POCT 在獸醫(yī)檢測(cè)診斷中的應(yīng)用和發(fā)展

朱連德

（北京中科基因技術(shù)股份有限公司，北京 102600）

1 POCT概念

POCT 是Point of Care Testing的縮寫(xiě)，可翻譯為“現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè)”或“現(xiàn)場(chǎng)即時(shí)檢測(cè)”，是指不需要固定、專(zhuān)用的場(chǎng)所，在最貼近患者/患病動(dòng)物的地點(diǎn)或采樣現(xiàn)場(chǎng)，應(yīng)用便攜式分析儀器及配套試劑進(jìn)行的一種操作簡(jiǎn)便、可快速得到結(jié)果的檢測(cè)方式。具有即時(shí)、便攜、簡(jiǎn)化、快速的特點(diǎn)，世界衛(wèi)生組織（WHO）對(duì)POCT 的定位為：經(jīng)濟(jì)、靈敏、特異、裝置簡(jiǎn)單、簡(jiǎn)便易用、快速。

POCT 屬體外診斷（IVD）行業(yè)的一個(gè)細(xì)分類(lèi)別。最近十年，POCT 在國(guó)內(nèi)醫(yī)學(xué)領(lǐng)域得到迅猛發(fā)展和較廣泛應(yīng)用，而獸醫(yī)POCT 尚處在起步階段。獸用POCT 產(chǎn)品在寵物醫(yī)院、養(yǎng)寵家庭等已逐步得以接受和應(yīng)用；在經(jīng)濟(jì)動(dòng)物疾病診斷中，接受程度和應(yīng)用覆蓋率也在逐步提高。

2 POCT應(yīng)用的技術(shù)

POCT 技術(shù)在短短數(shù)十年間飛快發(fā)展，從之前的干化學(xué)技術(shù)、膠體金免疫標(biāo)記技術(shù)、免疫層析、免疫斑點(diǎn)滲濾技術(shù)、色譜法、生物傳感器技術(shù)、生物和化學(xué)傳感器技術(shù)、紅外和遠(yuǎn)紅外分光光度技術(shù)、化學(xué)發(fā)光，到現(xiàn)在流行的生物芯片技術(shù)、微流控技術(shù)、多技術(shù)（免疫熒光，微激光，微校準(zhǔn)，集成芯片，液態(tài)芯片，液流芯片技術(shù)等）綜合應(yīng)用等逐步打開(kāi)了POCT 產(chǎn)業(yè)新局面。

從技術(shù)層面講，早期的POCT主要以定性檢測(cè)為主，包括膠體金、免疫分析、干化學(xué)技術(shù)等；在檢測(cè)速度快、操作簡(jiǎn)便的同時(shí)，對(duì)檢測(cè)準(zhǔn)確性和精準(zhǔn)度的要求也隨之提高，因此以免疫熒光、化學(xué)發(fā)光、生物芯片、微流控技術(shù)為核心的POCT 產(chǎn)品逐步應(yīng)用于臨床。

3 POCT迭代發(fā)展

國(guó)內(nèi)POCT 產(chǎn)品發(fā)展經(jīng)歷了第一代定性試紙條檢測(cè)（干化學(xué)測(cè)定）；第二代半定量色板卡比色或半定量?jī)x器閱讀（免疫測(cè)定）；第三代全定量手工儀器操作（生物傳感器等）；第四代全自動(dòng)儀器（全自動(dòng)平臺(tái)+生物芯片、微流控）；第五代自動(dòng)化、信息化、智能化（全自動(dòng)平臺(tái)+互聯(lián)網(wǎng)+生物芯片、微流控等）的不斷發(fā)展，產(chǎn)品研發(fā)方向愈發(fā)清晰，應(yīng)用場(chǎng)景愈發(fā)明了。

4 獸用POCT應(yīng)用場(chǎng)景

POCT 主要采用便攜式、自動(dòng)化的儀器設(shè)備，操作簡(jiǎn)單快捷，不要求特定的試驗(yàn)條件，適于基層診療機(jī)構(gòu)及養(yǎng)殖現(xiàn)場(chǎng)使用。

