基于網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)探索延胡索治療血栓的潛在作用機(jī)制

黎毅 李浩玲 周濃 祁俊生 蔣雪梅 戚文華

摘 要：為探索延胡索治療血栓的潛在作用機(jī)制，檢索中藥系統(tǒng)藥理學(xué)數(shù)據(jù)庫（TCMSP），對延胡索藥效成分進(jìn)行篩選，利用PubChem數(shù)據(jù)庫獲得藥效成分3D結(jié)構(gòu)，并通過Pharmmapper數(shù)據(jù)庫篩選出各活性成分可能存在的靶點(diǎn)；通過CTD數(shù)據(jù)庫挖掘與血栓相關(guān)的作用靶點(diǎn)，利用STRING獲得與血栓相關(guān)的作用靶點(diǎn)的蛋白相互作用網(wǎng)絡(luò)，通過GO功能富集和KEGG通路分析延胡索干預(yù)血栓的分子機(jī)制。結(jié)果表明：從延胡索中共篩選出13個(gè)主要成分，預(yù)測出延胡索與血栓相關(guān)靶點(diǎn)238個(gè)，選出26個(gè)關(guān)鍵靶點(diǎn)。GO富集分析結(jié)果主要涉及各種功能蛋白的活性、調(diào)控等過程。KEGG通路富集得到4條通路，包括蛋白聚糖在癌癥中的應(yīng)用、前列腺癌、膀胱癌以及丁酸代謝通路。綜上所述，延胡索發(fā)揮抗血栓作用可能通過多成分、多靶點(diǎn)起作用，為延胡索藥材質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的制訂和提升提供了參考。

關(guān)鍵詞：延胡索；血栓；作用機(jī)制；信號(hào)通路

中圖分類號(hào)：R93 文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A文章編號(hào)：1673-5072（2024）02-0142-08

隨著人們生活水平的提高及人口老齡化情況加劇，心血管疾病的發(fā)病率逐年升高，根據(jù)《中國心血管病報(bào)告2021》，2019年我國農(nóng)村和城市心血管病均占死因的40%以上［1］。血栓是引發(fā)心血管疾病的重要原因之一，引發(fā)血栓的菲爾紹（Virchow）三要素有：靜脈血液瘀滯、靜脈系統(tǒng)內(nèi)皮損傷和血液高凝狀態(tài)。血栓性疾病目前嚴(yán)重威脅人類的生命健康，其發(fā)病率高，老年人更易患病。近年來，中藥及其制劑逐漸應(yīng)用于血栓性疾病，已有研究表明，丹參具有抗血小板聚集作用，其多種制劑可用于腦梗死、冠心病及心絞痛等心腦血管疾病［2］；紅花注射液對小鼠腦梗塞、大鼠“血瘀”癥狀有明顯治療作用［3］。李冰［4］通過建立大鼠體內(nèi)的血栓模型發(fā)現(xiàn)，延胡索提取物可降低大鼠的全血比粘度，提高血液流變性，對大鼠的動(dòng)-靜脈旁路所誘發(fā)形成的血栓有抑制作用；此外，延胡索對電刺激動(dòng)脈形成的血栓有抑制作用［5］。

延胡索（Corydalis yanhusuo）為罌粟科（Papaveraceae）紫堇屬（Corydalis）植物，別名玄胡素、元胡、延胡、玄胡索、元胡索，其味辛苦，性溫，含多種異喹啉類生物堿，具有活血、行氣、止痛的功效。它是一味中醫(yī)常用的中藥藥材，沿用千年至今［6］，主要用于氣血瘀積所致的各種疼痛。近年來，延胡索已用于治療心力衰竭、冠心病、痛經(jīng)等疾病，療效好、副作用小。李彩虹［7］利用人參延胡索湯對冠心病心絞痛患者進(jìn)行對照治療，對照組給予西醫(yī)常規(guī)治療，治療組在對照組治療基礎(chǔ)上給予自擬中藥人參延胡索湯治療，對比結(jié)果表明，治療組總有效率明顯高于對照組。延胡索是臨床治療血栓性疾病的常用藥物之一，但其作用機(jī)制仍有待探究。

