血清微管解聚蛋白、CHI3L1與非小細胞肺癌患者肺癌根治術后復發轉移的關系*

嚴 潔,王?；?/p>

1.延安大學咸陽醫院檢驗科,陜西咸陽 712000;2.陜西省咸陽市第一人民醫院胸外科,陜西咸陽 712000

非小細胞肺癌(NSCLC)是肺癌最常見的病理學類型,約占肺癌的85%[1],不屬于小細胞肺癌病理學特點的肺癌都可歸為NSCLC。目前臨床上推薦遵循分期治療的原則治療NSCLC,肺癌根治術是Ⅰ期、Ⅱ期和部分ⅢA期NSCLC患者的首選治療方案[2],但部分患者術后易發生復發轉移,產生不良反應。因此,術前準確地評估NSCLC患者肺癌根治術后復發轉移情況具有重要意義。微管解聚蛋白是一種主要存在于細胞質中的磷酸蛋白,可通過磷酸化和去磷酸化作用對細胞微管系統動態平衡發揮調節作用,參與腫瘤細胞的惡性增殖與分化過程[3],與胃腸道間質瘤[4]、食管鱗狀細胞癌[5]等的發生與發展有關。微管解聚蛋白已被證實在NSCLC組織中異常表達,與多項臨床病理特征有關[6]。殼多糖酶3樣蛋白1(CHI3L1)屬于糖基水解酶18家族成員,是一種分泌型糖蛋白,參與血管內皮細胞遷移、生長、增殖及組織重塑過程[7],參與膠質瘤[8]、甲狀腺乳頭狀癌[9]等多種腫瘤細胞的生長、增殖過程,其在NSCLC組織中異常表達[10]。本研究擬探究微管解聚蛋白、CHI3L1與NSCLC患者肺癌根治術后復發轉移的關系,以期為NSCLC的臨床治療提供參考依據,現報道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2017年1月至2020年1月在延安大學咸陽醫院進行肺癌根治術治療的153例NSCLC患者作為研究對象。其中男97例,女56例;年齡39～78歲,平均(53.78±9.28)歲;有吸煙史64例,有飲酒史57例;病理類型:腺癌83例,鱗癌58例,其他12例;腫瘤最大徑:<5 cm 81例,≥5 cm 72例;TNM分期:Ⅰ期49例,Ⅱ期72例,ⅢA期32例;分化程度:中、高分化共90例,低分化63例;有淋巴結轉移41例,無淋巴結轉移112例;術前糖類抗原125(CA125)為58.74～138.57 U/mL,平均(77.28±17.48)U/mL;輔助化療:有126例,無27例;腫瘤位置:右肺69例,左肺60例,雙側24例。納入標準:(1)符合文獻[11]中NSCLC的診斷標準,且經病理學檢查確診;(2)術前TNM分期[12]為Ⅰ期、Ⅱ期、ⅢA期的NSCLC患者;(3)符合肺癌根治術適應證,術前影像學檢查未發現有遠處轉移征象,均在延安大學咸陽醫院完整進行根治術治療;(4)術前未接受任何抗腫瘤治療;(5)臨床資料完整,依從性良好。排除標準:(1)合并其他惡性腫瘤者;(2)合并心、肝、腎等重要臟器功能不全者;(3)合并自身免疫性疾病、血液系統疾病者;(4)失訪病例。所有患者及家屬均知情同意并簽署知情同意書,且本研究通過延安大學咸陽醫院醫學倫理委員會審核批準(YDXY-KY-2016-392)。

1.2方法

1.2.1檢測血清微管解聚蛋白、CHI3L1水平 采集所有患者入院后空腹靜脈血5 mL,3 000 r/min離心15 min,離心半徑10 cm,分離血清后保存于-80 ℃冰箱中備用。采用酶聯免疫吸附試驗(ELISA)檢測血清微管解聚蛋白、CHI3L1水平。Human 微管解聚蛋白1 ELISA檢測試劑盒(規格:96T,貨號:BLL-R6772E)購于上海研生實業有限公司,Chitinase-3-like Protein 1 (YKL-40/CHI3L1)ELISA試劑盒(規格:96T,貨號:YB72109)購于上海鈺博生物科技有限公司,所有操作均嚴格按照試劑盒說明書進行。

