黃芪桂枝五物湯復方顆粒成型工藝優(yōu)化

劉 楊，顧晉億，沈小寬，葛勝宇，金莉莉，關(guān) 皎?，朱鶴云?

（1.吉林醫(yī)藥學院藥學院，吉林 吉林 132013； 2.延邊大學藥學院，吉林 延邊 133002）

黃芪桂枝五物湯是漢代名醫(yī)張仲景所著《金匱要略》中治療血痹癥的經(jīng)典方劑，記載“血痹陰陽俱微，寸口關(guān)上微，尺中小緊，外證身體不仁，如風痹狀，黃芪桂枝五物湯主之”［1］，由黃芪、桂枝、白芍、生姜和大棗共5 味藥材組成，由桂枝湯的基礎(chǔ)上去甘草加黃芪而成，主用黃芪益氣補衛(wèi)，得其桂枝，固表而不留邪，桂枝得黃芪，散邪不傷正，且通脈溫陽之力大增，該方具有溫經(jīng)益氣、通痹和營的效果［2-3］，現(xiàn)代研究表明其對糖尿病周圍神經(jīng)病變、糖尿病血管功能障礙、腦梗死、冠心病、腰椎管狹窄癥、硬皮病等均具有治療作用［4-13］。但該湯劑存在攜帶不便、不易儲存、煎煮耗時等缺點，因此本實驗將其制備成顆粒劑，使之便于攜帶、利于保存，同時提高了患者服藥的依從性［14-15］，同時遵循古法提取的傳統(tǒng)工藝，將湯劑進一步濃縮為浸膏，再以顆粒的溶化性、成型性為指標考察稀釋劑種類與用量、潤濕劑體積分數(shù)及用量，并篩選最佳的黃芪桂枝五物湯復方顆粒劑制備工藝。

1 材料

1.1 試劑與藥物 黃芪桂枝五物湯為自制，處方中各飲片均購于吉林大藥房，經(jīng)吉林醫(yī)藥學院李景華副教授鑒定為正品，符合2020 年版《中國藥典》 規(guī)定。乳糖、無水乙醇（天津市大茂化學試劑廠）； 可溶性淀粉（天津市格瑞恒業(yè)科技有限公司）； 糊精（西隴科學股份有限公司）； 蔗糖（天津市致遠化學試劑有限公司）； 微晶纖維素（國藥集團化學試劑有限公司）； 氯化鈉（天津市恒興化學試劑制造有限公司），均為藥用規(guī)格。

1.2 儀器 DHG-9240A 電熱鼓風干燥箱（上海一恒科學儀器有限公司）； FA224 電子天平（上海舜宇恒平科學儀器有限公司）； MA100 水分測定儀（德國賽多利斯公司）；高速多功能粉碎機（永康市久品工貿(mào)有限公司）； 篩網(wǎng)（浙江上虞市道墟五四儀器廠）； CCA-1112A 冷卻水循環(huán)裝置、OSB-2200 油浴鍋、N-1300 旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀、NVP-1000 隔膜真空泵（上海愛朗儀器有限公司）； 98-1-C 型數(shù)字控溫電熱套（天津市泰斯特儀器有限公司）。

2 方法與結(jié)果

2.1 黃芪桂枝五物湯制備 取黃芪桂枝五物湯（25 首方劑） 處方藥材，依漢代度量衡折算劑量為黃芪41.40 g、白芍41.40 g、桂枝41.40 g、生姜82.80 g、大棗36.00 g，加入1 200 mL 蒸餾水浸泡0.5 h 后回流提取1 h，4 層紗布過濾，濾渣加1 200 mL 蒸餾水繼續(xù)回流提取1 h，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮至400 mL，即得［16-17］。

2.2 浸膏制備 取“2.1” 項下所制湯劑4 份，分別用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮至密度為1.20、1.25、1.30、1.35 g/mL 的稠浸膏，即得［18］。

2.3 顆粒制備 浸膏與稀釋劑混勻，加入適宜體積分數(shù)和劑量的乙醇作為潤濕劑，制軟材，16 目篩制粒，60 ℃干燥20 min，整粒，即得。

2.4 指標測定 測定顆粒的成型性（A）、吸濕性（B）、休止角（C）、堆密度（D） 和溶化性（E），計算綜合評分（V），公式如下［19-21］。

2.4.1 成型性 成型率按2020 年版《中國藥典》 四部“粒度和粒度分布測定法” （通則0982 第二法雙篩分法）進行測定，要求顆粒可通過10 目篩、不可通過80 目篩的不得少于總量的15%。

