三唑類殺菌劑的水環境毒理學研究進展

宋文陽, 竺浩杰, 徐笑笑, 劉 鵬, 尹曉輝, 劉訓悅

(浙江農林大學 現代農學院，杭州 311300)

三唑類殺菌劑 (triazole fungicides，TFs) 是一類廣譜、高效、低殘留、長效、內吸傳導性好，同時兼具保護和治療作用的殺菌劑，通過影響菌體細胞膜上麥角甾醇的合成而發揮作用，可防控包括子囊菌、擔子菌、半知菌等真菌病害，是目前最具潛力的殺菌劑種類之一，在作物病害防治上應用廣泛[1-3]。目前常用的三唑類殺菌劑主要有三唑酮、苯醚甲環唑、戊唑醇、烯唑醇、腈菌唑、丙環唑、氟硅唑及氟環唑等。根據QYResearch數據統計，2019 年世界農藥市場份額中，三唑類殺菌劑占了全球總殺菌劑的17.6%，全球銷售額為32.12 億美元，已成為世界范圍內使用最廣泛的殺菌劑類型之一。然而，由于三唑類殺菌劑光化學性質較穩定，生物降解率也較低，故而容易在環境中殘留，造成面源污染，對非靶標生物產生不利影響，甚至可能對人體健康產生一定的威脅[4-7]。研究發現，三唑類殺菌劑可在土壤、水體、動植物及人體中產生一定的殘留[8-10]。例如，在2022年抽樣檢查的香蕉中發現了苯醚甲環唑殘留，其殘留量為0.0554 mg/kg[11]；王燕燕等[12]2022 年對廣州市市場銷售的115 種蔬菜進行丙環唑殘留檢測，測得其殘留量均值為0.89 mg/kg，檢出率為21.74%，值得一提的是，在該次抽樣調查中，丙環唑在葉菜類蔬菜中的平均殘留量高達2.62 mg/kg。

此外，三唑類殺菌劑還可對哺乳動物、昆蟲、鳥類以及一些土壤無脊椎動物產生毒性，危害生態環境安全[13-15]。通過查詢歐盟農藥分類信息(https://www.efsa.europa.eu/en) 發現，苯醚甲環唑、戊唑醇、氟環唑、丙環唑、粉唑醇、環丙唑醇和氯氟醚菌唑這7 種三唑類殺菌劑中，戊唑醇、丙環唑和環丙唑醇未能排除對水生生物的急性和慢性毒性風險，氟環唑未能排除對水生生物的慢性毒性風險。根據GB/T 31270—2014《化學農藥環境安全評價試驗準則》[16]的研究方法，對以上7 種三唑類殺菌劑進行富集性評價，其中粉唑醇為低富集性，其余6 個品種均表現為中等富集性[17]。三唑類殺菌劑的生物富集性使得其在水生生物體內的殘留量增加，因而增大其對水生生物的毒性風險，例如導致水生生物的氧化損傷、代謝紊亂、發育不良等。本綜述擬從急性毒性、氧化應激毒性、發育毒性、遺傳毒性、內分泌干擾作用、對機體代謝的影響及聯合作用毒性等多方面、多層次概述三唑類殺菌劑暴露對魚類、兩棲類、溞類和藻類等水生生物的毒害作用，旨在為三唑類殺菌劑在農業生產上的科學合理應用提供理論指導，并為后續三唑類殺菌劑的環境生態學研究提供參考。

1 三唑類殺菌劑在水環境中的殘留現狀

三唑類殺菌劑因其具有特定的作用靶點，一直在殺菌劑市場中占據重要地位[18]。噴施后未被植物有效吸收利用的殺菌劑，易隨降雨及地表徑流等進入江河湖泊中并不斷累積，進而污染水環境[19]。由于三唑類殺菌劑在全球范圍內的長期大量使用，導致很多地區水域中都檢測到了該類藥劑的殘留。表1 列舉了已報道的部分地區中三唑類殺菌劑的殘留情況，從中可以看出，以農業生產為主的地區三唑類殺菌劑殘留量較高，如在美國的大農場附近、南美的秘魯、歐洲以及中國的九龍江水域附近都發現了三唑類殺菌劑的殘留。除此之外，在中國東北城市沈陽采集的河水和廢水中也檢測到了腈菌唑的殘留[20]。我國是農業大國，三唑類殺菌劑的殘留情況不容小覷，因此要嚴格監測，預防因三唑類殺菌劑殘留而出現的環境問題，為生態環境的保護和污染治理提供可行的實施方案。

