枯草芽孢桿菌制劑對肉牛生產性能、瘤胃發酵、血液生化及免疫指標的影響

摘" 要： 旨在研究枯草芽孢桿菌制劑對肉牛瘤胃發酵、生產性能、血液生化及免疫指標和肉品質影響。本試驗采用完全隨機設計，選用體況相近的育肥期西門塔爾雜交牛48頭，隨機分為對照組（飼喂基礎飼糧，CON）、低劑量組（在基礎飼糧中添加枯草芽孢桿菌制劑0.3 g·kg－1 DM， LAL）、中劑量組（在基礎飼糧中添加枯草芽孢桿菌制劑0.45 g·kg－1 DM， LAM）以及高劑量組（在基礎飼糧中添加枯草芽孢桿菌制劑0.6 g·kg－1 DM， LAH）。每組4個重復，每個重復3頭肉牛。預試期10 d，正試期90 d。結果表明：1）在飼糧中添加枯草芽孢桿菌制劑對試驗牛的瘤胃液pH、瘤胃液氨態氮（ammonium nitrogen，NH3-N）、干物質采食量（dry matter intake， DMI）、體尺、屠宰性能和肉品質沒有顯著影響（Pgt;0.05）。2）LAL組的血清總抗氧化能力（total antioxidant capacity， T-AOC）顯著高于CON組（Plt;0.05）。3）與CON組相比，LAL組與LAM組瘤胃液的丁酸摩爾濃度比例顯著降低（Plt;0.05），而LAL組與LAM組瘤胃液乙酸/丙酸的比值、LAM和LAH組血液中的總蛋白（total protein， TP）與球蛋白（globulin， GLB）含量以及血液中谷丙轉氨酶（alanine transaminase， ALT）與谷草轉氨酶（aspartate transaminase， AST）的活性顯著升高（Plt;0.05）。4）與CON組相比，LAH組的料重比（feed/gain， F/G）顯著降低（Plt;0.05），LAH組的平均日增重（average daily gain， ADG）、血液中的甘油三酯（triglyceride， TG）、結合珠蛋白（haptoglobin， Hp）以及血清淀粉樣蛋白 A（serum amyloid A， SAA）的含量都顯著高于CON組（Plt;0.05）。綜上所述，枯草芽孢桿菌制劑能在不同程度上改善肉牛的瘤胃內環境、血液抗氧化功能和免疫功能，并且在添加量為0.6 g·kg－1 DM時肉牛的增重效率最高。

關鍵詞： 枯草芽孢桿菌；肉牛；發酵參數；生產性能；肉品質

中圖分類號：S823.5

文獻標志碼：A

文章編號：0366-6964（2024）12-5575-15

doi： 10.11843/j.issn.0366-6964.2024.12.022

開放科學（資源服務）標識碼（OSID）：

收稿日期：2024-02-18

基金項目：國家自然科學基金青年基金項目（32302764）；湖南省教育廳重點項目（22A0168）；湖南省自然科學基金面上項目（2024JJ5179）；新疆自治區科技重大專項子課題（2022A02001-1）

作者簡介：吳" 江（1998-），男，江蘇泗洪人，碩士生，主要從事動物營養與飼料科學研究，E-mail： 1554830207@qq.com

*通信作者：王" 祚，主要從事反芻動物營養生理與瘤胃微生物研究，E-mail：zuowang@hunau.edu.cn

Effects of Bacillus Subtilis Preparations on Performance， Ruminal Fermentation，

Blood Biochemical and Immune Indices of Beef Cattle

WU" Jiang1， WAN" Fachun1， LIU" Lei2， SHEN" Weijun1， LAN" Xinyi1， WANG" Zuo1*

（1.College of Animal Science and Technology， Hunan Agricultural University， Changsha 410128，" China;

2.College of Veterinary Medicine， Hunan Agricultural University， Changsha 410128，" China）

