基于線粒體鈣穩態探討血府逐瘀湯對冠心病血瘀證模型大鼠的作用機制

〔摘要〕 目的 基于線粒體鈣穩態探討血府逐瘀湯治療冠心病血瘀證的作用機制。方法 150只SD大鼠隨機均分為正常組、假手術組（只穿線不結扎）、模型組、阿托伐他汀鈣組（0.90 mg/kg·d，以下簡稱他汀組）以及血府逐瘀湯低、中、高劑量組[3.51、7.02、14.04 g/（kg·d），以下簡稱低、中、高劑量組]，每組6只。除正常組和假手術組外，其他組均通過結扎大鼠冠狀動脈左前降支制備冠心病血瘀證模型，造模成功24 h后灌胃給藥，連續灌胃7 d，取各組大鼠左室缺血區心肌組織。HE染色觀察樣本壞死病變情況；線粒體鈣離子探針檢測線粒體內鈣離子的熒光強度；定磷法檢測心肌細胞Ca2+-Mg2+-ATP酶活性；免疫組織化學檢測心肌組織線粒體鈣單向轉運蛋白（mitochondrial calcium uniporter， MCU）、心肌肌漿網鈣離子ATP酶（sarco/sndoplasmic reticulum Ca2+-ATPase 2a， SERCA2a）、瞬時受體電位通道3（transient receptor potential canonical 3， TRPC3）、鈣釋放激活鈣通道1（calcium release-activated calcium channel protein 1， ORAI1）、半胱氨酸（cysteinyl aspartate specific proteinase， Caspase）-3、Caspase-9的蛋白表達。結果 與正常組相比，模型組大鼠心肌組織可見細胞排列紊亂，橫紋模糊，大量心肌細胞壞死，線粒體Ca2+平均熒光強度、MCU、TRPC3、ORAI1、Caspase-3、Caspase-9的AOD值明顯升高（P＜0.01），Ca2+-Mg2+-ATP酶活性、SERCA2a的AOD值明顯下降（P＜0.01）；與模型組相比，他汀組以及血府逐瘀湯各劑量組，心肌細胞水腫程度減輕，炎性細胞浸潤減少，細胞排列相對緊密，細胞病理損傷程度有所緩解，他汀組以及血府逐瘀湯各劑量組的SERCA2a的AOD值顯著上升（P＜0.01），線粒體Ca2+平均熒光強度、MCU、TRPC3、ORAI1、Caspase-9的AOD值顯著下降（P＜0.05，P＜0.01），血府逐瘀湯各劑量組的Ca2+-Mg2+-ATP酶活性顯著上升（P＜0.05，P＜0.01）以及Caspase-3的AOD值顯著下降（P＜0.05，P＜0.01）。結論 血府逐瘀湯可以調控冠心病血瘀證模型大鼠心肌線粒體鈣離子轉運，調節心肌細胞線粒體鈣穩態，可能與上調SERCA2a的蛋白表達，下調MCU、TRPC3、ORAI1、Caspase-3、Caspase-9的蛋白表達相關。

〔關鍵詞〕 血府逐瘀湯；冠心病；血瘀證；線粒體；鈣超載

〔中圖分類號〕R285.5" " " " "〔文獻標志碼〕A" " " " " 〔文章編號〕doi：10.3969/j.issn.1674－070X.２０24.06.004