應(yīng)用專(zhuān)業(yè)領(lǐng)域：POCT 產(chǎn)品可應(yīng)用于臨床檢驗(yàn)（包括動(dòng)物孕檢）、疫病診斷、傳染病監(jiān)測(cè)、免疫評(píng)價(jià)、疫病凈化、飼料及原料毒素檢測(cè)、環(huán)境質(zhì)量檢測(cè)（環(huán)境及運(yùn)輸車(chē)輛物品微生物測(cè)評(píng)、環(huán)境氣溶膠微生物監(jiān)測(cè)）、檢驗(yàn)檢疫、食品安全（如抗菌藥物殘留檢測(cè)）、公共衛(wèi)生（如人獸/人畜共患病檢測(cè)）等。

應(yīng)用場(chǎng)所/單位：POCT 產(chǎn)品可用于多種場(chǎng)合，包括各種類(lèi)型養(yǎng)殖場(chǎng)、診療機(jī)構(gòu)、具有診療資質(zhì)的飼料獸藥門(mén)店、小型獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室、屠宰場(chǎng)、牲畜/家禽/寵物犬貓等動(dòng)物檢疫場(chǎng)所、環(huán)境/動(dòng)物及飼料運(yùn)輸車(chē)輛檢查場(chǎng)所、食品安全檢測(cè)現(xiàn)場(chǎng)、養(yǎng)殖托管企業(yè)、養(yǎng)寵物家庭、研究機(jī)構(gòu)（動(dòng)物房）、高職院校、動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心、動(dòng)物防疫監(jiān)督所、農(nóng)業(yè)局執(zhí)法大隊(duì)、海關(guān)、生物反恐現(xiàn)場(chǎng)等。

5 POCT與傳統(tǒng)獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室分工合作

POCT 以較傳統(tǒng)實(shí)驗(yàn)室無(wú)可比擬的便攜性、檢測(cè)速度、檢驗(yàn)流程簡(jiǎn)化程度的優(yōu)勢(shì)得到快速發(fā)展，然而，它不能代替?zhèn)鹘y(tǒng)實(shí)驗(yàn)室。傳統(tǒng)實(shí)驗(yàn)室在批次檢測(cè)樣本量、結(jié)果精確度、性能穩(wěn)定性、連續(xù)大批量自動(dòng)化檢測(cè)操作等方面是POCT 所不能及的。

不可否認(rèn)，獸醫(yī)診療器械產(chǎn)業(yè)明顯出現(xiàn)了兩種發(fā)展趨勢(shì)：一種是向著更“高、精、集成”的方向發(fā)展；另一種是向著“簡(jiǎn)單、便捷、個(gè)體化”的方向發(fā)展。隨著這樣的一個(gè)變化，獸醫(yī)檢測(cè)診斷領(lǐng)域也發(fā)展出向兩極分化的趨勢(shì)，一方面是大型自動(dòng)化儀器模塊式的組合和流水線(xiàn)式的檢驗(yàn)流程所呈現(xiàn)出的“極大化”，大大提高了獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室的工作效率；另一方面是POCT 檢測(cè)儀器小型化、操作簡(jiǎn)便化、即時(shí)化、準(zhǔn)確化所呈現(xiàn)出的“極小化”。便攜式和手掌式的POCT 設(shè)備實(shí)現(xiàn)了傳統(tǒng)分析儀器微型化、操作方法簡(jiǎn)單化，現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)快速化、使用試劑微量化和檢驗(yàn)對(duì)象個(gè)體化。而這種“兩極化”的產(chǎn)生主要是適應(yīng)了當(dāng)今高效的獸醫(yī)檢測(cè)診斷、畜禽/水產(chǎn)養(yǎng)殖生產(chǎn)模式及寵物保健的需求。POCT 成為傳統(tǒng)實(shí)驗(yàn)室功能的延伸和補(bǔ)充，傳統(tǒng)實(shí)驗(yàn)室也成為POCT 檢測(cè)診斷的支持和依托，譬如，POCT 的檢測(cè)診斷結(jié)果可以通過(guò)傳統(tǒng)實(shí)驗(yàn)室得以驗(yàn)證和確認(rèn)。

