低聚果糖沙棘紅茶粉調節腸道菌群人體試驗研究

李艷，李蕊，陸少敏，陳紅運，李曉敏

1.完美（廣東）日用品有限公司（中山 528400）；2.廣東完美生命健康科技研究院有限公司（中山 528400）

腸道菌群目前被認為是一個由500～1000個物種和1014種細菌組成的新型復雜器官，是人體細胞數量的10倍以上[1]。腸道菌群越來越被認為是人類健康的關鍵因素，其與宿主和諧共存，參與營養物質的消化和吸收，也有助于維持宿主免疫系統的完整性，從而防止病原體定植[2]。研究表明，人類的各種慢性疾病可能與腸道微生態紊亂有關，維持良好的人體與腸道微生物共生關系，對人類健康至關重要[1]。低聚果糖是目前證據等級較高，得到公認的益生元，具有改善菌群平衡、調節腸道功能等健康益處[3]。大量試驗研究證實低聚果糖可顯著促進腸道雙歧桿菌和乳桿菌的增殖，并抑制有害菌，具有調節腸道菌群功能，有利于調節人體微生態平衡[4-12]。沙棘為胡頹子科植物沙棘的干燥成熟果實[13]，屬于“藥食同源”物質。沙棘含有極為豐富的營養成分與生物活性物質，包括維生素、礦物質、蛋白質及氨基酸、黃酮類、三萜及甾體類化合物等[14-15]。多項試驗研究證明沙棘中的活性成分可促進腸道乳酸桿菌增殖，增加有益菌和降低有害菌的相對豐度，調節腸道菌群組成[16-21]。茶葉對人體腸道疾病的預防和治療作用在古醫書中早有記載[22]，現代大量試驗研究證實紅茶或其中的茶多酚成分可以促進乳酸桿菌、雙歧桿菌、噬熱鏈球菌等有益菌的生長，抑制產氣莢膜梭菌、大腸桿菌、沙門氏菌、金黃色葡萄球菌、副溶血性弧菌等有害菌的生長，具有明顯的調節腸道菌群功能[23-34]。

低聚果糖沙棘紅茶粉由低聚果糖、沙棘粉和紅茶粉、檸檬酸、DL-蘋果酸等組成，對其進行調節腸道菌群的人體試驗研究，為該產品的應用推廣提供重要依據。

1 材料與方法

1.1 受試物

低聚果糖沙棘紅茶粉（完美公司生產），主要原料有低聚果糖、沙棘粉和紅茶粉、檸檬酸、DL-蘋果酸等，其中低聚果糖、沙棘粉和紅茶粉的比例約為4∶3.5∶1。

1.2 受試對象

1.2.1 受試人群納入標準

經體檢合格符合下列條件的自愿受試者：

（1）一個月內未患過胃腸疾病者；

（2）一個月內未服用過抗生素者。

1.2.2 受試人群排除標準

（1）年齡在65歲以上者；（2）孕婦或哺乳期婦女，對受試樣品過敏者；

（3）合并有心、肝、腎和造血系統等嚴重全身性疾病者；

（4）短期內服用與受試物功能有關的物品，影響結果判斷者；

（5）不符合納入標準，未按規定食用受試樣品，無法判定功效或資料不全影響功效或安全性判斷者。

1.3 試驗設計

按照《保健食品檢驗與評價技術規范》（2003年版）要求，采用自身對照及組間對照設計。按受試者的菌群狀況隨機分為試食組和對照組，盡可能考慮年齡、性別、飲食等因素，進行組間均衡性檢驗，以保證組間的可比性。每組受試者60例。

