高效液相色譜技術(shù)在食品安全檢測(cè)中的應(yīng)用

摘 要：高效液相色譜技術(shù)憑借其準(zhǔn)確、靈敏的優(yōu)勢(shì)，不僅能精確分析食品中的營養(yǎng)成分，還可有效檢測(cè)食品中的農(nóng)藥殘留、獸藥殘留以及微生物代謝產(chǎn)物等，有利于確保食品安全性與質(zhì)量。本文通過對(duì)高效液相色譜技術(shù)在食品檢測(cè)中的應(yīng)用步驟以及實(shí)踐進(jìn)行分析，旨在能對(duì)該技術(shù)有更加深入的了解。

關(guān)鍵詞：高效液相色譜技術(shù)；食品檢測(cè)；應(yīng)用

Application of High Performance Liquid Chromatography Technology in Food Safety Testing

CAO Yuanyuan1， NI Chengxue2

（1.Zhangdian District Disease Prevention and Control Center， Zibo 255000， China;

2.Zhangdian District Market Supervision Administration， Zibo 255000， China）

Abstract： High performance liquid chromatography technology， with its advantages of accuracy and sensitivity， can not only accurately analyze the nutritional components in food， but also effectively detect pesticide residues， veterinary drug residues， and microbial metabolites in food， which is conducive to ensuring food safety and quality. This article analyzes the application steps and practices of high-performance liquid chromatography technology in food detection， aiming to gain a deeper understanding of this technology.

Keywords： high performance liquid chromatography technology; food testing; application

隨著公眾生活水平的提升和食品安全意識(shí)的增強(qiáng)，食品質(zhì)量與安全問題成為社會(huì)關(guān)注的焦點(diǎn)。食品中可能存在的農(nóng)藥殘留、重金屬、添加劑等有害物質(zhì)，會(huì)對(duì)人體健康構(gòu)成潛在威脅[1]。因此，探索快速、準(zhǔn)確的食品檢測(cè)技術(shù)尤為重要。高效液相色譜技術(shù)（High Performance Liquid Chromatography，HPLC）作為一種分離和分析復(fù)雜混合物的先進(jìn)技術(shù)，憑借其高分辨率、高靈敏度與高選擇性，能夠有效檢測(cè)食品中的微量成分與污染物，為保障食品安全提供支持[2]。本文對(duì)高效液相色譜技術(shù)在食品檢測(cè)中的具體應(yīng)用進(jìn)行探討，以期為相關(guān)研究與實(shí)踐提供參考，進(jìn)一步推動(dòng)食品安全檢測(cè)技術(shù)發(fā)展，確保公眾飲食安全。

1 高效液相色譜技術(shù)在食品檢測(cè)中的應(yīng)用步驟

高效液相色譜技術(shù)在食品檢測(cè)中的應(yīng)用步驟主要分成6步，大致流程見圖1。①樣品準(zhǔn)備。仔細(xì)對(duì)食品樣品進(jìn)行預(yù)處理，去除雜質(zhì)，保證純凈度。②色譜條件選擇。根據(jù)檢測(cè)目標(biāo)和分析要求，設(shè)定合適的流動(dòng)相、固定相、流速和溫度等，優(yōu)化分離效果。③樣品注入。將經(jīng)過預(yù)處理的樣品準(zhǔn)確注入高效液相色譜系統(tǒng)的進(jìn)樣器中，確保注入量的準(zhǔn)確性。這是獲得可靠分析結(jié)果的前提。④色譜分離。在色譜柱中，樣品各組分會(huì)根據(jù)它們?cè)诹鲃?dòng)相和固定相之間的分配差異實(shí)現(xiàn)高效分離。這是高效液相色譜技術(shù)的核心步驟，直接關(guān)系到分析的準(zhǔn)確性和分辨率。⑤檢測(cè)分析。分離后的各組分通過高靈敏度檢測(cè)器進(jìn)行檢測(cè)，生成精確的檢測(cè)信號(hào)。這是獲取分析數(shù)據(jù)的關(guān)鍵步驟，要求檢測(cè)器具有高度靈敏度和準(zhǔn)確性。⑥數(shù)據(jù)處理與解讀。深入分析數(shù)據(jù)，包括數(shù)據(jù)的整理、統(tǒng)計(jì)和分析，以及根據(jù)分析結(jié)果對(duì)食品樣品中的各組分進(jìn)行定量和定性評(píng)估，為食品安全評(píng)估提供科學(xué)依據(jù)，確保分析結(jié)果的可靠性。

