彩色多普勒超聲聯合miR-151a-3p、miR-1285-3p對結核性胸膜炎患者的診斷價值

高源

(河南省胸科醫院/鄭州大學附屬胸科醫院 超聲科,河南 鄭州 450000)

結核性胸膜炎是結核病的一種類型,具有高發病率及高死亡率的特點,這對患者的生命安全造成了極大威脅[1-3]。近年來大量文獻表明,通過早期診斷和治療可降低結核性胸膜炎的死亡率,從而緩解患者癥狀,防止疾病進一步發展,甚至是挽救患者生命[4-5]。彩色多普勒超聲是一種非侵入性的影像學檢查方法,可以通過聲波來觀察人體內部結構,發現異常情況,其對于結核性胸膜炎的診斷具有重要價值,可通過檢測血流動力學變化來輔助診斷炎癥的位置和范圍,因此其成為越來越多醫生進行結核性胸膜炎診斷和治療過程中的重要工具之一[6]。微小RNA(microRNA,miRNA)是一類長度約為22個核苷酸的小分子RNA,在細胞內調節基因的表達水平,近年來越來越多的研究表明miRNA在人體健康和疾病中發揮著重要作用,可作為一種潛在的診斷和治療靶點,結核性胸膜炎也不例外[7-8]。有研究發現,結合彩色多普勒超聲技術和miRNAs檢測技術,可以更準確地診斷結核性胸膜炎并確定病變部位及范圍,而miR-151a-3p和miR-1285-3p是與結核感染相關的miRNA,已經在多項研究中證實了它們在結核性胸膜炎的評估和治療中的重要性[9-10]。因此,本研究旨在探究彩色多普勒超聲聯合miR-151a-3p和miR-1285-3p在結核性胸膜炎患者診斷中的價值,以期為臨床醫生提供更準確、更可靠的結核性胸膜炎診斷方法。

1 對象和方法

1.1 研究對象

選取2022年3月至2023年3月于河南省胸科醫院就診的100例結核性胸膜炎患者,記為TP組,選取健康對照組100例,記為CO組。TP組病程1～4個月,平均(2.47±1.20)個月,其中少量胸腔積液5例,中量胸腔積液73例,大量胸腔積液22例。兩組性別、年齡、BMI比較,差異無統計學意義(P>0.05),具有可比性。本研究符合醫院倫理委員會批準標準,監護人同意并簽署同意書。見表1。

表1 CO組和TP組一般資料對比

1.2 納入和排除標準

納入標準:經《結核性胸膜炎國家衛生行業標準》確診為結核性胸膜炎的患者;年齡≥18周歲的患者;生命體征穩定的患者;臨床資料完整的患者。

排除標準:有腫瘤標志物的患者;嚴重心腦血管等其他器官疾病終末期疾病的患者;有免疫缺陷病毒感染、自身免疫系統疾病、內分泌系統疾病的患者;血性胸腔積液的患者;存在嚴重意識障礙或精神病史的患者;哺乳期、妊娠期婦女。

1.3 檢測儀器及試劑

SS-2000型彩色多普勒超聲診斷儀購自徐州市大為電子設備有限公司;RNA提取試劑盒購自上海海方生物技術有限公司;反轉錄試劑盒購自北京凱詩源生物科技有限公司;7500型熒光實時定量PCR儀購自上海遠耀生物科技有限公司。

1.4 檢測方法

1.4.1彩色多普勒超聲檢測

彩色多普勒超聲診斷儀,高頻線陣探頭,探頭頻率為7.0～10.0 MHz,檢測時使患者取側臥位并使肺部位于檢查范圍,然后用消毒液消毒探頭并將探頭沿著患者的胸膜移動,并用輕壓的手法在其上方向前移動,對其內部回聲、有無胸腔積液、積液的上下界及分布范圍等情況,再用彩色多普勒血流顯象觀察血流分布情況,并記錄收縮期血流速度(peak systolic velocity,PSV)及阻力指數(resistive index,RI)。超聲檢查均為5 a以上臨床經驗的同一超聲科醫生進行操作。