表1 水生生態環境中三唑類殺菌劑的殘留現狀匯總Table 1 Summary of residue concentrations of triazole fungicides (TFs) in aquatic environments

2 對水生生物的毒性效應研究現狀

已有大量試驗研究為三唑類殺菌劑對環境生物的毒性效應評價提供了數據支撐。如通過組織病理學研究分析三唑類殺菌劑對水生生物的致畸作用；通過氧化損傷相關指標研究分析其對水生生物的氧化應激作用毒性；通過對水生生物的代謝組學、轉錄組學、基因組學等研究進行毒性機制探討等。

2.1 對水生生物的急性毒性作用

表2 列出了幾種常見三唑類殺菌劑對水生生物的急性毒性效應。從中可看出，不同三唑類殺菌劑對同種水生生物的毒性作用不同，而同一種三唑類殺菌劑對不同水生生物的毒性效應也存在差異。如，三唑醇對斑馬魚的96 h-LC50值為23.61 mg/L，根據OECD 實驗準則的毒性分級標準，表現為低毒，而丙環唑對斑馬魚的96 h-LC50值為2.47 mg/L，表現為中毒；三唑酮對虹鱒魚的毒性最低，而對稀有鮈鯽的毒性最高，苯醚甲環唑對花鯉的毒性最低，對斑馬魚的毒性最高。化學物質暴露可能會引起生物行為發生變化，通過行為分析可以直觀地看出生物體受到環境介質毒力影響的情況[26]。例如將斑馬魚分別暴露于200 ng/L 和500 ng/L 的戊唑醇中96 h 后，發現斑馬魚自主活動減少并出現畸形[27]，暴露于5 mg/L 的三唑酮中則可使斑馬魚產生盤旋行為[28]。

表2 常見三唑類殺菌劑對不同水生生物的急性毒性效應Table 2 The acute toxicity of triazole fungicides (TFs) on different aquatic organisms

2.2 對水生生物的發育毒性

暴露于三唑類殺菌劑中的水生生物通常會出現不同程度的發育異常。淡水魚暴露于0.5 mg/L丙環唑中96 h，會導致其組織、器官發生病理學變化，如初級/次級鰓片出現萎縮、浸潤及炎癥，肝細胞出現空泡化以及腎壞死等[43]。苯醚甲環唑暴露引起斑馬魚肝臟出現腫瘤性壞死，戊唑醇暴露可引起斑馬魚肝臟的液泡化，使得肝細胞之間的界限變模糊[44]。因此，一定濃度的三唑類殺菌劑暴露會引起水生生物組織器官發生病變，干擾其正常生理功能，產生不同程度的毒性效應。研究發現，部分三唑類殺菌劑還可以干擾核酸翻譯和表達，進而影響個體生長發育過程，如造成胚胎生長遲緩、致畸、器官功能不全或異常，甚至死亡。據報道，將斑馬魚暴露于不同濃度的戊菌唑 (penconazole) 中，會導致斑馬魚胚胎出現不同程度的發育異常，如孵化延遲、生存率和心率降低[45]；而苯醚甲環唑暴露可使斑馬魚胚胎發育出現形態學畸形，如心包水腫、卵黃囊水腫、脊柱變形和卵黃囊畸形 (圖1)[46]等。

圖1 苯醚甲環唑暴露引起斑馬魚胚胎的畸形[46]Fig.1 The teratogenesis of Danio rerio (zebrafish) embryos after difenoconazole exposure [46]

