生物農藥印楝素對三葉蟲螢幼蟲的毒力測定

摘要：

本研究通過噴霧法測定了印楝素對三葉蟲螢幼蟲的毒力。結果表明，印楝素對三葉蟲螢的毒力隨印楝素稀釋倍數增加而顯著降低，測試時間內（96 h），50倍稀釋液處理組三葉蟲螢累計校正死亡率最高，達56.6%，但印楝素2 000倍稀釋液對三葉蟲螢毒力很小，僅有1頭幼蟲死亡，是對三葉蟲螢比較安全的施藥濃度。印楝素能在控制農作物害蟲的同時對螢火蟲等有益生物安全性較好。

關鍵詞：三葉蟲螢；印楝素；毒力方程；死亡率

中圖分類號：Q969.9 文獻識別碼：A 文獻編號：1005-6114（2025）01-031-03

螢火蟲是一類中小型昆蟲，全世界約2 000種，屬鞘翅目（Coleopteran）螢科（Lampyridae），在溝通、求偶等過程中會發出熒光，具有很強的觀賞價值［1］。 此外，多數螢火蟲以蝸牛、蛞蝓等果蔬有害生物為食，亦是重要的天敵昆蟲［2］。隨著鄉村振興的發展，以螢火蟲為主題的農旅融合在四川、貴州等地逐漸發展［3］， 但螢火蟲普遍對化學藥劑敏感，篩選既能有效毒殺農作物害蟲，同時對螢火蟲毒力較小的藥劑，是促進農旅融合發展的關鍵。

三葉蟲螢（Emeia pseudosauteri）屬鞘翅目（Coleoptera）螢科（Lampyridae）峨眉螢屬（Emeia），是近年來發現于四川省樂山市峨眉山的新物種，在湖北、 浙江等地也有分布［4］。常見于土壤濕潤、植被豐富，水質干凈的地方［4］。印楝素是從植物印楝（Azadirachta "indica）中提取的一種植物源殺蟲劑，是世界公認的廣譜、高效、低毒、易降解、無殘留的殺蟲劑，且沒有抗藥性［5，6］。為了明確印楝素是否能在控制害蟲的同時，對螢火蟲等有益生物安全，本文在室內測定了印楝素不同濃度對三葉蟲螢的毒力。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

供試蟲源：本試驗采用健康的，大小一致的三葉蟲螢作為試驗對象（由樂山師范學院曹成全教授實驗室人工飼養）［7］。將180只三葉蟲螢末齡幼蟲，分為6組，放入提前鉆好孔的塑料盒中，10只/盒，放置海綿，噴灑一定濕度的水分以及放入蝸牛供其食用，保證螢火蟲正常的生活狀態。

供試藥劑：0.6%印楝素，九康生物科技發展公司。根據預試驗結果和藥劑參考稀釋倍數，將原藥分別稀釋50、200、500、1 000和2 000倍供試。

1.2 試驗方法

采用噴霧法噴灑農藥，將上述供試三葉蟲螢分別標記為A、B、C、D、E、F，對應噴灑50、200、500、1 000、2 000稀釋倍數的印楝素，F組為對照組，噴灑等量的清水，每組設3個重復。每組藥劑噴灑量10 mL，噴灑均勻。之后，每隔一段時間觀察一次三葉蟲螢，觀察到身體腹面朝上，并且長時間不動的確定為死亡，記錄累積死亡率，計算校正死亡率。

校正死亡率（%）=（處理組死亡率－對照組死亡率）/（1－對照組死亡率）×100

1.3 數據分析

使用DPS數據處理軟件和EXCEL對數據進行處理分析，采用周又生等［7］、何學友等［8］提出的生物統計學方法計算印楝素對螢火蟲幼蟲的致死中時間（LT50）和致死中濃度（LC50）等值，并選用R值最大的方程為毒力回歸方程［8，9］，用于衡量印楝素對三葉蟲螢的毒力影響。