網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)通過對數(shù)據(jù)庫檢索分析，采用復(fù)雜網(wǎng)絡(luò)模型，從系統(tǒng)水平解釋藥物與機(jī)體靶點(diǎn)相互作用關(guān)系，其復(fù)雜性符合中藥多成分、多靶點(diǎn)的特點(diǎn)，是中醫(yī)藥現(xiàn)代研究的新熱點(diǎn)。本研究通過網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)方法初步研究延胡索干預(yù)血栓的主要活性成分和可能的靶點(diǎn)，探尋其作用的分子機(jī)制，對延胡索臨床應(yīng)用提供一定參考。

1 材料與方法

1.1 延胡索藥物活性成分的篩選

目前用于查詢中藥成分的數(shù)據(jù)庫較多，其中疾病-靶標(biāo)網(wǎng)絡(luò)的藥理學(xué)平臺(tái)——中藥系統(tǒng)藥理數(shù)據(jù)庫TCMSP（http：//tcmspw.com/tcmsp.php）是一個(gè)較為理想的綜合中藥平臺(tái)［8］，其中包含了499味中藥以及對應(yīng)的超2.9萬個(gè)化學(xué)成分，數(shù)據(jù)豐富，可信度高。本研究通過TCMSP數(shù)據(jù)庫搜索草藥名“yanhusuo（延胡索）”，收集延胡索的藥效活性成分，根據(jù)成分的藥動(dòng)學(xué)（吸收、分布、代謝、排泄（ADME））進(jìn)一步篩選［9］，篩選條件為：口服生物利用度（Oral bioavailability，OB）≥30%、藥物相似性（Drug-likeness，DL）≥0.18和生物半衰期（Biological Half Life，HL）≥4，以獲取延胡索的主要藥效活性成分，通過PubChem Database（https：//pubchem.ncbi.nlm.nih.gov/）等化學(xué)成分?jǐn)?shù)據(jù)庫檢索篩選延胡索化學(xué)成分的分子3D結(jié)構(gòu)，以sdf格式保存，以此構(gòu)建延胡索藥效成分的化合物結(jié)構(gòu)數(shù)據(jù)庫。

1.2 應(yīng)用軟件準(zhǔn)備

Strawberry-perl-5.30.0.1-64bit，JAVA8.0，Cytoscape_v3.7.1，R×64 3.6.1，安裝路徑為C盤，不得出現(xiàn)中文和空格。

1.3 延胡索藥效成分靶點(diǎn)預(yù)測與疾病靶點(diǎn)查詢

利用Pharmmapper Server（http：//www.lilab-ecust.cn/pharmmapper/submitfile.html）數(shù)據(jù)庫，根據(jù)化合物的3D結(jié)構(gòu)預(yù)測延胡索潛在的化合物藥效靶點(diǎn)基因信息。使用CTD（http：//ctdbase.org/ about/）數(shù)據(jù)庫，以“Thrombosis”為關(guān)鍵詞進(jìn)行查詢，獲得血栓性疾病過程中已知的靶蛋白。

1.4 延胡索干預(yù)血栓性疾病潛在作用靶點(diǎn)蛋白質(zhì)相互作用網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建與分析

通過韋恩圖將延胡索的藥效成分靶點(diǎn)同血栓性疾病靶點(diǎn)取交集，獲得延胡索與血栓性疾病相關(guān)的化合物靶點(diǎn)并將其導(dǎo)入String（http：//string-db.org）數(shù)據(jù)庫，獲取蛋白質(zhì)相互作用（PPI）網(wǎng)絡(luò)，下載并保存為tsv格式，以此構(gòu)建延胡索潛在藥效作用靶點(diǎn)的蛋白相互作用網(wǎng)絡(luò)圖。

1.5 延胡索干預(yù)血栓性疾病成分-靶點(diǎn)的網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建