表3 概括了常用三唑類殺菌劑對幾種常見水生生物的發育毒性。其中，斑馬魚胚胎暴露于100μg/L 的丙環唑中會降低其存活率并誘導色素衰減，在胚胎和仔魚中出現心包水腫，且在斑馬魚胚胎中可以觀察到心臟區域血細胞彌漫，心包區域的血液發生聚集，氧化呼吸發生變化，基礎呼吸降低50%，寡霉素誘導的ATP 相關呼吸降低70%，質子滲漏降低30%，非線粒體呼吸降低50%，表明丙環唑暴露可以誘導斑馬魚色素減退，破壞線粒體生物能量[47]。將斑馬魚暴露于0.1 mg/L的三唑酮會導致形態畸形，包括心包水腫，循環異常，嚴重的靜脈血栓，靜脈竇 (SV) 和球莖之間的距離增加，心動過緩和心輸出量顯著降低[48]。丙硫菌唑暴露會降低斑馬魚胚胎中的谷胱甘肽水平，增加丙二醛含量，進而對斑馬魚胚胎產生一系列毒性效應，包括孵化抑制、體長縮短、心包囊腫和卵黃囊腫[49-50]。此外，三唑類殺菌劑暴露還會誘導斑馬魚胚胎相關基因表達的變化，如己唑醇、環唑醇、三唑酮、腈菌唑和三唑醇會影響斑馬魚體內視黃醇代謝及cyp26a1基因的表達，其中己唑醇、環唑醇和三唑酮暴露下cyp26a1基因的表達量較對照組上調了2.5 倍以上[51]。此外，三唑類殺菌劑暴露對其他水生生物的發育也會產生不同程度的影響。如不同濃度戊唑醇暴露可影響大型溞的存活、繁殖和生長[52]；三唑酮暴露可以通過改變非洲爪蟾HPT 軸相關基因的表達，擾亂其甲狀腺分泌功能，延緩甲狀腺激素依賴型兩棲動物的變態發育過程，造成其生長發育遲緩[53]。

表3 三唑類殺菌劑暴露對水生生物的發育毒性Table 3 Developmental toxicity of triazole fungicides (TFs) to aquatic organisms

2.3 對水生生物的氧化應激毒性

氧化應激可以反映機體氧化與抗氧化作用是否失衡，一般由外界刺激產生，其表征指標為活性氧(ROS)含量，是常用的環境檢測指標[63]。研究發現，作為環境污染物之一的三唑類殺菌劑可以引起水生生物的氧化應激和氧化損傷 (表4)。以斑馬魚為例，將受精后2 h 的斑馬魚胚胎暴露于質量濃度為0.05 和0.5 mg/L 的戊唑醇中，活性氧生成增加；在0.5 mg/L 時，谷胱甘肽過氧化物酶(GPx)活性降低，超氧化物歧化酶(SOD)、過氧化氫酶(CAT)、過氧化物酶(POD)、谷胱甘肽S-轉移酶(GSTs)和天冬氨酸轉氨酶(AST)/丙氨酸氨基轉移酶(ALT)在暴露和凈化階段活性均顯著升高[64-65]。將稀有鮈鯽暴露于三唑酮中，會誘導鮈鯽體內ROS 的積累，提高GPx、SOD 和CAT 的活性[66]。鯉魚暴露于苯醚甲環唑會導致心肌纖維腫脹和炎癥細胞的增加，導致抗氧化酶CAT、SOD和GSH-Px 活性升高[67]。線粒體是細胞中重要的細胞器，有研究發現，線粒體不僅與 ROS 的產生有關，還參與對細胞凋亡的調控[68]。用 100 μg/L的戊唑醇處理斑馬魚胚胎，顯示基礎呼吸約減少60%，表明耗氧量受損或資源分配發生變化[69]，并且證明了氧化應激是導致細胞損傷的重要因素[70]。暴露于高濃度 (0.850 mg/L) 丙硫菌唑中會降低斑馬魚胚胎的存活率并影響其孵化，誘導心包和卵黃囊水腫，導致氧化應激和p53 基因表達增加，從而導致細胞凋亡[49]。將斑馬魚成魚和胚胎暴露于一定濃度的苯醚甲環唑溶液中，發現斑馬魚成魚肝臟和胚胎中SOD、CAT 和GPx 的活性顯著下降，同時伴隨著這些酶的編碼基因表達水平顯著下調；MDA 含量測定發現，經苯醚甲環唑暴露后，斑馬魚成魚肝臟出現了明顯的脂質過氧化[32]。

表4 三唑類殺菌劑暴露對水生動物的氧化應激毒性Table 4 Oxidative stress effects of triazole fungicides (TFs) on aquatic animals

