規(guī)模豬場(chǎng)偽狂犬病的凈化技術(shù)與科學(xué)防控措施

劉姍

規(guī)模化生豬養(yǎng)殖場(chǎng)是現(xiàn)代畜牧養(yǎng)殖業(yè)的重要發(fā)展方向和重要組成，但要真正實(shí)現(xiàn)規(guī)模化生豬養(yǎng)殖還需要解決很多問題，其中疫病高發(fā)的問題是需要慎重考慮的問題之一。生豬養(yǎng)殖周期較長(zhǎng)，在整個(gè)生長(zhǎng)發(fā)育階段會(huì)受到多種疾病的威脅，其中偽狂犬病是一類危害較為嚴(yán)重的疫病之一。豬偽狂犬病是由偽狂犬病毒感染引起，種豬感染該種疾病之后會(huì)降低繁殖性能和種用價(jià)值，仔豬通常會(huì)引發(fā)嚴(yán)重的神經(jīng)癥狀和極高的死亡率，該類疾病在生豬養(yǎng)殖場(chǎng)中傳播流行所造成的經(jīng)濟(jì)損失是難以估量的，尤其是種豬場(chǎng)受到病毒感染之后，能夠通過母豬的胎盤將病毒傳播給胚胎，嚴(yán)重影響到后代的身體健康，再加上該種病毒容易發(fā)生變異，進(jìn)一步增加了疫情的防控難度，所以對(duì)于規(guī)模化養(yǎng)殖場(chǎng)來說，應(yīng)該注重做好偽狂犬病的防控和科學(xué)凈化。

豬偽狂犬病變異株對(duì)養(yǎng)豬業(yè)造成巨大經(jīng)濟(jì)損失。發(fā)病之后主要表現(xiàn)為發(fā)熱、腦脊髓炎等臨床癥狀，病死率高，傳播快，流行范圍廣，對(duì)豬場(chǎng)造成嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。此外，豬偽狂犬病還會(huì)影響豬肉品質(zhì)，對(duì)人類健康構(gòu)成潛在威脅。加強(qiáng)豬偽狂犬病的防控與凈化工作，有助于保護(hù)豬場(chǎng)免受疫情的影響，提高豬場(chǎng)經(jīng)濟(jì)效益。同時(shí)，也有利于維護(hù)豬肉品質(zhì)，保障人類食品安全。目前，我國(guó)豬偽狂犬病的防控與凈化工作正在逐步加強(qiáng)，一些地區(qū)已經(jīng)取得了一定的成效。然而，豬偽狂犬病的防控與凈化仍面臨一定的挑戰(zhàn)，需要進(jìn)一步加強(qiáng)。

一、流行病學(xué)

1、病原特征

偽狂犬病病毒是一種單股RNA病毒，屬于皰疹病毒科的成員。其外觀呈線形，具有螺旋對(duì)稱性，病毒顆粒直徑約為70nm，長(zhǎng)度為180～240nm。病毒質(zhì)粒包括5種蛋白質(zhì)，分別是核衣殼蛋白、糖蛋白、次黃嘌呤醇酸蛋白、大蛋白和非結(jié)構(gòu)蛋白。其中核衣殼蛋白為主要構(gòu)成VP2，是該病毒主要的抗原表位。該病毒非常穩(wěn)定，能在4℃環(huán)境中存活1個(gè)月左右。偽狂犬病病毒主要通過狗、狐貍等寵物或野生動(dòng)物傳播。其感染方式主要是經(jīng)由被感染動(dòng)物的唾液或其他分泌物進(jìn)入人體或動(dòng)物體內(nèi)，引起全身感染，主要侵襲神經(jīng)系統(tǒng)，導(dǎo)致中樞神經(jīng)系統(tǒng)損害和嚴(yán)重的神經(jīng)癥狀。病情嚴(yán)重時(shí)，可以導(dǎo)致死亡。偽狂犬病病毒與真正的狂犬病病毒相似，但兩者有所不同。偽狂犬病病毒的傳播較容易控制，因?yàn)樗饕ㄟ^唾液傳播，因此只有被感染的動(dòng)物咬傷人時(shí)才會(huì)傳播。與之相比，狂犬病病毒傳播較為復(fù)雜，主要通過被感染動(dòng)物的唾液進(jìn)入人體或動(dòng)物體內(nèi)，還可能通過其他途徑傳播。狂犬病病毒的致死率也較高，且沒有特定的治療方法，而偽狂犬病病毒經(jīng)常可被抗體清除，愈后較好。