1.4.2實時熒光定量 PCR檢測

空腹采集患者5 mL靜脈血,靜置1 h,在3 000 r·min-1下,離心15 min,收集上清液得到血清,用RNA提取試劑盒提總RNA,反轉錄試劑盒將RNA轉錄為cDNA,將cDNA放入PCR反應體系中,PCR反應體系包含PCR緩沖液、DNA聚合酶、熒光標記引物和探針等,反應條件為初始變性95 ℃ 10 min,循環擴增95 ℃ 15 s,60 ℃ 45 s,40個循環,反應結束后進行數據分析,以同一樣本中的U6 Ct值作為內參,采用2-ΔΔCt計算miR-151a-3p、miR-1285-3p基因相對表達量,引物序列見表2。

表2 miR-151a-3p、miR-1285-3p引物序列

1.5 統計學分析

2 結果

2.1 彩色多普勒參數

與CO組相比,TP組PSV升高,RI降低(P<0.05),見表3。

表3 CO組和TP組PSV、 RI比較

2.2 血清miR-151a-3p、miR-1285-3p表達

與CO組相比,TP組血清miR-151a-3p表達升高,miR-1285-3p表達降低(P<0.05),見表4。

表4 CO組和TP組血清miR-151a-3p、miR-1285-3p表達比較

2.3 彩色多普勒參數與血清miR-151a-3p、miR-1285-3p表達相關性分析

PSV與血清中miR-151a-3p呈正相關(r=0.937,P<0.001)、與miR-1285-3p呈負相關(r=-0.835,P<0.001),RI與血清中miR-151a-3p呈負相關(r=-0.951,P<0.001)、與miR-1285-3p呈正相關(r=0.835,P<0.001)。

2.4 ROC曲線分析

彩色多普勒超聲檢測的AUC為0.729,血清miR-151a-3p檢測為0.707,血清miR-1285-3p檢測為0.629,三者聯合為0.898,見表5。

表5 4種檢測手段的診斷價值比較

3 討論

結核性胸膜炎患者通常會出現呼吸困難、劇烈疼痛、身體虛弱等情況,且長期接受治療及隔離會給患者帶來心理壓力和負擔,容易產生焦慮、抑郁等負面情緒,同時也給患者及家庭帶來較大的經濟負擔,因此及早診斷、積極治療,并加強預防措施至關重要,可減少其對患者的影響,提高生活質量,對于預防和控制該疾病具有積極意義[11-13]。因此,為了更全面地對結核性胸膜炎患者進行診斷,從而為臨床提供更多、更可靠的診療依據,本文就彩色多普勒超聲聯合miR-151a-3p、miR-1285-3p檢測,探討其在結核性胸膜炎中的應用價值。

彩色多普勒超聲使用一種特殊的超聲探頭,將超聲波發送到人體內部,根據不同組織的密度和血液流動情況,產生不同的回波信號,經過計算機處理后,形成彩色圖像,其可以用于心血管疾病、肝臟病、胰腺病、腎臟病、乳腺疾病等多種疾病的診斷和治療,故其被廣泛應用于臨床醫學領域。目前,彩色多普勒超聲在診斷結核性胸膜炎方面也顯示出了良好的價值,其能夠清晰地顯示胸膜的狀態和液體的分布情況,還可以觀察到病變部位的血管變化,從而幫助醫生及時確定積液的位置、大小、質地等,進而為醫生制定更加有效的治療方案提供依據[14]。在本研究中,結核性胸膜炎患者彩色多普勒超聲呈現出厚度不一、粗糙、突起、形態不清晰的異常超聲線,在多普勒彩色模式下,結核性胸膜炎呈現出異常血流信號和淤血征象,且與CO組相比,TP組PSV升高,RI降低,這說明對結核性胸膜炎患者進行彩色多普勒超聲檢測比較有效。楊瑩瑩等[15]研究發現,多普勒超聲可很好顯示結核性胸膜炎患者積液的回聲及胸膜情況,具有診斷價值,這與本研究結果類似。分析原因可能是:(1)彩色多普勒超聲可以明確病變部位,肺動脈及其分支是結核性胸膜炎的主要病變區域,彩色多普勒超聲可以直接觀察肺動脈及其分支的血流情況,確定病變部位和程度;(2)彩色多普勒超聲可以實時監測肺血流動力學指標的變化,包括PSV、PI等,隨著結核性胸膜炎的病情變化而變化;(3)彩色多普勒超聲不需要注射造影劑或使用放射線,可以減少患者的不適和安全風險;(4)彩色多普勒超聲檢查非常容易操作,不需要復雜的手術技能和特殊的設備,可以在門診或病房內完成。

