高寒地區牛巴氏桿菌病的綜合有效防控措施總結分析

牛巴氏桿菌病是由巴氏桿菌感染引發的一種急性、熱性、敗血性傳染性疾病，具有發病急，傳播速度快，致死率高的特點，臨床上巴氏桿菌病又被稱為出血性敗血癥，主要表現為急性敗血型、肺炎型、水腫型和其他慢性型等幾種。西藏阿里地區札達縣是一個典型的農牧大縣牦牛養殖業，在當地的畜牧養殖結構中扮演著重要的角色牦牛養殖數量眾多，是農牧民群眾經濟收益的重要來源。當前，隨著牦牛養殖業不斷向前推進和發展，養殖規模擴大背景之下以巴氏桿菌病為代表的傳染性疾病在牧區廣泛發生流行，由于很多農牧民群眾對該類疾病的認知不足，不知道該采取哪些措施進行有效防控，防治措施不到位，導致了疫情大范圍傳播蔓延，甚至會出現周期性傳播流行的趨勢，對一個地區的牛養殖業造成了毀滅性打擊。

一、札達縣牛巴氏桿菌病病例探討

近幾年，在西藏阿里地區的札達縣一個中型規模的牦牛養殖場當中出現了一類傳染性疾病，臨床上患病牛主要表現出高熱、呼吸急促，并表現出急性腸胃炎，在發病兩天內出現了一頭病死牛。該類疾病先是在犢牛群體當中發生，隨后向著整個群體快速傳播蔓延，發病期間養殖戶嘗試使用了青霉素、鏈霉素等藥物進行治療，但病情并沒有得到有效地控制，患病牛的數量呈現逐漸增加的趨勢，并且死亡率進一步升高。獸醫接到求助之后，到達養殖場對發病情況進行了進一步的總結和分析，可以發現該養殖場養殖較為混亂，在一個牛舍當中往往存在來源不同或者年齡不同的牛群，再加上環境污染較為嚴重，地面有大量糞便堆積，污水橫流。養殖戶采用放牧養殖和設施養殖相結合的方式，冷季主要補充少量的玉米粉和秸稈飼料，牦牛個體較為瘦弱生長發育不良，同時養殖戶存在僥幸心理，并沒有對牛群進行詳細的疫苗免疫，只接種了重大傳染性疾病，而牛巴氏桿菌病的免疫接種不到位。隨即對病死牛進行了解剖觀察，可以發現臟器組織出現不同程度的敗血癥癥狀，然后采集了病料進行了進一步的病原分離鑒定分離到巴氏桿菌病，由此可以判定巴氏桿菌病感染引發的傳染性疾病，隨即為養殖戶制定了針對性緊急的治療方案，短時間內控制了病情，避免損失進一步加大挽回了死亡率。

二、巴氏桿菌病的流行病學

1、巴氏桿菌病的病原學

牛巴氏桿菌病也稱為牛出血性敗血癥，是由巴氏桿菌引起的一種急性、熱性傳染病。該種細菌可以分為多個血清型，目前已知的血清型有A、B、C、D、E、F和G，不同的血清型可能引起不同的疾病，而且他們對宿主和疫苗的效果也有所不同。從形態特征來看，巴氏桿菌屬于細小的球桿狀細菌，革蘭氏染色為陰性，在使用亞甲藍或吉姆薩染色時可以觀察到菌體兩端濃染，中間著色淺，因此也被稱為兩極桿菌。病原可以在包括土壤、水體和動物的消化道等多種環境中生存，在健康牛的上呼吸道和上消化道中可能作為常在菌存在，當動物受到應激，如受冷、過勞、長途運輸或饑餓等因素影響，導致動物抵抗力下降時細菌可能會大量繁殖產生毒素并引起疾病。巴氏桿菌對物理和化學因素的抵抗力相對較弱，普通消毒藥物常用濃度如1%火堿或2%來蘇兒溶液都能在很短時間內將其殺死。干燥后在2～3d內死亡，在血液和糞便中能生存10d，在腐敗的尸體中能生存1～3個月，在直射日光和高溫下立即死亡。

