CXCL14對糖尿病動脈粥樣硬化小鼠脂肪組織焦亡及主動脈斑塊的影響

［摘要］目的：探究CXC趨化因子配體14（CXCL14）對糖尿病動脈粥樣硬化（atherosclerosis，AS）小鼠脂肪組織焦亡及AS斑塊的影響。方法：① 腹腔注射鏈脲佐菌素誘導糖尿病ApoE^-/-小鼠，對糖尿病小鼠高脂喂養20周，構建糖尿病AS模型（模型組），對照小鼠僅高脂飲食（AS組）；② 在糖尿病小鼠后肢內側皮下注射抗CXCL14短肽（抗CXCL14組），對照糖尿病小鼠僅皮下注射生理鹽水；③ 在糖尿病小鼠后腹股溝皮下脂肪組織原位注射腺相關病毒（AAV）以抑制消化道皮膚素（GSDMD）介導的細胞焦亡，分為：AAV-shscramble組、AAV-shGSDMD組、抗CXCL14+AAV-shscramble組、抗CXCL14+AAV-shGSDMD組。各組小鼠高脂飲食飼養20周后，麻醉下收集小鼠血清，應用生化試劑盒檢測小鼠血脂水平（總膽固醇、三酰甘油、LDL-C、HDL-C）。處死小鼠，取附睪脂肪組織進行電鏡掃描及HE染色觀察脂肪細胞變化；利用qRT-PCR技術分析附睪脂肪組織焦亡相關因子GSDMD、天冬氨酸蛋白水解酶-1（Caspase-1）、NLR家族吡啶結構域蛋白3（NLRP3）炎癥小體、白介素-1β（IL-1β）和炎癥因子白介素-6（IL-6）的變化。分離提取小鼠主動脈，通過HE染色和血管大體油紅O染色觀察主動脈AS斑塊的相對面積。結果：與AS組相比，模型組小鼠附睪脂肪組織中的脂肪細胞肥大并數量減少（Plt;0.01），主動脈AS斑塊面積顯著增加，總膽固醇、三酰甘油、LDL-C水平明顯升高，HDL-C明顯降低；附睪脂肪組織的焦亡相關因子和IL-6水平明顯升高（Plt;0.05），表明糖尿病促進小鼠AS斑塊與脂肪組織焦亡。注射抗CXCL14短肽可以減少主動脈斑塊面積，改善血脂水平，并抑制脂肪組織焦亡，脂肪細胞數量增多。GSDMD敲減后，附睪脂肪組織中脂肪細胞數量增多，主動脈AS斑塊面積減少；然而注射抗CXCL14免疫肽后，AAV-shGSDMD組AS斑塊面積變化不顯著。結論：抗CXCL14可以減輕脂肪組織焦亡并緩解糖尿病AS的發展。

［關鍵詞］CXCL14；焦亡；脂肪組織；動脈粥樣硬化；糖尿病微環境

［中圖分類號］R587.2［文獻標志碼］A［文章編號］1671-7783（2024）06-0476-09

DOI： 10.13312/j.issn.1671-7783.y240091

［引用格式］許思婷，侯麗娜，楊萍，等. CXCL14對糖尿病動脈粥樣硬化小鼠脂肪組織焦亡及主動脈斑塊的影響［J］. 江蘇大學學報（醫學版），2024，34（6）：476-484.

［基金項目］國家自然科學基金資助項目（82070455）；江蘇大學附屬醫院博士啟動基金（jdfyRC2020005）；江蘇大學醫教協同創新基金重點項目（JDFY2022004）

［作者簡介］許思婷（1998—），女，碩士研究生；王中群（通訊作者），教授，博士生導師，E-mail： wangtsmc@126.com

Effects of CXCL14 on adipose tissue pyroptosis and aortic plaque of diabetic atherosclerotic mice

XU Siting¹， HOU Lina²， YANG Ping¹， WANG Zhongqun¹

（1. Department of Cardiology， Affiliated Hospital of Jiangsu University， Zhenjiang Jiangsu 212001; 2. Department of Cardiology， Lu′an People′s Hospital， Luan Anhui 237005， China）

