微RNA 與冠狀動脈疾病研究的文獻計量學評價

李 敏 趙小晗 劉 敏 馬曉娟▲

1.中國中醫(yī)科學院西苑醫(yī)院心血管科，北京 100091；2.北京中醫(yī)藥大學研究生院，北京 100029

冠狀動脈疾病（coronary artery disease，CAD）主要包括冠狀動脈狹窄或斑塊、冠狀動脈局限或痙攣、小血管病變、微血管功能障礙等，遺傳、環(huán)境及生活方式對其都具有一定的影響[1-2]。盡管目前在降低死亡率和發(fā)病率方面取得了成功，但復發(fā)事件的比例仍居高不下，因此開發(fā)新型診斷標志物用于CAD 的早期診斷和預后評估具有較高的臨床價值。微RNA（microRNA，miRNA）是一種長度為18～25 個核苷酸的單鏈非編碼RNA，通過轉(zhuǎn)錄后機制調(diào)節(jié)靶基因的表達[3-4]。目前已鑒定出超過2 000 個miRNA 在人類多種疾病的診斷和治療中起作用[5-7]。隨著對其研究的深入，越來越多的證據(jù)表明，miRNA 參與了心臟的各種病理生理過程，如影響血小板活化、控制脂質(zhì)代謝及斑塊形成等，有望成為CAD 的早期識別、輔助診斷及預后評估的一種新型生物標志物[8-10]。

1 資料與方法

1.1 數(shù)據(jù)收集、篩選

檢索WoS 核心數(shù)據(jù)庫獲取英文文獻，檢索式為TS=（coronary artery disease OR coronary heart disease）AND（microRNA OR miRNA）；檢索中國知網(wǎng)、萬方數(shù)據(jù)知識服務平臺、維普網(wǎng)獲取中文文獻，檢索式為主題=（冠狀動脈疾病OR 冠心病OR 急性心肌梗死OR 穩(wěn)定型心絞痛OR 不穩(wěn)定型心絞痛OR 冠狀動脈微栓塞OR 冠狀動脈慢血流）AND（微RNA OR miRNA）。納入標準：論文和綜述，發(fā)表于2010 年1 月至2023年6 月。排除標準：與主題無關(guān)，內(nèi)容不完整和重復發(fā)表的文獻。

1.2 數(shù)據(jù)分析

將英文文獻導入VOSviewer 中，繪制作者、關(guān)鍵詞密度圖，設(shè)置共現(xiàn)頻次為5。將中文文獻導入CiteSpace中，繪制作者、關(guān)鍵詞共現(xiàn)圖譜，參數(shù)為：方法LLR，時間切片2010 年1 月到2023 年6 月，年份1。最終用CiteSpace 制作中英文文獻時間線圖及突現(xiàn)圖，結(jié)合Excel 表展現(xiàn)中英文發(fā)文量前5 的機構(gòu)及關(guān)鍵詞聚類詞組。

2 結(jié)果

2.1 出版量

共納入英文1 733 篇，中文748 篇。該領(lǐng)域國內(nèi)外發(fā)文總體呈穩(wěn)步上升趨勢。見圖1。

圖1 時間-發(fā)文量分布圖

2.2 國家、機構(gòu)及作者

全球共284 個國家參與研究，發(fā)文量位居前3 的是中國（834 篇）、美國（296 篇）及德國（115 篇）。中英文發(fā)文量排名前5 的機構(gòu)見表1。圖2、3 分別為中英文文獻作者可視化圖。

表1 發(fā)文量前5 的機構(gòu)

圖2 英文作者可視化

圖3 中文作者可視化

2.3 關(guān)鍵詞

關(guān)鍵詞密度圖見圖4，圖中顏色越接近暖色，熱度越大。表達、動脈粥樣硬化、生物標志物是主要關(guān)鍵詞；圖5 為中文關(guān)鍵詞可視化圖，冠心病、心肌梗死、外泌體為主要關(guān)鍵詞。

圖4 英文關(guān)鍵詞密度圖

圖5 中文關(guān)鍵詞可視化

中英文關(guān)鍵詞聚類具體詞組見表2。英文聚類0、2、3 及中文聚類0、1、3 提示了miRNA 在不同的CAD中起著調(diào)控作用；英文聚類1、3 和中文聚類2 提示了miRNA 調(diào)控CAD 的具體機制；英文聚類0 及中文聚類1 主要為miRNA 指導CAD 的診斷與治療。

