QuEChERS-超高效液相色譜-串聯質譜法快速測定六堡茶中15種農藥殘留

摘 要：建立了QuEChERS-超高效液相色譜-串聯質譜法快速測定六堡茶中15種農藥殘留的方法。樣品經1%乙酸水浸泡，再加乙腈提取，加入無水乙酸鈉和無水硫酸鎂使有機相和水相分層，去除水分，采用PSA、C18、GCB、MgSO4混合凈化管凈化后，以超高效液相色譜-串聯質譜法定性定量分析。結果表明，15種農藥化合物的線性相關系數均大于0.995 9，檢出限為0.02～0.20 mg·kg-1，定量限為0.04～0.40 mg·kg-1，在3個加標回收水平下，平均回收率在63.1%～113.0%，相對標準偏差為0.1%～8.6%。該方法檢測速度快，操作簡單，有較好的靈敏度，適用于六堡茶中農藥殘留的測定。

關鍵詞：QuEChERS；超高效液相色譜-串聯質譜法；農藥殘留；六堡茶

Quick Determination of 15 Pesticide Residues in Liupao Tea by QuEChERS UltraHigh Performance Liquid Chromatography-Tandem Mass Spectrometry

CHEN Maolin， XIAO Jiayin*， DAI Yonghai

（Wuzhou Food and Drug Inspection Institute， Wuzhou 543000， China）

Abstract： A method was developed for the rapid determination of 15 pesticide residues in Liupao tea by QuEChERS-ultra performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry （UPLC-MS/MS）. The samples were soaked in 1% acetic acid water， then extracted with acetonitrile， and anhydrous sodium acetate and anhydrous magnesium sulfate were added to make the organic and aqueous phases stratified， and the water was removed， and the samples were purified by a mixture of purification tubes of PSA， C18， GCB， and MgSO4， and then analyzed by UPLC-MS/MS. The results showed that the linear correlation coefficients of the 15 pesticide compounds were more than

0.995 9， the limits of detection were in the range of 0.02～0.20" mg·kg-1， the limits of quantification were in the range of 0.04～0.40 mg·kg-1， and the average recoveries were in the range of 63.1%～113.0% at three spiked recoveries levels with the relative standard deviations of 0.1%～8.6%. The method is fast， simple and has good sensitivity， and is suitable for the determination of pesticide residues in Liupao tea.

Keywords： QuEChERS; ultra performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry; pesticide residues; Liupao tea

六堡茶富含茶多酚﹑黃酮等營養物質，具有明目清心﹑降低膽固醇等保健功效[1]。在六堡茶的種植過程中，農藥被廣泛使用。目前，我國農藥殘留檢測水平與發達國家相比仍有一定的差距[2]。為確保六堡茶的質量安全，本文擬建立快速、準確檢測六堡茶中農藥殘留的方法，以提高檢測效率[3]。QuEChERS是目前農產品檢測的主流方法，凈化效果好，具有簡便、快速、安全、高效等優點[4]。本文以QuEChERS為凈化手段，采用超高效液相色譜-串聯質譜法（Ultra Performance Liquid Chromatography-Tandem Mass Spectrometry，UPLC-MS/MS）對六堡茶中農藥殘留進行快速篩查和定量分析[5]。

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑

旋渦混合器：上海青浦瀘西儀器廠；LC-1290/QQQ-6470超高效液相色譜質譜聯用儀：安捷倫科技有限公司；Allegra X-15R離心機：美國貝克曼公司；圓周振蕩搖床：IKA公司。

無水硫酸鎂和無水乙酸鈉：四川西隴科學有限公司；乙腈（HPLC級）：OMNICHEM；PSA、GCB和C18：上海安譜實驗科技股份有限公司；涕滅威亞砜、涕滅威砜、氯吡脲、啶蟲脒、涕滅威、苯醚甲環唑、三羥基克百威、克百威、甲基異柳磷、多菌靈、吡蟲啉、水胺硫磷、甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽、嘧菌酯和腈菌唑15種農藥標準品：購自TMstandard公司。

1.2 農藥標準溶液配制

分別精密稱取15種農藥標準品約10.00 mg于15個10 mL容量瓶中，加少量乙腈，超聲溶解，用乙腈定容至刻度，配制成濃度約為1.0 mg·mL-1的15種農藥單標儲備液，儲存于-20 ℃冰箱中。