1.4 食用劑量及周期

試食組：低聚果糖沙棘紅茶粉，每日2次，每次1袋，沖飲，連續食用15 d；

對照組：采用空白對照組。

1.5 觀察指標

各項觀察指標于試食開始和結束時各做一次。

1.5.1 一般狀況包括精神狀況、睡眠、飲食、大小便等，并測量體重、血壓、心率。

1.5.2 安全性觀察

（1）血常規檢查：檢測血常規指標，觀察紅細胞、白細胞、血小板和血紅蛋白含量。

（2）尿、便常規檢查：檢查尿常規和便常規。

（3）肝、腎功能檢查：應用全自動生化分析儀測定血液主要生化指標。

（4）胸透、心電圖、腹部B超：試食開始前進行一次胸部透視、心電圖和腹部B超檢查。

（5）不良反應觀察。

1.5.3 功效性觀察

1.5.3.1 功效性指標于試食前后分別采集受試者糞便，進行10倍系列稀釋，選合適稀釋度，分別接種在各培養基上，按下列要求進行培養，然后對培養物進行菌落計算。

1.5.3.2 功效判定標準

符合以下任一項，且試驗組試食前后自身比較及試食后試食組與對照組比較，差異均有顯著性，可以判定該受試樣品具有調節腸道菌群功能的作用。

（1）糞便中雙歧桿菌和/或乳桿菌明顯增加，產氣莢膜梭菌減少或不增加，腸桿菌、腸球菌、擬桿菌無明顯變化。

（2）糞便中雙歧桿菌和/或乳桿菌明顯增加，產氣莢膜梭菌減少或不增加，腸桿菌和/或腸球菌、擬桿菌明顯增加，但增加的幅度低于雙歧桿菌/乳桿菌增加的幅度。

1.6 數據統計

數據結果用均數±標準差表示，自身對照資料采用配對t檢驗，兩組均數比較采用成組t檢驗，后者需進行方差齊性檢驗，對非正態分布或方差不齊的數據進行適當的變量轉換，待滿足正態方差齊后，用轉換的數據進行t檢驗；若轉換數據仍不能滿足正態方差齊要求，改用t’檢驗或秩和檢驗；方差齊但變異系數太大（如C.V.＞50%）的資料應用秩和檢驗。

2 結果

2.1 一般資料

共篩選合格試驗人群120例，試食組、對照組各60例，試驗結束后兩組各有3例脫落，最近進入統計結果的總例數為114例，其中：試食組57例，男性21例，女性36例，平均年齡35.53歲；對照組57例，男性22例，女性35例，平均年齡33.72歲。試驗結果如表1所示。

表1 試驗前一般資料的分析

2.2 安全性觀察

2.2.1 血壓、心率、尿常規、便常規、血常規指標

食用受試物15 d后，試食組和對照組體重、血壓、心率、尿常規、便常規、血常規指標均未見明顯異常改變，提示樣品對機體健康無明顯損害。結果見表2。

表2 試食前后兩組人群血壓、心率、尿、便、血常規變化情況（X±S）

2.2.2 血液生化指標

試食前后試食組與對照組人群的血生化指標均在正常范圍內。結果見表3。

表3 試食前后兩組人群血生化指標（X±S）

2.2.3 不良反應

試食期間未見明顯不良反應。

2.3 功效指標

試食前后腸道菌群數量變化見表4。試食前兩組腸道菌群數量無顯著性差異（P＞0.05）。試食后試食組乳桿菌、雙歧桿菌數量與試食前比較明顯增加，產氣莢膜菌明顯減少（P＜0.05）；試食后試食組乳桿菌、雙歧桿菌數量與對照組比較，均明顯高于對照組（P＜0.05）；而試食前后腸桿菌、腸球菌、擬桿菌數量均無明顯變化（P＞0.05）。

表4 試食前后兩組人群腸道菌群數量變化單位：CFU/g 糞便（log±S）

表4 試食前后兩組人群腸道菌群數量變化單位：CFU/g 糞便（log±S）

3 結論與討論

將受試者按菌群狀況分為試食組和對照組，試食組食用低聚果糖沙棘紅茶粉，對照組采用空白對照。15 d后結果表明：試食后試食組乳桿菌和雙歧桿菌數量與試食前比較均有增加，差異有顯著性（P＜0.05）；試食后試食組乳桿菌和雙歧桿菌數量顯著高于對照組（P＜0.05）；試食后產氣莢膜菌減少（P＜0.05），腸桿菌、腸球菌、擬桿菌數量均無明顯變化。兩組受試者試食后血壓、心率、血、便、尿常規和血生化指標等均無明顯異常改變，試食期間未觀察到明顯不良反應。根據《保健食品檢驗與評價技術規范》（2003年版）可以判定，低聚果糖沙棘紅茶粉具有調節人體腸道菌群的保健功能。

低聚果糖作為目前證據等級較高，得到公認的益生元，其改善菌群平衡、調節腸道功能已被專家共識[3]。沙棘粉和紅茶粉亦有大量試驗研究證實具有增殖有益菌、抑制有害菌生長的功效。但三者配伍調節腸道菌群功能是否顯著強于單方低聚果糖還有待進一步研究。