2 結果與分析

2.1 三葉蟲螢幼蟲的校正死亡率

不同濃度印楝素對三葉蟲螢的毒力差異較大，測試時間內（96 h），以50倍稀釋液毒力最強，三葉

蟲螢累計校正死亡率達56.6%；200倍、500倍和1 000倍稀釋液處理后，三葉蟲螢的校正死亡率分別為40%、20%和33.3%，而2 000倍稀釋液對三葉蟲螢毒力很小，僅導致1頭幼蟲死亡，說明印楝素2 000倍稀釋液對三葉蟲螢毒力很小（圖1）。

2.2 不同濃度印楝素對三葉蟲螢幼蟲的毒力方程

根據三葉蟲螢幼蟲校正死亡率與時間的關系，選用R值最大的二次曲線擬合毒力方程，印楝素50倍、200倍、500倍和1 000倍稀釋液，其毒力方程R值均大于0.95，表明選用的毒力方程可信；LT50依次為90.62 h、120.93 h、159.19 h和157.46 h，隨稀釋倍數增加呈增加趨勢（表1）。2 000倍稀釋液因死亡率較低，未能擬合毒力方程。

2.3 三葉蟲螢幼蟲校正死亡率與印楝素稀釋倍數的關系

觀測時間（96 h）內，三葉蟲螢幼蟲校正死亡率與印楝素稀釋倍數的關系可用方程 y=－14.83ln（x）+ 115.41（F=143.3984，R=0.9941，Plt;0.001） 表述（圖2）。據此計算出LC50為82.32倍，換算成濃度值為0.11 mg/L。

3 結論與討論

從印楝果實中提取的印楝素等成分可防治200多種農、林、倉儲和室內衛生害蟲，是世界公認的優 良殺蟲劑，對人畜和周圍環境無任何污染［5，6］。印

楝素對昆蟲的作用機理，一是直接或間接通過破壞昆蟲口器的化學感應器官產生拒食作用。例如，林素坤等人研究發現印楝素對草地貪夜蛾有較強的拒食作用［9］，本文采用噴霧法測定印楝素的毒性，對螢火蟲的食物影響較小，因此，未觀察到螢火蟲明顯的拒食行為。二是通過對中腸消化酶的作用使得食物的營養轉換不足，影響昆蟲的生命力。例如，印楝素可明顯抑制棉鈴蟲海藻糖的生物合成和分解從而影響其生命力［10］。三是高劑量的印楝素可以直接殺死害蟲，低劑量則致使出現永久性幼蟲，或畸形的蛹、成蟲等。有研究發現，印楝素對沙棘繞實蠅成蟲的有一定的觸殺效果［8］；80 mg/L的印楝素對蠋蝽的致死率為50%左右［11］；當用藥量大于3.2 μg/頭時，草地貪夜蛾幼蟲蛻皮生長受到較強抑制，使害蟲無法正常完成生活史，從而使種群發展與危害得到控制［12］。

近年來，中國螢火蟲的種類和數量都明顯下降，環境污染和棲息地破壞是最主要的因素［13］。在利用農藥消滅害蟲的過程中，選用高效低毒易分解的藥劑，對于螢火蟲等有益生物的保護至關重要［1］。印楝素正是這樣一類藥劑，研究表明其對多種農林害蟲有重要的控制作用［14，15］。本文的研究結果表明，高濃度的印楝素可直接殺死三葉蟲螢，但低濃度印楝素對三葉蟲螢直接作用較小，可以在防治農作物害蟲的同時不傷害三葉蟲螢。但有研究表明，低濃度印楝素可通過影響保幼激素的合成和釋放，從而影響昆蟲幼蟲蛻皮，甚至使昆蟲卵成熟所需要的卵黃原蛋白合成不足而導致不育［5］。本文未觀察低濃度印楝素是否會造成三葉蟲螢幼蟲畸形或蛻皮失敗，因此低濃度印楝素對三葉蟲螢幼蟲的影響還需后期繼續觀察研究。

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