基于響應面法優化紫蘇葉多糖提取條件及抗氧化活性研究

摘 要：目的：優化紫蘇葉多糖提取條件，探究其抗氧化活性，為紫蘇葉多糖提取及有效利用提供理論依據。方法：采用單因素試驗和響應面法優化紫蘇葉多糖超聲輔助提取工藝，并探究紫蘇葉多糖的體外抗氧化活性。結果：單因素分析中，料液比1∶35（g∶mL）、超聲溫度60 ℃、超聲時間50 min和超聲功率250 W時，紫蘇葉多糖得率最高，分別為13.6%、14.7%、14.8%、13.8%；響應面法優化結果顯示，料液比1∶38（g∶mL）、超聲溫度59 ℃、超聲時間50 min和超聲功率250 W時，紫蘇葉多糖得率最高，為14.471%±0.168%；多糖溶液濃度為2.0 mg·mL-1時對DPPH·和ABTS·+的清除能力分別為83.06%和77.96%。結論：紫蘇葉多糖對DPPH·和ABTS·+均有一定的清除能力，具有良好的抗氧化能力。

關鍵詞：紫蘇葉多糖；響應面法；提取工藝；抗氧化活性

Study on the Optimization of Extraction Conditions and Antioxidant Activity of Polysaccharide of Leaves of Perilla frutescens Based on Response Surface Method

XU Jingkai1， XU Menglu1， QIU Lei2， JIN Zhimiao1， LI Rui1， LUO Jincheng1，3*

（1.School of Public Health， Jiamusi University， Jiamusi 154007， China; 2.Institute of Intelligent Agriculture， Jiamusi Branch of Heilongjiang Academy of Agricultural Sciences， Jiamusi 154007， China; 3.Key Laboratory of Gout Research of Heilongjiang Province， Jiamusi 154007， China）

Abstract： Objective： To optimize the extraction conditions of polysaccharide of leaves of Perilla frutescens and investigate its antioxidant activity， to provide theoretical basis for the extraction and effective utilization of polysaccharide of leaves of Perilla frutescens. Method： One-factor test and response surface method were used to optimize the ultrasound-assisted extraction process of polysaccharides of leaves of Perilla frutescens and to investigate the in vitro antioxidant activity of polysaccharides of leaves of Perilla frutescens. Result： The highest yield of polysaccharides of leaves of Perilla frutescens was obtained at single factor analysis with the solid-liquid ratio of 1∶35 （g∶mL）， ultrasonication temperature of 60 ℃， ultrasonication time of 50 min， and ultrasonication power of 250 W， which was 13.6%， 14.7%， 14.8%， 13.8% respectively. The optimal results of response surface method showed tha when the solid-liquid ratio was 1∶38 （g∶mL）， the ultrasonication temperature was 59 ℃， the ultrasonic time was 50 min and the ultrasonication power was 250 W， the polysaccharide yield of leaves of Perilla frutescens was the highest， which was 14.471%±0.168%. When the concentration of polysaccharide solution was 2.0 mg·mL-1， the scavenging ability of DPPH· and ABTS·+ was 83.06% and 77.96%， respectively. Conclusion： Polysaccharide of leaves of Perilla frutescens had certain scavenging ability on DPPH· and ABTS·+， and had good antioxidant ability.

Keywords： polysaccharides of leaves of Perilla frutescens; response surface method; extraction process; antioxidant activity

紫蘇（Perilla frutescens）是我國衛生健康委員會首批頒布的60種藥食同源中藥之一[1]。紫蘇在我國已有2 000多年的種植歷史，主要種植于我國東北、西南地區[2]，而且應用極為廣泛，目前已應用于食品、保健品、醫藥等多個領域[3]。紫蘇葉既可作為食材，也可用于治療多種疾病。其具有鎮咳、健胃、抑菌、增強記憶力等多種功效[4-6]，是紫蘇的主要藥用部位之一。紫蘇葉味辛，性溫，無毒，歸肺、脾經，具有解表散寒、行氣寬中、和胃的功效，有良好的藥理作用[7]。紫蘇葉中含有多種活性物質，如多糖、酚類、不飽和脂肪酸等[8]。多糖廣泛存在于植物細胞壁、莖干、種子、根莖等多個部位[9]。作為植物化學物中的重要生物活性成分之一，紫蘇葉多糖具有抑菌、抗氧化、免疫調節等多種藥理活性[10-11]。

