慢性乙型肝炎患者接受核(苷)酸類似物抗病毒治療后血清HBV-DNA的表達及臨床意義

李慧

(河南省人民醫院 檢驗科,河南 鄭州 450000)

慢性乙型肝炎(chronic viral hepatitis B,CHB)為臨床常見的肝臟感染性疾病,由乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)持續感染6個月以上引起,如疾病早期未得到有效控制,病情持續進展可導致肝硬化、肝癌等嚴重后果[1]。積極的抗病毒治療可抑制HBV病毒復制,減輕肝細胞壞死、變性和炎癥反應,防止或控制肝臟纖維化,從而改善患者預后[2]。核(苷)酸類似物(nucleoside analogues and nucleotide analogues,NAs)是國內外指南一致推薦的抗病毒口服治療方案,臨床應用十分廣泛[3]。但相關研究指出,部分CHB患者對NAs藥物的反應不甚理想,需盡早調整治療方案[4]。而由于NAs耐藥檢測費用高昂,臨床急需客觀指標對CHB患者NAs抗病毒治療效果進行預測。Wang等[5]研究表明,血清乙型肝炎病毒脫氧核糖核酸(HBV deoxyribonucleic acid,HBV-DNA)與導致HBV持續感染的共價閉合環狀DNA(covalently closed circular DNA,cccDNA)呈正相關關系,但其在評估抗病毒治療血清學應答方面的價值還需進一步明確。基于此,本研究旨在觀察血清HBV-DNA水平在CHB患者NAs抗病毒治療過程中的變化,并探討其對血清學應答的預測價值,以期為臨床早期調整治療方案提供依據。

1 資料與方法

1.1 一般資料

回顧性分析2021年1月至2022年10月河南省人民醫院83例采用NAs抗病毒治療的CHB患者臨床資料,其中男53例,女30例;年齡25～68歲,平均(44.16±11.60)歲。納入標準:符合《慢性乙型肝炎防治指南(2019年版)》[6]中相關診斷標準;乙型肝炎病毒e抗原(hepatitis B e antigen,HBeAg)陽性;首次接受抗病毒治療,完成相關治療;年齡≥18歲;就診資料、治療資料等保存完整。排除標準:合并肝硬化、脂肪性肝病、自身免疫性肝病、藥物性肝病等其他肝病;合并其他慢性病毒感染;合并嚴重心、腦、肺、腎等器官功能障礙;近半年使用過免疫抑制劑;合并惡性腫瘤。

1.2 基線資料

收集患者NAs抗病毒治療前的基線資料,包括年齡、性別(男、女)、體重指數、家族史(有、無)、吸煙史(有、無)、飲酒史(有、無)、基礎疾病(高血壓、糖尿病)。收集患者NAs抗病毒治療前的實驗室檢測指標,檢測方法如下:采集患者空腹靜脈血5 mL,以3 000 r·min-1離心10 min,取上清液,根據電化學發光法測定乙型肝炎病毒表面抗原(hapatitis B surface antigen,HBsAg)、HBeAg水平,試劑盒廠家為羅氏診斷產品(上海)有限公司;根據丙氨酸底物法測定谷丙轉氨酶(glutamic-pyruvic transaminase,GPT)水平,根據天門冬氨酸底物法測定谷草轉氨酶(glutamic-oxaloacetic transaminase,GOT)水平,根據亞硝酸鹽氧化法測定總膽紅素(total bilirubin,TBil)水平,試劑盒廠家為美康生物科技股份有限公司。

1.3 治療及檢測方法

口服恩替卡韋片(齊魯制藥有限公司,國藥準字H20203225),每次0.5 mg,每日1次,連續治療12個月。分別于治療前及治療3、6、12個月時,采集患者空腹靜脈血3 mL,以3 000 r·min-1離心處理10 min,取上清液,根據熒光定量聚合酶鏈式反應法測定HBV-DNA水平,試劑盒購自廣州達安基因股份有限公司。于治療結束后,參照《慢性乙型肝炎抗病毒治療藥物臨床試驗技術指導原則專家意見》[7]評價血清學應答情況:血清HBeAg陰轉或HBeAg血清學轉換,以及HBsAg陰轉或HBeAg血清學轉換為血清學應答,否則為未應答。

1.4 觀察指標

(1)應答組和未應答組基線資料;(2)應答組和未應答組治療前及治療3、6、12個月時血清HBV-DNA表達;(3)治療3、6個月時血清HBV-DNA對CHB患者NAs抗病毒治療未應答的預測價值。

1.5 統計學方法

2 結果

2.1 基線資料

83例CHB患者中完全血清學應答46例,占比55.42%,納入應答組;不完全血清學應答37例,占比44.58%,納入未應答組。兩組患者年齡、性別等基線資料比較,差異無統計學意義(P>0.05)。見表1。

