淺析安西牛結(jié)節(jié)病的診斷及預(yù)防措施

徐萬勝

（甘肅省武威市涼州區(qū)黃羊鎮(zhèn)農(nóng)業(yè)技術(shù)服務(wù)中心，甘肅 武威 733000）

隨著中國經(jīng)濟(jì)的蓬勃發(fā)展和飲食結(jié)構(gòu)的調(diào)整，養(yǎng)牛業(yè)逐漸得到迅速發(fā)展，安西牛是我國甘肅省特有的一種優(yōu)良種牛，優(yōu)點(diǎn)較多，生產(chǎn)潛力較大，安西牛養(yǎng)殖模式逐漸轉(zhuǎn)向規(guī)模化，疾病的暴發(fā)率也逐漸升高。牛結(jié)節(jié)病作為一種病毒性傳染性皮膚病，可致使感染牛發(fā)熱、淋巴結(jié)腫大、皮膚水腫以及體表皮膚出現(xiàn)大范圍的瘤狀組織，一旦發(fā)生影響牛的正常生產(chǎn)。在日常飼養(yǎng)管理過程中，應(yīng)重視牛結(jié)節(jié)病的防控工作。由于該病無特效治療藥物，因此，應(yīng)掌握結(jié)節(jié)病的流行特點(diǎn)和診斷方法，并結(jié)合其特點(diǎn)實(shí)施科學(xué)的飼養(yǎng)管理方式，降低該病的發(fā)生率，從而促進(jìn)安西牛養(yǎng)殖業(yè)的經(jīng)濟(jì)效益收入和健康發(fā)展。

1 病原特征

該病的病原為疙瘩皮膚病病毒，屬于痘病毒科、羊痘病毒屬，與羊痘病毒具有相似的形態(tài)特征，具有囊膜，無血凝活性，截至目前分離的病毒株只有一個血清型[1]。該病毒對外界因素具有較強(qiáng)的抵抗力，在正常環(huán)境溫度下存活時間可長達(dá)40 d，若其存在于痂皮中則存活時間更為長久，病變皮膚結(jié)節(jié)在-80℃下可存活10年之久。但其對熱、強(qiáng)酸、強(qiáng)堿較為敏感，氯仿、乙醚、十二烷基硫酸鈉溶液、甲醛、酒精及碘伏等消毒劑可將其殺滅。

2 流行病學(xué)

牛結(jié)節(jié)病又稱牛疙瘩皮膚病，是一種急性、亞急性或慢性傳染病，在2022年農(nóng)業(yè)農(nóng)村部公告表示將牛結(jié)節(jié)性皮膚病由一類動物傳染病調(diào)整為二類動物傳染病，該病呈世界性流行，且不同年齡階段、品種、性別的牛均對該病易感，其中奶牛和亞洲水牛的易感性更高。病牛為主要傳染源，其皮膚結(jié)節(jié)、唾液、乳汁、鼻腔分泌物、精液等均存在病毒，且在恢復(fù)期仍會持續(xù)帶毒，持續(xù)時間約為21 d[2]。該病的主要傳播方式為直接接觸傳播、污染水源、飼料等間接傳播或通過節(jié)肢動物進(jìn)行傳播，由于感染公牛精液中存在病毒，在此時進(jìn)行配種或人工授精將增加疫病的傳播風(fēng)險。該病多呈季節(jié)流行性，多發(fā)于每年夏季，發(fā)病率在同一流行地區(qū)或不同養(yǎng)殖場均具有較大差異，在相同條件下的感染牛群其臨床癥狀表現(xiàn)也具有差異性。