將篩選出的延胡索化合物信息以及靶點(diǎn)PPI網(wǎng)絡(luò)對應(yīng)關(guān)系導(dǎo)入Cytoscape，構(gòu)建延胡索治療血栓性疾病的成分-靶點(diǎn)網(wǎng)絡(luò)。對其風(fēng)格（style）、節(jié)點(diǎn)（nodes）、線條（edges）等進(jìn)行設(shè)置，構(gòu)建延胡索干預(yù)血栓性疾病的成分-靶點(diǎn)網(wǎng)絡(luò)關(guān)系圖，并進(jìn)行可視化分析。

1.6 GO和KEGG分析

為研究藥效團(tuán)可能作用的生物學(xué)通路，探尋靶點(diǎn)間相互作用及基因功能的富集情況，對藥效團(tuán)的各個(gè)靶點(diǎn)基因進(jìn)行GO（Gene Ontology）功能富集分析和KEGG（Kyoto Encyclopedia of genes and genomes）生物學(xué)通路注釋分析。使用R3.6.1，載入相應(yīng)的程序包，設(shè)置氣泡圖和柱狀圖的高、寬、顯示目錄以及P值等參數(shù)，獲得GO和KEGG可視化結(jié)果。

2 結(jié)果與分析

2.1 延胡索活性成分及相應(yīng)靶蛋白的篩選

利用TCMSP檢索獲得延胡索藥效成分77個(gè)，符合篩選條件的主要藥效成分有26個(gè)，其中13個(gè)藥效成分的藥物相似性較高，在0.8以上（表1），說明這些成分藥動(dòng)學(xué)性質(zhì)較好，安全性較高，選取這些藥效成分進(jìn)行藥物靶點(diǎn)預(yù)測。

2.2 藥物靶點(diǎn)預(yù)測

對延胡索篩選出的13個(gè)藥效成分在Pharmmapper數(shù)據(jù)庫中進(jìn)行靶點(diǎn)預(yù)測并進(jìn)行基因名稱的注釋，獲得了849個(gè)與人類有關(guān)的藥效靶點(diǎn)基因，去除重復(fù)項(xiàng)，剩余241個(gè)靶點(diǎn)。查詢CTD數(shù)據(jù)庫，獲得血栓相關(guān)靶點(diǎn)29 046個(gè)，通過Venny圖與藥效化合物靶點(diǎn)取交集，得到延胡索中與血栓相關(guān)的靶點(diǎn)有238個(gè)，占延胡索化合物靶點(diǎn)的98.76%，占血栓靶點(diǎn)的0.82%，延胡索化合物靶點(diǎn)中不參與血栓的延胡索化合物靶點(diǎn)僅有3個(gè)，占延胡索化合物靶點(diǎn)的1.43%，即RBM41、GSTT2B、ADRBK1（圖1）。

2.3 延胡索干預(yù)血栓靶點(diǎn)的蛋白質(zhì)相互作用網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建

利用String數(shù)據(jù)庫篩選獲得238個(gè)靶點(diǎn)的PPI網(wǎng)絡(luò)，該相互作用網(wǎng)絡(luò)圖包含139個(gè)表示靶蛋白的節(jié)點(diǎn)和269條表示靶點(diǎn)間相互作用關(guān)系的線，各靶點(diǎn)間相互作用網(wǎng)絡(luò)較復(fù)雜（圖2）。進(jìn)一步分析發(fā)現(xiàn)，延胡索干預(yù)血栓靶點(diǎn)的節(jié)點(diǎn)度大于均值（3.87），且介數(shù)中心性大于均值（0.038）的關(guān)鍵靶蛋白有26個(gè)，分別為RAC1、POLR2H、POLR2F、CCNA2、PCNA、CUL1、APP、B2M、NCBP1、CCND1、ESR1、CPSF3、DDB1、NOTCH1、HSP90AB1、HDAC7、HDAC6、ERBB2、NUP214、CAT、RAN、DLAT、HSD17B4、NAE1、EPHB2、AR。其中，靶蛋白R(shí)AC1的節(jié)點(diǎn)度和介數(shù)中心性均最大，表明RAC1可能在整個(gè)蛋白質(zhì)網(wǎng)絡(luò)中作用很大。