6 獸醫(yī)POCT產(chǎn)品及其應(yīng)用現(xiàn)狀

目前國(guó)內(nèi)獸醫(yī)IVD 企業(yè)100 余家，約有1/3 的企業(yè)生產(chǎn)或研發(fā)生產(chǎn)POCT 產(chǎn)品。獸醫(yī)POCT 起步晚，市場(chǎng)上應(yīng)用的產(chǎn)品大多是第一、二代產(chǎn)品；但有些企業(yè)起點(diǎn)高，已研發(fā)生產(chǎn)第四、五代機(jī)。也有一些醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的企業(yè)跨界進(jìn)入獸醫(yī)行業(yè)生產(chǎn)推廣POCT 產(chǎn)品。

從終端用戶(hù)應(yīng)用和企業(yè)宣傳了解到，POCT 產(chǎn)品上市或正在研發(fā)的企業(yè)見(jiàn)表1。

表1 獸醫(yī)POCT 產(chǎn)品研發(fā)生產(chǎn)/供應(yīng)商與代表產(chǎn)品

以上列表偏重于經(jīng)濟(jì)動(dòng)物疫病相關(guān)的現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè)產(chǎn)品，不包括歐美等國(guó)外企業(yè)產(chǎn)品。

國(guó)外企業(yè)有Anigen（Bionote）、Biogal、BioGnost、BioMérieux、Biopanda、Biovet、Boehringer Ingelheim、Eiken、Eurof ins Scientif ic、GeneMedi、IDEXX、ID Vet、INDICAL、IVD Technologies、Livet、MEGACOR Diagnostik、Rapid Labs、SKYER、Svanova、Ubio、Vetlab Supplies、Zoetis 等。

國(guó)內(nèi)大多數(shù)獸醫(yī)POCT 產(chǎn)品處于中低端層次，需加強(qiáng)研發(fā)投入和技術(shù)交流，突破高端核心技術(shù)，提升產(chǎn)品質(zhì)量，降低成本，提高檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確率和穩(wěn)定性。

7 POCT存在的問(wèn)題

現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè)POCT 是獸醫(yī)檢測(cè)檢驗(yàn)（或體外診斷）領(lǐng)域新發(fā)展起來(lái)的新型檢測(cè)技術(shù)平臺(tái)。雖然POCT 有諸多優(yōu)勢(shì)，并且有廣闊的應(yīng)用前景，但是其技術(shù)本身存在的限制、發(fā)展中遇到的瓶頸、實(shí)際應(yīng)用中存在的問(wèn)題等都是POCT 必須面對(duì)的現(xiàn)狀和待解決的問(wèn)題。

7.1 質(zhì)量控制問(wèn)題

1）目前對(duì)傳統(tǒng)獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)檢驗(yàn)的質(zhì)量評(píng)價(jià)有室內(nèi)質(zhì)控和室間質(zhì)評(píng)，質(zhì)量管理較為完善，有效保證了傳統(tǒng)檢測(cè)檢驗(yàn)方法的可靠性。而有些POCT 儀器精密度欠佳，檢測(cè)結(jié)果誤差較大；有些產(chǎn)品沒(méi)有質(zhì)控方法和質(zhì)控品，也缺乏規(guī)范的POCT 間質(zhì)量評(píng)價(jià)體系，其結(jié)果的精密度和準(zhǔn)確度與傳統(tǒng)實(shí)驗(yàn)室PCR 儀或大型自動(dòng)分析儀的相關(guān)性能存在差距。另外POCT 產(chǎn)品種類(lèi)很多，采用的技術(shù)和檢測(cè)方法各不相同，加之沒(méi)有統(tǒng)一的校準(zhǔn)品，檢驗(yàn)結(jié)果在不同分析系統(tǒng)之間無(wú)法進(jìn)行比對(duì)，給實(shí)際應(yīng)用帶來(lái)一定限制。

2）醫(yī)療行業(yè)POCT 有相關(guān)的法律法規(guī)、行政管理和規(guī)章制度，醫(yī)療衛(wèi)生行政監(jiān)管部門(mén)對(duì)POCT 的管理也提出了一些要求，但獸醫(yī)監(jiān)管機(jī)構(gòu)對(duì)獸醫(yī)行業(yè)POCT 仍未全面制定相關(guān)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)和應(yīng)用規(guī)范，有些POCT 產(chǎn)品的生產(chǎn)和使用處于缺乏有效指導(dǎo)和監(jiān)管的狀態(tài)。