2、致病機(jī)理

豬偽狂犬病毒主要通過舔傷、咬傷等途徑進(jìn)入宿主體內(nèi)，隨后進(jìn)入中樞神經(jīng)系統(tǒng)，引起腦膜及大腦皮層的炎癥反應(yīng)和神經(jīng)元凋亡。這導(dǎo)致了嚴(yán)重的神經(jīng)系統(tǒng)損傷和相關(guān)的神經(jīng)癥狀。豬偽狂犬病毒感染后，病毒在宿主體內(nèi)進(jìn)入細(xì)胞并復(fù)制自己的基因組。在病毒復(fù)制的過程中，它會(huì)釋放各種生物活性物質(zhì)，比如病毒顆粒、病毒蛋白等，這些物質(zhì)可以激發(fā)宿主免疫系統(tǒng)的反應(yīng)，引發(fā)炎癥反應(yīng)和相關(guān)的免疫細(xì)胞應(yīng)答。這些反應(yīng)可能會(huì)導(dǎo)致宿主體內(nèi)的組織損傷和細(xì)胞凋亡。此外，豬偽狂犬病毒也會(huì)直接導(dǎo)致宿主體內(nèi)神經(jīng)元損傷和死亡，這是其主要的致病機(jī)理。病毒會(huì)累積在神經(jīng)元的突觸末端，破壞神經(jīng)信號(hào)傳遞機(jī)制，阻礙神經(jīng)細(xì)胞的正常活動(dòng)和功能。這導(dǎo)致宿主體內(nèi)神經(jīng)元失去連接以及神經(jīng)元過分激活，最終引發(fā)嚴(yán)重的神經(jīng)系統(tǒng)病變。

3、流行特點(diǎn)

豬偽狂犬病的傳染源主要是感染了該病毒的野生動(dòng)物和寵物狗等。感染的病畜會(huì)將病毒通過唾液分泌物、血液、尿液等途徑排泄出來，這些排泄物直接或間接地污染了環(huán)境，成為了病毒的傳播源。同時(shí)，被感染動(dòng)物的唾液分泌物可能通過咬傷等方式侵入人或動(dòng)物體內(nèi)，引起偽狂犬病的傳播。偽狂犬病病毒流行渠道主要是通過野生動(dòng)物間的接觸傳播，如不同品種的野生動(dòng)物之間的接觸和交配等。此外，人類因或多或少的接觸寵物狗而易受感染，特別是與野生動(dòng)物同棲于一個(gè)區(qū)域，食用生肉等都可能導(dǎo)致感染。偽狂犬病的易感群體包括豬、人類、家禽以及各種各樣的動(dòng)物等。其中，兒童、老年人以及免疫功能較弱的人群更加容易受到感染。豬偽狂犬病的流行特點(diǎn)包括：①病毒傳播速度快，易于蔓延；②感染后幾乎100%致病，并可致死亡；③在某些地區(qū)會(huì)出現(xiàn)季節(jié)性爆發(fā)；④隨著多個(gè)物種之間的接觸密切，其跨物種傳播越來越容易。此外，由于該病毒的結(jié)構(gòu)比較穩(wěn)定，且對(duì)常規(guī)消毒方法不敏感，因此在環(huán)境中的存在時(shí)間也比較長(zhǎng)，這對(duì)疫情控制帶來了一定的挑戰(zhàn)。