Abstract：" The aim of this experiment was to study the effects of Bacillus subtilis preparation on rumen fermentation， performance， blood biochemistry， immune indicators， and meat quality in beef cattle. A completely randomized design was employed， involving 48 Simmental beef cattle in similar physical condition during the fattening period. The cattle were randomly divided into four groups： control group （fed with basic diet， CON）， low-dose group （Bacillus subtilis preparation added to the basic diet at 0.3 g·kg-1 DM， LAL）， medium-dose group （Bacillus subtilis preparation added to the basic diet at 0.45 g·kg-1 DM， LAM）， and high-dose group （Bacillus subtilis preparation added to the basic diet at 0.6 g·kg-1 DM， LAH）. Each group had 4 replicates， with 3 cattle in each replicate. The pre-trial period lasted for 10 days， and the formal period lasted for 90 days. The results showed as follows：1） Adding Bacillus subtilis preparation to the diet did not significantly affect rumen fluid pH， rumen fluid ammonia nitrogen （NH3-N）， dry matter intake （DMI）， body measurements， slaughter performance， and meat quality of the experimental cattle （Pgt;0.05）.2）The serum total antioxidant capacity （T-AOC） in the LAL group was significantly higher than that in the CON group （Plt;0.05）.3） Compared to the CON group， the molar concentration of butyrate in rumen fluid was significantly lower in LAL and LAM groups （Plt;0.05）. Additionally， compared to CON group， the ratio of acetate/propionate in rumen fluid in the LAL and LAM groups， total protein （TP） and globulin （GLB） content in blood of the LAM and LAH groups， as well as the activity of alanine transaminase （ALT） and aspartate transaminase （AST） in blood of the LAM and LAH groups， were significantly higher （Plt;0.05）.4）Compared to the CON group， the LAH group showed a significant decrease in feed/gain ratio （F/G） （Plt;0.05）， and the LAH group exhibited significantly higher average daily gain （ADG）， triglyceride （TG） levels in blood， haptoglobin （Hp）， and serum amyloid A （SAA） compared to the CON group （Plt;0.05）. In conclusion， Bacillus subtilis preparation can improve the rumen environment， blood antioxidant function， and immune function in beef cattle to varying degrees. The highest weight gain efficiency in cattle was observed when the addition rate was 0.6 g·kg-1 DM.

Key words： Bacillus subtilis; beef cattle; fermentation parameters; performance; meat quality

*Corresponding author： WANG Zuo，E-mail：zuowang@hunau.edu.cn

枯草芽孢桿菌屬于革蘭陽性好氧菌，可產生內源性抗逆孢子，具有耐酸、耐堿和耐高溫的特性［1］，因而能在動物消化道中生存和定植［2］。目前，枯草芽孢桿菌作為飼料添加劑已廣泛應用于畜禽的飼糧中。烏日勒格［3］研究發現，添加枯草芽孢桿菌的飼糧能夠顯著提高肉羊的平均日增重（average daily gain， ADG）以及總蛋白（total protein， TP）含量，劉俊斌等［4］研究表明，在湖羊飼糧中添加枯草芽孢桿菌制劑能顯著提高瘤胃液的總揮發性脂肪酸（total volatile fatty acid， TVFA）和丙酸含量，何振虎和項黎麗［5］研究表明，在飼糧中添加枯草芽孢桿菌能顯著提高育肥羊血液中的血清總抗氧化能力（total antioxidant capacity， T-AOC）和超氧化物歧化酶（superoxide dismutase， SOD）活性，劉俊斌等［6］研究發現，添加枯草芽孢桿菌于飼糧中顯著降低了斷奶湖羊背最長肌的失水率；韓林［7］研究發現，在奶公牛飼糧中添加枯草芽孢桿菌會使瘤胃液的TVFA濃度、丙酸、異丁酸和異戊酸摩爾比顯著提高，李秀麗等［8］研究發現，在肉牛飼糧中添加10 g·d－1釀酒酵母復合物（由釀酒酵母、纖維素酶和枯草芽孢桿菌組成）能顯著提高肉牛的ADG并降低料肉比，李靖［9］研究發現，在飼糧中添加枯草芽孢桿菌顯著提高了育成牛ADG以及血清中免疫球蛋白A（immunoglobulin A， IgA）和免疫球蛋白G（immunoglobulin G， IgG）的含量。由此可見，飼糧中添加枯草芽孢桿菌對反芻動物影響的研究多集中在生長性能、瘤胃發酵、血液生化及免疫指標等方面。然而截至目前，尚無文獻研究枯草芽孢桿菌對肉牛肉品質的影響。因此，本研究以育肥期的西門塔爾雜交肉牛為研究對象，研究在肉牛育肥階段飼糧添加不同水平枯草芽孢桿菌制劑對其生產性能、瘤胃發酵、血液生化及免疫指標等方面的影響，為枯草芽孢桿菌制劑在肉牛生產養殖中的進一步應用提供基礎數據。

1" 材料與方法

1.1" 試驗動物及試驗設計

本試驗采用完全隨機設計，選用體況相近的育肥期西門塔爾雜交牛48頭，體重（606±48.2） kg，隨機分為對照組（飼喂基礎飼糧， CON）、低劑量組（在基礎飼糧中添加枯草芽孢桿菌制劑0.3 g·kg－1 干物質（DM）， LAL）、中劑量組（在基礎飼糧中添加枯草芽孢桿菌制劑0.45 g·kg－1 DM， LAM）以及高劑量組（在基礎飼糧中添加枯草芽孢桿菌制劑0.6 g·kg－1 DM， LAH）。每組4個重復，每個重復3頭肉牛。其中CON組飼喂基礎飼糧，其他處理組在配料時將不同劑量枯草芽孢桿菌制劑溶于500 mL的水中并均勻噴灑于飼料上。預試期10 d，正試期90 d。