2 高效液相色譜技術(shù)在食品檢測(cè)中的具體應(yīng)用

2.1 食品營養(yǎng)成分檢測(cè)

2.1.1 糖類檢測(cè)

糖類作為食品中重要的營養(yǎng)成分，其含量和種類對(duì)于評(píng)估食品品質(zhì)至關(guān)重要。高效液相色譜技術(shù)在糖類檢測(cè)中展現(xiàn)出了極大優(yōu)勢(shì)。例如，通過配置示差檢測(cè)器的高效液相色譜儀，能夠準(zhǔn)確測(cè)定食品中果糖、葡萄糖、麥芽糖等多種糖類的含量。劉艷平等[3]采用高效液相色譜-示差折光檢測(cè)器，并結(jié)合外標(biāo)法定量，測(cè)定食品中果糖、葡萄糖、麥芽糖。結(jié)果表明，各目標(biāo)物質(zhì)的標(biāo)準(zhǔn)曲線線性關(guān)系良好，R值均超過0.999；經(jīng)方法學(xué)驗(yàn)證充分證明了該方法具有較高的準(zhǔn)確性與可靠性，適用于食品中糖類的精確檢測(cè)。由此可見，高效液相色譜技術(shù)在食品檢測(cè)領(lǐng)域，特別是在糖類檢測(cè)中的應(yīng)用，可為食品質(zhì)量及安全評(píng)價(jià)提供準(zhǔn)確、可靠的數(shù)據(jù)支持，有望進(jìn)一步推動(dòng)食品檢測(cè)技術(shù)的進(jìn)步與發(fā)展。

2.1.2 氨基酸檢測(cè)

氨基酸作為組成蛋白質(zhì)的基本單位，對(duì)人體健康具有重要影響。高效液相色譜技術(shù)同樣在氨基酸檢測(cè)中得到了廣泛應(yīng)用。賈載凱等[4]采用柱前衍生高效液相色譜法測(cè)定了中韓泡菜中的氨基酸含量。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，中國泡菜中各種氨基酸含量均遠(yuǎn)高于韓國泡菜，特別是天冬氨酸、谷氨酸、賴氨酸和甘氨酸含量，比韓國泡菜高出約1倍，而苯丙氨酸含量更是高出近8倍。這一研究結(jié)果為泡菜品質(zhì)的評(píng)估提供了重要依據(jù)。

此外，高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜（High Performance

Liquid Chromatography Tandem Mass Spectrometry，LC-MS/MS）技術(shù)在氨基酸檢測(cè)中也得到了大力推廣。該技術(shù)結(jié)合了液相色譜的高分離能力和質(zhì)譜的高選擇性、高靈敏度、重現(xiàn)性好等優(yōu)點(diǎn)，測(cè)定結(jié)果穩(wěn)定、可靠，可實(shí)現(xiàn)氨基酸的快速、高特異性檢測(cè)[5]。

2.1.3 維生素檢測(cè)