7.2 操作人員問(wèn)題

POCT 使用范圍廣泛，操作者不局限于專(zhuān)業(yè)檢測(cè)人員。部分廠家宣傳POCT 操作簡(jiǎn)便，是“傻瓜儀器”，操作人員不需要具有專(zhuān)業(yè)背景，不需要對(duì)非檢測(cè)人員進(jìn)行培訓(xùn)。這些因素會(huì)導(dǎo)致POCT 不能得到最大程度的合理使用、規(guī)范操作和有效管理，致使用戶(hù)不能客觀評(píng)價(jià)所用產(chǎn)品的檢測(cè)結(jié)果和使用效果。

7.3 樣本量問(wèn)題

POCT 面對(duì)的是單樣本或少量樣本，減少了樣本處理流程，節(jié)省了樣本周轉(zhuǎn)時(shí)間（turn-around time，TAT）。不足是，當(dāng)樣本量增多時(shí)，其節(jié)省時(shí)間和節(jié)約綜合費(fèi)用上的優(yōu)勢(shì)下降。

7.4 檢測(cè)報(bào)告上傳問(wèn)題

POCT 無(wú)規(guī)范統(tǒng)一的結(jié)果報(bào)告形式，有許多POCT 尤其是第一、二代不能與實(shí)驗(yàn)室信息系統(tǒng)（LIMS）連接，其檢測(cè)檢驗(yàn)結(jié)果不能上傳給客戶(hù)，無(wú)法長(zhǎng)期保存，在樣本接收和檢測(cè)報(bào)告產(chǎn)生等方面不能向信息化方向發(fā)展。

隨著技術(shù)的發(fā)展，POCT 將在其產(chǎn)品性能、質(zhì)量、性?xún)r(jià)比、信息化、智能化和應(yīng)用范圍方面得到更合理、更完善的改進(jìn)，逐步解決存在的問(wèn)題，必將會(huì)在未來(lái)的獸醫(yī)診療模式中發(fā)揮更大的作用。

8 獸醫(yī)POCT發(fā)展方向

據(jù)世界衛(wèi)生組織要求，POCT應(yīng)遵循以下標(biāo)準(zhǔn)：1）負(fù)擔(dān)得起；2）靈敏；3）特異；4）用戶(hù)友好；5）快速而精準(zhǔn)；6）無(wú)其他設(shè)備負(fù)擔(dān)；7）可交付給終端用戶(hù)。依據(jù)行業(yè)特點(diǎn)，獸醫(yī)POCT 在研發(fā)、生產(chǎn)、交付等各方面也應(yīng)遵循這一標(biāo)準(zhǔn)。

隨著醫(yī)學(xué)、生命科學(xué)、計(jì)算機(jī)科學(xué)、軟件學(xué)、免疫學(xué)、分子生物學(xué)等跨學(xué)科知識(shí)經(jīng)驗(yàn)積累，膠體金免疫標(biāo)記技術(shù)、紅外/遠(yuǎn)紅外分光光度技術(shù)、單層試紙技術(shù)、多層涂覆技術(shù)、生物/化學(xué)傳感器技術(shù)、生物芯片技術(shù)、微流控技術(shù)等，以及機(jī)械、電子、光學(xué)、工程學(xué)、工業(yè)設(shè)計(jì)與制造等多領(lǐng)域技術(shù)工藝集成發(fā)展，以及獸醫(yī)檢測(cè)診斷需求的提升，推動(dòng)著獸醫(yī)POCT 不斷發(fā)展，朝著‘精準(zhǔn)化、自動(dòng)化、智能化、網(wǎng)聯(lián)化’方向邁進(jìn)。具有全自動(dòng)、智能、互聯(lián)網(wǎng)功能的POCT 將會(huì)占據(jù)更大、更廣闊的發(fā)展空間。

膠體金免疫層析技術(shù)應(yīng)充分利用自身優(yōu)點(diǎn)的情況下，朝著實(shí)現(xiàn)高通量、高靈敏度、定量檢測(cè)以及抗原抗體的同步檢測(cè)等方面發(fā)展，發(fā)揮該技術(shù)最大的價(jià)值。

