PIVKA-Ⅱ、GGT、GPR、GLR、PLR對乙型肝炎相關性原發性肝癌的診斷價值研究

黃 琴 彭曉明 梅麗萍 韓豎霞△

1. 湖北省中醫院檢驗科 (湖北 武漢, 430061) 2.湖北省中醫藥研究院 3.中醫肝腎研究及應用湖北省重點實驗室

原發性肝癌(PHC)是我國常見的惡性腫瘤之一,PHC起病隱匿,早期的臨床癥狀特異性不強,且發展迅速,因此PHC的早期發現具有重要意義[1]。在我國,PHC的主要病因是乙型肝炎病毒(HBV)感染[2]。HBV感染誘導的肝細胞損傷及炎癥壞死是進展為乙型肝炎相關性肝硬化(HBV-LC)乃至原發性肝癌(HBC-HCC)的重要因素[3]。目前,在早期肝癌篩查中,維生素K缺乏或拮抗劑-Ⅱ誘導蛋白(PIVKA-Ⅱ)是診斷肝癌的重要指標,具有較高的特異性[4];γ-谷氨酰轉肽酶(GGT)水平的高低可以反映肝細胞損傷的程度。作為血常規中的兩個常規參數,血小板計數(PLT)與腫瘤的生長和轉移有密切關系,淋巴細胞計數(LY)在腫瘤特異性免疫應答中起著重要的作用[5]。研究報道GGT與PLT比值(GGT/PLT,GPR)是肝癌的一個獨立預測因子[6]。GGT與LY比值(GGT/LY,GLR)在肝癌患者中可以預測微血管侵犯的發生及預后[7]。高PLT與LY比值(PLR)是預測肝癌患者預后較差的獨立危險因素[5]。本研究旨在探討PIVKA-Ⅱ、GGT、GPR、GLR、PLR在 HBV 感染后所致不同肝臟疾病患者中的變化情況以及單獨和聯合檢測對HBV-HCC的診斷價值。

1 資料與方法

1.1 研究對象 收集2020年1月至2022年12月收治的241例HBV相關性肝病患者的臨床資料,其中慢性乙型肝炎(CHB)患者83例, HBV-LC患者82例, HBV-HCC患者76例。另將同期在本院體檢中心體檢的81例健康人員作為正常對照組(NC組)。CHB組83例中男 62例,女21例,平均年齡(54.46±7.80)歲;HBV-LC組82例中男61例,女21 例,平均年齡(55.43±10.34)歲;HBV-HCC組76例中男58例,女18例,平均年齡(55.83±8.70)歲;NC組81例中男60例,女21例,平均年齡(54.04±6.26)歲。4 組研究對象的性別、年齡均差異無統計學意義(P>0.05) 。

1.2 診斷標準 CHB、HBV-LC診斷符合2019 年《CHB防治指南》中的相關標準[3]。HBV-HCC診斷參照2022年《HCC診療指南》中的相關標準[8]。

1.3 納入及排除標準 納入標準:①均為HBV感染的相關肝病患者;②年齡18～78歲。排除標準:①合并其他嗜肝病毒及HIV感染者;②伴有心、腎、肺、血液、代謝及胃腸道嚴重疾病者;③孕婦或哺乳期婦女;④過敏體質或對多種藥物過敏者[2]。

1.4 研究方法 采用G2100分析儀(日本富士瑞必歐株式會社)及其配套試劑對血清PIVKA-Ⅱ進行測定;采用AU5800全自動生化分析儀(美國貝克曼庫爾特公司)測定血清GGT;采用Unicel DXH800全自動細胞分析儀(美國貝克曼庫爾特公司)進行血液分析的各項指標測定。PIVKA-Ⅱ的生物參考區間為0～40 mAU/ml,GGT的生物參考區間10～60 U/L(男)、7～45 U/L(女)。陽性標準均為檢測結果高于正常參考區間上限值。收集各組人員的PLT、LY,計算GPR、PLR、GLR[9]。

1.5 統計學方法 應用GraphPad Prism 9軟件對數據進行正態性檢驗,不服從正態分布,采用中位數(四分位數)[M(P25,P75)]表示,組間比較采用非參數Kruskal-WallisH及Mann-WhitneyU檢驗;相關分析采用Spearman相關系數分析;利用二元Logistic回歸分析構建PIVKA-Ⅱ、GGT、GLR、GPR聯合診斷HBV-HCC的模型。采用MedCalc軟件繪制受試者工作特征(ROC)曲線,計算曲線下面積(AUC)。P<0.05表示差異有統計學意義。

2 結果

2.1 各組血清PIVKA-Ⅱ、GGT以及GLR、GPR、PLR水平比較CHB組、HBV-LC組、HBV-HCC組的PIVKA-Ⅱ、GGT、GLR、GPR水平依次增加,其中兩兩組比較,GGT、GLR、GPR水平差異均有統計學意義(P<0.05),HBV-HCC組的PIVKA-Ⅱ水平高于CHB組、HBV-LC組(P<0.05)。CHB組、HBV-LC組的PIVKA-Ⅱ、PLR水平均低于NC組(P<0.05)。見表1。

表1 4組血清PIVKA-Ⅱ、GGT以及GLR、GPR、PLR水平比較 [M(P25,P75)]

2.2 各組血清PIVKA-Ⅱ、GGT陽性情況比較 HBV-HCC組血清PIVKA-Ⅱ、GGT陽性率都大于50%。見表2。

表2 4組血清PIVKA-Ⅱ、GGT陽性情況比較 [例(%)]

