基于高通量測(cè)序的煙草根黑腐病根際土壤微生物群落結(jié)構(gòu)分析

摘 要：煙草根黑腐病是一種由根串珠霉[ Thielaviopsis basicola "（Berk. et Br.） Ferr.]引起的真菌病害，當(dāng)環(huán)境條件適宜時(shí)，殘留在土壤中的病原菌會(huì)侵染煙草植株根部導(dǎo)致病害的發(fā)生。本研究旨在調(diào)查煙草根黑腐病侵染煙草后土壤理化性質(zhì)的差異，以及利用16S rRNA和ITS高通量測(cè)序結(jié)合來研究根際微生物群落的種類和結(jié)構(gòu)的變化。結(jié)果表明，感病土壤的pH變化不顯著，SOC、TN、ALN、MBC和MBN顯著降低，AP和AK含量顯著升高，感病土壤的脲酶、過氧化氫酶和硝酸鹽還原酶含量顯著下降。在門水平上，健康植株和發(fā)病植株根際土壤微生物組成相似，但相對(duì)豐度存在顯著差異。其中發(fā)病后植株根際土壤中 Bacteroidota、Desulfobacterota、Firmicutes、RCP2-54、NB1-j、Latescibacterota、Patescibacteria和Verrucomicrobiota的豐度下降。在屬水平上，感病土壤中Sphingomonas、Gemmatimonas、SC-I-84、A21b、Bryobacter、Candidatus_Solibacter、 Pseudarthrobacter、 Bacillus和MND1 的豐度下降。此外，感病土壤中代謝活動(dòng)更加活躍。相關(guān)性分析表明細(xì)菌微生物中subgroup_2、Solibacter、Ellin6067和Bryobacter與感病土壤呈正相關(guān)。研究結(jié)果為探明煙草根黑腐病發(fā)生的微生態(tài)機(jī)制及，為病害的防控提供理論基礎(chǔ)。

關(guān)鍵詞： 煙草根黑腐病； 根際微生物； 理化性質(zhì)； 高通量測(cè)序

中圖分類號(hào)：S182 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：0488-5368（2025）01-0096-08

Analysis of Black Root Rot Rhizosphere Microbial Community Structure in Tobacco Based on High-Throughput Sequencing

TAN Jiaqi， LONG Fei， YUAN Ye， LIU Lu， WU Lili， HAN Ying， DU Hongbo

（Nanzheng Branch of Hanzhong Tobacco Company， Hanzhong， Shaanxi 723100， China）

Abstract：" Tobacco black root rot is a fungal disease caused by Thielaviopsis basicola （Berk. et Br.） Ferr. Under favorable environmental conditions， residual pathogenic fungi in the soil can invade tobacco plant roots， leading to disease development. This study aimed to investigate the changes in soil physicochemical properties and the composition and structure of rhizosphere microbial communities after tobacco black root rot infection， using high-throughput sequencing of 16S rRNA and internal transcribed spacer （ITS）. The results showed that the pH of diseased soil remained stable， whereas Soil organic carbon （SOC）， total nitrogen （TN）， alkaline nitrogen （ALN）， microbial biomass carbon （MBC）， and microbial biomass nitrogen （MBN） decreased significantly. Additionally， AP and AK content increased significantly in diseased soil， while the levels of urease， hydrogen peroxidase， and nitrate reductase decreased significantly. At the phylum level， the composition of rhizosphere soil microbes in healthy and diseased plants was similar， however， the relative abundances differed substantially. Following disease onset， the rhizosphere soil exhibited reduced abundances of Bacteroidota， Desulfobacterota， Firmicutes， "RCP2-54， NB1-j， Latescibacterota， Patescibacteria， and Verrucomicrobiota. At the genus level， diseased soil showed a decline in the abundances of genera such as Sphingomonas， Gemmatimonas， SC-I-84， A21b， Bryobacter， Candidatus Solibacter， Pseudarthrobacter， Bacillus， and MND1. "Furthermore， metabolic activity was enhanced in diseased soil. Correlation analysis indicated a positive correlation between subgroup_2， Solibacter， Ellin6067， Bryobacter， and diseased soil. The results of this study contribute to understanding the microbial ecological mechanisms behind tobacco black root rot and provide a theoretical basis for disease prevention and control.