表2 關(guān)鍵詞聚類詞組

關(guān)鍵詞時間線圖見圖6～7，提示miRNA 與CAD相關(guān)疾病及其機制一直是中英文文獻的研究熱點，英文文獻側(cè)重機制研究，核因子κB、細胞外囊泡等理論的提出為該領(lǐng)域提供了新方向；中文文獻從2014 年開始重視中醫(yī)證型及中藥在該領(lǐng)域的應用，血瘀證、川芎嗪等研究較多，磁珠捕獲、纖維化等理論的提出具有重要的價值。中英文關(guān)鍵詞突現(xiàn)見圖8，英文文獻相繼出現(xiàn)的內(nèi)皮祖細胞、內(nèi)膜病變形成等詞，突出了對該領(lǐng)域機制的關(guān)注，2021 年后細胞外囊泡熱度持續(xù)至今；中文文獻突現(xiàn)的外泌體是近兩年的研究熱點和趨勢。

圖6 英文關(guān)鍵詞時間線圖

圖7 中文關(guān)鍵詞時間線圖

圖8 關(guān)鍵詞突現(xiàn)

3 討論

miRNA 由于其在各種生物過程中的核心作用而廣受全球關(guān)注，本研究通過知識圖譜形式對miRNA與CAD 相關(guān)研究進行宏觀呈現(xiàn)。

3.1 研究現(xiàn)狀

該領(lǐng)域受到國內(nèi)外廣泛關(guān)注，如英文文獻Lang團隊關(guān)注不同miRNA 在冠狀動脈微栓塞、冠狀動脈慢血流中的調(diào)控作用及其分子機制；Nariman 團隊認為miRNA 在CAD 的易感性及診斷方面發(fā)揮作用[11-12]。中文文獻各團隊則重視中醫(yī)藥在該領(lǐng)域的應用，如王階團隊關(guān)注miRNA 在冠心病治療中的作用及認為血塞通影響不穩(wěn)定型心絞痛的miRNA 表達[13-14]。劉詠梅團隊認為三七總皂苷通過調(diào)控miRNA 抑制急性心肌梗死大鼠心肌細胞凋亡[15]。各團隊及研究機構(gòu)間合作相對分散，沒有形成獨特的學術(shù)交流網(wǎng)絡。

3.2 熱點及趨勢

目前miRNA 與CAD 的研究對象主要涉及冠心病、動脈粥樣硬化、急性冠脈綜合征等疾病，其亞型如miR-34a、miR-146a、miR-126 等研究較多，有望成為診斷和預后CAD 的關(guān)鍵指標。該領(lǐng)域機制的研究也備受關(guān)注，miRNA 在CAD 中起著微調(diào)控、多靶點的作用，如研究認為miR-34a 通過沉默調(diào)節(jié)蛋白1，調(diào)控氧化型低密度脂蛋白所致的細胞凋亡[16]；并刺激促炎性細胞因子分泌及影響血管內(nèi)皮細胞凋亡[17-18]；增加血管細胞黏附分子-1 和細胞間黏附分子-1 的蛋白表達水平，促進單核細胞對內(nèi)皮細胞的黏附，加重內(nèi)皮細胞炎癥[19]。此外，史大卓課題組發(fā)現(xiàn)miR-34a與冠心病血栓前狀態(tài)密切相關(guān)，對炎癥-血小板-血栓網(wǎng)絡涉及的多個方面具有調(diào)節(jié)作用，并在基因和蛋白質(zhì)表達水平研究活血解毒中藥抑制血栓形成的機制，為中藥預防冠心病血栓形成提供了實驗依據(jù)和分子靶向。基于關(guān)鍵詞突現(xiàn)，預測未來會有越來越多關(guān)于細胞外囊泡的研究，其作為miRNA 的載體在細胞間傳遞信息，根據(jù)生物合成途徑將細胞外囊泡分成外泌體、凋亡小體及微泡，游離的miRNA 容易被降解，通常會被封在囊泡中以獲得穩(wěn)定的狀態(tài)，比傳統(tǒng)的載體更具有靶向性，在CAD 中發(fā)揮著重要作用[20-25]。

綜上，目前對miRNA 與CAD 的研究均以動物實驗和小樣本量臨床試驗為主，且對其分子機制的探討還不夠完善。此外，由于miRNA 種類繁多及提取技術(shù)和方案缺乏統(tǒng)一標準，且易受藥物的干擾，因此今后的研究應著重于對miRNA 的提取和歸一化技術(shù)進行優(yōu)化，制訂一個統(tǒng)一標準以滿足不同實驗室之間的偏差，這就需要大量多中心、隊列前瞻性驗證試驗。隨著miRNA 管理的不斷完善，臨床研究者有信心實現(xiàn)其在CAD 的早期診斷、治療及預后的臨床應用。

利益沖突聲明：本文所有作者均聲明不存在利益沖突。