2、巴氏桿菌病的致病機理

巴氏桿菌通過其表面的黏附素與宿主細胞結合，進一步侵入宿主細胞，繁殖生產過程中能夠產生如磷脂酶、透明質酸酶和神經氨酸酶等多種侵襲性酶類，有助于細菌穿透宿主黏膜屏障，進入宿主組織。細菌進入宿主細胞后利用宿主細胞的營養物質進行生長和繁殖，在此過程中，細菌產生如內毒素、外毒素和蛋白毒素等多種毒素對宿主細胞造成損傷。同時大量巴氏桿菌在繁殖生長過程中能夠引起宿主免疫系統的紊亂，細菌產生的毒素和代謝產物能夠抑制宿主免疫細胞的活性，降低宿主免疫力，使疾病加重。同時，細菌繁殖過程中產生的毒素和酶類可導致宿主組織發生炎癥、壞死和出血等病理損傷，加劇病情惡化，最終導致宿主死亡。

3、巴氏桿菌病的流行特點

牛巴氏桿菌病的傳染源主要是帶菌的牛、豬、雞以及其他野生動物，病牛體內的巴氏桿菌可以通過排泄物、分泌物以及咳嗽、打噴嚏等方式釋放到外界環境中，成為傳染源。細菌主要通過呼吸道傳播，即通過空氣中的飛沫傳播。此外，巴氏桿菌也可以通過接觸傳播，即健康牛接觸到病牛的分泌物或排泄物，或者接觸到被污染的飼料、飲水、工具等。所有牛都可能感染巴氏桿菌病，尤其是犢牛和免疫力較弱的牛。在養殖場內部環境擁擠、潮濕、通風不良以及不良的飼養管理條件都可能增加牛感染巴氏桿菌的風險。從發病季節來看牛巴氏桿菌病在春、夏和秋季較為多發，這些季節的溫暖濕潤氣候有利于巴氏桿菌的生存和傳播。

三、巴氏桿菌病的臨床癥狀

牛巴氏桿菌病的潛伏期一般為2～5d，這意味著感染后大約2～5d內牛開始出現癥狀。通過對養殖場的發病情況進行進一步的觀察，可以發現發病類型主要有急性敗血型、肺炎型、水腫型和慢性型。急性敗血型發病較急體溫突然升高至40～42℃，脈搏加快，食欲減退或廢絕，短時間內全身衰竭、被毛粗亂、鼻鏡干燥、呼吸困難、黏膜發紺。從鼻腔當中流出帶血泡沫，腹瀉，糞便帶血。發病牛通常在24h內因虛脫而死亡。肺炎型也是比較常見的類型，發病后主要表現為體溫升高，出現呼吸困難，咽痛性干咳，鼻孔流出無色或帶血泡沫。胸部叩診呈濁音，聽診有支氣管呼吸音或啰音，有時有胸摩擦音，嚴重時，病牛頭頸前伸，張口伸舌，死于窒息。水腫型主要是病牛胸前及頭頸水腫，嚴重者可能波及下腹，舌、眼高度腫脹，眼紅腫、流淚、流涎。呼吸困難，皮膚和黏膜發紺，常因窒息或下痢虛脫而死。慢性型較少見通常是由急性型轉變而來。病牛長期咳嗽，慢性腹瀉，消瘦無力。

四、巴氏桿菌病的病理學變化

急性敗血型病死牛解剖之后能夠發現出現敗血癥的跡象，皮膚和黏膜的廣泛青紫色，血液凝固不良，有時可見明顯的溶血，實質性器官如肝、脾、腎等常出現腫大，質地變硬，表面可能有出血點，心包膜和胸膜可能出現纖維素性炎癥，導致胸腔積液和心包積液。肺炎型主要病變位置集中在肺臟組織和周邊，表現為纖維素性胸膜肺炎。肺葉實變，呈灰紅色或灰黃色，質地變硬，肺泡間隔增寬，充滿細胞和纖維素滲出物，胸膜表面可見纖維素性滲出物，嚴重時胸膜與肺組織粘連。水腫型典型特征性病變為組織水腫，尤其是皮下組織和淋巴結，水腫部位的皮膚變薄，呈蒼白色或黃褐色，淋巴結腫大，切面多汁，顏色變淺。慢性型主要表現出慢性肺炎和心內膜炎，肺組織出現壞死和纖維化，肺泡結構破壞，有時還能夠觀察到心瓣膜出現贅生物，導致心臟瓣膜功能異常。