Mechanism of action of Xuefu Zhuyu Decoction on model rats of

coronary heart disease with blood stasis pattern based on

mitochondrial calcium homeostasis

HUANG Shuchun， ZHANG Qiuyan*， YANG Yang， LI Jing， KUANG Huifang， WANG Mingyun

Hunan University of Chinese Medicine， Changsha， Hunan 410208， China

〔Ａｂｓｔｒａｃｔ〕 Objective To explore the mechanism of action of Xuefu Zhuyu Decoction （XFZYD） in treating coronary heart disease （CHD） with blood stasis pattern based on mitochondrial calcium homeostasis. Methods A total of 150 SD rats were randomized into normal group， sham-operated group （only threading without ligation）， model group， atorvastatin calcium group （0.90 mg·kg-1·d-1， hereinafter referred to as statin group）， and low-， medium-， and high-dose XFZYD groups （3.51， 7.02， 14.04 g·kg-1·d-1， hereinafter referred to as low-， medium-， and high-dose groups）， with six rats in each group. Except for the normal and sham-operated groups， the other groups were prepared for CHD with blood stasis pattern models by ligating the left anterior descending coronary artery of the rats. After 24 hours of successful modeling， the rats were given continuous intragastric administration for 7 d. The myocardial tissue of left ventricular ischemic area in rats of each group was taken. HE staining was used to observe the necrosis of the samples. The fluorescence intensity of calcium ions in mitochondria was determined by mitochondrial calcium ion probe. The Ca2+-Mg2+-ATPase activity of myocardial cells was examined by phosphorus determination method. Immunohistochemistry was used to check the protein expressions of mitochondrial calcium uniporter （MCU）， sarco/endoplasmic reticulum Ca2+-ATPase 2a （SERCA2a）， transient receptor potential canonical 3 （TRPC3）， calcium release-activated calcium channel protein 1 （ORAI1）， cysteinyl aspartate specific proteinase-3 （Caspase-3）， and cysteinyl aspartate specific proteinase-9 （Caspase-9）. Results Compared with the normal group， the model group showed disordered cell arrangement， blurred transverse stripes， necrosis of a large number of myocardial cells， a significant increase in mitochondrial Ca2+ average fluorescence intensity and AOD values of MCU， TRPC3， ORAI1， Caspase-3， and Caspase-9 （Plt;0.01）， and an obvious decrease in Ca2+-Mg2+-ATPase activity and AOD value of SERCA2a in the myocardial tissue of rats （Plt;0.01）. Compared with the model group， the statin group and low-， medium-， and high-dose groups showed reduced myocardial cell edema， inflammatory cell infiltration， and cell pathological damage as well as relatively tight cell arrangement， meanwhile， the AOD value of SERCA2a in those groups significantly increased （Plt;0.01）， and the average fluorescence intensity of mitochondrial Ca2+， AOD values of MCU， TRPC3， ORAI1， and Caspase-9 decreased significantly （Plt;0.05， Plt;0.01）. In addition， the Ca2+-Mg2+-ATPase activity in low-， medium-， and high-dose groups increased significantly （Plt;0.05， Plt;0.01）， while the AOD value of Caspase-3 decreased significantly （Plt;0.05， Plt;0.01）. Conclusion XFZYD can regulate myocardial mitochondrial calcium ion transport and mitochondrial calcium homeostasis in rats of CHD with blood stasis pattern， which may be related to up-regulating the protein expression of SERCA2a and down-regulating the protein expressions of MCU， Caspase-3， and Caspase-9.

〔Ｋｅｙｗｏｒｄｓ〕 Xuefu Zhuyu Decoction; coronary heart disease; blood stasis pattern; mitochondria; calcium overload

冠心病（coronary heart disease， CHD）是冠狀動脈粥樣病變導致心肌缺血或壞死的心血管疾病，歸屬于中醫學“胸痹”“心痛”的范疇，血瘀證是CHD中最常見的證型之一[1]。CHD的發病機制尚不明確，多種因素和病理機制共同作用于本病，而線粒功能障礙是缺血心肌細胞受損的基本環節，線粒體鈣超載是導致線粒體結構與功能障礙的重要因素[2-3]。心肌缺血發生發展的過程中線粒體平衡被打破，ATP生成減少導致細胞內Ca2+濃度上升，誘發線粒體基質攝入鈣離子，引發線粒體鈣超載，進一步加劇心肌缺血損傷。因此，減輕線粒體鈣超載對保護缺血心肌細胞有著重要的意義。血府逐瘀湯具有活血化瘀、行氣止痛的功效，是臨床上治療CHD的常用方。血府逐瘀湯干預CHD的作用機制以抗血小板集聚，調節血脂代謝，改善循環抗心肌缺血等為主[4]。本課題組前期通過各項研究證實，血府逐瘀湯可能是通過保護血管內皮、調控線粒體自噬和代謝、抑制心肌細胞凋亡等機制，發揮保護缺血心肌的作用[5-7]。本研究以線粒體鈣穩態為切入口，探討血府逐瘀湯調控線粒體鈣穩態實現心肌缺血損傷保護的作用機制，為中醫藥治療CHD血瘀證的作用機制提供新的思路與方法。

1 材料和方法

1.1" 實驗動物

SPF級雄性SD大鼠150只，體質量220～240 g，由湖南斯萊克景達實驗動物有限公司提供。動物合格證號：NO.430727211100715381，動物許可證號： SYXK（湘）2013-0005，倫理批號：LL2021040701。飼養于湖南中醫藥大學實驗動物中心清潔級動物房，溫度20～25 ℃，相對濕度55%～60%，自由攝食飲水。

