中藥超微粉制劑對仔豬免疫機能的影響

劉士剛

（德州市陵城區(qū)農(nóng)業(yè)農(nóng)村局 山東德州 253500）

目前，隨著我國生豬養(yǎng)殖業(yè)已經(jīng)形成集約化、規(guī)模化的養(yǎng)殖模式，每年的豬的養(yǎng)殖數(shù)量呈現(xiàn)逐年升高的趨勢，在豬在養(yǎng)殖過程中，臨床中抗菌藥物及抗生素的添加劑不合理的使用，不僅導(dǎo)致其臨床中細菌耐藥性問題越來越嚴重，還導(dǎo)致其豬的免疫力下降，生產(chǎn)性能下降等一系列問題[1,2]。相關(guān)研究表明，中藥及中藥提取物中含有黃酮、多糖、鞣質(zhì)、揮發(fā)油、生物堿、甙類等多種生物活性物質(zhì)，同時含有多種蛋白質(zhì)、氨基酸、維生素等多種營養(yǎng)物質(zhì)，通過臨床研究表明，中藥及中藥提取物具有提高動物的免疫能力、促進動物生長及調(diào)整其腸道微生物菌群結(jié)構(gòu)、抗氧化能力和改善肉品質(zhì)等多種藥用學(xué)價值，中藥及中藥提取物作為替抗性藥物或者添加劑，被廣泛應(yīng)用動物健康養(yǎng)殖中[3-5]。在臨床中中藥及中藥制劑采用傳統(tǒng)的中藥粉碎方法，其利用率較低，效果不佳，嚴重影響藥物有效成分的利用率，造成浪費，嚴重影響著藥物的效果[6]。中藥通過超微粉碎技術(shù)，可以有效改變中藥的致密胞漿結(jié)構(gòu)，使中藥的有效成分更好地釋放，提高其中藥及中藥制劑的有效成分在動物腸道內(nèi)的生物利用度和利用率，可以彌補傳統(tǒng)的中藥粉碎缺點，提高中藥及中藥制劑的利用效果[7-8]。本試驗以“杜×長×大”三元雜交斷奶仔豬為研究對象，添加不同的水平中藥超微粉制劑研究其對“杜×長×大”三元雜交斷奶仔豬免疫機能的影響，為進一步的臨床應(yīng)用奠定基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

中藥制劑組方主要由黃芪、板藍根各20 g，淫羊藿、熟地黃各15 g，益母草、巴戟天、杜仲、甘草各10 g，上述藥材均為人用藥材的下腳料，購自北京同仁堂醫(yī)藥有限公司。將上述中藥復(fù)方按照比例在65 ℃烘干箱中進行混合烘干，先采用普通粉碎機粉碎過篩、再進行超微粉碎，過篩，制成中藥超微粉制劑。

1.2 試驗設(shè)計與飼養(yǎng)管理

在德州市的某規(guī)模化養(yǎng)殖場進行飼養(yǎng)試驗，按照試驗設(shè)計，采用單因素隨機設(shè)計試驗，選擇健康的日齡相近、體重為25±2.0 kg“杜×長×大”三元雜交斷奶仔豬80 頭隨機分成4 組，每個組20 個重復(fù)，每1 頭斷奶仔豬為一個重復(fù)組，試驗組別分別為1 組（基礎(chǔ)精料）、2 組（基礎(chǔ)精料+0.5%復(fù)方中藥超微粉）、3 組（基礎(chǔ)精料+1.0%復(fù)方中藥超微粉）、4 組（基礎(chǔ)精料+1.5 %復(fù)方中藥超微粉），預(yù)試7 d，試驗期56 d。按照本市的規(guī)模化養(yǎng)殖場對斷奶仔豬規(guī)范的飼養(yǎng)管理制度進行飼養(yǎng)試驗、疫苗免疫、驅(qū)蟲及環(huán)境消毒等。“杜×長×大”三元雜交斷奶仔豬飼養(yǎng)試驗過程中，日糧組成成分與營養(yǎng)水平表1。

表1 日糧組成成分與營養(yǎng)水平

1.3 血液樣品采集

試驗結(jié)束（56 d）后，斷料12 h 空腹采血，每個試驗組隨機選擇體重相近的10 頭“杜×長×大”三元雜交斷奶仔豬進行保定，消毒后在前腔靜脈采集血液樣品，6 000 rpm/min 離心5 min 分離血清，-20 ℃保存。