維生素是人體不可或缺的微量營養(yǎng)素，對(duì)于維持人體正常生理功能有重要作用。高效液相色譜技術(shù)同樣適用于食品中維生素含量的檢測(cè)。王霞等[6]采用二硫蘇糖醇還原-高效液相色譜法準(zhǔn)確測(cè)定蔬菜中的還原型維生素C和總維生素C含量，該研究為評(píng)價(jià)蔬菜營養(yǎng)價(jià)值提供了有力的數(shù)據(jù)支持。此外，在適當(dāng)?shù)纳V條件和檢測(cè)器條件下，高效液相色譜法還可以用于食品中維生素A、維生素E、維生素K等多種維生素的檢測(cè)。例如，有研究人員采用高效液相色譜法測(cè)定嬰幼兒食品中的維生素A和維生素E含量，旨在為嬰幼兒食品的營養(yǎng)評(píng)價(jià)提供科學(xué)依據(jù)，確保嬰幼兒攝入充足的營養(yǎng)。

2.2 食品添加劑檢測(cè)

2.2.1 防腐劑檢測(cè)

防腐劑屬于常用的食品添加劑，主要用于延長食品保質(zhì)期。當(dāng)前，比較常用的防腐劑有苯甲酸、山梨酸及其鹽類等。馬曉年等[7]采用高效液相色譜法測(cè)定牛奶中苯甲酸、山梨酸以及脫氫乙酸的殘留量。實(shí)驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)，這種方法不僅重復(fù)性好，而且準(zhǔn)確度高，非常適合用于牛奶中苯甲酸、山梨酸和脫氫乙酸這3種防腐劑的殘留量測(cè)定。

2.2.2 甜味劑檢測(cè)

甜味劑是另一類廣泛使用的食品添加劑，其中阿斯巴甜、糖精鈉和安賽蜜等是較為常見的種類。朱艷等[8]將高效液相色譜儀與蒸發(fā)光散射檢測(cè)聯(lián)合使用，建立了一種全新的分析方法。結(jié)果表明，這

7種天然甜味劑在各自的線性范圍內(nèi)均內(nèi)展現(xiàn)出了良好的線性關(guān)系，R2值均超過0.995；甜味劑的平均回收率在94.36%～106.70%。該方法可對(duì)原酒中7種天然甜味劑（包括赤蘚糖醇、核糖醇、山梨糖醇、甘露醇、異麥芽酮糖、麥芽糖醇和乳糖醇）進(jìn)行同時(shí)測(cè)定，適合作為天然甜味劑含量的測(cè)定方法繼續(xù)推廣應(yīng)用。

2.2.3 色素檢測(cè)

食品色素的添加能夠顯著提升食品的視覺效果，但某些合成色素可能對(duì)人體健康構(gòu)成潛在威脅。胭脂紅、日落黃和亮藍(lán)是食品工業(yè)中較為常用的色素。吳婷[9]采用高效液相色譜法對(duì)食品中的喹啉黃、檸檬黃以及日落黃進(jìn)行檢測(cè)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，這3種化合物不僅實(shí)現(xiàn)了高度的分離，且均呈現(xiàn)出良好的線性關(guān)系。各化合物的加標(biāo)回收率在95.65%～105.29%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差較低，展現(xiàn)了一定的應(yīng)用價(jià)值。

2.3 有害物質(zhì)檢測(cè)

2.3.1 農(nóng)藥殘留檢測(cè)

高效液相色譜技術(shù)憑借其高分離效能、高靈敏度以及高選擇性，已成為檢測(cè)蔬菜、水果、谷物等農(nóng)產(chǎn)品中農(nóng)藥殘留的有效手段。嚴(yán)婭等[10]利用超高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)測(cè)定草莓和生姜中的5種主要農(nóng)藥殘留。實(shí)驗(yàn)過程中，為了提升QuEChERS方法的性能，選擇鹽析劑和凈化材料，并持續(xù)調(diào)整液相色譜和質(zhì)譜參數(shù)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，在1～50 ng·mL-1的濃度范圍內(nèi)，所有目標(biāo)農(nóng)藥均表現(xiàn)出良好的線性關(guān)系，且相關(guān)系數(shù)R2均大于0.99。該方法前處理步驟簡單、分析速度快、檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確性高，適合于果蔬中農(nóng)藥殘留的檢測(cè)。

