NM23基因與非小細(xì)胞肺癌臨床病理學(xué)特征及18F-FDG PET/CT影像特征的相關(guān)性

摘要：目的" 比較非小細(xì)胞肺癌中NM23基因表達(dá)情況不同在其臨床病理學(xué)特征、18F-FDG PET/CT影像特征、生存時(shí)間的差異。方法" 選擇2018年1月～2022年 12月于新疆醫(yī)科大學(xué)附屬醫(yī)院病理確診為非小細(xì)胞癌的107例患者的術(shù)后標(biāo)本，運(yùn)用免疫組化方法檢測(cè)NM23表達(dá)情況，分為NM23低表達(dá)組（≤++）（n=64）與NM23高表達(dá)組（gt;++）（n=43），比較兩組的臨床病理學(xué)特征、18F-FDG FDG PET/CT圖像上影像特征、生存期方面的差異。結(jié)果" NM23低表達(dá)組與高表達(dá)組在性別、臨床分期、組織類(lèi)型、分化程度、吸煙、PET/CT圖像上生長(zhǎng)部位、生存時(shí)間的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Pgt;0.05），但在原發(fā)灶分期、PET/CT圖像上淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Plt;0.05）。結(jié)論" NM23基因在非小細(xì)胞癌患者T分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移方面支持其為抑癌基因。

關(guān)鍵詞：非小細(xì)胞肺癌；NM23基因；臨床病理學(xué)特征；正電子發(fā)射斷層顯像；生長(zhǎng)部位；生存時(shí)間

Correlation between NM23 gene expression and the growth site and lymph node metastasis of non-small cell lung cancer in 18F-FDG PET/CT

XIA Luhua1， CHONG Le2， LI Hongyu3， GUO Peng1， DONG Zhanfei1， WANG Xinhua1， CHANG Cheng1

1Department of Nuclear Medicine，" 2Department of Ultrasound Medicine， 3Department of Breast Medicine， Tumor Hospital Affiliated to Xinjiang Medical University， Urumqi 830011， China

Abstract： Objective To compare the differences in clinicopathologic features， 18F-FDG PET/CT imaging features and survival time among non-small cell lung cancer with different NM23 gene expression profiles. Methods A total of 107 postoperative specimens of patients diagnosed with non-small cell lung cancer at the Affiliated Hospital of Xinjiang Medical University from January 2018 to December 2022 were selected as the research subjects. Immunohistochemistry was used to detect the expression of NM23， and the patients were divided into two groups： NM23 low expression group （≤++） with 64 cases and NM23 high expression group （gt;++） with 43 cases. The clinical and pathological characteristics， lymph node metastasis， tumor growth site under 18F-FDG PET/CT imaging， and survival period differences between the two groups were compared. Results The low-expression group and high-expression group of the NM23 gene showed no statistically significant differences in terms of gender， clinical stage， histological type， differentiation degree， smoking， PET/CT imaging location of tumor growth and survival time （Pgt;0.05）. There were statistically significant differences" in both the primary tumor stage and the presence of lymph node metastasis on PET/CT imaging （Plt;0.05）. Conclusion NM23 gene is supported as a tumor suppressor gene in non-small cell lung cancer patients in terms of T staging and lymph node metastasis.

Keywords： non-small cell lung cancer; NM23 gene; clinicopathological features; PET/CT; growth site; survival time