植物天然產物的提取方式除了熱浸出、萃取方法外，還包括超臨界萃取、超聲波輔助、微波輔助等提取工藝[12]。其中，超聲波輔助提取（Ultrasound-Assisted Extraction，UAE）是利用超聲波能量，增加溶質分子和溶劑分子間的相互作用、破壞細胞壁，加速物質傳質過程，從而提高目標物質的溶解度和傳質速率，具有較高的提取效率和較低的能耗[13]。本研究以黑龍江省農業科學院佳木斯分院種植的紫蘇葉為原料，采用單因素試驗，系統分析料液比、超聲溫度、超聲時間及超聲功率對紫蘇葉多糖提取效率的影響，利用響應面法對上述提取條件進行優化，并評估優化條件下所得多糖的抗氧化性能，旨在為紫蘇葉多糖的深入開發與應用提供依據。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

紫蘇葉，采收時間為2024年9月，產地為黑龍江省農業科學院佳木斯分院（46°47′36″N、130°24′55″E）；1，1-二苯基-2-苦基肼（DPPH），北京百奧萊博科技有限公司；維生素C、濃硫酸、葡萄糖，天津市大茂化學試劑廠；2，2’-聯氮雙（3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸）二銨鹽（ABTS），江蘇雷恩環保科技有限公司；苯酚、無水乙醇，天津市凱通化學試劑有限公司；過硫酸鉀，西隴科學股份有限公司。以上試劑均為分析純。

1.2 儀器與設備

KQ-500DE型數控超聲波清洗器，南北儀器有限公司；ZN-500A高速粉碎機，長沙步源制藥機械設備有限公司；EPOCH-SN酶標儀，安捷倫科技有限公司；SZ-97三重純水蒸餾器，上海亞榮生化儀器廠；JW-A1002型電子天平，諸暨市超澤衡器設備有限公司；LC-LX-L50C型臺式低速離心機，上海力辰邦西儀器科技有限公司；BGZ-140型電熱恒溫鼓風干燥箱，上海博迅醫療生物儀器股份有限公司。

1.3 試驗方法

1.3.1 樣品預處理

選取新鮮成熟、完整的紫蘇葉，清洗去除紫蘇葉表面的塵土，于60 ℃烘干至恒重后粉碎，過80目篩（孔徑180 μm），獲得紫蘇葉粉末，以水為溶劑，按照不同的料液比、超聲溫度、超聲時間、超聲功率進行超聲提取。

1.3.2 葡萄糖標準曲線

將葡萄糖于105 ℃干燥2 h至恒重后獲得葡萄糖標準物質，精確稱量10 mg葡萄糖標準物質轉移至100 mL容量瓶中，用雙蒸水定容后制得濃度為0.1 g·L-1的葡萄糖標準溶液。利用苯酚-硫酸法，按照表1順序分別配制不同濃度的葡萄糖標準溶液，選取雙蒸水作為對照，于490 nm波長下測定不同濃度葡萄糖標準溶液的吸光度值，并據此繪制葡萄糖標準曲線。

1.3.3 單因素試驗

（1）料液比對紫蘇葉多糖得率的影響。準確稱取1.0 g紫蘇葉粉末于燒杯中，以水作為溶劑，使用UAE進行提取，在超聲時間50 min、超聲功率250 W、超聲溫度60 ℃的條件下，將料液比設定為1∶25、1∶30、1∶35、1∶40、1∶45（g∶mL），提取完成后以5 000 r·min-1離心10 min取上清液，在490 nm波長下進行吸光度檢測，獨立重復試驗3次。

（2）超聲溫度對紫蘇葉多糖得率的影響。準確稱取1.0 g紫蘇葉粉末于燒杯中，以水作為溶劑，使用UAE進行提取，在料液比1∶35（g∶mL）、超聲時間50 min、超聲功率250 W的條件下，將超聲溫度設定為50、55、60、65 ℃和70 ℃，提取完成后以5 000 r·min-1離心10 min取上清液，在490 nm波長下進行吸光度檢測，獨立重復試驗3次。

