羊布魯氏菌病原分離診斷和綜合防治措施

文│楊正帥 （山東省臨沂市羅莊區動物疫病預防控制中心）

我國作為養殖大國，綿羊、山羊等養殖數量較大，國家統計局統計數據顯示，2022年我國養羊業不斷發展，不僅為消費者提供了優質的羊肉及相關產品，而且也是農牧民的主要經濟來源之一，為國家鄉村振興產業的發展奉獻了力量。但隨著養羊業的發展，導致羊只患布魯氏菌病的風險增大。因此，在使用科學準確的診斷方式診斷羊布魯氏菌病的基礎上，尋求有效的治療方法和科學的防控措施十分必要。

布魯氏菌病是養殖業中較為常見的人畜共患性傳染病之一，不僅會對牛羊畜禽的生產和健康造成威脅，還會威脅消費者的生命安全，因此，做好羊布魯氏菌病的診斷和防控工作具有重要意義。本文從羊布魯氏菌病病原的分離診斷、養殖實踐中的治療及綜合防控措施3個方面進行闡述，以期能為廣大養殖戶健康養羊提供參考和借鑒，保證羊只的健康及消費者的生命安全。

一、羊布魯氏桿菌概述

布魯氏桿菌屬于革蘭氏陰性，能感染哺乳動物，不會產生芽孢的小桿菌，主要包括馬、狗、林鼠、綿羊等6個類型，其中羊、牛、豬最為常見且也能感染人。羊布魯氏桿菌可感染不同品種、不同年齡階段、不同性別的羊，尤其是在母羊中發病率更高。患病羊主要表現為多汗、發燒、關節腫痛、乏力、精神萎靡，妊娠母羊表現為流產、死胎且陰道紅腫伴隨子宮內膜炎、乳房炎，甚至不孕等疾病，分泌水樣乳汁且凝結成塊，公羊表現為睪丸炎、附睪炎等，此病成為地方流行性疾病，且一年四季均可發病。

二、診斷方法

1.病原分離培養。此方法是診斷布魯氏菌病的金標準，但也存在操作復雜、實驗室要求較高、易被污染、檢測時間較長等問題。其原理是通過采集患病羊的血液、骨髓、其他體液等在培養基中進行培養，從而分離得到布魯氏桿菌。用一次性采血器采集患病羊頸部血液，并將其在無菌條件下注入雙相血培養基冷藏，接著在生物安全等級為3級及以上的實驗室中培養，所需條件為37℃、濃度為10%的CO2培養箱，普通菌種3～4天即可生長出菌落。

2.血清學檢測。常用的血清學檢測包括酶聯免疫吸附、虎紅平板凝集、試管凝集試驗等。

（1）酶聯免疫吸附。此方法具有靈敏度高、特異性強、檢測時間短等優勢。其原理主要是在ELISA板上包被菌體抗原，將處理過的血清滴入板中，若滴入的血清中含有布魯氏桿菌的抗體，則會在板內形成抗原抗體的復合物，然后再加入酶標進行顏色反應；最后使用酶標儀檢測出OD值從而計算出關于抗體的數量。

（2）虎紅平板凝集。此方法具有操作簡單、成本較低、可批量檢測、準確度高的特點，但可能存在假陽性。其原理是當抗原與抗體結合后會形成凝集物，根據凝集程度進行判斷。此方法一般作為初篩，若檢測結果表現為陽性，再使用試管凝集試驗進行二次檢測，從而有效降低假陽性的發生率，保證檢測結果的準確性。

（3）試管凝集試驗。此方法為我國法定的檢測布魯氏菌病的方法，既可以定性也可以定量和半定量；其精確度高于虎紅平板凝集試驗，也具有穩定性強、敏感性高、特異性強的特點。其原理為顆粒抗原在適當電解質條件下可以與一定比例的抗體進行特異性結合，即發生凝集反應，當此反應在體外進行時所導致的凝集現象為試管凝集試驗。

3.分子生物學診斷。常見的包括聚合酶鏈式反應（PCR）、環介導等溫擴增技術等。

（1）聚合酶鏈式反應。此方法具有操作簡單、靈敏度高、特異性強的特點，且隨著技術手段的進步，又衍生出了熒光定量PCR、多重PCR技術等。其原理是在95℃高溫下使雙鏈DNA變性解螺旋為單鏈，然后在60℃條件下引物與單鏈DNA互補配對，接著在DNA聚合酶最適反應溫度72℃條件下形成互補鏈，通過循環往復擴增出DNA分子。

（2）環介導等溫擴增。此方法具有檢測時間短、敏感性高、特異性強的特點，且檢測結果具有可視化的特點。其原理是在65℃條件下DNA處于動態平衡，引物互補配對時另一條DNA鏈就會變成單鏈，通過利用4種不同的特異性引物識別靶基因的6個特定區域并在DNA聚合酶的作用下，以外側引物區段的3’末端為起點，與模板DNA互補配對，啟動鏈置換DNA合成。