肺癌為全世界范圍內(nèi)死亡率及發(fā)病率均較高的惡性腫瘤之一，其中小細(xì)胞肺癌（SCLC）約占15%，非小細(xì)胞肺癌（NSCLC）約占85%［1-3］。多種治療方式結(jié)合治療為肺癌的主要治療方法。隨著世界范圍內(nèi)肺癌診治信息的快速傳播與交流，國(guó)際肺癌臨床診療規(guī)范的實(shí)施以及我國(guó)開(kāi)展了多項(xiàng)肺癌臨床試驗(yàn)與研究，我國(guó)肺癌的預(yù)防、診治、監(jiān)測(cè)水平取得了很大的進(jìn)步。肺癌細(xì)胞的轉(zhuǎn)移是一個(gè)復(fù)雜且精細(xì)的過(guò)程，受到多種基因的調(diào)控及癌細(xì)胞與宿主免疫細(xì)胞間的相互作用等多種因素的影響，探索與癌癥相關(guān)的基因表達(dá)情況與臨床病理學(xué)特征及生存情況有重大的意義，NM23基因在20世紀(jì)80年代作為一種癌癥轉(zhuǎn)移抑制基因被發(fā)現(xiàn)，在惡性腫瘤腫瘤如頭頸部惡性腫瘤、乳腺癌、肺癌、卵巢癌、肝癌、惡性黑色素瘤等惡性腫瘤中，具有抑制癌細(xì)胞生長(zhǎng)且促進(jìn)癌細(xì)胞凋亡的能力［4-7］，但NM23與各類(lèi)惡性腫瘤臨床病理學(xué)特征、轉(zhuǎn)移情況、生長(zhǎng)部位及患者預(yù)后等方面的研究納入的指標(biāo)不夠全面，樣本量也較少，還有待進(jìn)一步詳細(xì)的研究［8］。本研究基于臨床信息及免疫組化結(jié)果比較了NM23基因在NSCLC中的不同表達(dá)情況與臨床病理學(xué)特征、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況、患者生存時(shí)間的相關(guān)性，以期為NSCLC患者診斷及治療提供更多有價(jià)值的信息。

1" 資料與方法

1.1 一般資料

選擇2018年1月～2022年12月于新疆醫(yī)科大學(xué)附屬醫(yī)院NM23表達(dá)陽(yáng)性的107例NSCLC患者臨床病例資料，其中女性26例，男性81例，年齡53～74（62.37±5.53）歲；病理類(lèi)型：鱗癌53例，腺癌54例。納入標(biāo)準(zhǔn)： NSCLC患者術(shù)后標(biāo)本，經(jīng)病理明確診斷為NSCLC；有NM23基因免疫組化檢測(cè)結(jié)果者；簽署了留取標(biāo)本知情同意書(shū)。排除標(biāo)準(zhǔn)：病理診斷為SCLC及其他類(lèi)型肺腫瘤標(biāo)本及肺良性疾病標(biāo)本。本研究通過(guò)醫(yī)院倫理學(xué)審批［倫理審批號(hào)（K-2022021）］。

1.2" 方法

1.2.1" 實(shí)驗(yàn)儀器" 顯微鏡攝像裝置（102M型）；攤片烤片機(jī)（Slidetec HEAT型）；CO2培養(yǎng)箱（HH.CP-160型）；全自動(dòng)石蠟切片機(jī)（CUT 6062型）；醫(yī)學(xué)圖像分析系統(tǒng)（EPSON STYLUS PHOTO 915型）。

1.2.2" 實(shí)驗(yàn)試劑" "NM23鼠抗人單克隆抗體（北京奧維亞生物技術(shù)有限公司），免疫組織化學(xué)試劑盒、PBS緩沖液、NM23抗體稀釋液、粘片劑（福州邁新生物技術(shù)開(kāi)發(fā)有限公司）。

1.2.3" 實(shí)驗(yàn)要求" 陰性（-）對(duì)照，使用磷酸（PO4-）鹽緩沖液一抗；陰性對(duì)照（-）為對(duì)比相同染色條件下的陽(yáng)性（+）樣片，以上操作均嚴(yán)格按照操作說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。

1.2.4" 實(shí)驗(yàn)方法" "S-P免疫組化，NSCLC石蠟切片EnVision法。

1.2.5" 實(shí)驗(yàn)判定方法" "分析NM23在NSCLC中的表達(dá)差異，根據(jù)評(píng)分分為NM23低表達(dá)組（n=64）與NM23高表達(dá)組（n=43）。評(píng)分依據(jù)：①陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)量評(píng)分：腫瘤細(xì)胞中出現(xiàn)棕黃色顆粒為陽(yáng)性（陰性為0分，lt;25%為1分，25%～50%為2分，51%～75%為3分，gt;75%為4分）。②細(xì)胞染色程度標(biāo)準(zhǔn)：NSCLC肺癌細(xì)胞（不著色為0分，淡黃色為1分，棕黃色為2分，棕褐色為3分）。NM23低表達(dá)組：①+② ≤7分； NM23高表達(dá)組：①+② gt;7分。