2.3.2 獸藥殘留檢測(cè)

獸藥在畜牧業(yè)中的應(yīng)用雖然能有效治療動(dòng)物疾病并提高生產(chǎn)效益，但同時(shí)也可能在食品中產(chǎn)生殘留，進(jìn)而對(duì)人體健康構(gòu)成潛在威脅。為了準(zhǔn)確測(cè)定肉類、蛋類、奶類等畜產(chǎn)品中的獸藥殘留種類及含量，高效液相色譜技術(shù)得到了廣泛應(yīng)用，其可檢測(cè)包括抗生素、殺蟲劑在內(nèi)的多種獸藥殘留。酈明浩等[11]采用固相萃取提取技術(shù)結(jié)合高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法檢測(cè)雞肉中7種獸藥殘留。在分離流程中，選擇甲醇（含0.2%甲酸）與0.2%甲酸水溶液作為流動(dòng)相，通過梯度洗脫優(yōu)化分離效能；在電噴霧正離子模式下進(jìn)行同步掃描，采用多反應(yīng)監(jiān)測(cè)模式進(jìn)行檢測(cè)，外標(biāo)法完成精確定量分析。結(jié)果表明，該方法展現(xiàn)出良好的線性關(guān)系，相關(guān)系數(shù)均大于0.992。該法簡便易行、高效快速、準(zhǔn)確可靠，非常適合用于雞肉樣品中7種獸藥殘留量的精確定量分析。由此可見，高效液相色譜技術(shù)在獸藥殘留檢測(cè)中的應(yīng)用，可為食品安全提供有力保障，推動(dòng)食品檢測(cè)技術(shù)持續(xù)進(jìn)步與發(fā)展。

2.3.3 微生物殘留檢測(cè)

盡管高效液相色譜技術(shù)在微生物殘留檢測(cè)中的應(yīng)用相對(duì)有限，但在某些特定領(lǐng)域，仍展現(xiàn)出較高的應(yīng)用價(jià)值。特別是在食品發(fā)酵工業(yè)中，這項(xiàng)技術(shù)可用于檢測(cè)發(fā)酵產(chǎn)品中的微生物代謝產(chǎn)物，有效評(píng)估發(fā)酵過程的效果及微生物殘留狀況。此外，在乳制品、肉制品等特定食品中，高效液相色譜技術(shù)被用于檢測(cè)其中的微生物殘留情況。楊柳[12]初步建立了基于變性高效液相色譜技術(shù)的食品微生物快速檢測(cè)方法，該法結(jié)合常規(guī)聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（Polymerase Chain Reaction，PCR）技術(shù)，針對(duì)特定食品微生物（如產(chǎn)黃曲霉毒素菌、白色念珠菌、A型肉毒梭菌等）設(shè)計(jì)了特異性引物，且優(yōu)化了PCR反應(yīng)體系。在這種方法的應(yīng)用下，可實(shí)現(xiàn)食品中微生物的快速、準(zhǔn)確檢測(cè)。值得注意的是，微生物本身及其大多數(shù)代謝產(chǎn)物并不屬于有機(jī)化合物，或者無法直接通過高效液相色譜技術(shù)進(jìn)行檢測(cè)，因此在微生物殘留檢測(cè)中，這項(xiàng)技術(shù)應(yīng)與微生物培養(yǎng)法、免疫學(xué)檢測(cè)法等其他檢測(cè)方法結(jié)合使用，以提高檢測(cè)的準(zhǔn)確性。

3 結(jié)語

HPLC技術(shù)的應(yīng)用不僅提高了食品檢測(cè)的準(zhǔn)確性與效率，還為食品安全監(jiān)管提供了科學(xué)依據(jù)。隨著技術(shù)的不斷完善和進(jìn)步，HPLC在食品檢測(cè)領(lǐng)域的應(yīng)用前景將更加廣闊，進(jìn)而為保障公眾健康做出更大貢獻(xiàn)。

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