二、臨床癥狀

豬偽狂犬病的潛伏期通常為3～6周，最長(zhǎng)可達(dá)6個(gè)月。潛伏期內(nèi)，豬只可能沒有明顯的臨床癥狀。仔豬感染豬偽狂犬病后，癥狀較為嚴(yán)重。病初體溫升高，可達(dá)40℃以上，食欲減退，精神不振。隨后出現(xiàn)神經(jīng)癥狀，如震顫、痙攣、共濟(jì)失調(diào)等，病情惡化后，仔豬出現(xiàn)嘔吐、腹瀉、麻痹等癥狀，最終因呼吸衰竭而死亡。育肥豬感染豬偽狂犬病后，癥狀較輕。病豬表現(xiàn)為發(fā)熱、食欲減退、精神不振，生長(zhǎng)發(fā)育遲緩。部分豬可能出現(xiàn)呼吸道癥狀，如咳嗽、喘氣等。病程一般為1～2周，病死率較低。母豬感染豬偽狂犬病后，癥狀較輕。病豬表現(xiàn)為發(fā)熱、食欲減退、精神不振，繁殖性能下降，如流產(chǎn)、產(chǎn)死胎等。種豬感染豬偽狂犬病后，可能出現(xiàn)不育現(xiàn)象。

三、病理學(xué)變化

仔豬感染偽狂犬病毒后，病理組織學(xué)變化主要表現(xiàn)為腦膜腦炎和神經(jīng)節(jié)炎。腦膜充血、水腫，腦脊髓液增多。腦實(shí)質(zhì)內(nèi)見彌漫性膠質(zhì)細(xì)胞增生，局部腦組織壞死。神經(jīng)節(jié)細(xì)胞發(fā)生變性、壞死，周圍有淋巴細(xì)胞和漿細(xì)胞浸潤(rùn)。育肥豬病理組織學(xué)變化較輕。腦膜可能充血，腦脊髓液量可能增多。腦實(shí)質(zhì)內(nèi)見局部膠質(zhì)細(xì)胞增生，神經(jīng)節(jié)細(xì)胞可能發(fā)生變性。母豬和種豬感染偽狂犬病毒后，病理組織學(xué)變化與育肥豬相似，但程度較輕。腦膜可能充血，腦脊髓液量可能增多。腦實(shí)質(zhì)內(nèi)見局部膠質(zhì)細(xì)胞增生，神經(jīng)節(jié)細(xì)胞可能發(fā)生變性。

四、實(shí)驗(yàn)室診斷

準(zhǔn)備試劑和材料包括熒光抗體檢測(cè)試劑盒、豬偽狂犬病毒抗原、豬血清樣本、磷酸鹽緩沖液（PBS）、96孔板等。將豬血清樣本按照1∶10的比例稀釋，備用。將稀釋后的豬血清樣本和豬偽狂犬病毒抗原分別加入96孔板中，每個(gè)樣本或抗原設(shè)置3個(gè)重復(fù)孔。將96孔板置于濕盒中，37℃孵育1小時(shí)。用PBS洗滌96孔板3次，每次洗滌3分鐘。加入熒光抗體，37℃孵育45分鐘。用PBS洗滌96孔板3次，每次洗滌3分鐘。加入底物溶液，37℃孵育15分鐘。加入終止液，觀察熒光反應(yīng)。根據(jù)熒光強(qiáng)度進(jìn)行判定。陰性（-）：熒光強(qiáng)度低于對(duì)照線；陽性（+）：熒光強(qiáng)度等于或高于對(duì)照線。在96孔板中，將每個(gè)樣本或抗原的3個(gè)重復(fù)孔的熒光強(qiáng)度取平均值。與對(duì)照線進(jìn)行比較，判斷檢測(cè)結(jié)果。

五、凈化技術(shù)

1、凈化前的準(zhǔn)備工作

在凈化處理之前使用豬偽狂犬病毒gE基因缺失營(yíng)養(yǎng)和gE-ELISA抗體檢測(cè)試劑盒對(duì)豬群采血進(jìn)行抗體監(jiān)測(cè)，掌握豬群當(dāng)中偽狂犬病毒野毒株的感染情況。選擇適合區(qū)域化凈化模式，制定相應(yīng)的凈化路線，一般采取檢測(cè)、消毒、撲殺、無害化處理、凈化的綜合防控措施，以此來取得理想的凈化效果。