［Abstract］Objective： To explore the effect of CXCL14 on pyroptosis of adipocytes and the formation of atherosclerosis in diabetic microenvironment. Methods： ① ApoE^-/- mice were intraperitoneally injected with streptozotocin to construct diabetes mellitus， and diabetic ApoE^-/- mice were fed with high fat diet for 20 weeks， and the diabetic atherosclerosis model （model group） was constructed， and control mice were only fed on a high-fat diet （AS group）; ② Anti-CXCL14 short peptide was injected subcutaneously on the medial hind limb of diabetic mice （anti-CXCL14 group）， and control diabetic mice were injected subcutaneously with normal saline only; ③ Adeno-associated virus （AAV） was injected in situ into posterior inguinal subcutaneous adipose tissue in diabetic mice to inhibit gastrointestinal dermatin （GSDMD）-mediated pyroptosis， divided into： AAV-shscramble group， AAV-shGSDMD group， anti-CXCL14+AAV-shscramble group， anti-CXCL14+AAV-shGSDMDgroup. After 20 weeks of high-fat diet of the mice， the serum of the mice was collected under anesthesia， and the blood lipid levels （total cholesterol， triglycerides， LDL-C， and HDL-C） of the mice were analyzed by biochemical detection kit. The mice were sacrificed， and the epididymal adipose tissue was scanned by electron microscopy to observe the changes of fat cells. qRT-PCR was used to analyze the changes of pyroptosis-related factors GSDMD， aspartate proteolytic enzyme-1 （Caspase-1）， NLR family pyridine domain protein 3 （NLRP3） inflammasome， interleukin-1β （IL-1β） and inflammatory factor interleukin-6 （IL-6）. The mouse aorta was isolated and extracted， and the relative area of atherosclerotic plaques was observed by HE staining and oil red O staining. Results： Compared with the AS group， the hypertrophy and number of adipocytes of adipose tissue in the epididymis in the model group decreased （Plt;0.01）， the size of aorticplaque increased， the levels of total cholesterol， triacylglycerol and LDL-C were significantly increased， and HDL-C was significantly reduced. The levels of pyroptosis-related factors and IL-6 in adipose tissue of epididymis were significantly increased （Plt;0.05）， indicating that diabetes promoted pyroptosis of AS plaque and adipose tissue in mice. Injection of anti-CXCL14 short peptide could reduce the size of aortic plaque， improve blood lipid levels， and inhibit adipose tissue pyroptosis， which increases the number of fat cells. After GSDMD knockdown， the number of adipocytes increased and the area of aortic plaques decreased. However， after the injection of anti-CXCL14 immune peptide， there was no significant change in atherosclerosis in the AAV-shGSDMDgroup. Conclusion： Anti-CXCL14 can attenuate adipose tissue pyroptosis and alleviate the development of diabetic atherosclerosis.

［Key words］CXCL14; pyroptosis; adipose tissue; atherosclerosis; diabetic microenvironment

國際糖尿病聯合會報道的最新統計數據表明，截至2021年，中國的成年糖尿病患者已超過1.409億，成為全球成年糖尿病患者占比最高的國家^［1］。以動脈粥樣硬化（atherosclerosis，AS）為主要病變的糖尿病大血管并發癥目前仍是糖尿病患者致死、致殘的主要病因^［2］。近年來研究發現高糖可影響脂肪細胞的分化過程以及肥胖相關的代謝性紊亂^［3］。脂肪組織功能紊亂可分泌干擾素（IFN）等炎癥因子，并且常伴有T淋巴細胞等免疫細胞浸潤^［4］，炎癥促進了肥胖、胰島素抵抗和AS之間的聯系。細胞焦亡是近年來新發現的一種高度促炎性的細胞程序性死亡，分為依賴天冬氨酸蛋白水解酶-1（Caspase-1）的經典焦亡途徑以及依賴于Caspase-4/5/11的非經典焦亡途徑^［5］。研究者在人AS斑塊和ApoE^-/-小鼠斑塊、外周血以及皮下脂肪組織中均發現NLR家族吡啶結構域蛋白3（NLRP3）炎癥小體和白介素-1β（IL-1β）等焦亡相關標志物表達升高的現象^［6-8］。CXC趨化因子配體14（C-X-C motif chemokine ligand 14，CXCL14）對炎癥單核細胞具有趨化活性，可參與機體免疫調節^［9-11］。近年來有研究發現高脂飼喂小鼠的血清及白色脂肪組織中CXCL14表達上調^［12］，CXCL14基因敲除小鼠表現出較高的胰島素敏感性以抵抗飲食誘導的肥胖^［13］。因此，CXCL14在糖脂代謝調節方面有重要研究意義。本研究觀察CXCL14對糖尿病AS小鼠脂肪細胞焦亡以及主動脈斑塊的影響，從機體代謝紊亂與脂肪細胞焦亡方面為糖尿病AS的預防、治療及預后評估提供新思路。