（3）超聲時間對紫蘇葉多糖得率的影響。準確稱取1.0 g紫蘇葉粉末于燒杯中，以水作為溶劑，使用UAE進行提取，在料液比1∶35（g∶mL）、超聲溫度60 ℃、超聲功率250 W的條件下，將超聲時間設定為30、40、50、60 min和70 min，提取完成后以5 000 r·min-1離心10 min取上清液，在490 nm波長下進行吸光度檢測，獨立重復試驗3次。

（4）超聲功率對紫蘇葉多糖得率的影響。準確稱取1.0 g紫蘇葉粉末于燒杯中，以水作為溶劑，使用UAE進行提取，在料液比1∶35（g∶mL）、超聲溫度60 ℃、超聲時間50 min的條件下，將超聲功率設定為200、250、300、350 W和400 W，提取完成后以5 000 r·min-1離心10 min取上清液，在490 nm波長下進行吸光度檢測，獨立重復試驗3次。

1.3.4 多糖得率的測定方法

準確吸取1 mL紫蘇葉多糖提取液，加入5%苯酚水溶液1 mL，搖勻后加入濃硫酸5 mL，再次搖勻后在室溫下靜置30 min，測定吸光度并計算紫蘇葉多糖含量，再根據式（1）計算多糖得率[14]。

式中：Y為多糖得率，%；V為溶液體積，mL；C為多糖濃度，mg·mL-1；N為稀釋倍數；M為原料質量，g。

1.3.5 響應面優化設計

基于單因素試驗結果，采用Box-Behnken（BBD）試驗設計，以料液比、超聲時間、超聲溫度、超聲功率為試驗因素，以多糖得率為響應值，運用Design-Exper 13.0軟件進行4因素3水平的響應面試驗設計，以優化紫蘇葉多糖超聲提取工藝。響應面因素與水平設計見表2。

1.3.6 驗證試驗

根據上述響應面試驗得到的結果修正提取條件，以實際紫蘇葉多糖得率為檢驗指標，驗證響應面試驗結果的可行性。

1.4 抗氧化能力測定

1.4.1 DPPH·清除能力

分別取2 mL不同濃度的多糖樣品溶液于

10 mL試管內，隨后在暗環境中向各試管加入8 mL 2.5 μg·L-1 DPPH溶液，振蕩使其充分混合，并于室溫下避光靜置20 min。使用95%乙醇作為參比溶液進行調零后，在517 nm波長下測定樣品溶液與DPPH溶液充分混合后的吸光度值（A1）。采用相同步驟，測定2 mL多糖樣品溶液和8 mL 95%乙醇充分混合后的吸光度值（A2）以及2 mL 95%乙醇和8 mL DPPH溶液充分混合后的吸光度值（A0），每個樣品均進行3次平行測定，取平均值作為最終結果。將維生素C作為陽性對照。多糖樣品對DPPH·的清除率按式（2）計算得出[15]。

式中：PD為多糖樣品對DPPH·的清除率。

1.4.2 ABTS·+清除能力

等體積稱取7 mmol·L-1 ABTS溶液和5 mmol·L-1過硫酸鉀溶液，充分混勻后室溫避光放置24 h后作為ABTS儲備液。取適量儲備液，用無水乙醇稀釋，使其在734 nm處的吸光度為0.70±0.20左右。在

10 mL試管中分別加入不同質量濃度的多糖樣品溶液2 mL，在避光環境下分別加入6 mL ABTS儲備液，充分混勻后在室溫下避光靜置6 min。使用70%乙醇溶液作為參比溶液調零，在734 nm波長下測定各樣品的吸光度值（A4）。按照相同的方法測定2 mL多糖樣品溶液和6 mL 70%乙醇溶液充分混合后的吸光度值（A5）以及2 mL 70%乙醇和6 mL的ABTS溶液充分混合后的吸光度值（A3）。每個樣品均進行3次平行測定，計算其平均值。將維生素C作為陽性對照。多糖樣品對ABTS·+的清除率按式（3）計算得出[16]。