3 臨床癥狀

病牛因健康狀況和傳播媒介狀況的差異，導(dǎo)致其具有不同的臨床癥狀表現(xiàn)。該病具有2～5周的潛伏感染期，發(fā)病初期，病牛體溫可達(dá)41℃，呈稽留熱型，持續(xù)一周左右，隨后出現(xiàn)眼結(jié)膜、口腔黏膜、鼻黏膜發(fā)生潰瘍等一些角膜炎、鼻炎、結(jié)膜炎的典型癥狀。隨著病情的進(jìn)一步發(fā)展，病牛體表淋巴結(jié)腫大，出現(xiàn)大小不一的結(jié)節(jié)，其中腹股溝、頸部、四肢和耳下的癥狀表現(xiàn)較為明顯，四肢腫大尤為明顯，觸摸有明顯痛感反應(yīng)，隨后發(fā)生漿液性壞死，逐漸形成潰瘍和痂皮，痂皮經(jīng)長時間摩擦脫落后可形成空洞。病情較為嚴(yán)重的牛其頰部及牙床上發(fā)生肉芽性腫脹，發(fā)生滑膜炎和腱鞘炎而表現(xiàn)跛行，并可發(fā)生原發(fā)性或繼發(fā)性肺炎，容易發(fā)生死亡。妊娠母牛感染發(fā)病后可導(dǎo)致流產(chǎn)以及并發(fā)子宮內(nèi)膜炎，發(fā)病公牛出現(xiàn)睪丸炎、短暫或永久性不育，泌乳牛感染發(fā)病后其產(chǎn)奶量發(fā)生急劇下降，甚至失去泌乳能力。

4 病理變化

對病死牛進(jìn)行尸體剖檢，皮下組織有灰紅色漿液浸潤，明顯可見其體表肌肉、咽、氣管、肺臟、支氣管、瘤胃、皺胃甚至腎臟表面黏膜發(fā)生顯著的結(jié)節(jié)樣病變。結(jié)節(jié)處皮膚、皮下組織和肌肉組織發(fā)生充血、出血、水腫及壞死等癥狀并可見紅黃色的漿液性或出血性滲出液，同時發(fā)生明顯的炎癥反應(yīng)。結(jié)節(jié)腔內(nèi)有干酪樣的灰白色壞死組織，偶爾可見周圍充血紅腫，結(jié)節(jié)可深入皮下組織甚至骨骼。體表淋巴結(jié)發(fā)生增生性腫大、充血和出血癥狀，真皮以及皮下組織血管淋巴結(jié)處形成栓塞，其消化道和呼吸道黏膜可發(fā)生不同程度的潰瘍，病牛癥狀嚴(yán)重時其肺小葉發(fā)生膨脹，縱隔淋巴結(jié)發(fā)生感染，關(guān)節(jié)液內(nèi)可見纖維蛋白滲出物。組織病理學(xué)檢查可見其表皮脂腺細(xì)胞發(fā)生明顯腫脹，胞質(zhì)內(nèi)含有空泡，胞漿中有卵圓形或者圓形的包涵體[3]。

5 診斷

可根據(jù)該病的流行特點(diǎn)、臨床癥狀表現(xiàn)和病理變化進(jìn)行初步診斷，同時注意與偽牛痘、貝諾蟲病、蠕蟲病、昆蟲叮咬等混淆性疾病的鑒別診斷。牛結(jié)節(jié)病作為二類動物疫病，在進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室檢測時應(yīng)有相應(yīng)的限制條件，如需透射電鏡和PCR儀器等專業(yè)檢測儀器，以及實(shí)驗(yàn)室應(yīng)具備病原學(xué)、血清學(xué)和分子生物學(xué)檢測相應(yīng)的儀器設(shè)備和專業(yè)條件，然后才可進(jìn)行病毒的分離、中和試驗(yàn)或PCR檢測等，實(shí)現(xiàn)進(jìn)一步確診。

5.1 病毒鏡檢

透射電鏡診斷是直接快速的確診方法。將病料研磨制成懸液，然后滴于蠟板上，間隔60 s后滴加Tris-EDTA緩沖液，靜置20 s后滴加1%磷鎢酸，自然干燥后進(jìn)行鏡檢，可發(fā)現(xiàn)病毒形狀為短管狀或者磚塊狀，大小約為270 nm × 290 nm[4]。

5.2 動物試驗(yàn)

采集病牛的新鮮皮膚結(jié)節(jié)并制作成乳劑，皮內(nèi)或皮下接種于易感牛，一周左右后可觀察到接種部位淋巴結(jié)腫大、局部堅硬腫脹，可在腫脹物或唾液中分離出牛疙瘩皮膚病病毒，該病毒常用牛或山羊的原代和傳代細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)。