1.2.2治療方法 本研究中所有患者均由經驗豐富的?？漆t生評估接受肺癌根治術的可行性,根據腫瘤進展程度與患者的身體功能狀況選擇手術方式,以解剖性肺切除術為標準術式,手術路徑以微創手術為主,開胸手術為輔。淋巴結清掃標準:常規至少整塊清除或系統采樣3組縱隔淋巴結,至少清掃或采樣縱隔+肺內共12枚淋巴結。術后輔助化療:對于ⅠA期NSCLC患者肺癌根治術后可不進行輔助化療,ⅠB期NSCLC患者術后經多學科評估輔助化療的益處與風險,根據評估結果決定是否進行輔助化療,若存在脈管侵犯、低分化腫瘤、臟層胸膜侵犯等高風險因素則術后需進行輔助化療;ⅠC期、Ⅱ期、Ⅲ期NSCLC患者術后給予以鉑類為基礎的方案進行輔助化療。

1.2.3隨訪與復發、轉移評價標準 患者出院后隨訪3年,隨訪終止時間為患者死亡或隨訪期滿。隨訪方式:電話隨訪和門診復查。隨訪內容:癥狀、體征、X線片檢查等,若不能確定復發或轉移,做PET-CT檢查進一步核實。隨訪頻率:電話隨訪每月1次;門診復查出院后第1年每3個月1次,第2、3年每6個月1次。復發評價標準:隨訪期間同側肺、支氣管殘端或區域淋巴結出現腫瘤。轉移評價標準:隨訪期間發現腫瘤轉移至原病灶位置另一側胸腔或其他部位器官,包括另一側腎上腺、肺部、骨、腦、頸部淋巴結與肝臟等[13]。將復發和(或)轉移的患者納入復發轉移組,未復發和未轉移的患者納入未復發轉移組。

2 結 果

2.1兩組納入情況及一般資料、血清微管解聚蛋白、CHI3L1水平比較 復發轉移組49例,復發轉移發生率為32.03%(49/153);未復發轉移組104例,未發生復發轉移率為67.97%(104/153)。復發轉移組腫瘤最大徑≥5 cm患者比例、TNM分期為ⅢA期患者比例、分化程度為低分化患者比例、有淋巴結轉移患者比例、術后無輔助化療患者比例、CA125水平、血清微管解聚蛋白水平、血清CHI3L1水平均高于未復發轉移組,差異均有統計學意義(P<0.05)。兩組性別、年齡、吸煙史、飲酒史、病理類型、腫瘤位置比較,差異均無統計學意義(P>0.05)。見表1。

表1 兩組納入情況及一般資料、血清微管解聚蛋白、CHI3L1水平比較[n(%)或

2.2NSCLC患者肺癌根治術后復發轉移影響因素的多因素Logistic回歸分析 以NSCLC患者肺癌根治術后隨訪期間是否復發轉移為因變量(賦值:未復發轉移=0,復發轉移=1),以腫瘤最大徑(賦值:<5 cm=0,≥5 cm=1)、術后輔助化療(賦值:無=0,有=1)、TNM分期(賦值:Ⅰ、Ⅱ期=0,ⅢA期=1)、分化程度(賦值:中、高分化=0,低分化=1)、淋巴結轉移(賦值:無=0,有=1)、CA125水平(賦值:連續變量原值錄入)、微管解聚蛋白水平(賦值:連續變量原值錄入)、CHI3L1水平(賦值:連續變量原值錄入)為自變量進行多因素Logistic回歸分析(采用逐步后退法,α進=0.05、α退=0.10,腫瘤最大徑、術后輔助化療、分化程度及CA125水平4項變量被自動剔除),結果顯示,TNM分期為ⅢA期、有淋巴結轉移、微管解聚蛋白水平升高、CHI3L1水平升高是NSCLC患者肺癌根治術后復發轉移的獨立危險因素(P<0.05)。見表2。

表2 NSCLC患者肺癌根治術后復發轉移的多因素Logistic回歸分析

2.3血清微管解聚蛋白、CHI3L1對NSCLC患者肺癌根治術后復發轉移的預測價值 以微管解聚蛋白、CHI3L1建立聯合應用的預測模型Ln(P/1-P)=1.848×X微管解聚蛋白+0.052×XCHI3L1進行ROC曲線分析,結果顯示,血清微管解聚蛋白、CHI3L1及2項指標聯合檢測預測NSCLC患者肺癌根治術后復發轉移的曲線下面積(AUC)分別為0.841、0.763和0.918,2項指標聯合檢測的預測價值優于2項指標單獨檢測(P<0.05)。見表3、圖1。

