防治草莓炭疽病的增效藥劑組合篩選及效果評價

摘 要：采用菌絲生長速率法測定了5種殺菌劑對草莓炭疽病菌的室內毒力，將2種抑菌效果好的殺菌劑復配篩選增效配比，并在溫室驗證了其防治效果和對草莓植株的影響。結果表明，吡唑醚菌酯和苯醚甲環唑對草莓炭疽病菌均表現出良好的抑菌效果，EC50值分別為0.80 mg/L和6.33 mg/L" ；吡唑醚菌酯和苯醚甲環唑2個配比的增效系數分別是0.70和1.51，表現為相加或增效作用，其中2∶1配比的共毒系數最大。在設施條件下，移栽時用30%苯醚甲環唑·吡唑醚菌酯懸浮劑（吡唑醚菌酯和苯醚甲環唑2∶1）稀釋1 500～2 000倍蘸根處理，對草莓炭疽病具有良好的防治效果，同時對草莓生長無負面影響。

關鍵詞：草莓炭疽?。贿吝蛎丫ィ槐矫鸭篆h唑；增效

中圖分類號： S668.4" 文獻標識碼： A

文章編號： 1002-2910（2024）02-0021-06

收稿日期：2024-02-19

基金項目：國家重點研發計劃（2023YFD1401200）；山東省重點研發計劃（2022CXPT017）。

*通訊作者：王紅艷（1983-），女，山東滕州人，副教授，從事植物病害綜合防控研究。E-mail： sdauwhy@163.com

作者簡介：付浩然（2001-），男，山東德州人，在讀碩士研究生，從事植物病害綜合防控研究。E-mail：19806100948@163.com

Screening and evaluation of synergistic combination for strawberry anthracnose control

FU Haoran1， WANG Fengchao1， AN Meirong2， WU Chong3， GUO Yuhua1， WANG Hongyan1*

（1.College of Plant Protection， Shandong Agricultural University， Tai’an， Shandong 271018， China;2.Tianping Street Office in Daiyue District， Tai’an， Shandong 271000， China;3.Shandong Institute of Pomology， Tai’an， Shandong 271000， China）

Abstract：The indoor toxicity of five fungicides against strawberry anthracnose pathogen was measured using the mycelial growth rate method. Two fungicides with excellent effect were compounded to screen the synergistic ratios， and the control effect with the maximum co-toxicity coefficient was verified in greenhouse. The results showed that both difenoconazole and pyraclostrobin exhibited good inhibitory effects on strawberry anthracnose， and the EC50 values were 0.80 mg/L and 6.33 mg/L， respectively. The synergistic coefficients of difenoconazole and pyraclostrobin were 0.70 and 1.51， respectively. The co-toxicity coefficient of 2∶1 ratio was the best. In greenhouse， diluted 1 500～2 000 times with a 30% difenoconazole · pyraclostrobin suspension （pyraclostrobin and difenoconazole 2∶1） and treated with root dipping during transplantation had a good control effect on strawberry anthracnose and had no negative impact on strawberry growth.

Key words：strawberry anthracnose; pyraclostrobin; difenoconazole; synergism

中國是全球最大的草莓生產和消費國。截至2020年，中國草莓種植面積已達到12.72萬hm2，并且呈現持續增長的趨勢［1，2］。隨著鄉村振興戰略的推進，草莓產業已成為現代農業的支柱產業之一。但草莓在生育期病蟲害多而復雜，嚴重影響草莓的產量和質量，特別是高溫高濕天氣導致草莓苗期病害尤為嚴重，這其中又以草莓炭疽病為甚［3-5］。炭疽病可在整個草莓生長期產生危害，尤其是苗期和移栽期的匍匐莖、葉片、葉柄、根冠等部位容易染病，甚至導致整株死亡［6］。目前生產上主要采用甲氧基丙烯酸酯類、咪唑類、三唑類、苯并咪唑類等化學殺菌劑進行草莓炭疽病的防治［7］。但已登記的防治草莓炭疽病的殺菌劑以單劑為主，具有高度的選擇?；?，在長期高劑量殺菌劑的應用下，導致草莓炭疽病菌產生嚴重的抗藥性［8，9］。

筆者對5種農藥單劑進行了草莓炭疽病菌的室內毒力試驗，并選擇了抑菌效果較好的吡唑醚菌酯和苯醚甲環唑進行復配試驗，以明確 2 種藥劑防治炭疽病的最佳配比，為草莓炭疽病的防治提供有效藥劑。

1 試驗材料

1.1 供試菌株

草莓炭疽病菌（Colletotrichum gloeosporioides） 采自濰坊市草莓大棚，進行實驗室分離、鑒定，菌株于4 ℃環境下保存于馬鈴薯蔗糖瓊脂（PDA） 平板上備用（圖1）。將菌種在PDA培養基平板上轉接1次后，置于25 ℃條件下培養6 d，從菌落邊緣取直徑5 mm菌絲塊用做藥劑毒力測定［10］。