2.4 對水生生物的遺傳毒性

遺傳毒性是指環境中的理化因素作用于有機體，使其遺傳物質在染色體水平、分子水平和堿基水平上受到各種不利影響，從而造成的毒性損傷。例如細胞內ROS 含量的增加可使其直接攻擊堿基、脫氧核糖核酸 (DNA) 的脫氧核苷酸骨架等細胞成分，引起DNA 鏈斷裂、堿基修飾、DNA-DNA交聯、DNA-蛋白質交聯和其他氧化性DNA 損傷，誘發遺傳毒性[82]。將斑馬魚暴露于0.5 μg/L 和10 μg/L的丙硫菌唑中，會導致性腺指數和形態受損，成年斑馬魚的生育能力降低，F1胚胎發育異常，其潛在機制正是由于卵子和精子中性激素含量和DNA 甲基化發生了改變[83]。斑馬魚暴露于丙環唑中120 d 后，其類固醇激素、下丘腦-垂體-性腺-肝(HPGL) 軸和DNA 甲基化相關基因的表達均受到影響，17β-雌二醇和卵黃原蛋白水平升高，表明丙環唑暴露導致的DNA 甲基化可影響親代斑馬魚的受精和繁殖能力，進而使子代發育異常[84]。戊唑醇暴露對綠藻、月牙藻和微綠球藻均具有一定的遺傳毒性，可造成DNA 分子單鏈水平的損傷，并導致不同部位蛋白質含量的失衡[85]。目前，針對環境污染物對模式生物基因影響層面的研究越來越多，探明基因表達的變化，結合相關生物酶及蛋白活性的變化，將有助于進一步了解三唑類殺菌劑對水生生物產生毒性的潛在機制。

2.5 對水生生物的內分泌干擾效應

內分泌干擾化學品 (EDC) 是指可干擾野生動物和人體內分泌系統 (或激素系統) 的化合物。EDC 可以通過多種作用機制調節內分泌系統，并可能導致癌性腫瘤、出生缺陷和其他發育障礙。動物研究表明，其中許多不利影響通常是永久性的，并且一些 EDC 可以充當表觀遺傳調節劑，從而導致潛在的隔代影響[86]。部分三唑類殺菌劑已被確定為具有內分泌干擾特性，而三唑類殺菌劑在多地水生生態系統中都有檢測到，其殘留水平可能會干擾水生生物的內分泌功能。Li 等[87]在成年斑馬魚的卵巢中發現了戊唑醇的組織特異性生物蓄積，表明其存在導致內分泌紊亂的潛在風險。Poulsen 等[88]研究發現，經戊唑醇暴露后，非洲爪蟾血漿和性腺中的類固醇類激素含量均發生了變化。與對照組相比，高劑量丙環唑暴露組非洲爪蟾腦內芳香化酶活性顯著增高，表明丙環唑對其甲狀腺系統有刺激作用，且變態2 個月后，低劑量組雄性的睪丸大小、精子和苗勒氏管成熟度均比對照組有不同程度降低，而丙環唑處理組雄性斑馬魚肝臟體細胞指數則有所增加[89]。Yu 等[90]將斑馬魚胚胎分別暴露于己唑醇和戊唑醇中，發現受精后120 h 的胚胎中甲狀腺素 (T4) 水平顯著降低，而三碘甲狀腺原氨酸 (T3) 濃度顯著升高，表明己唑醇和戊唑醇會影響斑馬魚幼魚甲狀腺相關激素的分泌。而將熱帶爪蟾蝌蚪暴露于戊唑醇中發現，戊唑醇會導致熱帶爪蟾蝌蚪的T3、T4 激素水平上升，且在2 mg/L 質量濃度下暴露7 d 后，his、ttr、tshr和dio2基因表達水平相較于對照組有顯著上升，暴露21 d 后，除dio3外，其余6 個下丘腦-垂體-甲狀腺(HPT) 軸相關基因表達水平均有顯著上升，甲狀腺激素水平變化和HPT 軸相關基因的表達水平差異，說明戊唑醇對熱帶爪蟾存在明顯的甲狀腺內分泌干擾作用[91]。Liang 等[92]將斑馬魚暴露于苯醚甲環唑中，發現其體內T4 水平明顯降低，T3 水平無明顯變化；促甲狀腺激素釋放激素(CRH)、促甲狀腺激素(TSH)、轉甲狀腺素蛋白(TTR)、碘甲腺原氨酸脫碘酶(DIO1 和DIO2)、尿苷二磷酸葡萄糖醛酸轉移酶(UGT1ab)的轉錄水平均上調，而甲狀腺球蛋白(TG)、鈉/碘同向轉運體(NIS)和甲狀腺激素受體的轉錄水平則無明顯變化。將斑馬魚暴露于三唑酮中，同樣會改變其HPT 軸相關基因的表達，并影響甲狀腺激素的合成，破壞甲狀腺的正常生理功能[93]；將非洲爪蟾暴露于三唑酮中也發現其體內甲狀腺激素 (T4、T3) 濃度有下降的現象[94]。