2.4 成分-靶點(diǎn)網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建

成分-靶點(diǎn)網(wǎng)絡(luò)分析結(jié)果顯示（圖3）：該網(wǎng)絡(luò)共有150個(gè)表示化合物和靶點(diǎn)的節(jié)點(diǎn)，735條表示靶點(diǎn)之間以及靶點(diǎn)與化合物之間相互作用的線，473個(gè)藥效團(tuán)與靶點(diǎn)之間的關(guān)系，262個(gè)靶點(diǎn)之間的相互作用關(guān)系。化合物與篩選出的靶點(diǎn)的聯(lián)系越密集，說明該化合物干預(yù)血栓的可能性越大。在該網(wǎng)絡(luò)圖中，排名前七位的化合物是紫堇醇靈堿（18797-79-0，節(jié)點(diǎn)度=40）、荷包牡丹堿（bicuculline，節(jié)點(diǎn)度=40）、二氫白屈菜紅堿（dihydrochelerythrine，節(jié)點(diǎn)度=40）、刺罌粟堿（stylopine，節(jié)點(diǎn)度=39）、黃連堿（coptisine，節(jié)點(diǎn)度=38）、偽原阿片堿（24240-05-9，節(jié)點(diǎn)度=37）、巖黃連堿（dehydrocavidine，節(jié)點(diǎn)度=37），說明這些藥效成分可能是延胡索起到治療血栓作用最關(guān)鍵的成分。

2.5 延胡索干預(yù)血栓靶點(diǎn)GO功能富集分析

將篩選出的延胡索可能干預(yù)血栓的238個(gè)靶點(diǎn)進(jìn)行GO功能富集分析，得到共43個(gè)GO條目，排在前20位的GO可視化分析結(jié)果顯示（圖4）：延胡索治療血栓性疾病的生物學(xué)過程、分子功能較多，其中，熱休克蛋白Hsp90結(jié)合（Hsp90 protein binding），P值最小，是最為明顯的生物過程，該過程涉及8個(gè)作用靶標(biāo)，分別為RPS3、UNC45A、USP19、CYP2E1、GBP1、HDAC6、HDAC8、KDR，這可能是延胡索治療血栓性疾病最重要的生物過程。此外，其他生物過程還包括類固醇激素受體活性（steroid hormone receptor activity）、受損DNA結(jié)合（damaged DNA binding）、細(xì)胞核受體活性（nuclear receptor activity）、轉(zhuǎn)錄因子活性（transcription factor activity）、細(xì)胞粘附分子結(jié)合（cell adhesion molecule binding）、酪氨酸蛋白激酶活性（protein tyrosine kinase activity）等，也是延胡索治療血栓性疾病可能較重要的生物過程，應(yīng)該重視這些過程對血栓的影響。

2.6 延胡索干預(yù)血栓性疾病靶點(diǎn)KEGG通路富集分析

將238個(gè)靶點(diǎn)進(jìn)行KEGG通路富集分析，預(yù)測出延胡索干預(yù)血栓的靶點(diǎn)通路較少，富集到4個(gè)KEGG通路（圖5），分別是蛋白聚糖在癌癥中的應(yīng)用（Proteoglycans in cancer）、前列腺癌（Prostate cancer）、膀胱癌（Bladder cancer）以及丁酸代謝（Butanoate metabolism）通路，KEGG通路富集分析結(jié)果顯示，蛋白聚糖在癌癥中的應(yīng)用是最明顯的通路，涉及15個(gè)作用靶標(biāo)，分別是IGF1R、VAV3、PPP1CB、ARHGEF12、ESR1、FLNB、ARHGEF1、ERBB2、CCND1、MMP2、RAC1、MDM2、THBS1、MSN、KDR，這可能是延胡索治療血栓最重要的作用通路。蛋白聚糖在癌癥中的應(yīng)用和前列腺癌通路富集圖如圖6、圖7所示。從圖6可看出，蛋白聚糖在癌癥中的應(yīng)用通路可能涉及的靶點(diǎn)還有RAC1、cyclinD1、MP以及LARG等，與該通路聯(lián)系緊密的通路還有MAPK信號(hào)通路、鈣離子信號(hào)通路等。由圖7可見，前列腺癌通路涉及的靶點(diǎn)有GFR、AR、HSP、MDM2、CDK2以及CyclinD1等，與該通路聯(lián)系緊密的通路還有PI3K-Akt信號(hào)通路、p53信號(hào)通路等。因此，延胡索可能在前列腺癌及膀胱癌等癌癥通路中對血栓治療發(fā)揮作用。