2、凈化的四個(gè)階段

①凈化前期的準(zhǔn)備工作

按照豬場(chǎng)規(guī)模5～10%的比例進(jìn)行采樣，進(jìn)行病原和抗原檢測(cè)，用酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)，檢測(cè)血清當(dāng)中的gE抗體和gB抗體，采用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)檢測(cè)偽狂犬病毒核酸確定豬群的野毒株感染情況和貶義抗體水平。所有滅活疫苗或者活疫苗均為豬偽狂犬病毒gE基因缺失疫苗。0～3日齡選擇使用活疫苗進(jìn)行滴鼻免疫接種，45日齡進(jìn)行第2次免疫接種，70～75日齡進(jìn)行第3次免疫接種，若生產(chǎn)周期在6～7個(gè)月的豬群，應(yīng)該在120日齡再次免疫接種一次。后備母豬在配種前八周免疫接種一次，配種前四周強(qiáng)化免疫接種一次，種豬一年免疫接種4次。對(duì)于豬偽狂犬病發(fā)病場(chǎng)或者受到病毒威脅的養(yǎng)殖場(chǎng)，種公豬和種母豬緊急免疫接種滅活疫苗，免疫接種兩次，兩次間隔4～6周，配種前20天再免疫接種一次，產(chǎn)生1個(gè)月強(qiáng)化免疫接種一次。發(fā)病豬群應(yīng)該緊急接種活疫苗兩次，每次間隔四周。

②免疫控制階段

免疫控制階段應(yīng)該注重加強(qiáng)生物安全措施，確保引進(jìn)的豬群的種豬場(chǎng)取得種畜禽生產(chǎn)經(jīng)營(yíng)許可證和動(dòng)物防疫條件合格證，并且豬偽狂犬病毒檢測(cè)為陰性。種豬引入之后需要隔離60天以上，經(jīng)過gE抗體檢測(cè)陰性在于本養(yǎng)殖場(chǎng)的豬群進(jìn)行混合養(yǎng)殖，混群之后每年進(jìn)行三次檢測(cè)，平均4個(gè)月檢測(cè)一次抗體。養(yǎng)殖場(chǎng)需要堅(jiān)持自繁自愈、全進(jìn)全出的養(yǎng)殖管理方式，積極推廣應(yīng)用早期斷奶技術(shù)，加強(qiáng)門口往來人員車輛的控制和消毒。在豬場(chǎng)內(nèi)部不能夠養(yǎng)殖其他動(dòng)物防治貓犬動(dòng)物竄入到養(yǎng)殖場(chǎng)，制定嚴(yán)格的滅鼠措施，消滅環(huán)境當(dāng)中的蚊蟲。按照DB31-T432的要求，選擇優(yōu)質(zhì)低毒低殘留的消毒劑，對(duì)豬舍卷來內(nèi)外部環(huán)境用具運(yùn)輸工具等一切可能被污染的場(chǎng)所設(shè)施進(jìn)行嚴(yán)格消毒，執(zhí)行規(guī)范化消毒方案。隔離患病豬淘汰沒有價(jià)值的豬群，對(duì)于死亡豬死胎和相關(guān)物品要進(jìn)行嚴(yán)格無害化處理。選擇使用gE缺失滅活疫苗，對(duì)豬群進(jìn)行免疫接種，每半年按照豬群總量5～8%進(jìn)行抽樣檢測(cè)血清抗體。當(dāng)豬群的gE抗體陽性率下降到20%左右之后進(jìn)行分群，將陽性豬與陰性豬分開飼養(yǎng)。陽性豬群的種豬作案為商品豬有計(jì)劃地進(jìn)行淘汰。對(duì)于抗體陰性，豬群進(jìn)行隔離監(jiān)測(cè)，最后建立完全健康的gE抗體陰性豬群。