2.6 對水生生物機體代謝的影響

代謝紊亂是指機體對物質的消化、吸收、排泄出現病理性變化，由于供需不平衡而導致的一種不良狀態。細胞內各種代謝途徑如糖酵解途徑、三羧酸 (TCA) 循環、電子轉移體系等對維持細胞穩態十分重要。因此，毒理學試驗中可通過將葡萄糖、乳酸、氧化型輔酶/還原型輔酶(NAD(P)/NAD(P)H)、谷胺酰胺、谷氨酸等代謝產物作為指標來進行評價和研究。將大型溞暴露于戊唑醇中，發現隨著戊唑醇濃度的增加，大型溞應對有毒物質產生的相關能量升高，在暴露于0.52 mg/L 的戊唑醇中時，大型溞的代謝功能受到損害，導致脂質和蛋白質含量降低[95]。在230 mg/L 的戊唑醇中暴露7 d 和14 d 后，雄性斑馬魚體內葡萄糖、乳酸、膽固醇和甘油三酯水平升高，表明戊唑醇可對斑馬魚產生多種破壞性生理作用，導致其代謝異常[96]。將斑馬魚暴露于70 mg/L 的烯唑醇中，發現其纈氨酸、亮氨酸、異亮氨酸、丙氨酸、乳酸和膽堿含量增加，葡萄糖、肌酸和牛磺酸含量降低，即烯唑醇干擾了能量代謝、氨基酸代謝和脂質代謝[97]。而將虹鱒魚暴露于丙環唑中，出現了明顯的蛋白水解酶和淀粉酶活性受抑制現象；此外，暴露于500 μg/L 丙環唑的虹鱒魚腸道中，能量代謝參數 (Na+-K+-ATPase) 受到了顯著抑制[98]。

2.7 其他毒性效應

苯醚甲環唑在一定濃度下可促進微藻生長，改變水生微生物群落的結構和組成，同時，水生微生物可以通過對外源性物質的生物降解和代謝、脂質代謝等微生物功能調節來減少苯醚甲環唑暴露的影響[99]。關于三唑類殺菌劑對藻類毒性的研究發現，腈菌唑、丙環唑和戊唑醇都能抑制藻類生長，影響蛋白質結構和組成，還可破壞其類囊體膜，阻礙蛋白質和葉綠素a 的合成，最終抑制藻類生長[100]。不同異構體的葉菌唑 (triadimenol)會影響水華微囊藻Microcystis flos-aquae的葉綠素a 和類胡蘿卜素含量、光化學效率、快速光反應曲線、光能利用效率和蛋白質含量[101]。還有研究證明，三唑類殺菌劑會影響斑馬魚腸道微生物菌群的變化。例如，苯醚甲環唑可以增加腸道微生物群落如厚壁菌、氣單胞菌、腸桿菌和擬桿菌等的豐度，而這些腸道菌的變化可能與斑馬魚發育過程中的脂質代謝有關[102]。

此外，三唑類殺菌劑在光催化或生物體酶的作用下會轉化為一系列代謝物 (triazole fungicide products，TPs)，而有些代謝物的毒性與母體相當，甚至更高[103]。如丙硫菌唑易在環境中降解成脫硫丙硫菌唑，脫硫丙硫菌唑更易遷移到水體等環境中，半衰期較母體更長，對靶標生物的毒性也更大[104]。苯醚甲環唑的初級代謝產物苯醚甲環唑醇會在斑馬魚體內發生生物累積，且在雌性斑馬魚中的生物蓄積量大于雄性[58]。因此，對于三唑類殺菌劑的毒理學研究，不但要關注殺菌劑母體的影響，還要關注其代謝物尤其是有毒代謝產物的毒性效應和機理。