1.2" 試驗飼糧及飼養管理

試驗組和對照組所有牛均按其肉牛飼養場管理制度進行。在預試期內，觀察試驗牛群健康狀態，對食欲不振或有特殊疾病的牛及時替換調整，并做好編號、稱重、分組、驅蟲等工作。試驗牛均散欄飼養，采用全混合日糧（TMR）形式飼喂，每日喂料2次，飼喂時間為6：00和18：00，每月根據體重調整一次飼喂量。所有肉牛均自由采食及自由飲水。試驗期開始后每天記錄每個重復的試驗肉牛飼糧的飼喂量和剩料量，計算干物質采食量并根據前一天的采食量調整第二天飼喂量。試驗所用枯草芽孢桿菌制劑（活菌數≥8×107 CFU·g-1）由山東藍道夫生物科技有限公司提供。基礎飼糧及營養水平見表1。

1.3" 樣品采集

1.3.1" 肉樣采集

在正試期第90天，每組選6頭試驗牛進行屠宰，屠宰按照標準商業程序進行。于12～13肋骨的背最長肌的橫截面處采集2 kg左右的肉樣并分成2份，其中1份現場測定肉中pH和肉色（宰后45 min），并在0 ℃～4 ℃排酸72 h后測定滴水損失、蒸煮損失、剪切力大小等指標，另1份則保存在-20 ℃冷凍，用于測定肉常規指標。

1.3.2" 飼料樣及糞樣采集

試驗第27～29天以及第87～89天進行肉牛的消化試驗，采用酸不溶灰分（acid insoluble ash，AIA）法測定養分表觀消化率。采用四分法連續采集3 d的飼料樣品，飼料樣品每次采集200 g；每組選擇6頭肉牛連續采集3 d糞便，每天上午8點和下午3點采用直腸取糞法采集2次糞樣，將采集的糞樣混合均勻等比例分成2份，1份按每100 g加入10 mL 10%稀鹽酸的比例進行固氮，用于粗蛋白（crude protein， CP）測定；1份制備風干樣，用于測定干物質（dry matter， DM）、有機物（organic matter， OM）、粗脂肪（ether extract， EE）、中性洗滌纖維（neutral detergent fiber， NDF）、酸性洗滌纖維（acid detergent fiber， ADF）、鈣（calcium， Ca）、磷（phosphorus， P）以及AIA含量。

1.3.3" 瘤胃液樣品的采集

在正試期第90天，每組選擇6頭試驗牛進行屠宰，屠宰按照標準商業程序進行。在被屠宰后的牛瘤胃里采集瘤胃液100 mL，立即測定pH后，四層紗布過濾。其中取5 mL濾液，10 000 r·min－1離心10 min，取離心后的上清液1.5 mL，加入0.15 mL含量為25%的偏磷酸溶液，封蓋，倒置，輕輕搖勻，-20℃冰箱冷凍保存，以待測定氨態氮（ammonium nitrogen，NH3-N）。另取50 mL過濾后的瘤胃液放入50 mL離心管中，放于-20 ℃冰箱冷凍保存，以待測定揮發性脂肪酸（volatile fatty acid， VFA）。

1.3.4" 血液樣品采集

試驗開始的第30天和第90天晨飼前每個重復選擇1頭肉牛，尾靜脈采集血液，分兩管采集，每管采集40 mL，分別制備成血清與血漿樣品。血漿樣本直接采集到內有抗凝劑（肝素鈉）的無熱原采血管中；血清樣本為在室溫下，靜置30 min后離心（3 000 r·min－1， 10 min），分離血清，然后將血清分裝，并在-20 ℃冰箱中保存待測。

1.4" 測定指標及方法

1.4.1" 生產性能測定

試驗開始時和結束時測定每個重復的體重，每組選6頭體重和膘情相近的牛晨飼前空腹單獨測定體重和體尺。統計各組肉牛試驗期間的采食量，計算ADG、干物質采食量（dry matter intake， DMI）、料重比（feed/gain， F/G）。

ADG=（末重-初重）÷試驗時間；

DMI=總干物質采食量÷（試驗時間×試驗牛頭數）；

F/G=平均日采食量÷平均日增重。

1.4.2" 養分表觀消化率測定

飼糧和糞便樣品中的DM含量參照《飼料中水分的測定》（GB/T 6435—2014）測定；OM含量參照《飼料中粗灰分的測定》（GB/T 6438—2007）測定；CP含量參照《飼料中粗蛋白的測定》（GB/T 6432—2018）的凱氏定氮法測定；EE含量參照《飼料中粗脂肪的測定》（GB/T 6433—1994）測定；采用Van Soest等［10］的方法測定NDF和ADF ；Ca含量參照《飼料中鈣的測定》（GB/T 6436—2018）測定；P含量參照《飼料中總磷的測定》（GB/T 6437—2018）測定。