3 討 論

3.1 延胡索干預(yù)血栓的主要靶點(diǎn)及藥效成分

本研究通過TCMSP篩選得到延胡索的13個(gè)主要活性成分，獲得延胡索干預(yù)血栓的238個(gè)靶點(diǎn)，735個(gè)可能存在的相互作用關(guān)系，說明延胡索在治療血栓性疾病上有一定生化聯(lián)系。延胡索的關(guān)鍵作用靶點(diǎn)主要有RAC1、POLR2H、POLR2F、CCNA2、PCNA、CUL1、APP、B2M、NCBP1、CCND1等，這些靶點(diǎn)在網(wǎng)絡(luò)中起的作用較大。其中CCNA2基因可以使心肌梗塞的豬心心臟組織再生，以及在心肌梗塞區(qū)域的周圍有出現(xiàn)新心肌細(xì)胞的跡象以及心臟泵血功能的顯著改善［10］。APP（急性期蛋白）在創(chuàng)傷、感染等引起應(yīng)激時(shí)，有抑制多種水解酶的作用，在炎癥區(qū)域具有凝血和溶纖作用，延胡索通過對APP作用，可能對干預(yù)血栓形成有一定幫助。延胡索化合物-靶點(diǎn)網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建結(jié)果顯示，延胡索起到治療血栓性疾病作用最可能的成分包括紫堇醇靈堿、荷包牡丹堿、二氫白屈菜紅堿、刺罌粟堿、黃連堿、偽原阿片堿、巖黃連堿，這些成分對治療血栓性疾病的療效可能較大。其中紫堇醇靈堿可緩解高血壓心力衰竭［11］；荷包牡丹堿對抑制人肝癌MHCC97-H細(xì)胞的轉(zhuǎn)移及侵襲有顯著作用［12］，汪波［13］利用小鼠實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)荷包牡丹堿對小鼠有較好的抗心律失常活性。此外，刺罌粟堿存在抗炎活性，Velayutham等［14］發(fā)現(xiàn)刺罌粟堿具有調(diào)節(jié)血管內(nèi)皮生長因子受體（VEGFR-2）的潛力，并能抑制骨肉瘤細(xì)胞；Jang等［15］研究表明，刺罌粟堿通過抑制一氧化氮合酶（iNOS）和環(huán)氧合酶-2（COX-2）表達(dá)來抑制巨噬細(xì)胞中的一氧化氮和前列腺素E2（PGE2）產(chǎn)生。