③免疫凈化階段

這個(gè)階段應(yīng)該對(duì)整個(gè)豬場(chǎng)的豬群進(jìn)行逐頭的gE抗體檢測(cè)，將檢測(cè)全部為陽性的豬只淘汰，或者轉(zhuǎn)變成商品豬。淘汰之后建立陰性豬群，在逐一檢測(cè)之后的一個(gè)月內(nèi)，按照豬總數(shù)量的10%進(jìn)行抽樣復(fù)查gE抗體，若豬群當(dāng)中不存在gE抗體陽性豬三個(gè)月之后，再按照豬總數(shù)的10%的比例抽樣再次進(jìn)行g(shù)E抗體復(fù)查。上述兩次均為陰性，每半年對(duì)豬群抽樣進(jìn)行g(shù)E抗體和gB抗體檢測(cè)，對(duì)豬群中免疫抗體水平和野毒株的感染情況進(jìn)行動(dòng)態(tài)化的監(jiān)測(cè)。如若上述的任何一個(gè)步驟檢查出現(xiàn)了陽性，抗體陽性率在1～5%的應(yīng)該對(duì)整個(gè)豬群進(jìn)行一次全面的gE抗體檢測(cè)，剔除全部陽性豬，若陽性率低于1%，應(yīng)該按照建立陰性豬群監(jiān)測(cè)方案開展。

④凈化維持階段

在生豬養(yǎng)殖場(chǎng)當(dāng)中設(shè)立哨兵豬，尤其是在種豬舍當(dāng)中放置偽狂犬病毒gE抗體檢測(cè)為陰性的仔豬，觀察是否受到病毒感染或者發(fā)病，并重點(diǎn)檢測(cè)gE抗體情況，判定豬群當(dāng)中是否存在野毒株感染。注重做好種豬引種監(jiān)測(cè)，禁止引入豬偽狂犬病毒gE抗體陽性的帶毒豬。

3、凈化標(biāo)準(zhǔn)

養(yǎng)殖場(chǎng)的生產(chǎn)母豬或者后備的種公豬抽檢之后，豬偽狂犬病毒的gB抗體陽性率大于90%，種豬和殖母豬以及母豬抽檢偽狂犬病毒gE抗體檢測(cè)均為陰性，并且連續(xù)兩年不存在臨床病例，可以視為免疫無疫標(biāo)準(zhǔn)。養(yǎng)殖場(chǎng)的種公豬生產(chǎn)母豬和后備母豬經(jīng)過血清檢測(cè)豬偽狂犬病毒的gE抗體和gB抗體檢測(cè)都為陰性，停止免疫兩年以上，沒有發(fā)現(xiàn)新的臨床病例可以判定達(dá)到凈化標(biāo)準(zhǔn)。

六、防控措施

1、構(gòu)建安全的生物防護(hù)體系

選擇遠(yuǎn)離城市、村莊、交通要道等污染源的地方，確保豬場(chǎng)周圍環(huán)境相對(duì)安靜、清潔。按照生產(chǎn)流程和防疫要求進(jìn)行合理布局，分為生產(chǎn)區(qū)、辦公區(qū)、生活區(qū)、糞尿處理區(qū)等，各區(qū)域之間的距離應(yīng)滿足防疫要求。建設(shè)符合規(guī)模的豬舍，包括分娩舍、育肥舍、種豬舍等。配備完善的通風(fēng)、保暖、降溫等設(shè)施，確保豬舍內(nèi)環(huán)境舒適。設(shè)置專門的飼料車間、飼料儲(chǔ)存庫(kù)、原料驗(yàn)收區(qū)等，防止飼料污染。建立嚴(yán)格的入場(chǎng)消毒制度，對(duì)入場(chǎng)人員、車輛、物品等進(jìn)行徹底消毒。實(shí)施封閉管理，嚴(yán)禁無關(guān)人員進(jìn)入生產(chǎn)區(qū)。定期對(duì)豬群進(jìn)行疫病監(jiān)測(cè)，及時(shí)發(fā)現(xiàn)并處理疫情。制定合理的疫苗接種計(jì)劃，確保豬群免疫接種到位，進(jìn)行疫病監(jiān)測(cè)，及時(shí)發(fā)現(xiàn)疫情并采取隔離、消毒等措施。建立應(yīng)急預(yù)案，應(yīng)對(duì)突發(fā)疫情。實(shí)施嚴(yán)格的污水處理制度，確保排放達(dá)標(biāo)。建設(shè)沼氣池等廢棄物處理設(shè)施，減少環(huán)境污染。每天對(duì)豬舍進(jìn)行清理，每周進(jìn)行1～2次消毒，防止病原菌滋生。采取物理、化學(xué)、生物等措施，控制豬舍內(nèi)外害蟲、鼠類等。檢查豬舍設(shè)施，修復(fù)漏洞，防止蟲害侵入。