1.2" 主要藥品、試劑

血府逐瘀湯：當歸9 g，生地黃9 g，桃仁12 g，紅花9 g，枳殼6 g，牛膝9 g，川芎4.5 g，柴胡3 g，赤芍6 g，甘草6 g，桔梗4.5 g；均購自湖南中醫藥大學第一附屬醫院門診藥房，經湖南中醫藥大學第一附屬醫院制劑中心鑒定，符合用藥標準。藥液制備：加10倍量的水浸泡藥物30 min，加熱回流提取1 h，趁熱濾過；再次加入8倍量的水按上法煎煮1 h；合并兩次濾液，濃縮定容為含生藥量1.404 g/mL的藥液。阿托伐他汀片（福建東瑞制藥有限公司，規格：10 mg×28片，國藥準字：H20193043，產品批號：042206065）。

Ca2+-Mg2+-ATP酶試劑盒（批號：A0161-1-1，南京建成生物科技研究所）；MCU抗體（批號：JM10-20）、SERCA2a抗體（批號：ER1803-57）、TRPC3抗體（批號：ER65609）均購自杭州華安生物技術有限公司；ORAI1抗體（批號：Df 7956，美國Affinity公司）；Caspase-3抗體（批號：A11319）、Caspase-9抗體（批號：A11910）均購自美國Abclonal公司；Rhod-2 AM鈣離子熒光探針[批號：40776ES，翌圣生物科技（上海）股份有限公司]。

1.3" 主要儀器

臺式高速冷凍離心機（上海盧湘儀離心機儀器有限公司，型號：H1650R），倒置生物顯微鏡（北京中顯恒業儀器儀表有限公司，型號：DSZ2000X），多功能酶標分析儀（深圳市匯松科技發展有限公司，型號：MB-530），紫外可見分光光度計（上海天普分析儀器有限公司，型號：752），熒光定量RCP儀（美國Thermo公司，型號：PIKO REAL 96）。

1.4" 動物模型制備

SD大鼠適應性喂養7 d，術前禁食水24 h。參考李儀奎教授編著的《中藥藥理實驗方法學（第2版）》[8]提出的“血瘀證動物病理模型建立方法”進行動物造模。術前腹腔注射1%戊巴比妥鈉（30 mg/kg）進行麻醉，麻醉后將大鼠固定在鼠板上。于頸部和左側胸部備皮，行氣管插管，連接小動物呼吸機，呼吸比設置為2∶1，呼吸頻率為90次/min，潮氣量為30 mL，連接BL-420F生物機能實驗系統，觀察并記錄大鼠心電圖變化。大鼠左側胸部消毒后，于左前第4、5肋間開胸，皮膚切口長約3 cm，逐層鈍性分離，使用小型拉鉤鉤住肋骨，兩邊拉開，充分暴露心臟，將心包膜撕開，并輕提左心耳，找到肺動脈圓錐與左心耳中間的冠脈左前降支（left anterior descending， LAD），距主動脈根部2 mm處，以此處為結扎標志，使用6/0無創縫合絲線輕輕穿過左心耳下緣的心肌淺層，將LAD結扎。以心電圖ST段的改變及左室前壁向外膨脹發紺為造模成功標志，然后將心臟放回胸腔，關胸，逐層縫合。大鼠自主呼吸恢復后，拔出氣管。假手術組僅穿線不結扎，正常組不施加任何干預措施，其余各組行完全結扎。術后肌注青霉素8萬U/只×3 d抗感染。室內喂養，自由飲水攝食。

1.5" 動物分組及給藥

將各組SD大鼠隨機分為正常組、假手術組、阿托伐他汀鈣組（以下簡稱他汀組）以及血府逐瘀湯低、中、高劑量組（以下簡稱低、中、高劑量組）。在造模成功24 h后開始灌胃給藥，1日1次，連續7 d。詳見表1。

1.6" 指標檢測

第7天灌胃后，腹主動脈采血，處死動物，取出心臟，切取各組左室缺血區心肌，HE染色及免疫組織化學所用標本經生理鹽水沖洗干凈后，使用4%多聚甲醛固定；其余指標檢測標本生理鹽水沖洗干凈后，存于無菌凍存管，液氮冰凍保存。