飼糧營養成分表觀消化率以AIA為內源性指示劑，通過測定糞便和飼糧中的營養成分及AIA計算出養分的表觀消化率。飼料養分的表觀消化率計算公式如下：

表觀消化率（%）=A/C-B/DA/C×100。

公式中：A=飼糧中待測營養成分含量；B=糞中待測營養成分含量；C=飼糧中AIA含量；D=糞中AIA含量。

1.4.3" 屠宰性能及肉品質測定

正試期第90天，每組選6頭試驗牛進行屠宰，屠宰按照標準商業程序進行。測定并記錄屠宰活重、體尺、胴體重等數據指標。采用游標卡尺測量胴體兩側的第12～13肋骨處背膘厚，然后用四點背膘厚數據計算平均背膘厚。在左半邊胴體割取位于第12～13肋骨處的背最長肌，利用透明硫酸紙描繪下眼肌橫斷面積輪廓。隨后稱取透明硫酸紙的重量并測定其面積，將描繪的眼肌橫斷面積輪廓裁剪下來并進行稱重，根據兩次稱重的比值來計算眼肌面積。

在第12～13肋骨處采集背最長肌肉樣品，參照《畜禽肉質的測定》（NY/T 1333—2007）測定肉品質。

1.4.4" 瘤胃發酵參數測定

瘤胃液pH用pH計（REX PHS-3C， 雷磁）測定，重復3次，取平均值。NH3-N的測定采用紫外可見分光光度計（UV 2600/lamb 25， 島津）進行測定，具體步驟參照馮宗慈和高民［11］的方法。瘤胃微生物蛋白參考Cone等［12］的方法使用BCA蛋白測定試劑盒（MA0082， 美倫生物）和酶標儀（1530-801186， 賽默飛世爾）進行測定。VFA濃度參照曹慶云等［13］的方法，使用氣相色譜儀（GC CDS2， 安捷倫）進行測定。

1.4.5" 血液生化及免疫指標測定

牛血漿中的谷丙轉氨酶（alanine transaminase， ALT）、谷草轉氨酶（aspartate transaminase， AST）、膽堿酯酶（choline esterase， CHE）、尿素（blood urea nitrogen， BUN）、葡萄糖（glucose， GLU）、TP、白蛋白（albumin， ALB）、球蛋白（globulin， GLB）、總抗氧化能力（total antioxidant capacity， T-AOC）、肌酐（creatinine， CRE）、甘油三酯（triglyceride， TG）、丙二醛（malondialdehyde， MDA）、SOD、總膽固醇（total cholesterol， TC）、高密度脂蛋白（high density lipoprotein， HDL）以及低密度脂蛋白（low density lipoprotein， LDL）的檢測嚴格按照南京建成科技有限公司提供的測定試劑盒說明書使用酶標儀（DG5033A， 華東電子）或分光光度計（UV-5100， 上海元析）進行操作。

采用ELISA（酶聯免疫法）測定牛血漿中的血漿生長激素（growth hormone， GH）、三碘甲腺原氨酸（triiodothyronine， T3）、甲狀腺素（thyroxine， T4）、腎上腺素（adrenaline， ADR）、胰島素（insulin， INS）、胰高血糖素（glucagon， GC）、皮質酮（corticosterone， CORT）、谷胱甘肽還原酶（glutathione reductase， GR）、胰島素樣生長因子-1（insulin-like growth factor 1， IGF-1）、IGF-2、IgA、IgG、脂多糖結合蛋白（lipopolysaccharide binding protein， LBP）、腫瘤壞死因子-α（tumor necrosis factor-α， TNF-α）、白細胞介素-1β（interleukin-1β， IL-1β）、白細胞介素-2（interleukin-2， IL-2）、白細胞介素-6（interleukin-6， IL-6）、白細胞介素-8（interleukin-8， IL-8）、結合珠蛋白（haptoglobin， Hp）、干擾素-γ（interferon-γ， IFN-γ）和血清淀粉樣蛋白 A（serum amyloid A， SAA）。ELISA試劑盒購于南京建成科技有限公司，測定方法按試劑盒說明書使用酶標儀（DG5033A， 華東電子）進行試驗操作。

1.5" 數據處理與分析

本次試驗數據通過采用Microsoft Office Excel 2019軟件進行初步整理，試驗數據采用IBM SPSS Statistics 25軟件進行單因素方差分析，Duncan’s法進行組間差異顯著性檢驗，結果用平均值表示，SEM為標準誤值，以Plt;0.05為差異顯著，Plt;0.01為差異極顯著，0.05≤Plt;0.1為顯著性趨勢。