式中：PA為多糖樣品對ABTS·+的清除率。

2 結果與分析

2.1 葡萄糖標準曲線

葡萄糖標準曲線如圖1所示，回歸方程為Y=1.079 5X+0.056 6，r2=0.999 2，具有良好的線性關系。

2.2 不同因素對紫蘇葉多糖得率的影響

2.2.1 料液比對紫蘇葉多糖得率的影響

在其余因素固定的條件下，不同料液比對紫蘇葉多糖得率的影響如圖2所示。當料液比為1∶35（g∶mL）時，紫蘇葉多糖得率最高，為13.6%，隨后呈下降趨勢，因此選擇料液比1∶30、1∶35、1∶40（g∶mL）開展響應面優化試驗。

2.2.2 超聲溫度對紫蘇葉多糖得率的影響

在其余因素固定的條件下，不同超聲溫度對紫蘇葉多糖得率的影響如圖3所示。當超聲溫度為

60 ℃時，紫蘇葉多糖得率最高，為14.7%，隨后呈下降趨勢，因此選擇提取溫度55、60、65 ℃開展響應面優化試驗。

2.2.3 超聲時間對紫蘇葉多糖得率的影響

在其余因素固定的條件下，不同超聲時間對紫蘇葉多糖得率的影響如圖4所示。當超聲時間為50 min時，紫蘇葉多糖得率最高，為14.8%，隨后呈下降趨勢，因此選擇超聲時間40、50、60 min開展響應面優化試驗。

2.2.4 超聲功率對紫蘇葉多糖得率的影響

在其余因素固定的條件下，不同超聲功率對紫蘇葉多糖得率的影響如圖5所示。當超聲功率為

250 W時，紫蘇葉多糖得率最高，為13.8%，隨后呈下降趨勢，因此選擇超聲功率200、250、300 W開展響應面優化試驗。

2.3 響應面試驗結果與分析

2.3.1 回歸方程模型與方差分析

根據BBD試驗設計原理，選取料液比、超聲溫度、超聲時間及超聲功率4個因素設計29組試驗，優化紫蘇葉多糖的提取條件。試驗設計及結果見表3。對表中數據進行回歸擬合，二次回歸模型為Y=15.10-0.32A-0.18B-0.12C+0.15D-0.065AB+0.24AC+0.44AD+0.23BC+0.090BD-0.004 2CD-0.73A2-0.68B2-1.18C2-0.79D2。

回歸模型方差分析結果如表4所示，回歸模型的總回歸系數R2=0.972 5，P＜0.01，失擬項P=0.669 2＞0.05，表明該模型可用于預測4個因素組合下紫蘇葉多糖的得率。由F值可知，4個因素對紫蘇葉多糖得率的影響程度為A＞B＞D＞C，即料液比＞超聲溫度＞超聲功率＞超聲時間。

2.3.2 響應面分析

利用Desgin-Expert 13.0軟件對數據進行擬合得到響應面圖。在響應面圖中，曲線的陡峭程度越大，表示紫蘇葉多糖得率受該因素交互作用的影響越顯著；相反，曲線的陡峭程度越小，表示紫蘇葉多糖得率受該因素交互作用的影響越小[17]。此外，不同因素交互作用對響應值影響的顯著性可以通過等高線的形狀與分布密度來展現。若等高線近似橢圓形，整體分布較為密集，則相應因素交互作用影響較為顯著，且等高線密度越高，顯著性越強；反之，若等高線分散且趨近于圓形，則表明影響不顯著[18]。由圖6至圖11可知，料液比（A）與超聲功率（D）交互作用對應曲線最為陡峭，且等高線密集度最高，說明料液比（A）和超聲功率（D）的交互作用對紫蘇葉多糖得率的影響最為顯著；料液比（A）和超聲時間（C）的交互作用對紫蘇葉多糖得率的影響次之；超聲溫度（B）和超聲時間（C）的交互作用對紫蘇葉多糖得率的影響與前兩組比更小，但其等高線呈橢圓形，表明超聲溫度（B）和超聲時間（C）仍存在顯著的交互作用；剩余3組等高線近似圓形，表明3組中兩因素的交互作用對紫蘇葉多糖得率的影響并不顯著。BBD分析結果與表4方差分析結果一致，各因素之間的交互作用對紫蘇葉多糖得率的影響依次為AD＞AC＞BC。