1.6.1" 心肌組織病理學觀察" 將固定在4%多聚甲醛內的心肌組織樣本制成4 μm的石蠟切片，在60 ℃的恒溫箱中烘烤1～2 h。將切片浸置于二甲苯10 min×2次，再將組織切片于梯度（無水、95%、85%、75%）乙醇中進行清洗，每級5 min，再置于蒸餾水中5 min。蘇木素染色約1～3 min，流水沖洗，PBS返藍。伊紅染色1～3 min，流水沖洗。梯度（無水、95%、85%、75%）乙醇脫水，每級5 min。再將切片浸置于二甲苯5 min×2次。中性樹膠封片封固。在光學顯微鏡下觀察心肌細胞的形態變化并采集圖像。

1.6.2" 線粒體鈣離子熒光強度檢測" 將心肌組織剪碎，加入3 mL混合酶溶液（0.4%Ⅱ型膠原酶∶0.125%胰酶=2∶1），消化15 min后，棄去上清液。再在組織中加入3 mL混合酶溶液，37 ℃條件下消化8 min后，加入DMEM完全培養基中終止消化，吸取上清液。細胞懸液在1000 r/min條件下離心5 min后，加入5 mL紅細胞裂解液重懸，室溫裂解5 min。然后1000 r/min離心5 min，棄去上清液，PBS清洗后加入完全培養基重懸細胞。吸取掉細胞培養液后，加入稀釋好的線粒體鈣離子探針，重懸細胞。37℃細胞培養箱內孵育30 min，然后用不含血清的細胞培養液洗滌細胞3次。采用流式細胞儀進行線粒體鈣離子強度檢測。

1.6.3" 心肌細胞Ca2+-Mg2+-ATP 酶活性檢測" 取大鼠心肌組織，稱定準確質量后，按1∶9質量體積比加入蒸餾水后勻漿，3 000 r/min離心10 min，取上清液100 μL與2 000 μL定磷液勻漿，根據Ca2+-Mg2+-ATP酶測試盒的說明進行操作，按照定磷法檢測心肌細胞Ca2+-Mg2+-ATP酶活性。蒸餾水調零，用1 cm光徑于660 nm處檢測吸光度值計算其活性。

1.6.4" 免疫組織化學檢測心肌組織SERCA2a、MCU、TRPC3、ORAI1、Caspase-3、Caspase-9的蛋白表達" 將心肌組織從固定的多聚甲醛取出后，PBS沖洗，組織脫水后進行常規石蠟切片（4 μm），60 ℃恒溫烤箱烘烤2 h；梯度（無水、95%、85%、75%）乙醇脫蠟復水。抗原修復一次，枸櫞酸鈉緩沖液（pH 6.0）放置微波爐中至沸騰后加入組織切片，斷電，間隔5～10 min，重復1～2次，冷卻置室溫后取出切片，PBS沖洗3次，每次3 min。濕盒中進行一抗孵育：適當滴加稀釋的一抗（SERCA2a、MCU、TRPC3、ORAI1、Caspase-9、Caspase-3），4 ℃過夜，PBS沖洗3次，每次5 min。滴加反應增強液，室溫20 min，PBS洗3次，每次2 min。滴加二抗，37 ℃孵育60 min，PBS沖洗3次，每次5 min。滴加DAB顯色，顯微鏡下觀察顯色結果，雙蒸水終止反應。蘇木素復染：3 min，水洗，鹽酸乙醇分色，自來水中促藍。75%、85%、95%、100%的乙醇，每級1～2 min。流水沖洗、復染、脫水透明，中性樹膠封片。顯微鏡下觀察，用Image J 圖像分析系統分別測量每張切片中3個視野MCU、SERCA2a、TRPC3、ORAI1、Caspase-9、Caspase-3的面積積分光密度（integrated optical density， IOD）以及對應的面積（Area），并計算出平均光密度值（average optical density， AOD），AOD=IOD/Area。

1.7" 統計學方法

采用SPSS 25.0軟件進行統計處理，計量資料采用“ｘ±s”表示，滿足正態性者，不同組間相比采用單因素方差分析（One-WayANOVA），并進行組間的多重相比，方差齊時選擇LSD法，方差不齊時選擇Dunnett T3法；不滿足正態性時選擇秩和檢驗。以Plt;0.05差異具有統計學意義。