1.2.6" 患者18F-FDG PET/CT檢查方法" "PET/CT（飛利浦GEMINI TF PET/CT）；顯像劑：18F-FDG顯像劑；空腹血糖≤6.0 mmol/L，注射顯像劑前禁食至少6 h，注射18F-FDG顯像劑量為0.1 mCi/kg體質(zhì)量；顯像劑注射完成后要求患者安靜平臥45～60 min；檢查體位取仰臥位；掃描范圍為頭頂至大腿根部；檢查時(shí)間約20 min，圖像數(shù)據(jù)傳輸后在 Medex 工作站觀察圖像。

1.3" 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

采用SPSS27.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，計(jì)數(shù)資料以n（%）表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)，以Plt;0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2" 結(jié)果

2.1" 臨床病理學(xué)特征比較

NM23基因低表達(dá)≤（++）組與NM23高表達(dá)gt;（++）組在性別、臨床分期、組織類(lèi)型、分化程度、吸煙情況的差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Pgt;0.05）；但原發(fā)灶分期的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Plt;0.001，表1）。

2.2" 18F-FDG PET/CT圖像上生長(zhǎng)部位比較

NM23基因低表達(dá)組與NM23基因高表達(dá)組在NSCLC生長(zhǎng)在右肺上、中、下葉的表達(dá)差異、以及肺癌生長(zhǎng)在左肺上葉與下葉表達(dá)情況差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Pgt;0.05，表2）。

2.3" "18F-FDG PET/CT圖像淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況

NM23基因低表達(dá)組與NM23基因高表達(dá)組在NSCLC淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Plt;0.001，表3）， 18F-FDG PET/CT在NSCLC中淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移圖像（圖1）。

2.4" 生存時(shí)間比較

NM23基因低表達(dá)組與NM23基因高表達(dá)組在NSCLC患者生存時(shí)間的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Pgt;0.05）。

2.5" NM23表達(dá)的NSCLC患者術(shù)后病理圖

術(shù)后證實(shí)NM23基因表達(dá)陽(yáng)性的NSCLC病理圖，每張切片分別隨機(jī)選擇5個(gè)低倍（×200）和高倍視野（×400）（圖2）。

3" 討論

有學(xué)者在鼠黑色素瘤cDNA庫(kù)中發(fā)現(xiàn)了NM23基因［9］，其具有轉(zhuǎn)移抑制潛能［10-14］，研究NM23基因的抑癌作用是非常重要的，尤其應(yīng)關(guān)注其與LC臨床病理學(xué)特征及預(yù)后情況方面的價(jià)值。本研究結(jié)果顯示，NSCLC中NM23基因高與低表達(dá)組在原發(fā)灶分期（T1～T2期vs T3～T4期）、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況（轉(zhuǎn)移vs 未轉(zhuǎn)移）的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，在腫瘤生長(zhǎng)部位及30月生存時(shí)間方面的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

本研究顯示，NM23基因低表達(dá)組與NM23基因高表達(dá)組在原發(fā)灶分期，即T分期上差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，這與既往研究［15］報(bào)道的NM23基因高表達(dá)與T分期呈負(fù)相關(guān)關(guān)系的研究結(jié)果一致。NM23基因表達(dá)越高，癌灶越小；NM23基因表達(dá)越低，癌灶越大，說(shuō)明NM23基因在癌癥發(fā)生發(fā)展過(guò)程中起抑制作用。淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移一般被認(rèn)為是癌癥轉(zhuǎn)移的階段性標(biāo)志，NSCLC轉(zhuǎn)移首先浸潤(rùn)的是淋巴結(jié)，然后才是血行轉(zhuǎn)移至其他部位，了解淋巴結(jié)的轉(zhuǎn)移情況不僅為NSCLC患者選擇治療方案的重要參考依據(jù)，也是判斷患者預(yù)后情況的重要指標(biāo)。以往研究發(fā)現(xiàn)NM23蛋白的升高表達(dá)與多種惡性腫瘤的轉(zhuǎn)移能力降低相關(guān)，尤其在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移方面［16-18］，本研究顯示NM23的高表達(dá)能夠抑制淋巴結(jié)的轉(zhuǎn)移，這與既往研究［19-20］結(jié)果一致。