2.3.3 驗證試驗

通過響應面優化試驗，確定超聲波輔助提取紫蘇葉多糖的最優工藝參數為料液比 1 ∶ 38.413（g∶mL）、超聲溫度59.279 ℃、超聲時間50.032 min和超聲功率263.778 W，紫蘇葉多糖預期得率為14.619%。為了確保所得回歸模型的可靠性與穩健性，在提取樣品中使用了上述最佳操作條件，考慮到實際操作及現有試驗條件，綜合實際操作的可行性，最終確定的工藝條件為料液比 1 ∶ 38（g∶mL）、超聲溫度59 ℃、超聲時間50 min和超聲功率250 W，在該條件基礎上重復提取3次，紫蘇葉多糖得率為14.471%±0.168%。

2.4 紫蘇葉多糖抗氧化活性測定

2.4.1 DPPH·清除率

紫蘇葉多糖對DPPH·的清除效果如圖12所示。隨著多糖濃度的逐步增加，其清除DPPH·的能力隨之增強。當多糖濃度升至0.2 mg·mL-1時，DPPH·清除率達到了83.06%的峰值。維生素C作為陽性對照，其DPPH·清除率維持在約99.58%的高水平。多糖濃度超過0.2 mg·mL-1，紫蘇葉多糖對DPPH·的清除作用逐漸趨于平穩，繼續增加多糖濃度并未能顯著提升其清除DPPH·的效能。

2.4.2 ABTS·+清除率

紫蘇葉多糖對ABTS·+的清除效果如圖13所示。紫蘇葉多糖對ABTS·+的清除效果與DPPH·相似，清除ABTS·+能力也隨其濃度的增加而增加。特別是在多糖濃度為0.2 mg·mL-1時，ABTS·+清除率達到峰值，為77.96%。維生素C對ABTS·+清除率同樣維持在約99.72%的高水平。多糖濃度超過0.2 mg·mL-1，對ABTS·+的清除作用同樣趨于穩定狀態。

3 討論

3.1 紫蘇葉多糖提取工藝研究

在單因素試驗中，紫蘇葉多糖的得率隨著提取液用量的增加呈現先遞增后遞減的變化趨勢。在初始階段，較低的提取液用量可能導致其過早達到飽和狀態而不利于紫蘇葉多糖的有效提取，因此紫蘇葉多糖得率相對較低。隨著提取液用量的逐漸增大，提取液能夠更有效地溶解紫蘇葉多糖成分。但當料液比升高至1∶35（g∶mL）并繼續增加蒸餾水的比例時，紫蘇葉多糖得率開始下降，原因可能是過大的浸提液體積無法進一步顯著增加與紫蘇葉粉末的接觸面積，而且可能引起超聲能量在混合提取體系內部損耗，減弱其對溶質分子的輻射效應，最終降低紫蘇葉多糖的溶出速率并增加其損失量[19]。

在一定溫度范圍內，紫蘇葉多糖的得率隨提取溫度的逐步上升而呈現增長趨勢。這可能是溫度升高促使混合液中的分子活動加劇，進而有利于溶劑更有效地滲透至細胞組織內部，并加速細胞內含物釋放至提取液中。但當提取溫度提升至60 ℃以上時，紫蘇葉多糖得率呈現下降趨勢，可能是因為過高的溫度加速了提取混合液的蒸發速率，同時植物多糖的分子結構復雜，在高溫條件下易發生部分分子化學鍵的斷裂，進而造成其結構損壞，最終導致紫蘇葉多糖得率降低[20]。

當超聲時間為30～50 min時，隨著超聲時間的延長，紫蘇葉細胞壁逐漸遭受破壞，促進了多糖類物質更有效的釋放，導致提取液逐漸接近飽和狀態。然而，一旦超聲時間越過50 min界限，多糖的提取效率及其增長速率會隨著超聲時間的進一步增加而呈現遞減趨勢。這可能是由于長時間的機械振動與空化效應在一定程度上對多糖結構造成了損害，并促使了非多糖成分溶出，進而降低了多糖提取效率隨超聲時間延長而進一步提升的可能性[21]。