表1 應答組和未應答組基線資料比較

2.2 應答組和未應答組血清HBV-DNA表達

治療前,應答組和未應答組HBV-DNA比較,差異無統計學意義(P>0.05);兩組治療前至治療12個月的HBV-DNA呈逐漸下降趨勢,組間、時點、交互效應有統計學意義(P<0.05)。見表2。

表2 應答組和未應答組血清HBV-DNA表達比較

2.3 血清HBV-DNA對CHB患者NAs抗病毒治療未應答的預測價值

將CHB患者NAs抗病毒治療效果作為狀態變量(應答=0,未應答=1),將治療3、6個月時血清HBV-DNA作為檢驗變量,繪制ROC曲線,結果顯示,治療3個月時HBV-DNA對CHB患者NAs抗病毒治療未應答的預測價值較低(AUC=0.694,P=0.002),治療6個月時HBV-DNA對CHB患者NAs抗病毒治療未應答具有一定預測價值(AUC=0.751,P<0.001)。見表3。

表3 治療3個月及治療6個月HBV-DNA的預測效能分析

3 討論

隨著國家肝炎監測工作的全面加強,一般人群感染HBV的風險下降,盡管如此,中國在全世界范圍內仍屬于CHB高流行區域[8]。NAs是臨床公認的抗HBV治療藥物,主要以恩替卡韋等為主,能有效控制CHB患者病情,減少并發癥發生[9]。但由于NAs無法直接作用于肝內cccDNA、HBV易發生耐藥變異、CHB患者免疫耐受程度個體差異大等原因,臨床CHB功能性治愈率仍較低,患者病情易反復,導致肝衰竭的發生風險日益加劇[10]。本研究結果顯示,83例CHB患者中,治療后不完全血清學應答的患者有37例,未應答率達44.58%,提示CHB患者NAs抗病毒治療后未應答率較高,臨床需要加以關注。

本研究結果顯示,兩組治療前HBV-DNA比較差異不顯著,兩組治療前至治療12個月時血清HBV-DNA水平均逐漸下降,充分證實了NAs抗病毒治療的有效性。吳鳳萍等[11]研究分析恩替卡韋單藥治療CHB期間HBV-DNA的動態變化發現,隨著治療時間的延長,HBV-DNA逐漸下降,本研究結果與之一致。恩替卡韋為第三代NAs藥物,屬于鳥嘌呤核苷類似物,進入人體后會逐步三磷酸化,通過模擬可合成DNA的脫氧核苷三磷酸,與HBV多聚酶的天然底物三磷酸脫氧鳥嘌呤苷競爭,從而在逆轉錄合成過程中直接抑制HBV-DNA正鏈合成,進而降低HBV-DNA水平[12-13]。

本研究結果顯示,應答組在治療3、6、12個月時HBV-DNA均高于未應答組,HBV-DNA表達上調導致CHB患者抗病毒治療未應答風險增加,提示血清HBV-DNA水平與患者治療效果密切相關。在CHB發生、發展過程中,HBV進入機體后主要在肝細胞內進行復制并形成cccDNA;而cccDNA是HBV復制的源頭,其存在是CHB無法完全治愈的關鍵原因,故監測cccDNA可反映CHB患者抗病毒治療效果,但其只能通過肝穿刺測得,取材困難且風險高,臨床難以推廣[14]。HBV-DNA作為病毒血清學標志物,與肝內cccDNA密切相關,可在一定程度上反映cccDNA的存在及轉錄活性,且血清HBV-DNA越高提示肝內cccDNA含量升高,這意味著HBV處于大量復制的狀態,從而影響恩替卡韋對HBV的殺傷效果[15]。本研究進一步分析發現,治療3個月時HBV-DNA對CHB患者NAs抗病毒治療未應答的預測價值較低,治療6個月時HBV-DNA對CHB患者NAs抗病毒治療未應答具有一定預測價值,提示治療6個月時HBV-DNA可作為抗病毒治療未應答的預測指標。臨床可在患者采用NAs抗病毒治療6個月時檢測其血清HBV-DNA水平,當HBV-DNA>3.565 log10IU·mL-1時,需警惕抗病毒治療未應答情況的發生,考慮盡早調整治療方案,從而改善CHB患者臨床預后。

4 結論

血清HBV-DNA表達在CHB患者NAs抗病毒治療前后變化明顯,治療前血清HBV-DNA可作為治療后未應答的預測指標。本研究的局限性在于,研究樣本量較小,且數據均來自河南省人民醫院,增加了選擇偏倚的風險,還需在未來開展多中心、大樣本研究,改進本研究不足,進一步明確血清HBV-DNA對CHB患者的臨床指導意義。