1.2 供試藥劑

原藥。①97%苯醚甲環唑原藥， 山東省聯合農藥工業有限公司；②98%吡唑醚菌酯原藥， 山東省聯合農藥工業有限公司；③98%肟菌酯原藥， 山東省聯合農藥工業有限公司；④98%氟醚菌酰胺原藥，山東省聯合農藥工業有限公司；⑤98%多菌靈原藥，山東濰坊潤豐化工股份有限公司（常規對照藥劑）。

田間防治用藥。①10%苯醚甲環唑微乳劑，山東省聯合農藥工業有限公司；②20%吡唑醚菌酯懸浮劑，山東省濟南賽普實業有限公司；③30%苯醚甲環唑·吡唑醚菌酯懸浮劑，湖南農大海特農化有限公司。

2 試驗設計與方法

2.1 5種原藥對草莓炭疽病菌的防效篩選

為測定5種原藥室內毒力，對5種原藥設置不同濃度配比，以篩選草莓炭疽病菌防效最佳藥劑。5種原藥的濃度設置詳見表1。多菌靈原藥以稀鹽酸溶解，其余供試原藥均由丙酮溶解，配置成濃度為1 000 mg/L的母液，于4 ℃保存備用。

2.2 殺菌劑對草莓炭疽病菌的室內毒力測定

選擇防效較好的吡唑醚菌酯和苯醚甲環唑2種藥劑進行復配［11］。不同配方的濃度設置見表2。吡唑醚菌酯和苯醚甲環唑2種殺菌劑與不同配方的濃度設計為1∶1、2∶1的2個比例濃度含藥PDA 培養基，試驗所用殺菌劑系列濃度的藥液均為現配現用。

供試菌株在PDA培養基平板上于溫度25 ℃條件下培養6 d后，每個菌落用十字交叉法測量其直徑，以不含殺菌劑的PDA培養基培養的菌落為對照，計算藥劑的抑制率，按毒力回歸方程y=a+bx計算藥劑抑制菌絲生長的有效中濃度（EC50），將其作為毒力參數［12］。并計算：

菌落增長直徑D=D1-D2，式中D1為菌落直徑，D2為菌餅直徑。

菌絲生長抑制率I（%）=（D0-Dt）/D0×100，式中，D0為空白對照菌落增長直徑，Dt為藥劑處理菌落增長直徑［13］。操作重復 4 次，取平均值。

2.3 殺菌劑對草莓炭疽病菌離體試驗的最佳配比篩選

計算吡唑醚菌酯與苯醚甲環唑混劑的有效中濃度EC50（exp）和增效系數（SR） 。

式中，a代表混劑中A的百分比；b代表混劑中B的百分比；EC50（exp）為混劑EC50的理論值，EC50 （obs）為混劑EC50實測值。EC50通過增效系數SR來評估吡唑醚菌酯與苯醚甲環唑混用的增效作用，SR＞1.5為增效作用，0.5≤SR≤1.5為相加作用，SR＜0.5為拮抗作用［13］。

2.4 溫室防治效果試驗

溫室試驗分別設10%苯醚甲環唑微乳劑1 500倍液，20%吡唑醚菌酯懸浮劑1 500倍液，30%苯醚甲環唑·吡唑醚菌酯懸浮劑（吡唑醚菌酯和苯醚甲環唑2∶1）1 500、2 000和2 500倍液，共5個處理，以清水對照。每個處理重復3次，隨機區組排列。選取3葉1心的章姬草莓幼苗，去除浮土后使用不同濃度藥劑蘸根處理，瀝干水分，移栽至基質槽中，深不埋心，淺不露根［14］。

蘸根處理28 d后，調查草莓炭疽病的發病情況，計算點狀病斑的發生率、病情指數、防治效果。病情分級標準：0級，無任何癥狀；1 級病斑長度≤2.0 mm；3級病斑長度2.1～5.0 mm；5 級病斑長度 5.1～9.0 mm；7 級病斑長度9.1～15.0 mm；9 級植株萎蔫。

發病率（%）=發病株數/總株數 ×100；

病情指數=∑（病情級數×該級病害株數）/（最高病情級數×總株數）×100；

防治效果（%）=（對照組病情指數－處理組病情指數）/對照組病情指數×100。

2.5 各處理對草莓葉片葉綠素含量和光合速率的影響

同時測定使用10%苯醚甲環唑微乳劑1 500倍液、20%吡唑醚菌酯懸浮劑1 500倍液、30%苯醚甲環唑·吡唑醚菌酯懸浮劑（吡唑醚菌酯和苯醚甲環唑2∶1）1 500倍液處理及清水處理對草莓葉片葉綠素含量和光合速率的影響。選擇每株草莓各選取相鄰 3 片第三功能葉作為測定對象。采用FK－YL01葉綠素測定儀測定SPAD值代表葉綠素含量［15］。采用HM－GH10型光合作用測定儀測定葉片凈光合速率，測定時間為9∶00～10∶00，計量單位為μmolCO2/m2·s。使用軟件SPSS 22.0對數據進行統計分析。