2.4.2 吸濕性 取適量顆粒，30 ℃烘干至恒重，轉(zhuǎn)移至恒重后的稱量瓶中，精密稱定質(zhì)量，置于干燥器中（預(yù)先使用過飽和NaCl 溶液平衡24 h，相對濕度為75%），48 h后精密稱定質(zhì)量，重復2 次，取平均值，以吸濕前后顆粒質(zhì)量計算吸濕率。

2.4.3 休止角 采用固定漏斗法，將待測顆粒從固定好的首尾相連的3 只漏斗中從上至下沿壁漏下，于桌面上水平放置坐標紙，漏斗底端距桌面高度2 cm，待顆粒頂端不再升高時停止，測量圓錐體底部直徑、錐體高度，計算圓錐斜面與水平面所成夾角度數(shù)，重復5 次，取平均值。

2.4.4 堆密度 將顆粒置干燥量筒中，慢慢振搖，量取體積，稱定質(zhì)量，根據(jù)顆粒質(zhì)量、體積計算堆密度。

2.4.5 溶化性 溶化性按2020 年版《中國藥典》 四部通則可溶性顆粒溶化性檢查法進行測定，稱取顆粒10 g，加到100 ℃200 mL 水中，攪拌5 min，立即觀察，若顆粒全部溶化或有輕微渾濁，沒有焦屑，則認為溶化性合格，反之不合格［22］。

2.5 單因素試驗 取“2.2” 項下浸膏適量，以制軟材難易程度、制粒情況、顆粒成型率、顆粒溶化性為評價指標，浸膏密度、稀釋劑種類、稀釋劑與浸膏的比例、潤濕劑體積分數(shù)、潤濕劑用量為影響因素，進行單因素試驗。

2.5.1 浸膏密度 取“2.2” 項下4 種密度的浸膏適量，加單一稀釋劑、潤濕劑，按“2.3” 項下方法進行顆粒的制備，結(jié)果見表1。由此表明，使用不同密度浸膏所制備的顆粒溶化性均符合標準，但為1.25、1.30 g/mL 時易制粒，成型率高，綜合考慮顆粒的硬度和均勻度，最終選擇1.30 g/mL。

表1 浸膏密度考察結(jié)果

2.5.2 稀釋劑種類 黃芪桂枝五物湯適用于糖尿病周圍神經(jīng)病變，因此本實驗選取無糖稀釋劑可溶性淀粉、微晶纖維素和糊精。取密度為1.30 g/mL 的稠浸膏3 份，按表2 處方及“2.3” 項下方法進行顆粒的制備，結(jié)果見表3。由此表明，可溶性淀粉與微晶纖維素均具有較好的顆粒成型率，但微晶纖維素的溶化性不合格，糊精在制軟材過程中出現(xiàn)硬化而難以制軟材，綜合考慮后，最終選擇可溶性淀粉。

表2 不同輔料與浸膏的配伍比例處方

表3 稀釋劑種類考察結(jié)果

2.5.3 浸膏與稀釋劑的比例 依據(jù)規(guī)定，藥用輔料最大量不應(yīng)超過所制浸膏的4～5 倍，結(jié)合實際制粒過程中的經(jīng)驗，選取浸膏與輔料1 ∶1、1 ∶1.5、1 ∶2、1 ∶2.5 比例，按“2.3” 項下方法進行顆粒的制備，結(jié)果見表4。由此表明，當浸膏與稀釋劑比例在1 ∶2、1 ∶2.5 時顆粒成型率較高，溶化性合格，但后者細粉較多、硬度稍低，故選擇1 ∶2。

表4 浸膏與稀釋劑比例考察結(jié)果

2.5.4 潤濕劑體積分數(shù) 取密度為1.30 g/mL 的浸膏，浸膏與可溶性淀粉比例為1 ∶2，選擇不同體積分數(shù)的乙醇作為潤濕劑，按“2.3” 項下方法進行顆粒的制備。因30%乙醇及以下潤濕劑水分占比太高，不易制軟材和制粒，故本實驗選擇40%、50%、60%、70%乙醇，結(jié)果見表5。由此表明，40%、50%乙醇不易制粒，粘篩； 60%、70%乙醇制粒情況相近，最終選擇70%乙醇作為潤濕劑。