3.2 延胡索干預(yù)血栓靶點(diǎn)功能分析

GO結(jié)果顯示，延胡索治療血栓性疾病靶點(diǎn)的功能主要體現(xiàn)在熱休克蛋白Hsp90的結(jié)合、類固醇激素受體活性、受損DNA結(jié)合、細(xì)胞核受體活性、轉(zhuǎn)錄因子活性等，這些功能主要涉及有關(guān)基因的轉(zhuǎn)錄、翻譯以及有關(guān)蛋白的活性，其中熱休克蛋白Hsp90的結(jié)合是最為明顯的生物過程，涉及8個(gè)作用靶標(biāo)。KEGG結(jié)果則涉及蛋白聚糖在癌癥中的應(yīng)用、前列腺癌等4個(gè)通路。有研究表明，腫瘤可導(dǎo)致血液的高凝，引發(fā)血栓，所以延胡索可能不僅對于治療癌癥有一定功效，在治療血栓方面也可能有作用。在蛋白聚糖在癌癥中的應(yīng)用通路中，通路下游的多個(gè)蛋白如RAC1、CyclinD1、MP、LARG等可能直接或間接作用于細(xì)胞的增殖和存活，促進(jìn)血管內(nèi)皮細(xì)胞的增生和在內(nèi)皮化，從而促進(jìn)有血栓的血管愈合，這對于延胡索治療血栓性疾病提供了依據(jù)。此外，下游RTKs（受體酪氨酸激酶）可以間接性地抑制腫瘤血管生成，Moesin（膜突蛋白）可間接作用于腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移和侵襲。腫瘤形成是引發(fā)血栓的重要原因之一，有研究表明，血栓常作為隱性癌的臨床表現(xiàn)［16］，因此延胡索可能通過抑制癌癥的通路中的相關(guān)基因或靶點(diǎn)治療血栓性疾病。在前列腺癌通路中，GFR（表皮生長因子）作為其下游分子，可介導(dǎo)PI3K-Akt信號(hào)通路和MAPK通路。PI3K-Akt信號(hào)通路主要與細(xì)胞生長和凋亡密切相關(guān)［17］，參與血小板的粘附聚集等過程，使纖維蛋白發(fā)生聚集［18］。PI3K-Akt信號(hào)通路可通過減少mPTP釋放，在線粒體水平上發(fā)揮心肌保護(hù)作用，從而達(dá)到治療心力衰竭的作用［19］，為治療血栓性疾病提供了思路。由圖6可知，MDM2基因可間接地抑制細(xì)胞凋亡，此外，楊娟［20］通過大鼠電刺激模型實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)延胡索乙素可有效減少動(dòng)脈血栓形成、增加動(dòng)脈血流量，同時(shí)對其抗血栓機(jī)制深入研究，發(fā)現(xiàn)其作用機(jī)制與拮抗損傷后的血管內(nèi)皮細(xì)胞凋亡和抑制組織因子表達(dá)有關(guān)，所以蛋白聚糖在癌癥中的應(yīng)用通路對治療血栓性疾病可能有一定療效。

3.3 延胡索在治療血栓性疾病中的常見案例

在現(xiàn)代各種疾病中，常見的臨床血栓性疾病多種多樣，如動(dòng)脈粥樣硬化、腦血栓形成、冠心病、心絞痛、心肌梗死、血栓性閉塞性脈管炎、風(fēng)濕性心臟病、心力衰竭以及心律失常等。血栓形成有三個(gè)關(guān)鍵因素為炎癥反應(yīng)、血管生成和纖維蛋白聚集。延胡索主要成分為生物堿、甾體、有機(jī)酸和糖類［21］。有研究表明，延胡索有增加血液流通，緩解大鼠心力衰竭的功效［22］，陳岑［23］通過實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)延胡索具有顯著的抗血小板聚集作用。此外，臨床上延胡索對冠心病有較高的療效［24］。何四琴［25］發(fā)現(xiàn)，在缺血性心律失常患者中應(yīng)用復(fù)方延胡索湯劑與美托洛爾聯(lián)合治療療效顯著，可加速患者心率變異性指標(biāo)及臨床癥狀改善，增強(qiáng)心肌功能，且不會(huì)導(dǎo)致不良心臟事件，安全性高。由此可見，延胡索在治療血栓性疾病（如冠心病、心絞痛等）方面有重要作用。