隨著超聲功率的提升，紫蘇葉多糖的得率呈現先上升后下降的趨勢。具體而言，在超聲波功率處于較高水平時，其促進多糖得率的提升可歸因于超聲波的特有作用，該作用能夠促使溶液內部氣泡迅速瓦解，提升細胞內容物轉移至外部的速度。但是，當超聲功率超過250 W時，紫蘇葉多糖的提取效率開始下降。這主要是因為過高的超聲功率可能產生了過強的機械應力，導致多糖結構被破壞，引發多糖的降解現象，最終降低了紫蘇葉多糖的得率[22]。

本研究單因素試驗中各因素的最優條件與ZHANG等[23]研究結果一致，但本研究測得紫蘇葉多糖得率較高。本試驗未對紫蘇葉多糖樣品進行脫色脫蛋白處理，因此結果可能由于色素及蛋白質對吸光度的影響而導致紫蘇葉多糖得率偏高。

3.2 多糖的抗氧化活性

在濃度為0.002～2.000 mg·mL-1時，本研究提取的紫蘇葉多糖展現出一定的抗氧化效能，且其抗氧化能力呈現出劑量依賴性增長趨勢。多糖濃度為0.002～2.000 mg·mL-1時，其對DPPH·和ABTS·+的清除作用隨著濃度的升高逐漸增強。濃度高于

0.256 mg·mL-1，紫蘇葉多糖對DPPH·和ABTS·+的清除作用趨于穩定。當濃度為0.2 mg·mL-1時，紫蘇葉多糖對DPPH·和ABTS·+的清除率達到峰值，分別為83.06%和77.96%，表明紫蘇葉多糖具有良好的抗氧化活性。另外，研究結果表明紫蘇葉多糖的抗氧化活性低于維生素C，但多糖具有其他生物活性，如免疫調節、抗菌、抗炎等作用，因此紫蘇葉多糖仍具有較好的應用前景。同時，本研究存在一定的局限性，如未對紫蘇葉多糖的分子結構特征進行深入分析，且多糖的抗氧化活性評價方法較為單一，有待更進一步探討紫蘇葉多糖的結構特征、抗氧化機理及其他生物活性，并進行全面的安全性評價，以推動其在食品、藥品或保健品領域的產業化應用。

4 結論

本研究在單因素試驗的基礎上運用響應面法對超聲輔助紫蘇葉多糖的提取條件進行優化，并評估了其抗氧化活性。經優化后確定的最優超聲輔助提取工藝為料液比1∶38（g∶mL）、超聲溫度59 ℃、超聲時間50 min和超聲功率250 W，該條件下多糖得率可高達14.471%±0.168%。同時，體外抗氧化結果表明，紫蘇葉多糖對DPPH·和ABTS·+的清除能力均呈現明顯的劑量依賴性，具有良好的抗氧化活性。該研究可為紫蘇葉多糖的工業化生產提供理論依據，其抗氧化活性研究結果可為其在功能性食品和化妝品領域的應用提供一定的理論支持。

參考文獻

[1]白寶清，賈槐旺，張錦華，等.紫蘇籽粕抗氧化肽的純化、鑒定及降血脂功效研究[J].中國糧油學報，2022，37（7）：92-101.

[2]牟景君，徐凡.世界紫蘇看中國，中國紫蘇在樺南[J].家庭生活指南，2024，40（3）：3.

[3]丁素蕓，閆芝茜，劉會平，等.紫蘇葉多糖的提取工藝優化及理化特性分析[J].食品研究與開發，2023，44（1）：95-101.

[4]況彎彎.紫蘇揮發油微囊的制備與表征、抑菌活性研究[D].南昌：江西中醫藥大學，2020.

[5]HASHIMOTO M，TANABE Y，HOSSAIN S，et al.Intake of alpha-linolenic acid-rich perilla frutescens leaf powder decreases home blood pressure and serum oxidized low-density lipoprotein in Japanese adults[J].Molecules，2020，25（9）：1-15.

[6]田智聰，劉曉風，楊月欣.食藥同源物質在清咽止咳方面的應用與發展[J/OL].中國食物與營養，1-9[2024-11-21].https：//doi.org/10.19870/j.cnki.11-3716/ts.20240927.002.