2" 結" 果

2.1" 枯草芽孢桿菌制劑對育肥肉牛生長性能以及表觀消化率的影響

由表2可知，在本試驗條件下，不同劑量枯草芽孢桿菌制劑對育肥肉牛的DMI、屠宰前體尺以及表觀消化率沒有顯著影響（Pgt;0.05）。隨著飼糧中枯草芽孢桿菌制劑添加劑量的升高，育肥肉牛的ADG呈升高的二次效應（Plt;0.05），育肥肉牛的F/G呈降低的二次效應（Plt;0.05）。LAH組的育肥肉牛ADG顯著高于CON組（Plt;0.05）且LAH組的育肥肉牛F/G顯著低于CON組（Plt;0.05）。處理組的尻長較CON組有提高的趨勢（0.05≤Plt;0.1）。

同行數據肩標不同表示差異顯著（Plt;0.05），若無字母或含有相同肩標則表示差異不顯著（P≥0.05）；SEM.不同處理組的標準誤差；Treat.處理效應；L. 一次效應；Q. 二次效應。下表同

In the same row， values with different letter superscripts mean significant difference （Plt;0.05），while with no letter or the same superscripts mean no significant difference（Pgt;0.05）. SEM. Standard error of different treat; Treat. Treatment effect; L. Linear effect; Q. Quadratic effect. The same as below

2.2" 枯草芽孢桿菌制劑對育肥肉牛屠宰性能及肉品質的影響

由表3可知，雖然枯草芽孢桿菌制劑對育肥肉牛的屠宰性能和肉品質的影響不顯著（Pgt;0.05），但屠宰率隨著枯草芽孢桿菌制劑添加劑量的增加呈升高的一次效應（Plt;0.05）。

2.3" 枯草芽孢桿菌制劑對育肥肉牛瘤胃發酵的影響

由表4可知，在飼糧中添加枯草芽孢桿菌制劑對瘤胃液pH及NH3-N濃度無顯著影響（Pgt;0.05）。隨著飼糧中枯草芽孢桿菌制劑添加劑量的升高，瘤胃液的丁酸的摩爾濃度比例和TVFA濃度呈先降低后升高的二次效應（Plt;0.05），而瘤胃液乙酸/丙酸的比值和異戊酸的摩爾濃度比例呈先升高后降低的二次效應（Plt;0.05）。LAL組與LAM組瘤胃液的丁酸的摩爾濃度顯著低于CON組（Plt;0.05）。LAL組與LAM組的瘤胃液乙酸/丙酸的比值顯著高于CON組（Plt;0.05）。

2.4" 枯草芽孢桿菌制劑對育肥肉牛血液生化指標的影響

由表5可知，與CON組相比，在肉牛飼糧中添加枯草芽孢桿菌制劑對CHE和GR的活性沒有顯著影響（Pgt;0.05），對T3、INS和IGF-Ⅱ的濃度也沒有顯著差異（Pgt;0.05）。隨著飼糧中枯草芽孢桿菌制劑劑量的增加，育肥肉牛血液中的ALT、AST、TP、GLB、TG、T4、EPI和CORT的濃度呈升高的二次效應（Pgt;0.05），血液中的LDL濃度則呈現降低的二次效應（Pgt;0.05），血液中GH和GC濃度呈現降低的一次效應（Pgt;0.05），血液中IGF-1濃度呈現升高的一次效應（Pgt;0.05）。LAM組與LAH組的ALT和AST的活性均顯著高于CON組（Plt;0.05）。與CON相比，在肉牛飼糧中添加枯草芽孢桿菌制劑對牛血液中BUN、GLU、ALB、T-CHO、CRE和HDL濃度的差異沒有顯著影響（Pgt;0.05）。LAM組與LAH組的TP濃度與GLB濃度顯著高于CON組（Plt;0.05）。LAH組的TG濃

度顯著高于CON組（Plt;0.05）。LAL組的LDL濃度顯著高于LAM與LAH組（Plt;0.05）。

2.5" 枯草芽孢桿菌制劑對育肥肉牛血液抗氧化及免疫指標的影響

由表6可知，飼糧中加入不同劑量枯草芽孢桿菌制劑對育肥肉牛血液中的MDA、SOD、IgA、LBP、IL-1β以及IFN-γ濃度均無顯著影響（Pgt;0.05）。隨著飼糧中枯草芽孢桿菌制劑劑量的增加，育肥肉牛的總抗氧化能力呈先上升后下降的二次效應（Pgt;0.05）。育肥肉牛血液中的IgG、Hp和SAA濃度隨枯草芽孢桿菌制劑添加劑量的增加呈上升的二次效應（Pgt;0.05），而IL-2、IL-6和IL-8的濃度隨添加劑量的提高呈上升的一次效應（Plt;0.05）。LAL組的T-AOC顯著高于CON組（Plt;0.05）。