五、巴氏桿菌病的實驗室診斷

1、病料涂片染色

從病牛的病變組織（如肺部、血液等）中取出適量樣本，涂抹在載玻片上，并覆蓋一個蓋玻片，將涂片放入革蘭氏染色劑（結晶紫）中，浸泡2～3min，用清水沖掉多余的染色劑，涂片放入碘液中，浸泡1～2min，用清水沖掉多余的碘液。然后涂片放入95%酒精中，浸泡10～20s，用清水沖掉多余的酒精，將涂片放入沙黃染色劑中，浸泡2～3min，用清水沖掉多余的染色劑，涂片放在干燥器中干燥，或自然晾干，在顯微鏡下觀察涂片的染色結果。在顯微鏡下能夠觀察到革蘭氏陰性染色的包裝桿菌兩端呈現卵圓形染色較為明顯。

2、巴氏桿菌病病原分離

在實驗操作之前應該采集病變組織或分泌物樣本，準備好無菌拭子或接種環、血瓊脂平板、酵母提取物瓊脂平板、培養箱。使用無菌拭子或接種環采集病變組織或分泌物樣本，將樣本接種到血瓊脂平板和酵母提取物瓊脂平板上，劃線接種，將平板放入培養箱當中，37℃條件下培養24～48h。可以觀察到在血瓊脂平板上形成圓形、凸起的菌落，菌落邊緣光滑，呈淡灰色或灰白色，菌落周圍常有β-溶血環。酵母提取物瓊脂平板形成圓形、光滑、隆起的菌落，菌落呈乳白色或淡黃色，菌落表面常有皺褶或環狀結構。將分離得到的病原轉移到麥康凱瓊脂平板上，細菌生長不良好，生長瘦弱，由此可以排除大腸桿菌感染引發的傳染性疾病。隨即將分離得到的病原進行了包括糖發酵試驗、氧化酶試驗、硫化氫試驗等理化檢測，可以發現分離得到的細菌發酵乳糖，產生硫化氫，氧化酶試驗為陽性，凝集試驗可觀察到顆粒狀凝集現象，免疫熒光抗體技術可在細胞膜上檢測到特異性熒光。結合上述理化特征以及病原菌落形態特征，可以判定病原為巴氏桿菌。

六、巴氏桿菌病的治療措施

牦牛巴氏桿菌病具有發病的條件性，一旦出現患病病例，預示著養殖管理不到位，并且病原能夠迅速順著多種渠道向著整個群體快速傳播蔓延，再加上該種疾病發病較為嚴重，傳播速度相對較快，如果不能夠及時采取措施進行治療，短時間內會造成嚴重的死亡。所以在臨床用藥過程中應該做到規范用藥，合理用藥，首次用藥加倍，確保有效抑制病原的繁殖生長緩和患病牛的臨床癥狀。在臨床用藥過程中可以使用磺胺類藥物進行肌肉注射，推薦使用磺胺間甲氧嘧啶鈉注射液，使用劑量為0.33mL/kg·bw，每天2次，連續使用3d。在藥物使用過程中要注意磺胺或者其代謝產物能夠在尿液當中產生沉淀，首次用藥加倍會導致尿酸鹽沉積形成結晶，引發血尿或者腎小管堵塞，所以在臨床用藥過程中，可以搭配使用5%的碳酸氫鈉注射液進行靜脈注射，使用劑量為200～300mL，并且在用藥期間讓患病牛大量飲水。在使用抗生素進行治療的同時，也需要聯合患病牛的外在癥狀實施對癥治療，搭配使用5%的葡萄糖氯化鈉注射液500mL，維生素C注射液80mL、20%的安鈉咖注射液20mL，混合之后靜脈注射，每天使用一次，連續使用3～5d。按照上述治療方案對患病牛進行了為期9d的治療，有90%的患病牛恢復健康，剩余患病牛因為病情嚴重治療無效死亡，養殖場病情得到了很好控制。