[7]樊俐慧，朱向東，徐坤元，等.紫蘇葉的臨床應用及其量效關系[J].吉林中醫藥，2020，40（8）：1084-1086.

[8]劉浩.紫蘇不同部位營養品質及抗氧化能力的比較研究[J].中國食品添加劑，2022，33（10）：237-244.

[9]LIN F，XU Y，LIU B，et al.Research progress on extraction， separation， structure， and biological activities of polysaccharides from the genus Atractylodes： a review[J].International Journal of Biological Macromolecules，2024，283：137550.

[10]HUNG H Y，LU C Y.Antioxidative and hepatoprotective effects of Perilla frutescens extract against acetaminophen-induced liver injury in mice[J].Food Funct，2018，9（2）：1133-1143.

[11]LI Y J，LI J M，LI S L，et al.Characterization and immunomodulatory activity of a purified polysaccharide from Perilla frutescens leaves[J].International Journal of Molecular Sciences，2017，18（2）：321.

[12]何吉祥，趙亞棟，呂莊元，等.茶色素研究現狀及應用開發前景[J/OL].浙江紡織服裝職業技術學院學報，1-7[2024-11-21].http：//kns.cnki.net/kcms/detail/33.1351.z.20241127.1431.004.html.

[13]MOUNIKA A，ILANGOVAN B，MANDAL S，

et al.Prospects of ultrasonically extracted food bioactives in the field of non-invasive biomedical applications： a review[J].Ultrasonics Sonochemistry，2022，89：106121.

[14]張勇，李榕娣，莊遠杯，等.響應面法優化毛葡萄葉多糖提取工藝及其抗氧化活性分析[J/OL].飼料工業，1-10[2024-11-21].http：//kns.cnki.net/kcms/detail/21.1169.S.20241017.1656.002.html.

[15]BALIYAN S，MUKHERJEE R，PRIYADARSHINI A，

et al.Determination of antioxidants by DPPH radical scavenging activity and quantitative phytochemical analysis of Ficus religiosa[J].Molecules，2022，27（4）：1326.

[16]LI L，THAKUR K，LIAO B，et al.Antioxidant and antimicrobial potential of polysaccharides sequentially extracted from Polygonatum cyrtonema Hua[J].International Journal of Biological Macromolecules，2018，114：317-323.

[17]林建翠，趙琳，儒花卉，等.Box-Behnken響應面法優化蛇六谷多糖的提取工藝[J].食品安全質量檢測學報，2021，12（8）：3212-3218.

[18]郭麗麗，李小蘭，田小麗，等.黃芪莖葉總皂苷的響應面提取工藝優化及抗氧化活性研究[J].中國食品添加劑，2023，34（4）：158-167.

[19]原夢瑤，康淑荷，崔璐娟，等.紅芪多糖超聲提取工藝優化及抗氧化、美白和吸濕保濕活性[J/OL].精細化工，1-14[2024-11-21].https：//doi.org/10.13550/j.jxhg.20240132.

[20]祝曉慧，宋健強，董偉，等.超聲輔助低共熔溶劑法優化提取珊瑚菌多糖及其抗氧化活性研究[J].中國野生植物資源，2024，43（8）：21-28.

[21]徐宜彬，劉運偉，李陽，等.塔拉多糖超聲提取及其自由基清除能力研究[J].森林工程，2024，40（2）：168-175.

[22]木慧，楊申明，王映，等.番荔枝多糖的超聲波輔助提取工藝優化及抗氧化活性分析[J].保鮮與加工，2024，24（9）：72-79.

[23]ZHANG H，LI H，ZHANG Z，et al.Optimization of ultrasound-assisted extraction of polysaccharides from perilla seed meal by response surface methodology： characterization and in vitro antioxidant activities[J].Journal of Food Science，2021，86（2）：306-318.

基金項目：佳木斯大學大學生創新創業計劃訓練項目（S202410222157）。

作者簡介：許景開（2003—），男，浙江寧波人，本科。研究方向：營養與食品衛生學。

通信作者：羅進城（1991—），男，安徽六安人，碩士，講師。研究方向：營養與食品衛生學。E-mail： 993419009@qq.com。