近年來,基因檢測成為臨床研究的新興熱點,miRNA的出現為疾病的篩查與早期診斷提供了新的方向,而越來越多的研究發現許多miRNA與結核性胸膜炎的發生和發展有關[16]。miR-151a-3p是miRNA的一種,在多種人類組織中表達,并與多種疾病的發展和進展有關,其可靶向多個參與細胞增殖、凋亡和遷移的基因,從而在這些細胞過程中起關鍵作用。最近研究表明,miR-151a-3p可能參與了結核分枝桿菌感染后的肺部病理反應和免疫反應過程,這提示miR-151a-3p可以作為結核性胸膜炎的診斷和預后潛在生物標志物[17]。另外,miR-1285-3p也被認為在結核性胸膜炎中具有潛在的生物學意義,可以通過調節多個信號通路減輕炎癥反應和組織損傷,也可以通過調節細胞凋亡和自噬等關鍵過程來控制病原體的清除和宿主免疫反應的平衡,因此其有望成為該疾病的治療靶點和診斷標志物[18]。本研究結果顯示,與CO組相比,TP組血清miR-151a-3p表達升高,miR-1285-3p表達降低,這說明miR-151a-3p、miR-1285-3p與結核性胸膜炎密切相關,患者血清中其表達的檢測有望成為一種有效的診斷評估手段。馮真等[19]研究表明,miR-151a-3p在結核病中高表達,可能是診斷結核病潛在的生物標志物,這與本研究結果類似。分析原因可能是:首先,這兩種miRNA可能與結核分枝桿菌感染之后的宿主免疫反應有關,miR-151a-3p的上調和miR-1285-3p的下調可能是為了調節細胞凋亡、細胞周期和炎癥等過程,從而控制結核分枝桿菌的擴散和破壞;其次,miR-151a-3p和miR-1285-3p可以在感染早期被檢測到,并且在疾病的進展過程中表達水平異常,此外其檢測方法簡單、快速和可靠,因此具有潛在的診斷價值。

彩色多普勒超聲在結核性胸膜炎的診斷中雖然具有一定優勢,但其顯示范圍比較狹窄,只能顯示局部的情況,不能整體觀察胸腔和肺部情況,且在肥胖患者或非完全自主呼吸狀態下診斷效果較差,此外其多依賴于醫生的主觀判斷,容易造成漏診和誤診。而miR-151a-3p和miR-1285-3p由于是定量指標,其檢測在結核性胸膜炎的診斷中表現出高靈敏度、特異性強等優勢,因此與彩色多普勒超聲聯合,可以相互補充,發揮各自的優勢,提供更準確、全面的診斷信息。本研究結果顯示,PSV與血清中miR-151a-3p呈正相關、與miR-1285-3p呈負相關,RI與血清中miR-151a-3p呈負相關、與miR-1285-3p呈正相關;彩色多普勒超聲檢測的AUC為0.729,血清miR-151a-3p檢測為0.707,血清miR-1285-3p檢測為0.629,三者聯合為0.898,這說明彩色多普勒超聲聯合miR-151a-3p、miR-1285-3p檢測具有更好的診斷效果,有更高的準確性。徐靜等[20]研究發現,彩色多普勒超聲聯合血清miRNA檢測可以作為乳腺癌診斷手段,能夠提高乳腺癌的早期診斷率,這與本研究結果類似。分析原因可能是:彩色多普勒超聲可以對胸腔和胸膜進行非侵入式的檢查,能夠直接觀察胸腔積液的分布和形態,并對血流動態進行評估,對于結核性胸膜炎的早期診斷和治療監測有著非常重要的作用;而miR-151a-3p和miR-1285-3p是結核性胸膜炎的生物標志物,其表達水平與結核病的發病、病程以及病情嚴重程度密切相關,具有高靈敏度和特異性;將彩色多普勒超聲和miR-151a-3p、miR-1285-3p檢測相結合,能夠實現多種檢查手段之間的協同作用,可以提高結核性胸膜炎的診斷準確性。

4 結論

彩色多普勒超聲聯合miR-151a-3p、miR-1285-3p對結核性胸膜炎患者的診斷,與單一檢測相比更全面,更有效,更客觀,可以更有針對性地制定治療方法,達到精準治療,值得臨床推廣應用。本研究給臨床觀察帶來方便,對結核性胸膜炎的診斷工作提供了對應的幫助,并進一步提升結核性胸膜炎診斷準確率,但結核性胸膜炎的診斷仍然需要長期、大量、連續性的研究,以期為臨床診斷提供更多、更有利的診療證據。