2.3 HBV-HCC組患者的GLR、GPR、PLR與血清PIVKA-Ⅱ、GGT指標的相關性分析 HBV-HCC組患者的GLR、GPR、PLR與血清PIVKA-Ⅱ、GGT呈正相關性;其中,GLR與GGT的相關系數最高(r=0.913),PLR與PIVKA-Ⅱ的相關系數最低(r=0.122)。見表3。

表3 HBV-HCC組患者的GLR、GPR、PLR與血清PIVKA-Ⅱ、GGT的相關性分析

2.4 PIVKA-Ⅱ、GGT、GLR、GPR、PLR單獨與聯合檢測對HBV-HCC的診斷價值 PIVKA-Ⅱ、GGT、GLR、GPR聯合檢測的診斷敏感度、AUC以及Youden指數均高于PIVKA-Ⅱ、GGT、GLR、GPR、PLR單獨檢測,GGT、GLR、GPR三者聯合檢測的特異度達到95.06%。見表4。

表4 PIVKA-Ⅱ、GGT、GLR、GPR、PLR單獨與聯合檢測對HBV-HCC的診斷價值

3 討論

目前,我國一般人群乙型肝炎表面抗原(HBsAg)流行率為5%～6%,慢性HBV感染者約7 000萬例,HBV感染原發性肝癌病死率為38%,臨床對于HBV-HCC的早發現、早治療對于肝癌患者生存時間的延長和生活質量的提高具有重要意義[10]。當前,病理學、影像學和實驗室檢查為臨床診斷HBV-HCC的主要方法。病理檢查雖然為金標準,但它是一種有創性檢查。影像學檢查常有一定的滯后性和主觀性,易發生偏倚,其對于早期肝癌的診斷敏感度低,結節性肝硬化診斷易出現假陽性,不適用于大量的早期篩查。臨床實驗室檢查采用最小創傷性的方式對患者的血液做一些相關指標的檢查和分析。甲胎蛋白(AFP)是應用最廣泛的肝癌血清標志物,但診斷敏感度僅為55%～65 %,診斷效果仍不理想[11]。PIVKA-Ⅱ是一種無凝血活性的異常的凝血酶原。凝血酶原前體轉變為凝血酶原依賴維生素K,肝癌患者因肝細胞病變合成異常凝血酶原[12]。近年來許多研究表明PIVKA-Ⅱ診斷肝癌具有很高的特異性,肝癌診療指南中也指出將其作為肝癌早期診斷標志物,特別是針對血清AFP陰性人群[8,13-15]。本研究結果顯示,HBV-HCC組的PIVKA-Ⅱ水平高于CHB組、HBV-LC組(P<0.05),HBV-HCC組陽性率大于50%,診斷特異性為97.53%。GGT也主要來源于肝臟,用于肝功能的監測和評估。肝硬化、肝癌患者肝臟功能受損,代謝能力減弱,導致GGT水平增高。研究表明GGT可以聯合PIVKA-Ⅱ提高肝癌的檢出率[16]。PLT和LY是血常規中的常規監測指標,其在HBV-HCC的發生發展中也發揮巨大作用。PLT可釋放5-羥色胺誘導血管的生成及肝細胞的再生,加速肝硬化進程,從而誘發HBV-HCC[17]。腫瘤免疫中的淋巴細胞以T細胞為主,通過識別腫瘤細胞分泌的可溶性抗原,激活免疫細胞,或者通過直接的細胞毒性作用,發揮抗腫瘤效應[18,19]。據報道,GLR、GPR、PLR這三個指標作為新的炎癥因子,是肝癌的預測、發展和預后監測中的重要指標[5-7]。本研究表明CHB組、HBV-LC組、HBV-HCC組的GLR、GPR水平依次增加,其中組間兩兩比較,GLR、GPR水平差異均有統計學意義(P<0.05),CHB組、HBV-LC組的PLR水平均低于NC組(P<0.05)。通過相關性分析,HBV-HCC組患者的GLR、GPR、PLR與血清PIVKA-Ⅱ、GGT呈正相關性,GLR與GGT的相關性系數最高為0.913,PLR與PIVKA-Ⅱ的相關性系數最低為0.122。GLR、GPR、PLR三者對于HBV-HCC的診斷特異度均大于85%,靈敏度分別為68.42%、76.32%、36.84%,其中PLR的Youden指數為0.233,雖然PLR對HBV-HCC的診斷具有一定的特異度,但是綜合評估其診斷價值偏低。

為了提高HBV-HCC的診斷準確度,本研究采用 PIVKA-Ⅱ、GGT、GLR、GPR聯合檢測診斷HBV-HCC。結果顯示,GGT、GLR、GPR三者聯合診斷HBV-HCC的AUC為0.909,特異度為95.06%;PIVKA-Ⅱ、GGT、GLR、GPR四者聯合診斷HBV-HCC的AUC為0.934,靈敏度提高至89.47%。表明聯合檢測為提高HBV-HCC診斷的有效方法。同時,由于GGT,PLT和LY是常規的檢測參數,相比于PIVKA-Ⅱ檢測費用較低,操作簡單,可以廣泛用于HBV感染后肝臟疾病發展的基層醫院監測。綜上所述,PIVKA-Ⅱ、GGT、GLR、GPR的聯合檢測有助于HBV-HCC的早期診斷。