三、治療方案

1.非妊娠的羊只可以使用青霉素＋鏈霉素以肌內注射的方式進行治療。

2.妊娠母羊，若病情較輕可以肌內注射10～30毫克的孕酮進行治療；病情嚴重的需要考慮使用藥物進行催產和墮胎，同時使用濃度為0.1%的高錳酸鉀溶液進行子宮清洗，直至陰道無分泌物流出。

四、綜合防控措施

由于布魯氏菌病屬于人畜共患性傳染病，一旦發病不僅會威脅羊只健康，若消費者接觸了患病羊或食用帶菌產品也可能會造成感染。因此，廣大養殖戶、政府部門在飼養過程中一定要加強布魯氏菌病防控工作，降低此病的發生率，甚至達到完全凈化。

1.政府方面。

（1）加強宣傳。由于廣大養殖戶專業素養參差不齊，對布魯氏菌病無清晰了解，因此，基層部門、防疫部門應做好布魯氏菌病宣傳工作，使其認識到此病的危害性，從思想上重視此病的防控。首先，可以成立專門的宣傳隊伍，定期為各地區養殖戶進行關于布魯氏菌病防控知識的講解，并定期設置考核，檢驗養殖戶的接受程度。然后可以充分利用新媒體，如抖音、快手、直播等，將關于布魯氏菌病的相關知識制作成短視頻，能多次播放，加深理解。

（2）加大檢疫力度。在飼養過程中，廣大養殖戶可能存在僥幸心理，為了減少工作量，不定期進行布魯氏菌病檢疫工作，加大此病發生、傳播的風險。因此，為了對廣大養殖戶起到督促作用，政府部門應加大檢疫力度，并根據檢測結果實行一定的獎懲制度。其具體工作主要體現在以下幾個方面。

對轄區內的養殖場定期進行抽檢，對有問題的羊及時進行淘汰或撲殺，并責令養殖場實施整改。

做好羊只屠宰前的產地檢疫工作，制定完善的檢疫流程，嚴格執行，對檢疫合格的羊只才能運輸到屠宰場，對檢疫陽性的要進行無害化處理。

制定科學、嚴謹的羊只調運方案，對新引入的羊要具備完善的檢疫證明，并做好引種前的檢疫、引種后的隔離飼養等工作，避免在引種過程中造成疫病傳播。

做好羊只屠宰檢疫，實施定點屠宰、集中屠宰等，責令關停小作坊式的屠宰場，并對每只屠宰的羊只進行詳細登記，注明來源，提升產品質量。

（3）增加經費投入。充足的經費投入是做好布魯氏菌病防控工作的重要條件，因此政府部門要設置專項經費。其一，在經濟條件允許的情況下，設置陽性羊只無害化處理的經費補貼，降低養殖戶的損失。其二，設置相關保險服務和保險方案，一旦出現陽性羊只，在養殖戶強制捕殺和無害化處理后進行補貼，防止養殖戶出現私自售賣的情況。其三，為基層畜牧獸醫工作站配備較為先進的布魯氏菌病檢測設備，并提高基層工作人員的薪資待遇，從而保證人員充足，并調動其工作積極性，提高此病的防治質量。

2.養殖戶方面。

（1）定期消毒。完善、嚴格的消毒制度可以有效預防多種疾病的發生。首先，每天定時打掃圈舍，清除羊只糞、尿等排泄物，破壞適合病菌繁殖的環境。然后要定期消毒，在消毒前用水沖洗污物，之后選擇不同的消毒方式進行消毒，如對于飼草料等使用深埋或焚燒的方式進行消毒，墻面、地面、圍欄等使用2%的火堿溶液進行噴灑消毒，金屬用具使用火焰燃燒的方法進行消毒。

（2）科學管理。首先，要堅持自繁自養，盡量不從其他區域引種，避免引種過程中造成布魯氏菌病的傳播；然后，設施齊全，配備良好的通風系統、飲水池、飼料槽、保溫、風扇等設備，為羊只提供一個溫濕度適宜、空氣干凈的圈舍；最后，科學飼喂，根據各階段羊只的生長發育特點進行分群、分欄飼養，并為其提供搭配合理、營養物質全面、適口性良好的飼草料，并定期補充微量元素、維生素、礦物質等，提高羊只自身免疫力和抵抗力。

（3）防護到位。工作人員應做好自身防護，預防感染。進入養殖區需要穿戴專門的工作服、口罩、手套等，在需要治療、接產時嚴禁直接用手接觸，并做好消毒處理工作。工作過程中不小心受傷需要及時使用碘伏、酒精等進行多次深層消毒，避免病菌入侵。此外，流產胎兒、死亡羔羊等要收集到指定地點進行無害化處理，避免隨意丟棄，且處理后需要對地面、圈舍進行消殺，避免造成布魯氏菌病的傳播。

五、結語

綜上所述，羊布魯氏菌病是一種人畜共患病，會對羊只、消費者的健康造成威脅。因此，養殖戶需要掌握對布魯氏桿菌的診斷方式，出現異常情況后及時判斷并采取有效的治療措施，通過政府部門和養殖戶共同努力，從源頭防止此病的發生，保證養羊業的安全性和穩定性。