1 材料和方法

1.1 主要試劑和儀器

小鼠普通飼料購自江蘇協同醫藥生物有限公司，由74.0%玉米粉、20.0%麥麩、4.5%魚粉、1.0%谷物粉及0.5%食鹽組成。小鼠高脂飼料購自常州卡文斯實驗動物有限公司，由83.25%普通飼料、15.0%脂肪、1.25%膽固醇和0.5%牛膽鹽構成。消化道皮膚素（gasdermin-D，GSDMD）敲減腺相關病毒（AAV-shGSDMD）及陰性對照腺相關病毒（AAV-shscramble）購于北京合生生物股份有限公司;鏈脲佐菌素（STZ，美國Sigma公司）;蘇木素-伊紅染色（HE染色）和油紅染色液試劑盒為索萊寶公司產品;組織包埋盒及載玻片購自江蘇世泰實驗器材有限公司；總膽固醇（TC）、三酰甘油（TG）、低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）和高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）測試盒購自南京建成生物工程研究所。代謝籠（蘇州澤雅科教實驗設備有限公司）;BM450A組織包埋機、BM450型組織包埋冷凍臺、PH60型病理組織漂烘儀（常州派斯杰醫療公司）;手動輪轉式切片機（德國Leica公司）;光學顯微鏡（日本Olympus公司）。

1.2 糖尿病AS小鼠模型的構建

為了避免雌激素對AS的保護作用，本實驗所用小鼠皆為雄性^［14］。SPF等級6周齡的載脂蛋白E基因敲除（ApoE^-/-）雄性小鼠購于常州卡文斯實驗動物有限公司［許可證號：SCXK（蘇）2021-0013］，所有動物實驗經江蘇大學實驗動物管理和使用委員會審查并符合實驗動物倫理要求［許可證號：SYXK（蘇）2018-0053］。ApoE^-/-小鼠是研究AS斑塊最常用的實驗模式動物，一般高脂飼養14周可致明顯的斑塊形成，本課題組前期實驗證實高脂飼養20周可構建出成功的AS模型。6周齡ApoE^-/-雄性小鼠用普通飼料適應性飼養1周后，連續5 d腹腔內小劑量［40 mg/（kg·d）］注射STZ溶液，2周后檢測隨機血糖，連續3次血糖值gt;16.7 mmol/L即為糖尿病誘導成功，之后改為高脂飲食20周構建糖尿病AS模型。

1.3 實驗分組及處理

1.3.1分組 ① 觀察糖尿病微環境對脂肪細胞焦亡及AS的影響，ApoE^-/-小鼠分為：AS組（僅高脂飲食）、模型組（糖尿病+高脂飲食）；② 探究CXCL14對糖尿病微環境下脂肪細胞焦亡及AS的影響，分為：模型組（后肢內側皮下注射生理鹽水）、抗CXCL14組（后肢內側皮下注射抗CXCL14短肽）；③ 探究糖尿病微環境下CXCL14通過促進脂肪細胞焦亡影響AS的機制，分為：AAV-shscramble組（后肢內側皮下注射生理鹽水+脂肪組織原位注射AAV-shscramble）、AAV-shGSDMD組（后肢內側皮下注射生理鹽水+脂肪組織原位注射AAV-shGSDMD）、抗CXCL14+AAV-shscramble組（后肢內側皮下注射抗CXCL14短肽+脂肪組織原位注射AAV-shscramble）、抗CXCL14+AAV-shGSDMD組（后肢內側皮下注射抗CXCL14短肽+脂肪組織原位注射AAV-shGSDMD）。

每組6只小鼠，作相應干預后高脂飼養20周，麻醉下留取血清1 mL，實施安樂死后留取相關組織標本行后續相關檢測。

1.3.2 CXCL14的干預方式 由于CXCL14的特異性受體迄今為止尚不可知，本研究借鑒Tong等^［15］應用的一種與阻斷受體類似的基于短肽的免疫干預方法來降低ApoE^-/-小鼠模型中CXCL14的表達。在糖尿病誘導成功3周后，小鼠按照15 mg/kg劑量在后肢內側皮下注射抗CXCL14短肽（51-71CEEKMVIVTTKSMSRYRGQEH）或生理鹽水，每隔3周注射1次，共注射3次。