4 結(jié)束語

以上研究分析可知，延胡索藥物介導(dǎo)血栓性疾病的治療機(jī)制具有復(fù)雜性、多樣性，不能從單一角度進(jìn)行研究，通過對其復(fù)雜網(wǎng)絡(luò)的分析，可從中找出多個(gè)干預(yù)血栓性疾病的靶點(diǎn)、功能和通路，在此基礎(chǔ)上可探索多樣化的治療方法。在中醫(yī)治療血栓疾病過程中，醫(yī)生常常運(yùn)用復(fù)方制劑以及多種藥物聯(lián)合用藥以增強(qiáng)用藥效果，本研究僅對延胡索這一種藥物內(nèi)的多種藥效成分進(jìn)行研究，發(fā)現(xiàn)其對血栓性疾病的作用機(jī)制主要是通過介導(dǎo)炎癥反應(yīng)、抑制細(xì)胞凋亡、介導(dǎo)免疫途徑及抑制癌癥等方式發(fā)揮療效。本研究主要預(yù)測了延胡索抗血栓的可能機(jī)制，僅為后續(xù)藥物復(fù)方制劑的配伍機(jī)制研究提供參考，但藥物在體內(nèi)可能還受到機(jī)體自身以及其他因素影響，因此后期還需進(jìn)行體外實(shí)驗(yàn)對本研究的預(yù)測結(jié)果進(jìn)行驗(yàn)證。

參考文獻(xiàn)：

［1］ 馬麗媛，王增武，樊靜，等.《中國心血管健康與疾病報(bào)告2021》概要［J］.中國介入心臟病學(xué)雜志，2022，30（7）：481-496.

［2］ 劉秀蓮.丹參及其制劑治療血栓性疾病的研究進(jìn)展［J］.內(nèi)蒙古中醫(yī)藥，2014，33（20）：120-121.

［3］ 李亮，周黎明，熊文碧，等.紅花注射液對血栓性疾病的治療作用研究［J］.世界科學(xué)技術(shù)，2006（4）：49-52.

［4］ 李冰.延胡索提取物抗大鼠血栓的實(shí)驗(yàn)研究［D］.長春：長春中醫(yī)藥大學(xué)，2014.

［5］ 湯佩佩，白明，苗明三.中醫(yī)藥研究與網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)［J］.中醫(yī)學(xué)報(bào)，2012，27（9）：1112-1115.

［6］ 何曉鳳，張晶，張梅.延胡索化學(xué)成分，藥理活性及毒副作用研究進(jìn)展［J］.上海中醫(yī)藥雜志，2017，51（11）：97-100.

［7］ 李彩虹.人參延胡索湯治療冠心病心絞痛的療效觀察［J］.中西醫(yī)結(jié)合心血管病電子雜志，2015，3（28）：89-90.

［8］ 汝錦龍.中藥系統(tǒng)藥理學(xué)數(shù)據(jù)庫和分析平臺(tái)的構(gòu)建和應(yīng)用［D］.咸陽：西北農(nóng)林科技大學(xué)，2015.

［9］ 陳晶，王萌，侯志濤.基于網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)的延胡索干預(yù)心力衰竭作用機(jī)制研究［J］.中國中醫(yī)藥信息雜志，2020，27（3）：71-77.

［10］SHAPIRO S D，RANJAN A K，KAWASE Y，et al.Cyclin A2 induces cardiac regeneration after myocardial infarction through cytokinesis of adult cardiomyocytes［J］.Science Translational Medicine，2014，6（224）：224ra27.

［11］WANG M Y，LUO W，YU T X，et al.Corynoline protects ang II-induced hypertensive heart failure by increasing PPARα and Inhibiting NF-κB pathway［J］.Biomedicine & Pharmacotherapy，2022，150：113075.

［12］郭錳，張成輝，吳婷婷.荷包牡丹堿對人肝癌MHCC97-H細(xì)胞轉(zhuǎn)移、侵襲的影響及機(jī)制研究［J］.中草藥，2019，50（22）：5515-5520.

［13］汪波.云南地不容化學(xué)成分及阿樸菲型生物堿抗心律失常構(gòu)效關(guān)系初步研究［D］.昆明：云南中醫(yī)學(xué)院，2013.