2 結果

2.1" 血府逐瘀湯對CHD血瘀證模型大鼠心肌組織病理學形態的影響

正常組與假手術組，均未見明顯病理形態改變，細胞形態規整，排列有序，橫紋清晰；與正常組相比，模型組大鼠心肌組織可見細胞排列紊亂，橫紋模糊，心肌細胞空泡變性，大量炎性細胞浸潤，大量心肌細胞壞死；與模型組相比，他汀組和低、中、高劑量組，心肌細胞水腫程度減輕，炎性細胞浸潤減少，細胞排列相對緊密，細胞病理損傷程度有所緩解；與他汀組相比，低、中、高劑量組的心肌細胞受損情況顯著減輕；與低、中劑量組相比，高劑量組心肌病理損傷程度明顯降低。詳見圖1。

2.2" 血府逐瘀湯對CHD血瘀證模型大鼠心肌細胞線粒體Ca2+平均熒光強度的影響

與正常組和假手術組相比，模型組線粒體Ca2+平均熒光強度明顯升高（P＜0.01）；與模型組相比，他汀組和低、中、高劑量組線粒體Ca2+平均熒光強度明顯下降（P＜0.01）；與他汀組相比，中、高劑量組線粒體Ca2+平均熒光強度明顯下降（P＜0.05，P＜0.01）；與低劑量組相比，中、高劑量組線粒體Ca2+平均熒光強度明顯下降（P＜0.05，P＜0.01）；與中劑量組相比，高劑量組線粒體Ca2+平均熒光強度明顯下降（P＜0.05）。詳見表2、圖2。

2.3" 血府逐瘀湯對CHD血瘀證模型大鼠心肌細胞Ca2+-Mg2+-ATP酶活性的影響

與正常組和假手術組相比，模型組Ca2+-Mg2+-ATP酶活性下降（P＜0.05，P＜0.01）；與模型組相比，低、中、高劑量組的Ca2+-Mg2+-ATP酶活性升高（P＜0.05，P＜0.01）；與他汀組相比，中、高劑量組Ca2+-Mg2+-ATP酶活性升高（P＜0.05，P＜0.01）；與低劑量組相比，高劑量組Ca2+-Mg2+-ATP酶活性升高（P＜0.01）。詳見表3。

2.4" 血府逐瘀湯對CHD血瘀證模型大鼠心肌組織SERCA2a、MCU、TRPC3、ORAI1、Caspase-3、Caspase-9蛋白表達的影響

與正常組和假手術組相比，模型組SERCA2a的AOD值顯著下降（P＜0.01）；與模型組相比，他汀組和低、中、高劑量組SERCA2a的AOD值顯著升高（P＜0.01）；與他汀組相比，高劑量組SERCA2a的AOD值顯著升高（P＜0.01）；與低劑量組相比，中、高劑量組SERCA2a的AOD值顯著升高（P＜0.05，P＜0.01）；與中劑量組相比，高劑量組SERCA2a的AOD值顯著升高（P＜0.05）。詳見表4、圖2。

與正常組和假手術組相比，模型組MCU、TRPC3、ORAI1、Caspase-3、Caspase-9的AOD值明顯升高（P＜0.01）；與模型組相比，他汀組和低、中、高劑量組MCU、TRPC3、ORAI1、Caspase-9的AOD值明顯下降（P＜0.01），低、中、高劑量組Caspase-3的AOD值顯著下降（P＜0.05，P＜0.01）；與他汀組相比，中、高劑量組MCU、TRPC3、ORAI1、Caspase-3、Caspase-9的AOD值明顯下降（P＜0.05，P＜0.01）；與低劑量組相比，高劑量組MCU、TRPC3、Caspase-3、Caspase-9的AOD值明顯下降（P＜0.01），中、高劑量組ORAI1的AOD值明顯下降（P＜0.01）；與中劑量組相比，高劑量組MCU、TRPC3、ORAI1、Caspase-3、Caspase-9的AOD值明顯下降（P＜0.05，P＜0.01）。詳見表4—6，圖2—7。

