血清Klotho 蛋白、AngⅡ與2 型糖尿病腎病病情進展的相關性

唐春霞，王維

無錫人民醫(yī)院特需科，江蘇無錫 214023

糖尿病腎病經過不同途徑、機制對腎臟造成損害，導致腎臟發(fā)生不同的病理改變，是造成糖尿病患者死亡的主要原因[1-2]。研究顯示，血管緊張素Ⅱ（AngiotensinⅡ, AngⅡ）在糖尿病腎病的發(fā)病過程中具有關鍵意義[3]。血清Klotho 蛋白主要在腎小管上皮細胞中表達，腎臟損傷早期，血清Klotho 蛋白水平較低，可作為早期腎損傷的標志物[4]。目前關于糖尿病腎病病情進展程度與血清Klotho 蛋白及AngⅡ的相關性研究較少。鑒于此，本研究選取2018 年5 月—2019 年10 月無錫人民醫(yī)院確診為糖尿病腎病的104 例患者和同期56 名健康志愿者為研究對象，分析血清Klotho 蛋白及AngⅡ表達情況，以及上述指標與糖尿病腎病病情進展之間的關系，旨在為糖尿病腎病的治療及預防提供新的靶點，控制疾病進展。現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取本院收治的104 例2 型糖尿病腎病患者和56 例健康志愿者為研究對象。糖尿病腎病患者（Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ組）中男73 例，女31 例；年齡43～79 歲，平均（55.02±6.85）歲。健康志愿者（對照組）中女21例，男35 例；年齡25～80 歲，平均（45.113±7.95）歲。糖尿病腎病組與對照組一般資料比較，差異無統(tǒng)計學意義（P均＞0.05），具有可比性。且研究通過本院醫(yī)學倫理委員會審核。

1.2 納入與排除標準

納入標準：①符合2 型糖尿病腎病的診斷標準[5]；②病歷資料齊全；③患者、家屬均知情同意，并簽署知情同意書。

排除標準：①非糖尿病所致腎臟損害者；②伴隨其他內分泌疾病者，如腎上腺、甲狀腺、腦垂體等；③處于哺乳期或妊娠期的女性；④伴結核、腫瘤等患者；⑤處于應激狀態(tài)者，如低血糖或高滲昏迷、創(chuàng)傷、手術等。

1.3 方法

根據(jù)HE 染色、PAS 染色、銀染及Masson 等光學顯微鏡下的染色，再結合電鏡結果進行糖尿病腎病病理分期，并按病理分期分為Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ組，其中Ⅱ期（Ⅱ組，出現(xiàn)系膜擴張，＞25%所見系膜區(qū)）36 例，Ⅲ期（Ⅲ組，出現(xiàn)Kimmelstiel-Wilson 結節(jié)）38 例，Ⅳ期（Ⅳ組，嚴重腎小球硬化，即＞50%腎小球硬化）30例。采用酶聯(lián)免疫吸附法（Enzyme-Linked Immunosorbent Assay, ELISA）檢測血清Klotho 蛋白水平，放射免疫法檢測AngⅡ水平，所有試劑盒均購自北京北方生物技術研究所，操作按照試劑盒使用說明書進行。

1.4 觀察指標

對比不同受試者血清Klotho 蛋白、AngⅡ表達情況，采用Pearson 相關性檢驗分析糖尿病腎病病情進程與血清Klotho 蛋白、AngⅡ之間的相關性。

1.5 統(tǒng)計方法

應用SPSS 20.0 統(tǒng)計學軟件處理數(shù)據(jù)，血清Klotho 蛋白、AngⅡ表達水平為計量資料，符合正態(tài)分布，以(±s)表示，多組間比較采用單因素方差分析檢驗，P＜0.05 為差異有統(tǒng)計學意義；采用Pearson分析法進行相關性分析。

2 結果

2.1 各組血清Klotho 蛋白、AngⅡ表達水平比較

糖尿病腎病各組血清Klotho 蛋白水平較對照組明顯下降，糖尿病腎病Ⅳ組低于糖尿病腎病Ⅲ期組和糖尿病腎病Ⅱ組，糖尿病腎病Ⅲ期組低于糖尿病腎病Ⅱ組，差異有統(tǒng)計學意義（P均＜0.05）。糖尿病腎病各組AngⅡ表達水平較健康對照組升高，糖尿病腎病Ⅳ期組高于糖尿病腎病Ⅲ期組和糖尿病腎病Ⅱ組，糖尿病腎病Ⅲ組高于糖尿病腎病Ⅱ組，差異有統(tǒng)計學意義（P均＜0.05）。見表1。

表1 各組血清Klotho 蛋白、AngⅡ表達水平比較[（±s），pg/mL]

表1 各組血清Klotho 蛋白、AngⅡ表達水平比較[（±s），pg/mL]