七、牛巴氏桿菌病的預防措施

1、及時清除糞污等污染物，嚴格無害化處理

牛舍糞污等污染物的清理和無害化處置是預防牛巴氏桿菌病的重要措施之一，糞污等污染物的清理方案的制定需要考慮牛舍的大小、養殖密度、糞便積累的速度等因素。根據實際情況，制定合理的清理頻率和清理方法。規模化養殖場推薦采用機械清糞，中小規模養殖場主要采用人工清糞或者結合使用的方式，要確保清理工具的清潔和消毒，避免交叉污染，一般堅持每天對養殖場的糞污進行清理。清理出的糞便等污染物，需要進行無害化處置。無害化處置的方法包括堆肥、發酵、焚燒等。其中堆肥化是一種常見的無害化處置方法，通過在一定溫度和濕度條件下，利用微生物的作用將糞便等污染物分解轉化為有機肥料。在進行堆肥過程中，要注意控制溫度、濕度和通氣條件，以確保微生物的正常生長和分解效果。

2、嚴格防疫期間的衛生消毒

牛巴氏桿菌病預防期間的環境清理與衛生消毒目標是消除或減少牛巴氏桿菌病病原體在環境中的存在，防止疾病傳播。消毒之前應該結合養殖規模和疫病發生流行趨勢，制定合理的消毒方案，使用有效的消毒劑（如過氧化氫、季銨鹽）對牛舍、牛欄、飼槽、飲水器等設施進行定期消毒。消毒期間眼睛認識的老鼠、蒼蠅等害蟲可以攜帶牛巴氏桿菌病病原體，因此需要采取措施控制害蟲。養殖場的患病牛應立即隔離，并對接觸過的牛和環境進行消毒，每天消毒1次，連續使用7d，推薦使用2%的氫氧化鈉溶液。病死牛應妥善處理，焚燒或深埋，并對處理區域進行消毒，工作人員在接觸牛或牛舍后，應徹底洗手消毒。非必要人員和車輛應限制進出牛舍，以減少病原體引入的風險。一般情況下養殖場常規消毒，每周進行一次，每批次的牛群出欄之后進行一次大清理和大消毒，疫情發病期間應該堅持消毒1～2次/d，連續使用1周。消毒期間常用的消毒劑主要包括，過氧乙酸、次氯酸鈉、氫氧化鈉、生石灰、碘酊。其中過氧乙酸主要用于空氣消毒物體表面消毒，空氣消毒時通常按照1∶100的比例稀釋過氧乙酸原液，將過氧乙酸原液放入耐熱容器中加熱，產生氣體進行熏蒸，作用時間為1h。物體表面消毒使用0.2%～0.5%的濃度，通過噴霧、浸泡或擦拭的方式對牛舍內墻壁、地面、飼料槽等進行消毒，作用時間需30min以上。次氯酸鈉和氫氧化鈉主要用于物體和地面消毒，使用濃度通常為1%、2%～5%，生石灰主要用于地面干燥吸水處理，然后通過吸水之后產生的生石灰乳消滅環境當中的病原，達到很好的消毒效果，使用濃度一般控制在5%～10%。碘酊主要用于皮膚消毒，直接涂抹于皮膚表面對皮膚進行消毒。衛生消毒過程中應該確保使用的安全規范，消毒劑的使用濃度、作用時間和使用頻率應根據具體產品和現場情況按照說明書或專業指導進行調整，消毒劑使用后徹底沖洗干凈，避免對牛只和環境造成傷害。

3、牛巴氏桿菌病疫苗免疫接種

疫苗免疫接種是防范牛巴氏桿菌病發生流行的最有效措施，目前在市場中的疫苗種類多種多樣，常見的是牛巴氏桿菌病滅活疫苗，在疫苗免疫接種過程中，一定要小心仔細做到科學選擇，對于正在發生疫情的養殖場，通過對疫情進行嚴格的處理，病死牛嚴格無害化淘汰之后，未發病的牛群推薦使用巴氏桿菌病滅活疫苗免疫接種每100kg以下的牛使用4mL，100kg以上的牛使用6mL，皮下或者肌肉注射，免疫期9個月。同時也需要嚴格落實每年春秋兩季的集中免疫接種制度，通常選擇在每年的3～4月份和10～11月份分別進行一次額外的免疫接種。在疫苗免疫接種過程中，一定要小心仔細使用之前恢復到室溫，充分搖勻，并做局部消毒處理，每頭牛使用一個滅菌針頭。

（作者單位：859600西藏阿里地區札達縣農業農村和科技水利局（農牧業綜合服務管理中心））