一項(xiàng)薈萃分析顯示，NM23可能被用作NSCLC的預(yù)后指標(biāo)，該研究發(fā)現(xiàn)NM23陽(yáng)性的NSCLC患者的5年生存率高于NM23陰性患者，NM23陽(yáng)性的NSCLC患者的5年腫瘤轉(zhuǎn)移率比NM23陰性患者低，NM23是有利的NSCLC預(yù)后的正面指標(biāo)，NM23表達(dá)與NSCLC的進(jìn)展相關(guān)［21］，這與另一項(xiàng)研究［22］結(jié)果一致，NM23表達(dá)可以作為NSCLC可靠且獨(dú)立的預(yù)后指標(biāo)。本研究結(jié)果顯示，NM23表達(dá)與NSCLC生存時(shí)間的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，與其研究結(jié)果不一致，可能與隨訪時(shí)間不夠長(zhǎng)，樣本量較小，患者自身基礎(chǔ)情況、術(shù)后治療方案差異、術(shù)后患者心理情況等有關(guān)，或與NSCLC自身特點(diǎn)相關(guān)，在早期就可出現(xiàn)血行轉(zhuǎn)移，對(duì)預(yù)后情況影響較大。

國(guó)內(nèi)外學(xué)者對(duì)NM23基因的持續(xù)研究，充分肯定了NM23基因在腫瘤轉(zhuǎn)移抑制方面的重要作用［23-25］。本研究結(jié)果支持NM23基因?yàn)镹SCLC抑癌基因，其抑制細(xì)胞增殖及轉(zhuǎn)移的能力可能與PI3K/AKT/mTOR信號(hào)通路受到抑制有關(guān)［26-29］。

本研究創(chuàng)新之處在于加入了NM23表達(dá)情況在18F-FDG PET/CT圖像上生長(zhǎng)部位的比較，結(jié)果顯示NM23表達(dá)情況與腫瘤生長(zhǎng)的部位不相關(guān)。后續(xù)研究中將會(huì)深入探索NM23基因與其他基因聯(lián)合表達(dá)情況與LC臨床病理學(xué)特征、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、生長(zhǎng)部位、生存情況的研究，為尋找新的腫瘤標(biāo)志物及靶基因奠定理論基礎(chǔ)。但由于受免疫組化獲得的信息及臨床病理學(xué)特征有限，本研究?jī)H納入NM23基因作為研究目的基因，很多可能引起NSCLC患者淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的其他高風(fēng)險(xiǎn)基因沒(méi)有被納入研究，本研究的局限性為僅納入了單一的NM23基因表達(dá)情況不同時(shí)與NSCLC患者的病理學(xué)特征、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、生存時(shí)間的比較情況。

綜上所述，本研究認(rèn)為NM23基因的高表達(dá)在NSCLC原發(fā)灶大小、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移方面發(fā)揮著抑制作用，能夠?yàn)镹SCLC的臨床診治工作提供有用的信息，未來(lái)NM23可能在NSCLC的診斷和預(yù)后中作為一種有價(jià)值的生物標(biāo)志物。

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（編輯：林" 萍）

基金項(xiàng)目：新疆維吾爾自治區(qū)科技支疆項(xiàng)目計(jì)劃（指令性）項(xiàng)目（2022E02050）

作者簡(jiǎn)介：夏露花，博士，副主任醫(yī)師， E-mail： xialuhuahua@163.com

通信作者：常" 誠(chéng)，主治醫(yī)師， E-mail： chch011@126.com