3" 討" 論

3.1" 枯草芽孢桿菌制劑對育肥肉牛生產性能及表觀消化率的影響

有研究發現，枯草芽孢桿菌能夠提高反芻動物的生長性能，提升反芻動物的ADG［14］。仇武松等［15］研究表明，在飼糧中添加枯草芽孢桿菌可以降低羔羊的F/G，從而提高生長性能。這與枯草芽孢桿菌能夠較好地分泌蛋白酶、纖維酶、淀粉酶、脂肪酶等活性物質，對飼糧植物源抗原蛋白具有較強的降解效果有關［16-18］。Li等［19］認為，飼糧中添加枯草芽孢桿菌能夠改善畜禽消化道中的蛋白酶分泌，從而改善動物的生長性能。本試驗研究結果與上述報道一致。在本試驗中，LAH組育肥肉牛的ADG較CON組顯著提高且料重比顯著降低，同時LAH組血液中的TP與GLB含量顯著高于CON組，表明添加枯草芽孢桿菌制劑會通過分泌蛋白酶顯著改善育肥肉牛的增重效率。張娟利等［20］研究發現，在飼糧中添加枯草芽孢桿菌對13月齡新疆褐牛的養分表觀消化率有所改善但不顯著，白天天等［21］研究表明，在飼糧中添加枯草芽孢桿菌對綿羊的養分表觀消化率沒有顯著影響。這與本試驗研究結果一致。但田躍等［22］研究發現，在育肥豬的飼糧中添加枯草芽孢桿菌會顯著提高育肥豬的干物質及有機物表觀消化率。張安榮等［23］研究表明，在飼糧中添加枯草芽孢桿菌會顯著提高肉雞的干物質、蛋白質、鈣和磷的表觀消化率。產生這種差異的原因可能與單胃動物和反芻動物胃腸道消化機制的區別以及飼糧結構的不同有關，具體機制還有待進一步探究。

3.2" 枯草芽孢桿菌制劑對育肥肉牛屠宰性能及肉品質的影響

肌肉pH、肉色、滴水損失、蒸煮損失和剪切力等是客觀評價肉品質的常用指標［24］。枯草芽孢桿菌可通過下調脂肪合成關鍵基因脂肪酸合成酶（fatty acid synthetase， FAS）、乙酰輔酶A羧化酶（acetyl CoA carboxylase， ACC）等mRNA的表達，來降低脂肪合成關鍵酶的生成使得脂肪酸合成減少，從而調節機體脂質代謝，最終改善肉品質［25］。Bai等［26］研究發現，飼糧中添加枯草芽孢桿菌可以使貯藏8 d的肉雞肌肉值顯著提高，滴水損失、蒸煮損失及剪切力數值顯著降低，并改善肉色。Meng等［27］研究表明，飼糧中添加0.2%的益生菌（含枯草芽孢桿菌和丁酸梭菌）可顯著增加育肥豬豬肉的肉色評分、大理石花紋評分和紅度值。劉俊斌等［6］與宋淑珍等［28］的研究發現，飼糧中添加枯草芽孢桿菌能夠顯著提高羊肉的系水力。Wu等［29］的研究表明，在飼糧中添加枯草芽孢桿菌，對羔羊的剪切力、pH、粗蛋白含量、粗脂肪含量以及水分均無顯著影響。劉帥等［30］研究發現，枯草芽孢桿菌通過調控育肥豬糖脂代謝和抗氧化能力改善肉品質。在本試驗中，添加枯草芽孢桿菌制劑對育肥肉牛的肉品質以及肌肉成分均無顯著影響，但LAH血液中的TP、GLP與TG含量都顯著增加，LAL的T-AOC顯著高于CON組。究其原因，可能是因為本試驗所添加的枯草芽孢桿菌制劑劑量僅能改善肉牛的血液生化指標和抗氧化能力，還未達到能夠通過調控肉牛的糖脂代謝和抗氧化能力來顯著改善肉品質的最少添加量。劉俊斌等［6］研究發現，在飼糧中添加枯草芽孢桿菌，其對斷奶湖羊的屠宰性能沒有顯著影響。烏日勒格［3］的研究也表明，在全混合日糧中添加枯草芽孢桿菌對肉羊的屠宰性能無顯著影響。而郭瑞萍等［31］與彭豫東等［32］的研究發現，飼糧中添加枯草芽孢桿菌可以顯著提高肉雞的屠宰率。而在本試驗中，添加枯草芽孢桿菌制劑對育肥肉牛的屠宰性能沒有顯著影響，產生這種差異的原因可能與反芻動物瘤胃復雜的動態生態系統有關，但具體機理還有待后續研究。

