種甜瓜根部第8天、第9天、第10天時(shí)，分枝列當(dāng)侵入細(xì)胞在甜瓜根皮層擴(kuò)展過(guò)程中會(huì)形成大量的爪狀結(jié)構(gòu)，不僅擴(kuò)大了侵入面積而且可起到固著作用。在接種第11?天時(shí)，分枝列當(dāng)侵入細(xì)胞與甜瓜維管束連接，根據(jù)石蠟切片觀察結(jié)果可將分枝列當(dāng)吸器形成過(guò)程分為初始吸器狀態(tài)（S0）、附著狀態(tài)（S1）、吸器基部膨大（S2）及吸器細(xì)胞與維管束連接（S3）4個(gè)階段。對(duì)4個(gè)階段植物激素進(jìn)行檢測(cè)，生長(zhǎng)素類激素在分枝列當(dāng)S0時(shí)期的含量顯著高于其他3個(gè)階段。Zhang等對(duì)檀香Santalum?album吸器形成過(guò)程轉(zhuǎn)錄組分析結(jié)果表明：生長(zhǎng)素類激素合成基因在吸器形成前期處于高表達(dá)水平［12］。Ishida等研究表明生長(zhǎng)素生物合成基因YUC3在根寄生植物松蒿Phtheirospermum?japonicum吸器與寄主接觸點(diǎn)的表皮細(xì)胞中特異性表達(dá)，說(shuō)明生長(zhǎng)素類激素在松蒿吸器的形成中起關(guān)鍵作用［13］。在本研究中生長(zhǎng)素類激素IND、IAA、IBA含量在初始吸器階段（S0時(shí)期）的含量顯著高于吸器形成后期，推測(cè)生長(zhǎng)素類激素在分枝列當(dāng)初始吸器形成過(guò)程中具有重要作用。

本研究結(jié)果表明，細(xì)胞分裂素類激素參與了分枝列當(dāng)吸器形成，其中，反式玉米素核苷、異戊烯基腺苷在吸器形成前期含量保持穩(wěn)定，后期含量顯著上升，異戊烯基腺嘌呤、激動(dòng)素在吸器形成前期含量顯著下降后期保持穩(wěn)定。推測(cè)異戊烯基腺嘌呤、激動(dòng)素介導(dǎo)調(diào)控了吸器形成前期，而反式玉米素核苷、異戊烯基腺苷介導(dǎo)調(diào)控了吸器形成后期，說(shuō)明細(xì)胞分裂素類激素在分枝列當(dāng)吸器的形成過(guò)程中具有關(guān)鍵作用。寄生植物松蒿乙烯信號(hào)突變體在吸器的侵入細(xì)胞形成階段和在寄主皮層擴(kuò)展中表現(xiàn)出明顯的缺陷［14］，表明乙烯對(duì)吸器的形成具有重要的作用。在分枝列當(dāng)吸器形成過(guò)程中乙烯合成前體1氨基環(huán)丙烷羧酸在初始吸器時(shí)期的含量顯著高于吸器形成后期，推測(cè)1氨基環(huán)丙烷羧酸可能在分枝列當(dāng)吸器侵入細(xì)胞形成時(shí)發(fā)揮重要作用。

Furuhashi等用油菜素內(nèi)酯單獨(dú)處理菟絲子時(shí)無(wú)法誘導(dǎo)出吸器［15］，但在本研究中油菜素內(nèi)酯在吸器形成后期的含量顯著高于初始吸器時(shí)期。本研究檢測(cè)了茉莉酸類、水楊酸、脫落酸、赤霉素類等植物激素在分枝列當(dāng)吸器形成過(guò)程中的含量變化，檢測(cè)結(jié)果顯示：茉莉酸、N茉莉酸異亮氨酸、水楊酸在分枝列當(dāng)吸器形成后期含量顯著高于前期，說(shuō)明這幾類植物激素對(duì)寄生植物吸器形成具有關(guān)鍵作用，但植物激素調(diào)節(jié)植物生長(zhǎng)發(fā)育是一個(gè)相互獨(dú)立又協(xié)同作用的過(guò)程［16］，分枝列當(dāng)吸器形成或許是多種植物激素協(xié)同作用的結(jié)果，其中以生長(zhǎng)素、細(xì)胞分裂素、油菜素內(nèi)酯在分枝列當(dāng)吸器形成過(guò)程中可能起主導(dǎo)作用。

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