表5 潤濕劑體積分數(shù)考察結(jié)果

2.5.5 潤濕劑的用量 取密度為1.30 g/mL 的浸膏，浸膏與可溶性淀粉比例為1 ∶2，70%乙醇作為潤濕劑，加入量分別為浸膏量的5%、10%、15%、20%、25%，按“2.3”項下方法進行顆粒的制備，結(jié)果見表6。由此表明，潤濕劑用量為20%、25%時軟材不易過篩，顆粒不均勻； 為5%、10%時顆粒成型性雖高，但細粉過多，綜合實驗結(jié)果，最終選擇潤濕劑用量為15%。

表6 潤濕劑用量考察結(jié)果

2.6 正交試驗 在單因素試驗基礎(chǔ)上，以稠浸膏密度（W）、浸膏與稀釋劑比例（X）、潤濕劑體積分數(shù)（Y）、潤濕劑用量（Z） 為影響因素進行L9（43） 設(shè)計，以顆粒成型性、溶化性、堆密度、休止角、吸濕性為評價指標，按“2.4” 項下方法計算綜合評分V，因素水平見表7，結(jié)果見表8～9。由此可知，各因素影響程度依次為W＞X＞Z＞Y。最終確定，最優(yōu)處方為W1X3Y3Z2，即浸膏密度1.27 g/mL，藥輔比1 ∶2.5，潤濕劑70%乙醇，用量20%。

表7 正交試驗因素水平

表8 正交試驗設(shè)計與結(jié)果

表9 方差分析結(jié)果

2.7 驗證試驗 按“2.6” 項下優(yōu)化處方進行3 批試驗。結(jié)果，該方法重復性良好，工藝合理可靠，穩(wěn)定可行，見表10。

表10 驗證試驗結(jié)果（n＝3）

3 討論與結(jié)論

3.1 討論

3.1.1 浸膏密度的選擇 在浸膏密度的選擇中隨著浸膏密度的增大，黏度隨之增大，流動性變差，吸濕性增強，這可能與浸膏水分逐漸降低、苷類及糖類物質(zhì)被充分提取出來從而增大了浸膏的黏度有關(guān)，同時由于水分在粉末之間形成液體橋等作用，導致高密度的浸膏在制軟材過程中易粘篩。當密度為1.35 g/mL 時，浸膏黏度大，軟材粘篩，顆粒成型率低，因此選擇密度為1.30 g/mL 的浸膏進行制粒，其黏度低，易制軟材，易制粒。

3.1.2 稀釋劑種類及加入比例的選擇 本實驗對糊精、微晶纖維素和可溶性淀粉3 種無糖型稀釋劑進行了考察，結(jié)果發(fā)現(xiàn)加糊精的軟材變粘變硬，這與水分誘發(fā)了糊精本身的黏性有關(guān)。微晶纖維素易制軟材，但成型顆粒的溶化性不好，這與其本身的多孔結(jié)構(gòu)及不溶于水的理化性質(zhì)有關(guān)。在比例考察過程中，浸膏-可溶性淀粉（1 ∶2） 及浸膏-可溶性淀粉（1 ∶2.5） 比例下易制軟材、易制粒，考慮到患者用藥的依從性、生產(chǎn)成本等因素，選擇前者為最佳比例進行制粒。

3.1.3 潤濕劑體積分數(shù)和用量的選擇 本實驗對4 種體積分數(shù)的乙醇進行了制軟材制粒的考察，發(fā)現(xiàn)40%、50% 乙醇易制軟材、不易制粒，這與潤濕劑含水量高、潤濕性強、軟材易粘篩有關(guān)； 60%、70%乙醇均易制軟材易制粒，考慮到后期顆粒的穩(wěn)定性，故選擇70%為最適宜的潤濕劑體積分數(shù)。在潤濕劑用量的考察中，本實驗進行了加入比例的考察，其中加入量為浸膏量15%的潤濕劑顆粒成型率最高，故選擇潤濕劑用量為15%。

3.2 結(jié)論 本實驗從劑型創(chuàng)新的角度出發(fā)，將傳統(tǒng)經(jīng)典湯劑制備為便于攜帶、利于儲存的顆粒劑，從浸膏密度開始，多角度考察顆粒性狀，利用正交試驗及直觀的數(shù)據(jù)對比展現(xiàn)顆粒優(yōu)劣，逐步篩選出顆粒制備的最佳工藝，并驗證工藝穩(wěn)定性。本實驗所制得的顆粒劑既可作為創(chuàng)新劑型單獨使用，也可作為劑型中間體服務(wù)于后續(xù)片劑及膠囊劑的制備，為后續(xù)黃芪桂枝五物湯的開發(fā)提供科學依據(jù)。