2、科學(xué)管理

限制豬場(chǎng)內(nèi)人員流動(dòng)，減少與外界的接觸。入場(chǎng)人員需進(jìn)行徹底的消毒、更衣、換鞋等操作。設(shè)置獨(dú)立的豬舍，避免不同年齡段的豬只混合飼養(yǎng)。使用優(yōu)質(zhì)、無病原體的飼料。飼料儲(chǔ)存場(chǎng)所應(yīng)保持干燥、通風(fēng)，避免陽光直射。夏秋季節(jié)應(yīng)該每半個(gè)月檢查飼料庫(kù)存，防止過期、變質(zhì)飼料投入使用。合理規(guī)劃豬場(chǎng)生產(chǎn)，保持豬群年齡結(jié)構(gòu)的均衡。避免過度擁擠，確保豬群生長(zhǎng)空間充足。好及時(shí)淘汰病豬、老齡豬，降低疫病傳播風(fēng)險(xiǎn)。

3、環(huán)境調(diào)控

根據(jù)豬只年齡、生長(zhǎng)階段、季節(jié)等因素，設(shè)置合適的室內(nèi)溫度。一般來說，仔豬期豬舍溫度應(yīng)保持在25～30℃，生長(zhǎng)豬期和育肥豬期豬舍溫度可適當(dāng)降低。冬季采用保溫措施，如安裝保溫?zé)簟⑹褂貌輭|等；夏季采用降溫措施，如安裝風(fēng)扇、噴霧裝置等。每天檢查豬舍溫度，如有異常，及時(shí)調(diào)整。保持豬舍內(nèi)濕度適中，避免過度干燥或潮濕。一般來說，豬舍濕度控制在60～70%為宜。冬季加強(qiáng)豬舍保溫的同時(shí)，注意適當(dāng)增加濕度；夏季豬舍內(nèi)水分蒸發(fā)較快，需加強(qiáng)濕度調(diào)控。根據(jù)豬舍內(nèi)空氣質(zhì)量需求，設(shè)置合理的通風(fēng)換氣設(shè)施。豬舍應(yīng)具備良好的自然通風(fēng)或機(jī)械通風(fēng)條件。確保豬舍內(nèi)空氣質(zhì)量，避免氨氣、二氧化碳等有害氣體積聚。冬季通風(fēng)換氣時(shí)，注意防止冷風(fēng)侵襲；夏季通風(fēng)換氣時(shí)，注意降低舍內(nèi)溫度。重點(diǎn)檢查通風(fēng)換氣設(shè)施，確保其正常運(yùn)行。在保證環(huán)境調(diào)控達(dá)標(biāo)的基礎(chǔ)上，還應(yīng)該調(diào)控好豬舍的養(yǎng)殖密度。仔豬期（0～3個(gè)月）每頭仔豬占地面積約為0.3～0.5平方米。生長(zhǎng)期（3～6個(gè)月）每頭生長(zhǎng)豬占地面積約為0.6～1平方米。育肥期（6～10個(gè)月）每頭育肥豬占地面積約為1～1.5平方米。成年豬每頭豬的占地面積一般控制在1.5～2.0平方米。

綜上所述，豬偽狂犬病的防控與凈化對(duì)養(yǎng)豬業(yè)具有重要意義。我國(guó)應(yīng)加強(qiáng)豬偽狂犬病的防控與凈化工作，采取一系列綜合措施，提高豬場(chǎng)生物安全水平，保障養(yǎng)豬業(yè)的持續(xù)健康發(fā)展。