注：AngⅡ：血管緊張素Ⅱ；與對照組比較，aP＜0.05；與糖尿病腎病Ⅱ組比較，bP＜0.05；與糖尿病腎病Ⅲ組比較，cP＜0.05。

AngⅡ組別血清Klotho 蛋白41.56±10.32（46.52±11.85）a（51.23±12.94）ab（56.45±13.75）abc 8.906＜0.001對照組（n=56）糖尿病腎病Ⅱ組（n=36）糖尿病腎病Ⅲ組（n=38）糖尿病腎病Ⅳ組（n=30）F 值P 值758.23±220.12（730.12±200.45）a（505.45±185.23）ab（400.12±150.12）abc 27.318＜0.001

2.2 血清Klotho 蛋白、AngⅡ表達與糖尿病腎病病情進展的相關性分析

結果顯示，血清Klotho 蛋白水平與糖尿病腎病病情進展呈負相關，血清AngⅡ表達與糖尿病腎病病情進展呈正相關（P均＜0.05）。見表2。

表2 糖尿病腎病損害情況與血清Klotho 蛋白、AngⅡ表達相關性

3 討論

糖尿病腎病是糖尿病的嚴重并發(fā)癥之一，目前對于其發(fā)病機制尚不完全清楚，治療上只能減慢其進展，不能阻止或逆轉病情發(fā)生[6]。臨床上如能尋找到新的診療靶點，及時診斷并治療，可為控制病情進展以及臨床治療爭取更多時間。糖尿病腎病的發(fā)病機制較為復雜，但已有研究表明被激活的炎癥因子及氧化應激介質引發(fā)的腎臟炎癥反應可導致腎小球硬化、腎小管萎縮及腎間質持續(xù)進展性纖維化，上述過程與糖尿病腎病的發(fā)展有緊密相關性。

本研究結果顯示，與對照組相比，糖尿病腎病各組血清Klotho 蛋白下降（P＜0.05），隨著糖尿病腎病病情進展，血清Klotho 蛋白水平呈下降趨勢，Pearson 分析顯示Klotho 蛋白水平與病情進展呈負相關。表明血清Klotho 蛋白與糖尿病腎病患者病情進展密切相關。在田浩等[7]研究中，慢性腎臟病患者中血清Klotho 蛋白水平明顯降低，Ⅰ～Ⅱ期患者血清Klotho 蛋白水平為（4.51±0.57）ng/mL，Ⅲ～Ⅳ期為（3.43±0.64）ng/mL，Ⅴ期為（2.95±0.47）ng/mL，且血清Klotho 蛋白水平與患者分期相關（P＜0.05）。Guo J等[8]通過體外實驗觀察到晚期糖基化終末產物可增強氧化應激，從而降低小管上皮細胞Klotho 的表達；隨著病情進展，導致分解血清Klotho 蛋白的腫瘤壞死因子Q 轉換酶表達增加，血清Klotho 蛋白水平下降。分析原因，血清Klotho 蛋白對腎臟具有保護作用，機制為：①增強抗凋亡蛋白的穩(wěn)定性，間接抑制氧化應激反應；②抑制細胞內相關傳導信號，增高抗氧化酶水平；③拮抗腎素-血管緊張素系統(tǒng)作用等[9-10]。在糖尿病腎病進展過程中，血清Klotho 蛋白水平不斷下降。本研究結果顯示，對比對照組，糖尿病腎病各組AngⅡ表達水平較明顯升高，隨著病情進展，AngⅡ呈上升趨勢，血清AngⅡ與病情進展呈正相關（r=0.529，P＜0.05），這與Huimin S 等[11]研究結果一致。分析原因為，糖尿病患者長時間處于高血糖狀態(tài)，AngⅡ高代謝使得細胞因子系統(tǒng)激活，糖尿病腎病進展，機制可能為：①AngⅡ激活腎小管、腎小球中的AT1受體，血管阻力增加，腎血流量減少，刺激系膜、促進細胞外基質產生，促進疾病進展[12-14]；②AngⅡ導致內皮功能受損，促進產生活性氧，活化NF-κB，腎小球濾過屏障受損[15]。本研究結果表明，血清Klotho 蛋白、AngⅡ與糖尿病腎病患者病情進展密不可分。但本研究并未分析各指標水平與糖尿病腎病預后之間的關系，且納入的研究樣本較少。鑒于此，研究結果的可信度還需在未來開展更多的相關性研究加以佐證，旨在為臨床治療爭取更多時間提供新的靶點依據(jù)。

綜上所述，血清Klotho 蛋白、AngⅡ與糖尿病腎病患者病情進展密切相關，臨床糖尿病患者可定期檢測血清Klotho 蛋白、AngⅡ水平，及時預防并治療，旨在控制病情進展，為臨床治療爭取更多時間，促進患者良性預后。