Key words： Tobacco black root rot; Rhizosphere microbiota; Physicochemical properties; High-throughput sequencing

由根串珠霉[ Thielaviopsis basicola （Berk. et Br.） Ferr.]侵染煙草引起的煙草根黑腐病是我國煙草主要根部病害之一，也是世界性煙草病害^[1]。常與煙草黑脛病復(fù)合發(fā)生，使得該病具有易混淆、難防治、危害重等特點(diǎn)^[2]。近年來該病在我國局部地區(qū)發(fā)生頻率發(fā)病趨勢(shì)與為害程度呈上升趨勢(shì)，已成為煙草主要病害^[3]。煙草根黑腐病主要通過侵染煙草根部，破壞根系結(jié)構(gòu)和代謝功能，導(dǎo)致根系發(fā)育不良和生長緩慢，最終影響煙草的產(chǎn)量和品質(zhì)。一些研究表明，煙草根黑腐病發(fā)生的土壤中，病原菌的數(shù)量增加，而益生菌的數(shù)量減少，導(dǎo)致土壤微生物群落失衡，從而加重病原菌的侵染更加容易^[4]。目前防治煙草根黑腐病的方法包括化學(xué)防治、生物防治、土壤改良和煙草抗病品種選育等^[5]。越來越多的研究表明生物防治和土壤改良等綠色防控技術(shù)可有效預(yù)防煙草根黑腐病發(fā)生，并且可促進(jìn)煙草的生長發(fā)育^[6，7]。

植物病害的發(fā)生與土壤系統(tǒng)中的微生物菌群及多樣性的變化具有一定的相關(guān)性^[8，9]。土壤微生物在土壤功能和健康方面發(fā)揮著重要作用，其中包括抵御植物病原體的能力^[10]。植株的健康狀況能夠靈敏地反映在根際微生物群落結(jié)構(gòu)上，表現(xiàn)為其多樣性和均一性的差異^[11]。在抑病土壤中，一些根際微生物保護(hù)易感作物免受某些植物病原體的侵害，而有利于疾病發(fā)生的土壤則不能提供保護(hù)，并允許病原體的傳播^[12]。另有研究表明，病害的侵染能夠改變植物根際土壤微生物菌落的多樣性，從而利于自身的入侵并增強(qiáng)利用寄主營養(yǎng)的能力^[13]。

本研究利用高通量測(cè)序技術(shù)來研究煙草根黑腐病侵染的煙草根際土壤與健康煙株根際土壤細(xì)菌和真菌的多樣性差異。此外，還分析了土壤理化特性、酶活等指標(biāo)。旨在從分子水平揭示煙草根黑腐病對(duì)煙草根際土壤微生物群落結(jié)構(gòu)及多樣性、土壤酶活等方面的影響，為煙草根黑腐病的綠色防控提供更多的生物控制資源。

1 材料與方法

1.1 田間病害調(diào)查

發(fā)病率和病情指數(shù)計(jì)算公式如下：

發(fā)病率（%）=（發(fā)病株數(shù)/調(diào)查總株數(shù)）×100

病情指數(shù)=∑［（各級(jí)病株×該病級(jí)值）/（調(diào)查總株數(shù)×最高級(jí)值）］×100

1.2 取樣地概況

取樣地塊為陜西省漢中市南鄭區(qū)新集鎮(zhèn)二門村，土壤質(zhì)地為黃壤土，常年連作當(dāng)?shù)刂髟云贩N云煙97，煙草根黑腐病頻發(fā)頻感。采樣區(qū)域?yàn)橥黄瑓^(qū)煙田，土壤肥力均勻，地塊平整。