1.3.3 GSDMD腺相關病毒的干預方式 在糖尿病誘導成功1周后，在小鼠后腹股溝皮下脂肪組織原位注射腺相關病毒AAV-shscramble/AAV-shGSDMD（1GCCUCCAUGAAUGUGUGUATT）。

1.4 小鼠附睪旁脂肪組織取材及電鏡樣本制備

麻醉小鼠后打開腹腔，找到附睪旁白色脂肪并取出，冰上切成約1 mm³大小后立即將標本置于2.5%戊二醛固定液內室溫固定2 h，再轉移至4 ℃保存。收集到的標本4 ℃冰袋運輸至武漢賽維爾生物科技公司進行電鏡的樣本處理與制備。

1.5 小鼠附睪旁脂肪組織及主動脈組織石蠟切片制備

麻醉后處死小鼠，取出附睪旁白色脂肪組織并分離主動脈組織。將新鮮組織浸入4%多聚甲醛溶液中，在4 ℃冰箱中固定24～48 h。接著進行脫水，將主動脈依次浸泡于梯度乙醇溶液（70%、80%、90%、95%、95%、100%、100%）和二甲苯中，每個濃度浸泡1 h。隨后，將組織浸入預熱至55 ℃的石蠟溶液中，浸泡3次，每次0.5～1 h，確保石蠟完全替代二甲苯。進行組織包埋，將浸蠟的組織放入盛有蠟液的模具中，使用包埋機操作，確保切面與底部平行。將包埋好的模具移至－10 ℃冷凍臺上冷卻30 min，待蠟凝固后修整蠟塊，切片機切片，片厚4 μm，將切片漂浮于漂片機溫水上展平，用載玻片將組織撈起，放入烘箱烤片。待水烤干，蠟烤化后，取出常溫保存備用。

1.6 HE染色觀察小鼠附睪組織及主動脈斑塊形成情況

使用常溫所存附睪及主動脈組織石蠟切片，脫蠟水化，蘇木素染液染色10 min，流水沖洗，分化液分化30 s，ddH₂O浸泡15 min，置伊紅染液染色1 min，流水沖洗，ddH₂O浸泡3 min，脫水，透明，封片后，鏡下拍照。利用Image J軟件分析測量各組照片，計算各組小鼠附睪組織200倍視野下脂肪細胞數量以及主動脈斑塊相對面積（%）=主動脈斑塊面積/血管腔面積×100%。

1.7 主動脈大體油紅O染色

將小鼠主動脈弓至腹主動脈腎動脈分支段取出，用剪刀縱向剪開主動脈，平鋪主動脈，滴加新鮮配制的油紅O染液覆蓋，染色15 min，棄去染液，用60%異丙醇沖洗，直至正常組織變成乳白色為止；再次用生理鹽水沖洗，鏡下觀察并拍照。

1.8 qRT-PCR檢測附睪脂肪組織焦亡相關因子和炎癥因子的表達

收集小鼠附睪周圍白色脂肪組織后，用TRIzol試劑提取組織總RNA，再經過反轉錄合成cDNA模版，最后進行熒光定量PCR檢測。擴增條件：95 ℃ 5 min預變性，1個循環；95 ℃ 5 s變性，60 ℃ 30 s退火，72 ℃ 30 s延伸，共40個循環。引物序列：GSDMD上游5′-TTCAGGCCCTACTGCCTTCT-3′，下游5′-GTTGACACATGGAATAACGGGGTT-3′；NLRP3上游5′-GAGCTGGACCTCAGTGACAACAC-3′，下游5′-ACCATGCGAGATCCTGACAACAC-3′；IL-1β上游5′-TCGCAGCACATCAACAAGAG-3′，下游5′-TGCTCATGTCCTCATCCTGGAAGG-3′；GAPDH上游5′-ATCATCTCCGCCCCTTCTGC-3′，下游5′-ATGCCTGCTTCACCACCACCTTC-3′；Caspase-1上游5′-ACA-AGGCACGGGACCTATG-3′，下游3′-TCCCAGTCAGT-CCTGGAAATG-5′；IL-6上游5′-CGGAGAGGAGACTTCACAGAG-3′，下游3′-TTTCCACGATTTCCCAGA-GA-5′；CXCL14上游5′-GAAGATGGTTATCGTCACCACC-3′，下游3′-CGTTCCAGGCATTGTACCACT-5′。擴增結果采用2^-ΔΔCt法計算相對定量。