等溫?cái)U(kuò)增、信號(hào)放大、化學(xué)發(fā)光等技術(shù)應(yīng)用讓分子診斷POCT 更加易于采用；對(duì)動(dòng)物生理/病理信息長(zhǎng)時(shí)段實(shí)時(shí)了解，采取皮下或某部位的植入式傳感檢測(cè)，具有重要的臨床檢測(cè)診斷和疫病預(yù)警價(jià)值；便攜式生物醫(yī)學(xué)傳感檢測(cè)，結(jié)合智能手機(jī)等移動(dòng)終端，能夠?qū)崿F(xiàn)隨時(shí)隨地的動(dòng)物健康檢測(cè)和疾病診斷；穿戴式生物醫(yī)學(xué)傳感檢測(cè)系統(tǒng)，貼合于動(dòng)物頸、胸、腹、四肢皮膚等表面，將實(shí)現(xiàn)廣泛而實(shí)時(shí)的健康信息采集。

新一代檢測(cè)技術(shù)如生物芯片、基因測(cè)序、微流控等已陸續(xù)進(jìn)入應(yīng)用階段，技術(shù)進(jìn)步帶來(lái)的產(chǎn)品迭代與質(zhì)量升級(jí)必將有助于提高人們對(duì)POCT 的認(rèn)知度與理解度，將會(huì)極大推動(dòng)獸醫(yī)POCT 行業(yè)發(fā)展。

國(guó)務(wù)院下發(fā)《關(guān)于積極推進(jìn)“互聯(lián)網(wǎng)+”行動(dòng)的指導(dǎo)意見(jiàn)》（2015年7 月），“互聯(lián)網(wǎng)+醫(yī)療”的概念在醫(yī)療行業(yè)開(kāi)始興起，在線(xiàn)健康咨詢(xún)、電子處方、遠(yuǎn)程會(huì)診等新業(yè)態(tài)逐步落地。在這一浪潮中，以“互聯(lián)網(wǎng)+移動(dòng)醫(yī)療+POCT”為主要表現(xiàn)形式的iPOCT 出現(xiàn)。獸醫(yī)POCT也即將走向iPOCT 的發(fā)展道路。

在集約化、高密度養(yǎng)殖的行業(yè)大環(huán)境下，獸醫(yī)單憑經(jīng)驗(yàn)、望聞問(wèn)切和比較解剖，開(kāi)展疫病診斷、流行趨勢(shì)預(yù)判，已受到很大局限。對(duì)疫病或疫病流行態(tài)勢(shì)作出比較準(zhǔn)確的判定，需要借助獸醫(yī)檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室的檢測(cè)數(shù)據(jù)，包括過(guò)去的、現(xiàn)在的、區(qū)域的甚至全國(guó)的數(shù)據(jù)。而這些數(shù)據(jù)的實(shí)時(shí)獲得，沒(méi)有信息化、數(shù)字化工具的支撐，也是很難實(shí)現(xiàn)的。

在偏遠(yuǎn)的牧區(qū)或鄉(xiāng)村，鄉(xiāng)村獸醫(yī)或養(yǎng)殖者，要想得到快速正確的診斷結(jié)果，可以利用POCT 與數(shù)字化獸醫(yī)進(jìn)行線(xiàn)上咨詢(xún)和遠(yuǎn)程診療。

通過(guò)互聯(lián)網(wǎng)，數(shù)字化獸醫(yī)及實(shí)驗(yàn)室/POCT 檢測(cè)，可以解決缺醫(yī)或診療時(shí)效問(wèn)題，同時(shí)也避免了人與人、人與動(dòng)物的直接接觸，保障生物安全措施的有效實(shí)施。

在實(shí)驗(yàn)室+iPOCT 基礎(chǔ)上，借助大數(shù)據(jù)和算法，將業(yè)務(wù)數(shù)字化，逐步朝數(shù)字化、智能化獸醫(yī)發(fā)展，將大大提升整個(gè)獸醫(yī)行業(yè)的診療水平，擴(kuò)大獸醫(yī)觸達(dá)范圍，讓需要獸醫(yī)的地方實(shí)時(shí)享受到獸醫(yī)服務(wù)。