1.3 土壤取樣

選取3個(gè)小區(qū)，分別將健康煙株與感病煙株整株挖起，采用抖根法收集煙株根系表面土壤。健康、感病土壤樣品分別混勻后各分成兩份，一份用于土壤細(xì)菌及真菌高通量測(cè)序，一份用來測(cè)定土壤理化性質(zhì)，置于-80 ℃冰箱保存。

1.4 土壤理化性質(zhì)的測(cè)定

土壤pH值用電位法（FE28-Meter）測(cè)定的；土壤有機(jī)碳（SOC）和總氮（TN）分別用重鉻酸鉀氧化能力法（vario Macro cube）和硫酸-加速器煎煮法（KjeltecTM 8400）估算；采用半微量凱達(dá)爾擴(kuò)散法來測(cè)量堿性水解氮（ALN）；土壤中的可利用鉀（AK）和磷（AP）分別采用醋酸銨浸出-火焰光度法（PinA Aciie 900F）和土壤快速磷含量法，即碳酸氫鈉浸出+鉬銻比色法（UV-2450）進(jìn)行評(píng)估；土壤中的微生物生物量碳（MBC）和氮（MBN）采用氯仿熏蒸提取法（TOC-VCPH；MBC和Auto Analyzer 3-AA3；MBN）測(cè)定[14～16]。

1.5 土壤酶活性的測(cè)定

土壤酶的活性是用南京建城生物工程研究所的試劑盒進(jìn)行測(cè)定的。具體是采用不同的比色法估計(jì)土壤中尿素酶（URE；苯酚鈉-次氯酸鈉法）、蔗糖酶（INV；3，5-二硝基水楊酸法）、酸性磷酸酶（ACP；苯磷酸鈉法）和硝酸鹽還原酶（NR；苯酚-二磺酸法）活性。同樣，過氧化氫酶（CAT）的活性采用紫外分光光度法測(cè)定^[17]。

1.6 DNA提取、PCR擴(kuò)增和Illumina MiSeq測(cè)序

使用E.Z.N.A.土壤DNA試劑盒（Omega Bio-Tek， USA）從0.5 g土壤樣品中提取微生物總DNA，并進(jìn)行純化。利用NanoDrop和瓊脂糖凝膠電泳測(cè)定進(jìn)行提取出的DNA的質(zhì)量和濃度進(jìn)行測(cè)定。隨后將提取的DNA用無菌水稀釋到1 ng/L的濃度，并以此依此作為模板，用通用引物343F（5'-TACGGRAGGCAGCAG-3'）和798R（5'-AGGGTATCTAATCCT-3'）^[18]，采用Takara Ex Taq（Takara，中國）進(jìn)行16S rRNA基因V3-V4可變區(qū)域的PCR擴(kuò)增。16S擴(kuò)增子的測(cè)序和分析由OE生物技術(shù)有限公司進(jìn)行 （OE Biotech， Shanghai， China）。使用TruSeqDNA PCR-Free Sample Preparation Kit（Illumina， USA）來生成測(cè)序文庫。最后，在Illumina NovaSeq6000平臺(tái)上對(duì)該文庫進(jìn)行測(cè)序，每個(gè)文庫有兩個(gè)250個(gè)堿基的雙端讀循環(huán)。