1.3 試驗方法

1.3.1 提取及凈化

稱取2 g（精度到0.01 g）試樣于50 mL聚丙烯離心管中，加入10 mL 1%乙酸水浸泡10 min，加入15 mL乙腈，置于振蕩搖床振蕩5 min，加入混合鹽包（1.5 g無水乙酸鈉和6 g無水硫酸鎂），立即搖勻，冰浴10 min，冷卻后再振蕩5 min，4 750 r·min-1離心5 min，取上清液3 mL過QuEChERS凈化管（PSA 100 mg，C18 100mg，GCB 30 mg，MgSO4 300 mg）凈化，棄去初濾液，續濾液過0.22 μm有機濾膜，供UPLC-MS/MS測定。

1.3.2 色譜條件

色譜柱：ACE Ultracore Super C18（75 mm×2.1 mm，2.5 μm）；流動相：A為0.1%甲酸水，B為乙腈。梯度洗脫程序：0～0.5 min，5%B；0.5～2.0 min，5%B→80%B；2.0～2.5 min，80%B→90%B；2.5～4.0 min，90%B。后運行時間：1.5 min；流速：0.35 mL·min-1。柱溫：40 ℃。進樣量：1.0 μL。

1.3.3 質譜條件

離子源：AJS ESI+；檢測方式：MRM；霧化器壓力：15 psi；干燥氣溫度：150 ℃；干燥氣流速：

8 L·min-1；毛細管電壓：3 500 V；加速電壓：7 V；鞘氣溫度：350 ℃；鞘氣流速：10 L·min-1；15種農藥質譜參數如表1所示。

2 結果與分析

2.1 線性關系、檢出限與定量限

取1.2中標準儲備液分別采用空白六堡茶基質溶液進行稀釋，配制6個濃度水平的系列混合標準溶液，以峰面積為縱坐標，濃度為橫坐標繪制標準曲線[6]。如表2所示，在相應樣品濃度范圍內，15種農藥的峰面積與其濃度的線性關系良好（R2＞0.995 9）。以定量離子對的信噪比大于3計算方法的檢出限，信噪比大于10計算方法的定量限[7]，各農藥的檢出限為0.02～0.20 mg·kg-1，定量限為0.04～0.40 mg·kg-1。

2.2 回收率與精密度

選取標準系列的1、3、5共3個濃度水平作為加標水平1、加標水平2、加標水平3，對六堡茶空白試樣進行加標回收實驗，每個濃度水平設置6個平行，按上述方法同步進行實驗，測定15種農藥在六堡茶試樣中的平均回收率和相對標準偏差，結果如表2所示。15種農藥在六堡茶中的平均回收率為63.1%～113.0%，相對標準偏差為0.1%～8.6%，可見該方法符合農藥殘留痕量分析的要求[8]。

3 結論

本文通過QuEChERS對六堡茶中農藥殘留進行前處理凈化，用UHPLC-MS/MS檢測[9]，建立測定六堡茶中農藥殘留的方法。結果表明，QuEChERS凈化效果良好，該方法操作簡便、快速、安全、高效，可作為六堡茶中15種農藥殘留的檢測分析方法。

參考文獻

[1]吳平.六堡茶風味輪的構建及解析[J].茶葉，2021，47（2）：89-98.

[2]許禎毅，姜咸彪.茶葉中農藥殘留檢測技術應用進展[J].福建茶葉，2020，42（5）：8-10.

[3]李德光.六堡茶鮮葉中擬除蟲菊酯類農藥殘留的檢測方法[J].科學中國人，2015（3）：40-41.

[4]范興，劉華文，廖璐，等.高效液相色譜—質譜串聯法測定六堡茶農藥殘留[J].廣西職業技術學院學報，2023，16（3）：83-90.

[5]鐘水橋，梁美艷.EMR-Lipid-超高效液相色譜-串聯質譜法快速測定豬肉中多種氨基甲酸酯類農藥殘留量[J].現代食品，2020（6）：170-172.

[6]吳漢彬.QuEChERS-氣相色譜串聯質譜法同時測定茶葉中6種農藥殘留[J].食品與機械，2023，39（6）：55-58.

[7]劉偉悅.超高效液相色譜-串聯質譜法測定茶葉中三種農藥殘留[J].食品工業，2022，43（7）：307-311.

[8]劉相真，葉美君，陸小磊.GC-MS和LC-MSMS法快速測定茶葉中35種農藥殘留[J].中國茶葉加工，2019（3）：48-58.

[9]胡沛然.六堡茶多酚氧化酶及其產生菌對茶葉品質的應用[D].南寧：廣西大學，2019.

作者簡介：陳茂林（1994—），男，廣西梧州人，本科，助理工程師。研究方向：食品、藥品檢測。

通信作者：肖嘉茵（1994—），女，廣西梧州人，本科，工程師。研究方向：食品、藥品檢測。E-mail：931655229@qq.com。