圖1 血清微管解聚蛋白、CHI3L1及2項指標聯合檢測預測NSCLC患者根治術后復發轉移的ROC曲線

表3 血清微管解聚蛋白、CHI3L1對NSCLC患者肺癌根治術后復發轉移的預測價值

3 討 論

進行肺癌根治術的早、中期NSCLC患者術后可能發生復發轉移,這是導致臨床治療失敗的主要原因,且發生復發轉移對患者的生命安全威脅極大。本研究中,NSCLC患者肺癌根治術后復發轉移的發生率為32.03%,與文獻[14]報道結果一致,比較復發轉移組與未復發轉移組的臨床資料發現,NSCLC患者肺癌根治術后復發轉移與腫瘤最大徑、TNM分期、分化程度、淋巴結轉移、術后輔助化療及CA125、微管解聚蛋白、CHI3L1水平有關,多因素Logistic回歸分析結果顯示,NSCLC患者TNM分期為ⅢA期、有淋巴結轉移、微管解聚蛋白水平升高、CHI3L1水平升高是NSCLC患者肺癌根治術后復發轉移的獨立危險因素(P<0.05)。TNM分期為ⅢA期、有淋巴結轉移的NSCLC患者腫瘤惡性程度更高,腫瘤細胞的生長、增殖及遷移能力更強,肺癌根治術徹底切除腫瘤組織的難度更大,增加了術后復發轉移的風險[15]。

微管解聚蛋白是一種微管不穩定蛋白,其基因定位于人第1號染色體,具有1個N端“調節”區域和1個C端“作用”區域,是一種高度保守的可溶性蛋白,由149個氨基酸組成,相對分子質量為19×103,具有解聚微管的作用,在細胞分化、組織再生、神經系統發育、惡性腫瘤發生與發展過程中發揮著重要作用[16]。目前微管解聚蛋白已被證實在乳腺癌中呈高表達,且其表達水平與腫瘤的惡性程度有關[17]。本研究結果顯示,復發轉移組血清微管解聚蛋白水平高于未復發轉移組,血清微管解聚蛋白水平升高是NSCLC患者肺癌根治術后復發轉移的獨立危險因素,其參與疾病復發轉移的機制可能是癌細胞中的p53基因誘導癌細胞表達微管解聚蛋白,微管解聚蛋白水平升高引起微管動力學紊亂,導致癌細胞周期失控進而促進癌細胞有絲分裂,使癌細胞的分裂與增殖功能得以維持或強化,增加術后復發轉移的發生風險[18]。

CHI3L1又稱為人類軟骨糖蛋白-39,其基因定位于人1號染色體q32,是一種分泌性糖蛋白,屬于糖基水解酶18家族,但沒有甲殼質酶活性,由383個氨基酸組成,相對分子質量為40×103,主要由中性粒細胞、腫瘤細胞及巨噬細胞等分泌,已被證實與組織重塑、炎癥反應及腫瘤細胞的生長、增殖有密切關系[19]。本研究結果顯示,復發轉移組血清CHI3L1水平高于未復發轉移組,血清CHI3L1水平升高是NSCLC患者肺癌根治術后復發轉移的獨立危險因素。推測其機制可能為:(1)CHI3L1水平升高促進癌細胞發生上皮間質轉化,從而增強腫瘤細胞的遷移及侵襲能力[20],增加術后復發轉移的發生風險;(2)CHI3L1水平升高可引起促血管生長因子的分泌,有利于腫瘤細胞新生血管生成[21],促進腫瘤細胞的生長與增殖,增加術后復發轉移的發生風險;(3)CHI3L1水平升高可通過激活磷脂酰肌醇3激酶或蛋白激酶B或哺乳動物雷帕霉素靶蛋白信號通路,引起NSCLC癌細胞的增殖和轉移[22],增加了術后復發轉移的發生風險。

ROC曲線分析結果顯示,血清微管解聚蛋白、CHI3L1對NSCLC患者肺癌根治術后復發轉移均具有一定的預測價值,2項指標聯合檢測可進一步提高預測效能。NSCLC肺癌根治術后復發轉移受多種因素的影響,2項指標聯合檢測可更全面地反映患者的病情概況,提高預測效能。

綜上所述,血清微管解聚蛋白、CHI3L1聯合檢測對NSCLC患者肺癌根治術后復發轉移具有較高的預測價值,值得臨床推廣應用。