3 多種三唑類殺菌劑及與其他物質的聯合暴露毒性

自然環境中農藥殘留常常與環境中的其他污染物質共存，關于復合污染的聯合毒性評價存在諸多不確定性。針對三唑類殺菌劑與其他農藥聯合暴露毒性的研究較多，其中可能有協同也可能有拮抗作用。有研究表明，戊唑醇和苯醚甲環唑聯合暴露對斑馬魚的毒性可能存在拮抗作用，混合物對成年斑馬魚的急性毒性與藥劑單獨處理相比表現為累加效應，對肝臟的聯合毒性則小于藥劑單獨處理效應的累加，并且混合物對性腺和腸道菌群的毒性作用也比兩種單劑處理的累加毒性有所降低。轉錄組學和代謝組學研究進一步表明，混合物可以誘導更多的差異表達基因 (DEGs)來調節參與能量代謝、類固醇激素生物合成、視黃醇代謝和微生物代謝的途徑，平衡能量代謝和供應，維持類固醇激素和視黃酸水平，進一步降低戊唑醇和苯醚甲環唑對斑馬魚肝臟和性腺的毒性作用[105]。Wang 等[106]研究了戊唑醇和聯苯菊酯對斑馬魚的聯合毒性，發現無論是在胚胎期、仔魚期、幼魚期和成魚期，戊唑醇和聯苯菊酯組合對斑馬魚的急性毒性均表現為協同效應，進一步評估了與氧化應激、細胞凋亡、免疫系統和內分泌系統相關的 16 個基因在mRNA 水平上的表達，發現其中有些基因發生了較大變化，與藥劑單獨作用相比，聯合處理組cas3和p53的表達水平明顯下調，cas9的表達水平則明顯上調。Levine等[107]研究發現，丙環唑會增強對硫磷對水生物種的急性毒性。丁草胺和三唑酮聯合暴露則對影響斑馬魚胚胎發育以及導致甲狀腺內分泌紊亂都具有協同作用[108]。阿維菌素與苯醚甲環唑的聯合毒性研究表明，復合農藥暴露表現出偏離非獨立作用模型的劑量水平依賴——低劑量時表現為拮抗作用，高劑量時則表現為協同作用[109]。腈菌唑與噻蟲嗪聯合暴露對斑馬魚胚胎發育的影響也表現出協同作用[110]。與單一藥劑暴露相比，氟咯菌腈與三唑酮聯合暴露組斑馬魚胚胎ERa、Tnf、IL和bax4 個基因表達量的變化更顯著，表現出協同作用[111]。

4 結論與展望

三唑類殺菌劑因具有高效、廣譜性、持效期長等優點，使其在防治病害、提高糧食產量和品質方面發揮著不可替代的作用，是目前最有發展前景的殺菌劑類型之一。隨著三唑類殺菌劑的長期大量使用，在各地水體中已多次檢測到該類藥劑的殘留，尤其是農業發達的地區殘留情況更甚。不可否認三唑類殺菌劑在農業生產中的貢獻，同樣也不可忽視其帶來的環境污染問題。水體中的三唑類殘留物會對水生生物及水環境造成一定的危害，影響魚類、兩棲類和溞類等水生生物的健康，同時對藻類的生長也會產生一定的促進或抑制效果。此外，三唑類殺菌劑對環境生物的影響形式多樣，不僅會導致生物個體畸形、生長受阻、器官組織病變，還會影響生物代謝和引起內分泌失調，甚至造成基因突變。水生生態風險評估在水環境生態修服和建設中至關重要，未來必定向更高層次發展。展望農藥水生生態環境風險評估未來的發展，筆者認為以下幾方面的研究還有待加強：

1) 對三唑類殺菌劑代謝產物的研究較少，尤其是探究代謝產物對水生生物毒性的研究更少，因此需要進一步研究明確代謝物的毒性，以便更系統地評估三唑類殺菌劑的毒性。

2) 自然界中生物物種及殘留農藥的種類均不是單一存在的，目前有關三唑類殺菌劑對藻類、溞類、魚類及兩棲類等單一物種的毒性已有較多研究報道，但還應從生態系統的角度，對處于不同營養級的生物綜合進行毒性評估。此外，目前關于不同種三唑類殺菌劑之間以及三唑類與其他污染物質之間聯合毒性的研究較少。后續應加強對多種相關生物的綜合評價以及對多種污染物質聯合暴露毒性效應的研究，并在暴露濃度選擇上盡可能貼近環境濃度。

3) 在風險表征方面，需要探索更多適用于生物體內三唑類殺菌劑含量的定量分析方法，以便為表征暴露和效應評估提供必要的基礎數據，但是目前有關定量分析方法的研究還較少。此外，現有調查數據已證實，三唑類殺菌劑在水環境中存在較為廣泛的殘留，未來隨其大規模施用可能還存在一定程度的殘留累積，但如何緩解三唑類殺菌劑殘留造成的風險還有待進一步研究。