1.9 統計方法

應用SPSS 25.0軟件進行統計學分析、GraphPad Prism 8軟件繪制統計圖。采用Shapiro-Wilk法對各連續變量進行正態性檢驗，符合正態分布用均值±標準差進行統計描述，兩組均數比較采用兩樣本t檢驗，多組均數比較采用單因素方差分析，進一步組間比較采用LSD-t檢驗。Plt;0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 糖尿病促進ApoE^-/-小鼠脂肪組織焦亡和AS斑塊的形成

qRT-PCR結果顯示，模型組附睪脂肪組織焦亡相關因子GSDMD、NLRP3、IL-1β以及炎癥因子IL-6 mRNA轉錄水平較AS組明顯升高（Plt;0.01）；并且附睪脂肪組織中CXCL14 mRNA轉錄水平也顯著升高（Plt;0.01），見圖1。

掃描電鏡顯示，與AS組相比，模型組附睪脂肪組織中肥大脂肪細胞數量較多，細胞大小不一，排列不均；透射電鏡顯示，模型組脂肪細胞膜不規則光滑，細胞核周圍線粒體及小脂滴數量較多（圖2）。附睪脂肪組織HE染色顯示，模型組脂肪細胞數量明顯減少（圖3；t=10.88，Plt;0.01）。小鼠主動脈HE染色結果顯示，模型組較AS組主動脈血管腔內斑塊面積顯著增加（圖4；t=13.62，Plt;0.01）。血脂檢測結果顯示，模型組TC（t=2.793，P=0.049）、TG（t=4.946，P=0.008）、LDL-C（t=2.857，P=0.046）水平顯著升高，HDL-C（t=3.212，P=0.033）水平顯著下降（圖5）。上述實驗結果證實糖尿病會促進AS的進程。

2.2 抗CXCL14短肽干預抑制脂肪組織焦亡并減輕ApoE^-/-小鼠糖尿病AS程度

為了驗證皮下注射抗CXCL14短肽的效果，檢測小鼠附睪組織中的CXCL14 mRNA含量，如圖6，與模型組相比，抗CXCL14組的CXCL14 mRNA水平顯著下降，證明注射干預成功。

小鼠附睪脂肪組織qRT-PCR結果顯示，與模型組相比，抗CXCL14組焦亡相關因子GSDMD、Caspase-1、IL-1β mRNA以及炎癥因子IL-6 mRNA水平明顯下調（Plt;0.05），見圖6。附睪脂肪組織HE染色顯示，相較模型組，抗CXCL14組在同一倍鏡下脂肪細胞數目明顯增加（圖7）。

小鼠高脂飼養20周，將小鼠處死后分離完整主動脈，并行油紅O染色，結果顯示，抗CXCL14組較模型組斑塊面積明顯減少（圖8）。對小鼠主動脈行HE染色結果顯示同樣變化（圖9）。小鼠血脂檢測結果顯示，抗CXCL14組小鼠血清中TC、TG、LDL-C水平明顯下降，HDL-C水平顯著升高（圖10）。由此提示CXCL14可能通過血脂代謝途徑促進AS形成。

2.3 糖尿病微環境下CXCL14可能通過影響脂肪組織焦亡促進AS進展

收集小鼠附睪脂肪組織，qRT-PCR結果顯示，AAV-shGSDMD的原位注射可以有效降低附睪組織GSDMD的mRNA水平（圖11），證明腺相關病毒的有效干預。

附睪脂肪組織HE染色顯示，與AAV-shscramble組相比，同視野下的AAV-shGSDMD組脂肪細胞數量增多（圖12A；Plt;0.01）。應用HE染色及油紅O染色檢測主動脈病變結果顯示，與AAV-shscramble組相比，AAV-shGSDMD組小鼠的AS斑塊嚴重程度減輕（圖12B-C；Plt;0.05），該結果表明脂肪細胞焦亡促進AS進展。

注射抗CXCL14免疫肽后，小鼠附睪組織脂肪細胞HE染色及主動脈HE染色、油紅O染色檢測顯示，與AAV-shGSDMD組相比，抗CXCL14+AAV-shGSDMD組的脂肪細胞數量明顯增多，AS斑塊嚴重程度明顯減輕；而抗CXCL14+AAV-shscramble組與抗CXCL14+AAV-shGSDMD組的脂肪細胞數量和主動脈斑塊面積，兩組之間無明顯統計學差異（圖12A-C）。