3.3" 枯草芽孢桿菌制劑對育肥肉牛瘤胃發酵的影響

瘤胃液pH是反映瘤胃發酵與動物機體健康的一個重要參數［33］。本試驗中，不同劑量組之間瘤胃液pH差異不顯著，且都處于正常范圍之內。這與烏日勒格［3］研究發現的在全混合日糧中加入枯草芽孢桿菌對肉羊瘤胃pH沒有顯著影響的結果一致。研究表明，瘤胃微生物所需NH3-N的最佳含量為5.0～30.0 mg·dL－1［34］。本試驗中，瘤胃液NH3-N含量為11.96～14.36 mg·dL－1，在正常范圍內。反芻動物瘤胃發酵產生的VFA可為機體提供70%～80%的能量，同時也可為瘤胃微生物的增殖提供碳架［35］。有研究報道，飼糧中添加枯草芽孢桿菌會降低瘤胃液丁酸摩爾濃度比含量［36］。這與本試驗研究結果一致。但也有不少研究顯示，在飼糧中添加枯草芽孢桿菌對瘤胃液中的丁酸摩爾濃度并沒有顯著影響［37］。丁酸有著刺激瘤胃上皮發育，促進養分的消化吸收的作用。本試驗中，LAL組與LAM組的丁酸摩爾濃度比例顯著低于對照組，產生這種情況的原因可能是飼糧中添加的枯草芽孢桿菌促進了瘤胃壁對丁酸的吸收，這也與瘤胃液TVFA濃度沒有顯著變化，丁酸摩爾濃度比例隨著枯草芽孢桿菌添加劑量的增加呈先下降后上升的二次效應一致。丙酸是生成葡萄糖的主要前體物質。本試驗中，日糧中添加枯草芽孢桿菌對瘤胃內的丙酸摩爾濃度比例沒有顯著影響，這與本試驗中枯草芽孢桿菌制劑對血液中GLU的含量沒有顯著影響的結果一致。有不少研究表明，飼糧中添加枯草芽孢桿菌會降低瘤胃中奶牛瘤胃中的乙酸/丙酸值［38-39］。本試驗中，LAL組與LAM組的乙酸/丙酸值則顯著高于CON組。產生這種情況的原因可能與本試驗所飼喂的飼糧中酒糟占了較大的比重有關，酒糟中的乙酸被肉牛采食后使其瘤胃發酵趨向乙酸型發酵。

3.4" 枯草芽孢桿菌制劑對育肥肉牛血液生化指標的影響

血液生化指標反映了畜禽體內物質代謝變化和組織機能狀態，主要表現在機體營養代謝、應激和健康狀況等方面［40］。ALT與AST是評價肝功能的重要指標，當組織細胞受損或通透性增大時，ALT和AST 會釋放到血液中引起血清酶活性的改變［41］。王毅等［42］研究表明，在湖羊羔羊強制補飼料中添加枯草芽孢桿菌會顯著降低血清中的AST活性，對ALT活性沒有顯著影響。蘇勇華等［43］研究發現，在飼糧中添加枯草芽孢桿菌對多浪羊血清中的ALT和AST活性沒有顯著影響。在本試驗中，LAM組與LAH組的ALT與AST活性顯著高于CON組。產生這種差異的原因可能與進行試驗時所處的季節、動物種類以及飼喂階段的不同有關。血清蛋白質是體內蛋白質合成代謝的重要標志。TP由ALP和GLP組成，大部分來源于肝，可反映動物肝的代謝能力和儲備能力，也可以反映機體蛋白的代謝水平。TP的升高可促進蛋白質的沉積與利用，并對機體的免疫性能產生積極作用。血清中ALP可以維持血漿膠體滲透壓，GLP參與機體特異性免疫，在機體中具有重要的生理功能［44］。宋淑珍等［28］發現，在育肥羊的飼糧中加入枯草芽孢桿菌會顯著提高育肥羊血清中的TP和GLP。這與本試驗研究結果一致。有研究表明，枯草芽孢桿菌可通過提高蛋白酶的活性并調節氨基酸的平衡性吸收，最終促進機體對營養物質的吸收利用，從而提高了血清中的TP和GLP濃度［45］。在本試驗中，LAM組與LAH組的TP與GLP濃度顯著高于CON組，表明枯草芽孢桿菌加快了育肥肉牛蛋白的代謝水平，保證機體組織的發育與分泌蛋白的需要量，維持了血清蛋白質的較高水平。在本試驗中，處理組瘤胃中的丁酸摩爾濃度比例均低于對照組而TVFA與對照組相比則沒有顯著變化，瘤胃中VFA的濃度受合成與代謝兩個因素的影響，因而推測，枯草芽孢桿菌制劑可能促進了瘤胃對丁酸的吸收。丁酸被認為是蛋白質的前體物質［46］，因此枯草芽孢桿菌制劑促進瘤胃對丁酸的吸收在可能一定程度上刺激了蛋白酶，提高了機體氨基酸與蛋白質的合成，這與本試驗處理組血液中TP與GLP含量均高于對照組的情況一致。有研究認為，枯草芽孢桿菌能夠通過促進畜禽消化道中的蛋白酶分泌來改善動物的生長性能［19］，這也與本試驗LAH組的ADG顯著高于對照組的情況一致。