1.4 免疫指標的測定

按照哺乳動物IgG、IgA、IL-2 ELISA 試劑盒說明書對采集的每個試驗“杜×長×大”三元雜交斷奶仔豬進行免疫指標測定，測定豬瘟病毒（CSFV）和口蹄疫病毒（FMDV）的抗體水平。

1.5 數(shù)據(jù)分析

每個試驗組以“平均值±標準差”表示，試驗數(shù)據(jù)用SPSS 18.0軟件對每個重復(fù)組的數(shù)據(jù)比較，用Duncan's 法對每個試驗組數(shù)據(jù)進行多重因素比較，用 ＜0.05 表示差異顯著性。

2 結(jié)果

2.1 中藥超微粉制劑對斷奶仔豬免疫指標的影響

試驗結(jié)束（56 d）后采集血液分離血清，用酶聯(lián)免疫吸附試驗（EILSA）測定血清中IgG、IgA、IL-2 含量及CSFV 和FMDV 的抗體水平。結(jié)果由表2 可知，試驗2、3、4 組“杜×長×大”三元雜交斷奶仔豬血清中IgA、IgG、IL-2 含量及FMDV 抗體水平均高于1 組，其中試驗3、4 組“杜×長×大”三元雜交斷奶仔豬血清中IgA、IgG、IL-2 含量及CSFV 抗體水平顯著高于1 組（ ＜0.05），試驗2 組“杜×長×大”三元雜交斷奶仔豬血清中IgA、IgG、IL-2 含量及CSFV 抗體水高于1 組，試驗2、3、4 組之間相比，差異性不顯著。

表2 斷奶仔豬免疫機能指標的結(jié)果(±S )

表2 斷奶仔豬免疫機能指標的結(jié)果(±S )

項目 1組 2組 3組 4組IgA/（g/L） 1.02±0.07b 1.08±0.11ab 1.13±0.16a 1.15±0.12a IgG /（g/L） 1.15±0.12b 1.19±0.13ab 1.27±0.15a 1.30±0.12a IL-2 (pg/mL) 15.16±0.12b 16.42±0.18ab 17.72±0.22a 18.76±0.24a CSFV (pg/mL) 3.63±0.15b 3.74±0.23ab 4.43±0.12a 4.32±0.12a FMDV(pg/mL) 1.17±0.04 1.19±0.22 1.21±0.03 1.21±0.21

3 討論

相關(guān)研究表明，動物體內(nèi)免疫系統(tǒng)主要包括細胞免疫和體液免疫，其中體液免疫是由免疫球蛋白介導(dǎo)的，常見的免疫球蛋白有IgA、IgG、IgM 等，這些免疫球蛋白尤其在動物抗感染免疫中起著重要作用。細胞免疫主要是由細胞因子介導(dǎo)的，常見的細胞有IL-2、IL-4、IL-6 等，其中IL-2 是由淋巴細胞分泌的細胞因子，主要作用介導(dǎo)動物機體內(nèi)細胞免疫[4-5]。CSFV 和FMDV 在養(yǎng)豬過程中危害比較大，且臨床中沒有有效的藥物進行預(yù)防，主要通過疫苗接種獲得相應(yīng)的免疫力，其疫苗接種后抗體水平的高低直接影響著疫苗的免疫效果及豬對該病的抗感染能力[9-10]。國內(nèi)許多研究表明，中藥制劑及中藥提取物中富含有多種活性物質(zhì)，同時含有多種氨基酸、維生素及礦物質(zhì)等營養(yǎng)物質(zhì)，可以有效提高動物免疫機能，在牛、羊、雞、豬多種等動物養(yǎng)殖過程中被廣泛應(yīng)用[11]。本試驗研究表明，試驗2、3、4 組“杜×長×大”三元雜交斷奶仔豬血清中IgA、IgG、IL-2 含量及FMDV 抗體水平均高于1 組，其中試驗3、4 組“杜×長×大'三元雜交斷奶仔豬血清中IgA、IgG、IL-2 含量及CSFV 抗體水平顯著高于1 組，說明不同的中藥超微粉制劑可以提高“杜×長×大”三元雜交斷奶仔豬的免疫機能指標及CSFV 和FMDV 的抗體水平，以基礎(chǔ)精料+1.0%復(fù)方中藥超微粉、基礎(chǔ)精料+1.5 %復(fù)方中藥超微粉添加較適宜。可以在臨床中推廣與應(yīng)用。■