3 討論

2015年邵峰院士研究團隊建立骨髓巨噬細胞焦亡模型，篩選出底物蛋白GSDMD，并證明GSDMD是細胞焦亡的最終執行者之一^［16］。越來越多的研究證實，GSDMD可以通過調控細胞焦亡參與心肌缺血/再灌注損傷^［17］、糖尿病腎病^［18］、脂肪性肝炎^［19］、腫瘤^［20］等各種疾病的發生發展過程。在人頸動脈斑塊和ApoE^-/-小鼠AS斑塊中，完整的GSDMD和活化的GSDMD蛋白表達量更高，由GSDMD介導的細胞焦亡與AS炎癥相關^［21］。大量研究表明內皮細胞^［22-23］、巨噬細胞^{［21，24］}、平滑肌細胞^［25］焦亡參與AS的進展，但目前鮮有研究闡述脂肪細胞焦亡對AS的影響。因此，本研究以脂肪組織為著眼點，探討CXCL14對糖尿病AS的影響及可能機制。

早在20世紀中期，研究人員就發現脂肪細胞增大與全身胰島素抵抗增加密切相關^［26］。脂肪細胞肥大時，其與鄰近細胞和細胞外基質成分的接觸增加，細胞機械應力增加，當脂肪細胞體積擴張到接近氧擴散極限時，會造成細胞缺氧，最終促進脂肪組織炎癥的發生^［27-28］。本研究觀察到糖尿病微環境下脂肪細胞肥大、血脂水平升高，這些都是糖尿病加重AS的證據。另外，糖脂代謝與冠狀動脈疾病的發病機制交互關聯，本研究中糖尿病AS小鼠較單純AS小鼠出現了更高水平的CXCL14和脂肪組織焦亡，這提示脂肪組織焦亡與糖尿病AS之間可能存在一定關聯。Ignacio等^［28］學者對人類脂肪前體細胞和脂肪細胞所分泌的各趨化因子進行比較發現，CXCL14在脂肪細胞中升高最顯著，并且與趨化因子CC配體2（CCL2）、CXCL1等其他趨化因子相比，CXCL14在肥胖人群脂肪細胞中表達最突出。當CXCL14被敲除后，肥胖遺傳小鼠的食欲明顯降低，食物的攝入量明顯減少，從而體重減輕^［29］。另一項研究中，泡沫細胞來源的CXCL14促進AS，抗CXCL14短肽可靶向治療AS^［14］。本研究中抗CXCL14短肽注射后，附睪脂肪組織中的脂肪細胞數量增多，焦亡相關因子表達水平下降，同時ApoE^-/-小鼠的糖尿病AS斑塊減輕，因此我們猜測CXCL14可能通過脂肪細胞焦亡影響AS。

最新的研究發現相比ApoE^-/-小鼠，相同喂養條件下的同周齡GSDMD^-/-ApoE^-/-小鼠AS斑塊面積更小，IL-1β等促炎因子mRNA水平顯著降低，證實GSDMD缺乏可減輕ApoE^-/-小鼠中飲食誘導的AS^［30］。本研究中，在敲減GSDMD后，糖尿病AS小鼠附睪脂肪組織中的脂肪細胞數量增加，主動脈AS斑塊面積也相應地減少，說明GSDMD可作為治療AS的潛在靶點。最近，葉浡之教授團隊證明了其開發的一種新型GSDMD小分子抑制劑GI-Y1可以減少AS斑塊形成^［20］。本研究中，在注射抗CXCL14短肽后，與AAV-shGSDMD組相比，抗CXCL14+AAV-shGSDMD組的主動脈AS斑塊嚴重程度更輕，提示抗CXCL14短肽可以在GSDMD敲減的基礎上進一步預防AS的發生；而抗CXCL14+AAV-shGSDMD組的AS斑塊嚴重程度，相比抗CXCL14+AAV-shscramble組沒有顯著減輕，因此我們猜測抗CXCL14短肽比GSDMD敲減對于AS有更強的保護作用，但具體機制有待深入探究。

綜上所述，本研究結果表明，糖尿病微環境下CXCL14可能通過促進脂肪組織焦亡來推動AS，而靶向CXCL14的藥物治療或可作為一種可行的AS治療策略。

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［收稿日期］2024-05-08［編輯］何承志