血清中的TG是儲存于脂肪組織中的重要脂質構成物質，主要由肝合成，能夠反映機體脂肪代謝情況［47］。王毅等［42］研究發現，在湖羊羔羊強制補飼料中添加枯草芽孢桿菌會顯著提高血清中TG含量。張洪偉等［48］研究表明，在飼糧中添加枯草芽孢桿菌對育肥牛的血清中TG含量有所提高。丁浩等［49］研究發現，在保育豬飼糧中添加枯草芽孢桿菌對豬血清中的TG含量有顯著提升。這與本試驗研究結果一致。在本試驗中，LAH組的TG顯著高于CON組，表明枯草芽孢桿菌制劑會促使育肥肉牛血脂的提高。在本試驗中，飼糧中添加枯草芽孢桿菌制劑對育肥肉牛血清激素濃度沒有產生顯著影響，但與促進肌肉發育和生長密切相關的胰島素樣生長因子IGF-1有隨著添加濃度提高而增高的趨勢，且IGF-1呈顯著線性增加。宋林錦［50］研究發現，IGF-1對關嶺牛的成肌細胞增殖具有正向調控作用。在本試驗中，飼糧中添加枯草芽孢桿菌制劑的肉牛的尻長與CON組相比有增長的趨勢，這與IGF-1在育肥肉牛血液中隨著飼糧中枯草芽孢桿菌制劑添加劑量的提高而增高的趨勢相互映證。因而可以推測，枯草芽孢桿菌制劑可以通過提高育肥肉牛血液中的IGF-1的含量來促進育肥肉牛的肌肉發育，從而進一步提高了育肥肉牛的生長性能。這一推論與本試驗中LAH組的ADG顯著高于CON組的情況相一致。

3.5" 枯草芽孢桿菌制劑對育肥肉牛血液抗氧化及免疫指標的影響

T-AOC是機體抗氧化性能的綜合性指標，與自由基清除能力相關，是機體抗氧化能力的標志［51］。相關研究表明，枯草芽孢桿菌具有很強的抗氧化能力，能夠減輕體內以及體外的氧化損傷程度［52］。何振虎和項黎麗［5］研究發現，在飼糧中添加枯草芽孢桿菌可以顯著提高育肥羊血清中的T-AOC。王蕾和孫婭靜［53］研究表明，在肉仔雞飼糧中添加枯草芽孢桿菌會顯著提高血清中的T-AOC。黃嘉訸［54］研究發現，飼糧添加枯草芽孢桿菌顯著提高了育肥豬血清中的T-AOC。在本試驗中，雖然LAL組的T-AOC顯著高于CON組，與上述研究結果一致，但LAL組較CON組血液中的SOD并沒有顯著提高，這表明枯草芽孢桿菌不是通過抗氧化酶來提升機體血清中的T-AOC。LAL組與CON組相比，T-AOC顯著升高的原因可能是枯草芽孢桿菌通過代謝產生非酶抗氧化劑（抗氧化酸或多酚類物質）對機體內的自由基進行直接中和或通過相關信號通路來調節自由基，但其具體作用機制有待進一步探究［55］。急性期蛋白是動物體對外界或體內的刺激進行非特異性應答時合成的一類蛋白［56］，其在血液中的含量隨動物體內炎癥水平而變化，能反映畜禽的應激程度［57］。SAA與Hp均屬于急性期蛋白，可作為炎癥評估和診斷的重要指標。在本試驗中，LAH組血液中的SAA濃度顯著高于CON組，表明在飼糧中添加枯草芽孢桿菌制劑有增加育肥肉牛機體產生炎癥反應的風險，SAA含量的顯著提高也與LAH組的TP含量顯著高于對照組的情況相對應。

4" 結" 論

本試驗條件下，當飼糧中添加0.6 g·kg－1 DM的枯草芽孢桿菌制劑（活菌數≥8×107CFU·g－1）時對育肥肉牛的增重效率最佳，肉牛血清中TP、GLP和TG的濃度也顯著提高，但同時會增加育肥肉牛產生炎癥和肝功能受損的風險。

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（編輯" 范子娟）

勘誤聲明

發表在本刊2024年第55卷第11期5135-5146頁，篇名為《飼糧組成對生長豬小腸消化環境的影響研究》（作者：王嘉誠，李晨旭，王浩然，曹寧，趙峰，解競靜，薩仁娜，李素芬，王鈺明）一文中，“表1 飼料原料的營養成分（干物質基礎）”第一列、第七行的“總能/（kJ·kg-1） GE”數據單位有誤，現將其修改為“總能/（MJ·kg-1） GE”。

特此說明。

本刊編輯部

2024年12月18日