1.7 數(shù)據(jù)處理與分析

利用QIIME2（Quantitative Insights into Microbial Ecology version 2）系統(tǒng)對(duì)提交的原始數(shù)據(jù)進(jìn)行過濾、修剪并去除檢測(cè)到的嵌合序列。首先，使用QIIME2平臺(tái)選擇每個(gè)擴(kuò)增子序列變體（ASV）的代表性讀數(shù)^[19]。其次，使用q2-feature-classifier的默認(rèn)配置對(duì)一組有代表性的讀數(shù)進(jìn)行注釋并與Silva數(shù)據(jù)庫（https：//ftp.arb-silva.de）進(jìn)行比對(duì)。最后，在云平臺(tái)（https：//cloud.oebiotech.cn/task/）上進(jìn)行了分析操作，如α和β多樣性分析和微生物多變量統(tǒng)計(jì)分析。基于Bray-Curtis距離，利用主坐標(biāo)分析（PCoA）來可視化微生物菌落構(gòu)成的變化。使用 \"betadisper \"和 \"adonis \"函數(shù)，進(jìn)行了多元方差分析（PERMANOVA）以比較各處理之間的差異。使用 LEfSe 軟件進(jìn)行LEfSe 分析，默認(rèn)設(shè)置 LDA Score 的篩選值為 4。使用PICRUSt2（Phylogenetic investigation of communities by reconstruction of unobserved states）算法對(duì)細(xì)菌群落進(jìn)行功能注釋和分析^[20]。

數(shù)據(jù)運(yùn)用 Microsoft Excel 2017 和 SPSS 22.0 軟件進(jìn)行分析，采用 Duncan方法進(jìn)行顯著性差異檢驗(yàn)（ P lt;0.05），并使用Origin 2017進(jìn)行繪圖。

2 結(jié)果

2.1 根黑腐病對(duì)煙草土壤理化性質(zhì)的影響

由表1可知，與健康土壤相比，感病土壤的pH變化不顯著，SOC、TN、ALN、MBC和MBN顯著降低。但是，在感病土壤中AP和AK含量顯著升高。說明病害影響了煙草根際土壤的理化性質(zhì)，從而影響煙草根系對(duì)營養(yǎng)的吸收。

2.2 根黑腐病對(duì)煙草土壤酶活性的影響

由表2可知，根黑腐病對(duì)煙草根際土壤酶活性有不同程度的影響。與健康土壤相比，感病土壤的脲酶、過氧化氫酶和硝酸鹽還原酶含量顯著下降。蔗糖酶和酸性磷酸酶的含量變化不顯著。

2.3 根黑腐病對(duì)煙草根際土壤微生物多樣性的影響

在門水平Top15上，健康土壤與感病土壤的微生物群落組成存在較大差異。如圖1A所示，感病土壤中 Bacteroidota、Desulfobacterota、Firmicutes、RCP2-54、NB1-j、Latescibacterota、Patescibacteria和Verrucomicrobiota的豐度下降。在屬水平 Top15上，感病土壤中 Sphingomonas、Gemmatimonas、SC-I-84、A21b、Bryobacter、Candidatus_Solibacter、Pseudarthrobacter、Bacillus和MND1 的豐度下降（圖1）。

土壤微生物α多樣性分析表明，感病土壤中細(xì)菌ACE數(shù)量升高，Chao1指數(shù)增加，Simpson指數(shù)和Shannon指數(shù)下降，但是均不表現(xiàn)顯著性（ P lt; 0.05）。相反，感病土壤中真菌ACE數(shù)量下降，Chao1指數(shù)下降，Simpson指數(shù)和Shannon指數(shù)上升，但是均不表現(xiàn)顯著性（ P lt; 0.05）。

采用Bray-Curtis相似性指數(shù)法考察ASV水平下細(xì)菌β多樣性的p值差異。結(jié)論中 p lt;0.05據(jù)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。R2值表示亞組中樣本間差異的解釋程度。如圖2所示，主坐標(biāo)分析（PCoA）顯示了土壤樣品的分離程度。多變量方差分析（PERMANOVA）的結(jié)果表明，根黑腐病侵染煙草顯著改變了土壤細(xì)菌群落（ P "lt; 0.01）。此外，ADONIS統(tǒng)計(jì)顯示，不同組間的R2值為0.17。