［14］VELAYUTHAM N K，THAMARAIKANI T，WAHAB S，et al.Stylopine：a potential natural metabolite to activate vascular endothelial growth factor receptor 2 （VEGFR2） in osteosarcoma therapy［J］.Frontiers in Pharmacology，2023，14：1150270.

［15］JANG S I，KIM B H，LEE W Y，et al.Stylopine from Chelidonium majus inhibits LPS-induced inflammatory mediators in RAW 264.7 cells［J］.Archives of Pharmacal Research，2004，27（9）：923-929.

［16］李廷廷，戰(zhàn)翠萍，崔久嵬.癌癥相關(guān)性血栓形成的病理機(jī)制進(jìn)展［J］.中國實(shí)驗(yàn)診斷學(xué)，2019，23（5）：932-935.

［17］劉秋雨，連增林.中藥干預(yù)乳腺癌血管生成雙途徑研究進(jìn)展［J］.中國中醫(yī)藥信息雜志，2017，24（2）：120-126.

［18］黃曼婷，吳煥林，徐丹蘋.柚皮素通過PI3K/Akt通路拮抗血小板聚集的體外研究［J］.中國病理生理雜志，2017，33（3）：517-522.

［19］ZHANG L，GUO Z X，WANG Y，et al.The protective effect of kaempferol on heart via the regulation of Nrf2，NF-κβ，and PI3K/Akt/GSK-3β signaling pathways in isoproterenol-induced heart failure in diabetic rats［J］.Drug Development Research，2018，80（3）：294-309.

［20］楊娟.延胡索乙素抗血栓作用及機(jī)制研究［D］.鄭州：鄭州大學(xué)，2013.

［21］WANG L，ZHANG Y，WANG Z W，et al.The antinociceptive properties of the Corydalis yanhusuo extract［J］.PLoS One，2016，11（9）：e0162875.

［22］李晶晶，張靜怡，賀愛琴，等.延胡索炮制方法和功能主治歷史沿革［J］.中國中醫(yī)藥信息雜志，2014，21（4）：134-136.

［23］陳岑.活血化瘀中藥和食物抗血小板聚集活性評(píng)價(jià)及作用機(jī)制初探［D］.重慶：重慶大學(xué)，2015.

［24］楊興華，劉國安.中醫(yī)藥治療冠心病心絞痛的研究進(jìn)展［J］.中醫(yī)臨床研究，2011，3（20）：127-129.

［25］何四琴.復(fù)方延胡索湯劑聯(lián)合美托洛爾治療缺血性心律失常的療效及對患者不良心臟事件的影響［J］.醫(yī)學(xué)理論與實(shí)踐，2018，31（6）：785-787.

Potential Action Mechanism of Corydalis yanhusuoin the Treatment of Thrombus Based on Network Pharmacology

Abstract：The pharmacodynamic components of Corydalis yanhusuo are screened by searching the TCM Systematic Pharmacology Database（TCMSP） in order to explore the potential action mechanism of C.yanhusuo in the treatment of thrombus.PubChem database is employed to obtain the 3D structure of pharmacodynamic components and Pharmmapper database is utilized to screen out the potential targets of each active component.The target associated with thrombus is mined through CTD database and the protein interaction network （PPI） of the target associated with thrombus is obtained by STRING.The molecular mechanism of C.yanhusuo in intervention of thrombus is analyzed by GO functional enrichment and KEGG pathway.The results show that a total of 13 main components are screened from C.yanhusuo and 238 targets related to thrombus are predicted，including 26 key targets screened.The results of GO enrichment analysis have mainly involved the activity and regulation of various functional proteins.KEGG pathway is enriched to obtain 4 pathways，including the application of proteoglycans in cancer，prostate cancer，bladder cancer and butanoate metabolic pathways.In conclusion，the antithrombotic effect of C.yanhusuo may be achieved through multi-components and multi-targets，providing references for the formulation and improvement of the quality standard of C.yanhusuo.

Keywords：Corydalis yanhusuo；thrombus；action mechanism；signaling pathway