5.3 血清學(xué)試驗(yàn)

病毒中和試驗(yàn)為常用且有效的經(jīng)典方法，但由于該病毒主要引起細(xì)胞免疫，因此對于再次感染或者中和抗體水平較低的病牛較難確診。在牛感染發(fā)病后一周，機(jī)體并未產(chǎn)生相應(yīng)的中和抗體又表現(xiàn)臨床癥狀，此時采集的病料方可進(jìn)行ELISA方法檢測。在使用熒光抗體技術(shù)進(jìn)行診斷時應(yīng)注意該病抗體與其他痘病毒引起的相似疾病之間存在的交叉反應(yīng)[5]。

5.4 PCR鑒定

該鑒定方法靈敏快速、成本較低，可將采集病料進(jìn)行相應(yīng)處理后進(jìn)行病毒基因組的提取，通過特異性PCR擴(kuò)增可快速對牛結(jié)節(jié)病進(jìn)行鑒定。

6 預(yù)防措施

6.1 科學(xué)選擇消毒劑，嚴(yán)格執(zhí)行消毒措施

在養(yǎng)殖過程中應(yīng)建立完善的消毒工作制度，包括日常預(yù)防性消毒措施和發(fā)病應(yīng)急性消毒措施，確保落實(shí)生物安全工作。根據(jù)牛疙瘩皮膚病病毒的特性，科學(xué)選擇對其較為敏感的強(qiáng)酸強(qiáng)堿、醛類或含脂溶劑的消毒藥物[6]，進(jìn)行環(huán)境消毒滅源工作。（1）加強(qiáng)日常預(yù)防性消毒工作，首先可以使用過硫酸氫鉀復(fù)合物粉進(jìn)行養(yǎng)殖環(huán)境的整體噴霧消毒，在此過程中應(yīng)注意墻壁、飼養(yǎng)設(shè)備的消毒，其次在養(yǎng)殖場各入口處設(shè)置消毒池、消毒間和消毒盆，最后加強(qiáng)對進(jìn)入養(yǎng)殖場車輛物資進(jìn)行噴霧、浸泡或擦拭消毒。（2）嚴(yán)格執(zhí)行發(fā)病后消毒工作，養(yǎng)殖場發(fā)生牛結(jié)節(jié)病后應(yīng)立即進(jìn)行消毒，及時切斷病毒的擴(kuò)散。首先，針對全場養(yǎng)殖環(huán)境，可配合使用3%次氯酸鈉、戊二醛進(jìn)行噴霧消毒，牛舍地面可間隔使用漂白粉與0.1%戊二醛癸甲溴銨溶液，采取熏蒸或者火焰方式進(jìn)行金屬設(shè)施的消毒，各入口消毒池內(nèi)可放入2%燒堿溶液；其次，針對病牛和隔離區(qū)，可使用苯扎溴銨等季銨鹽類消毒劑進(jìn)行環(huán)境消毒，同時使用1%過硫酸氫鉀溶液進(jìn)行帶牛噴霧消毒，病牛體表分泌物應(yīng)及時清理，尸體采取嚴(yán)格的無害化處理方式，疫情暴發(fā)期間，養(yǎng)殖場每周需至少進(jìn)行3次消毒工作。

6.2 加強(qiáng)蚊蠅防控，定期進(jìn)行驅(qū)蟲工作

牛結(jié)節(jié)病可通過節(jié)肢動物進(jìn)行傳播，因此在養(yǎng)殖過程中應(yīng)加強(qiáng)昆蟲、蚊蠅的防控工作。首先必須及時清理牛舍內(nèi)糞便，進(jìn)行堆積密封發(fā)酵處理，以及清除場內(nèi)及周邊雜草，防止蚊蠅的滋生，牛舍內(nèi)安裝防罩網(wǎng)以及黑光燈，進(jìn)行蚊蠅的誘殺，在吸血蟲媒介活躍的季節(jié)嚴(yán)格執(zhí)行定期驅(qū)蟲計劃，殺滅蜱蠓等蟲媒媒介。