3 結果與分析

3.1 5種殺菌劑對草莓炭疽病菌菌絲生長的抑制作用

試驗結果顯示，5 種殺菌劑對草莓炭疽病菌均有一定的毒力作用，其中苯醚甲環唑的毒力最強，EC50為0.80 mg/L（表3）。5 種單劑的抑制中濃度（EC50 ） 依次為苯醚甲環唑（0.80 mg/L）＜多菌靈（3.61 mg/L）＜吡唑醚菌酯（6.33 mg/L） ＜肟菌酯（10.35 mg/L） ＜氟醚菌酰胺（12.25 mg/L）。

3.2 吡唑醚菌酯與苯醚甲環唑不同配比對草莓炭疽病菌菌絲生長的抑制

從表4可以看出，不同藥劑隨著濃度的升高對草莓炭疽病菌菌絲生長的抑菌率都有不同程度的提高，其中當苯醚甲環唑濃度為0.05～1.6 mg/L時，其抑菌率為16.88%～60.57%；當吡唑醚菌酯濃度為1.25～50 mg/L時，其抑菌率為39.29%～65.67%；當吡唑醚菌酯與苯醚甲環唑的配比分別為1∶1、2∶1時，其抑菌率分別為9.95%～46.51%和21.77%～51.93%（圖2）。

3.3 吡唑醚菌酯和苯醚甲環唑對草莓炭疽病菌的聯合毒力測定

篩選到毒力較高且作用機制不同的殺菌劑吡唑醚菌酯和苯醚甲環唑，將二者復配后根Wedley法確定其最佳配比［16］。依據毒力回歸曲線方程、抑制中濃度和SR值可知（表5），吡唑醚菌酯與苯醚甲環唑復配比例為2∶1時，其SR值最高，為1.51，表現為增效作用，此時EC50為1.27 mg/L，而1∶1復配比例的SR值是0.70，表現為相加作用。

3.4 苯醚甲環唑、吡唑醚菌酯對溫室草莓炭疽病的防治效果

表6表明，在移栽蘸根處理28 d后，30%苯醚甲環唑·吡唑醚菌酯懸浮劑1 500倍處理對草莓炭疽病的防效最高，為88.13%，其次是30%苯醚甲環唑·吡唑醚菌酯懸浮劑2 000倍處理的防效，為84.99%，中、高濃度復配處理的防效均高于吡唑醚菌酯和苯醚甲環唑單劑處理的防效（Plt;0.05），30%苯醚甲環唑·吡唑醚菌懸浮劑2 500倍處理的防效最低。30%吡唑醚菌酯與苯醚甲環唑復配（2∶1）稀釋1 500～2 000倍對草莓炭疽病有較好的防治效果。

3.5 苯醚甲環唑、吡唑醚菌酯處理對溫室草莓生長的影響

通過草莓葉片的葉綠素含量（表7）和葉片凈光合速率（表8）測定結果可以得知，苯醚甲環唑、吡唑醚菌酯及其復配藥劑對草莓葉片葉綠素含量和光合速率沒有顯著性負面影響，各處理間差異不顯著（Plt;0.05）。

4 小結

當前，針對植物病害的防控是一種綜合運用農業、物理、生物、生態、化學等多種技術手段和途徑進行防治的技術模式［17］。在這一領域，研究人員正積極探索和研究新的高效、低毒且環境友好的復配劑，這已成為

當前行業內的趨勢和熱點［18］。根據中國農藥信息網顯示，苯醚甲環唑自從被登記以來，目前有多個復配產品，噁菌靈、噻蟲嗪、辛硫磷和氰烯菌酯都參與到苯醚甲環唑的復配中來，主要用于防治小麥上的全蝕病和紋枯病以及草莓上的上的枯萎病。

本研究發現，5種殺菌劑對草莓炭疽病菌的抑制中濃度最低的是苯醚甲環唑，在防治草莓炭疽病菌上，吡唑醚菌酯與苯醚甲環唑復配比例為2∶1 時，對草莓炭疽病菌具有顯著的增效作用，增效指數為1.51。該復配制劑在溫室試驗中表現出較高的防治效果，且對草莓植株生長表現出較高的安全性，同時有效地減少了化學藥劑的用量。這將為草莓炭疽病的綠色高效防控提供支撐，同時也為防治草莓炭疽病的藥劑登記提供新選擇。

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