2.4 根際土壤微生物多樣性的差異分析

采用Wilcoxon算法計(jì)算感病煙草根際土壤微生物差異的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，默認(rèn)篩選標(biāo)準(zhǔn)為 P ＜0.05。結(jié)果表明，在前10個(gè)微生物屬中，有益屬的相對(duì)豐度，如SC-I-84、RCP2-54、Dongia、Luedemannella、KF-JG30-C25和Reyranella在感病系統(tǒng)中比在對(duì)照系統(tǒng)中顯著下調(diào)（ p "lt; 0.05）（圖3）。為了揭示土壤微生物群落中差異性物種的組成，采用線性判別分析（LEfSe）得到支系圖，并計(jì)算差異性代表ASVs的線性判別分析（LDA）得分，以確定貢獻(xiàn)大小，默認(rèn)的LDA閾值被設(shè)定為3.0（ P lt; 0.01）（圖4）。結(jié)果顯示，在感病土壤系統(tǒng)中，Oxalobacteraceae、Massile、Thermoleophilia、Gaiellales和KF-JG30-C25是代表性最高的微生物群。相反，SC-I-84、Dongiales、RCP2-54、KF-JG30-B3和Reyranellales是對(duì)照系統(tǒng)中最豐富的微生物群。這些結(jié)果共同表明，土壤細(xì)菌群落組成的變化與病原菌侵染有關(guān)。

2.5 根際土壤微生物菌落的相關(guān)性分析

對(duì)相對(duì)豐度前 30 位的細(xì)菌屬相對(duì)豐度進(jìn)行斯皮爾曼遜（Spearman）相關(guān)性分析（圖5）。結(jié)果表明， Gemmatimonas與Sphingomonas、Flavisolibacter高度正相關(guān)，Nitrospira與Haliangium、Anaeromyxobacter，Bacillus與MND1、Subgroup_22、Dongia高度正相關(guān)，MND1與Bacillus、RCP2-54、Dongia 高度正相關(guān)等。

2.6 土壤微生物群的功能預(yù)測(cè)分析

為了確定微生物群落的預(yù)測(cè)代謝功能，使用PICRUSt工具，根據(jù)16S rRNA基因序列對(duì)已確定的ASVs進(jìn)行KEGG功能預(yù)測(cè)。結(jié)果如圖6A所示，KEGG差異代謝通路在感病樣本中顯著上調(diào)表達(dá)，比如代謝通路、次級(jí)代謝合成、多種環(huán)境微生物代謝、氨基酸代謝和碳代謝（ P lt;0.05），表明代謝活動(dòng)更加活躍。COG注釋分析結(jié)果表明，多個(gè)通路在感病樣本中顯著上調(diào)表達(dá)，比如核糖核酸酶HIII、DNA結(jié)合反應(yīng)調(diào)節(jié)因子、核苷-二磷酸-糖環(huán)合酶、阿拉伯糖外流滲透酶、Pimeloyl-ACP甲酯羧酸酯酶、NAD（P）依賴性脫氫酶（圖6B）。

2.7 不同土壤類型種植模式下土壤理化性質(zhì)和細(xì)菌群落之間的相互關(guān)系

冗余分析（RDA）描述了細(xì)菌組成、土壤理化指標(biāo)和土壤樣品之間的相關(guān)性，揭示了環(huán)境變量對(duì)土壤細(xì)菌群落的影響為86.3%，第一軸和第二軸的數(shù)據(jù)變化分別為74%和12.3%（圖7A）。環(huán)境變量對(duì)土壤真菌群落的影響為86.7%，第一軸和第二軸的數(shù)據(jù)變化分別為74%和12.7%（圖7B）。此外，感病煙草與AK，AP和INV因子相關(guān)，其他的土壤因子與健康土壤相關(guān)。細(xì)菌微生物中subgroup_2，Solibacter，Ellin6067和Bryobacter與感病土壤呈正相關(guān)，SC-I-84，Sphingomonas和Koribacter與健康土壤呈正相關(guān)。