6.3 及時隔離治療，控制病毒傳播

在日常檢疫過程中，若發(fā)現(xiàn)牛結(jié)節(jié)病后應(yīng)將疫情狀況報告于畜牧獸醫(yī)主管部門，然后進(jìn)行隔離和對癥治療。目前針對病牛并無特異性療法，針對破潰結(jié)節(jié)可使用外科方法進(jìn)行徹底清創(chuàng)，然后注入抗菌消炎藥物或0.1%高錳酸鉀溶液進(jìn)行沖洗，并涂抹碘甘油，然后全身使用磺胺類藥物防治繼發(fā)性感染[7]，同時嚴(yán)格執(zhí)行相應(yīng)消毒措施。及時淘汰無治療價值病牛并嚴(yán)格按照無害化處理措施進(jìn)行尸體銷毀，嚴(yán)格禁止病牛銷售貿(mào)易行為。

6.4 科學(xué)接種疫苗，提高機(jī)體抵抗力

我國農(nóng)業(yè)農(nóng)村部明確指出接種山羊痘活疫苗，牛產(chǎn)生較強(qiáng)的細(xì)胞免疫水平，一定程度上可預(yù)防牛結(jié)節(jié)病的感染和傳播，但其存在一定的安全問題，且有概率發(fā)生再次感染，在不發(fā)生該病的地區(qū)并不推薦接種弱毒疫苗。目前該病毒的雞胚化弱毒疫苗為常用接種疫苗，牛接種免疫后可產(chǎn)生良好的免疫保護(hù)作用，新生犢牛可通過初乳獲得母源抗體，進(jìn)而可獲得半年的免疫保護(hù)力。耐過本病的牛在恢復(fù)后可存在較高滴度的中和抗體，并且可以維持?jǐn)?shù)年之久。

6.5 加強(qiáng)飼養(yǎng)管理，全面凈化污染源

首先保證牛群處于一個舒適的養(yǎng)殖環(huán)境，做好通風(fēng)干燥和防寒保暖工作，嚴(yán)格按照不同生長階段進(jìn)行科學(xué)飼養(yǎng)，同時可采用藥物預(yù)防措施，在飼料或飲水中添加黃芪多糖、復(fù)合維生素等添加劑，從而提高牛群自身的免疫能力。養(yǎng)殖戶應(yīng)當(dāng)堅持自繁自育，盡量避免引種，如若必須進(jìn)行引種，應(yīng)做好疫情調(diào)查工作，避免從疾病高風(fēng)險地區(qū)引進(jìn)，實(shí)行全進(jìn)全出養(yǎng)殖管理方案，嚴(yán)格按照引進(jìn)程序執(zhí)行隔離飼養(yǎng)觀察，做好安西牛的進(jìn)出檢疫監(jiān)管，強(qiáng)化調(diào)運(yùn)過程中疫病防控工作，嚴(yán)禁病牛銷售，減少疾病擴(kuò)散。

7 結(jié)語

牛結(jié)節(jié)病對于安西牛養(yǎng)殖具有較大的危害性，其具有強(qiáng)烈的傳染性，嚴(yán)重時可導(dǎo)致病牛死亡。若疫情暴發(fā)較為嚴(yán)重時，需要獸醫(yī)主管部門劃定相應(yīng)疫點(diǎn)、疫區(qū)、受威脅區(qū)，并組織采取隔離撲殺、銷毀消毒、無害化處理等各種嚴(yán)格防疫措施。由于該病無特異性治療藥物，因此養(yǎng)殖場應(yīng)重視日常防控工作，科學(xué)選擇敏感消毒劑進(jìn)行消殺滅原，定期檢疫監(jiān)管及時隔離對癥治療，結(jié)合該病的發(fā)病規(guī)律和流行特點(diǎn)，對其進(jìn)行有效控制，保護(hù)安西牛種質(zhì)資源，促進(jìn)安西牛養(yǎng)殖業(yè)的健康發(fā)展。