3 討論

我國現有約3.3億心血管疾病患者，其中CHD患者1 139萬，且CHD的死亡率呈現逐年上升的趨勢[9]，CHD早已成為我國的重大公共衛生問題，防治CHD刻不容緩。中醫學認為CHD的病機總屬本虛標實，本虛為氣血陰陽不足、心脈失養，標實為瘀血、氣滯、痰濕、寒凝等痹阻心脈，病位在心。血府逐瘀湯出自《醫林改錯》，王清任針對胸中血瘀證，創立此方，由桃仁、當歸、川芎、牛膝、紅花、桔梗、生地黃、柴胡、赤芍、枳殼、甘草11味藥物組成，方中以當歸、赤芍、川芎、桃仁和紅花活血為伍，配伍柴胡、桔梗與枳殼等寬胸行氣、調暢氣機，全方活血為主，兼以行氣，以奏活血化瘀、行氣止痛之效。現代藥理學研究表明，當歸和川芎具有保護心肌細胞的作用，其機制可能是通過穩定缺氧心肌細胞膜，保護線粒體功能，通過鈣拮抗，抑制細胞鈣超載，減少缺血區細胞凋亡的發生[10-12]。本實驗中血瘀證模型大鼠在給予血府逐瘀湯之后，心肌細胞線粒體鈣離子濃度下降，心肌組織病理改變改善，表明血府逐瘀湯對血瘀證模型大鼠的心肌細胞具有一定的保護作用。

心肌缺血缺氧后，圍繞梗死血管周圍的缺血心肌組織結構和功能遭受破壞。如何維持心肌細胞結構和能量代謝，減輕心肌細胞損傷，是現代醫學研究的重點問題。心肌細胞是對能量代謝敏感的高耗能細胞，心肌能量剝奪是缺血性心臟病發病的關鍵。線粒體作為細胞的能量源，其功能障礙在心肌缺血的發生發展中發揮著關鍵作用[13]。線粒體功能障礙可改變細胞內Ca2+敏感通路[14]，使胞漿Ca2+水平升高，引起線粒體Ca2+超載，最終導致細胞死亡。因此，調節線粒體Ca2+轉運，減輕線粒體鈣超載能夠改善心肌缺血損傷，有效保護心肌，對尋找減輕CHD心肌缺血損傷的作用靶點具有重要意義。

有研究表明，心肌細胞內質網和線粒體內儲存鈣離子和靜息狀態胞漿內游離鈣離子濃度很低。CHD血瘀證心肌缺血時心肌細胞供氧供能水平下降，使得ATP酶SERCA2a和Ca2+-Mg2+-ATP酶的活性下降[15-16]，SERCA2a不能將胞質中多余的Ca2+泵到肌漿網中，內質網中的鈣庫耗竭可激活ORAI1[17]，導致大量Ca2+向心肌細胞內轉移，線粒體攝取細胞內過量Ca2+調節細胞內鈣穩態失衡[18]，線粒體電子傳遞失衡導致線粒體能量代謝下降在心臟缺血期間維持進行性損傷[19]。同時，線粒體鈣超載導致Ca2+依賴性離子通道開放，線粒體膜通透性改變，線粒體結構受損，誘導線粒體向細胞質中釋放一系列促凋亡因子結合成凋亡復合體，激活Caspase-9，Caspase-9的啟動進而激活下游Caspase-3進入不可逆的凋亡過程，這些變化因素最終導致心肌細胞死亡[20]。

線粒體通過機制調節Ca2+的信號傳導，維持細胞內Ca2+穩態，影響著細胞的有氧代謝和生存死亡[21]。MCU復合物活化和線粒體鈣超載是心血管疾病的潛在機制[22]。MCU是線粒體Ca2+攝取的最主要離子通道[23]，是鈣穩態調節的關鍵因子。但MCU不是線粒體攝取Ca2+的唯一通路，44%的總經典TRPC3定位于線粒體內膜，當線粒體外鈣離子濃度較高時大量Ca2+可以通過TRPC3進入線粒體[24]。這些鈣離子通道在線粒體維持鈣穩態中發揮重要的作用。

因此，維持線粒體鈣穩態保護線粒體結構與功能的完整性對保護心肌細胞生理功能具有重要的意義，影響能量代謝，細胞凋亡[25]。有研究表明[26-27]，抑制線粒體鈣超載，能有效保護線粒體結構，抑制線粒體途徑誘導的細胞凋亡，保護心肌細胞。

本研究結果顯示，血府逐瘀湯可以明顯改善缺血心肌組織病理形態，在低、中、高劑量組中，高劑量組效果最佳；血府逐瘀湯可以降低線粒體內鈣離子濃度，調節線粒體內鈣穩態，可能與提高心肌組織中Ca2+-Mg2+-ATP酶活性、上調SERCA2a的蛋白表達、下調MCU、TRPC3、ORAI1、Caspase-9和Caspase-3的蛋白表達有關。

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