3 討論

根際最接近根，是植物與土壤生物相互作用的動(dòng)態(tài)區(qū)域，該區(qū)域內(nèi)高水平的營養(yǎng)物質(zhì)、水和根際分泌物可以吸引多種不同的微生物，其中大量的微生物也參與了土壤與植物之間的相互作用，與植物的生長、健康和生產(chǎn)力有關(guān)[21，22]。在根際，微生物群落是多樣化的，這意味著不同類型的微生物種群具有不同的作用^[23]。土壤中富含各種真菌和細(xì)菌，它們作為有益微生物或病原體，在植物的適合度和作物性能中發(fā)揮重要作

用^[24]。不同的植物物種可以通過植物—土壤反饋改變土壤微生物群落的組成，這些反饋可以塑造植物根際群落組成和生態(tài)系統(tǒng)功能[25，26]。

根際土壤微生物與土傳疾病的發(fā)生密切相關(guān)，病原菌的入侵可以改變植物土壤和內(nèi)生菌微生物群落的組成^[27]。本研究利用Illumina NovaSeq6000測(cè)序平臺(tái)對(duì)健康煙草植株和根黑腐病侵染的煙草植株的根際土壤細(xì)菌和真菌菌落進(jìn)行測(cè)序。結(jié)果表明，在煙草根黑腐病原菌侵染后，部分真菌的相對(duì)豐度發(fā)生了顯著變化，其中真菌群落多樣性低于健康煙草植株。這一結(jié)果與西洋參的研究相似，即發(fā)生根黑腐病時(shí)，根際土壤真菌的種類和多樣性指數(shù)均明顯下降^[28]。但是，細(xì)菌的相對(duì)豐度顯著增加，推測(cè)這些細(xì)菌可能與病原體建立了互惠互利的關(guān)系，并參與了病原體的入侵過程。有趣的是，在黃連和黃精相關(guān)的研究中，發(fā)現(xiàn)患病植株根際土壤細(xì)菌和真菌豐富度及多樣性都要高于健康植株，因此，病原菌對(duì)于土壤微生物多樣性的影響仍然會(huì)因植物種類的不同而有所差別[29，30]。此外，在感病土壤中，有益菌屬 Sphingomonas、Gemmatimonas、SC-I-84、A21b、Bryobacter、Candidatus_Solibacter、Pseudarthrobacter、Bacillus和MND1 的豐度下降。尤其是Bacillus，被認(rèn)為是一類重要的根際有益菌，容易在土壤中定殖和繁殖，在土壤的物質(zhì)和能量循環(huán)中發(fā)揮重要作用，其代謝產(chǎn)物不僅能夠有效抑制病害而且能促進(jìn)植物的生長發(fā)育^[31]。因此，表明在煙草根黑腐病原菌侵染的土壤中有益菌的減少，病原菌的增加，會(huì)導(dǎo)致土壤致病性增強(qiáng)，打破了根際土壤微生物的平衡，繼而導(dǎo)致煙草患病加重。

土壤理化性質(zhì)直接影響著土傳病害的發(fā)生，作為土壤微生物的主要生境，土壤主要環(huán)境因子的變化對(duì)土傳病害的發(fā)生與嚴(yán)重程度密切相關(guān)^[32]。煙草根黑腐病是典型的土傳病害，主要以厚垣孢子和內(nèi)生分生孢子在土壤、病殘?bào)w中越冬。研究表明，根黑腐病田間發(fā)病最適宜溫度在17～23℃，土壤濕度大易發(fā)病，土壤pH ≤ 5.6時(shí)極少發(fā)病。pH、NO-N的降低，以及NH-N的增加會(huì)在土壤中產(chǎn)生對(duì)根黑腐病具有的抑制效應(yīng)的因素，并主要作用于煙草根部環(huán)境，能有效減少根黑腐病的發(fā)生^[33]。本研究發(fā)現(xiàn)，與健康土壤相比，感病土壤SOC、TN、ALN、MBC和MBN顯著降低，AP和AK含量顯著升高。此外，感病煙草與AK，AP和INV因子正相關(guān)，細(xì)菌微生物中subgroup_2，Solibacter，Ellin6067和Bryobacter與感病土壤呈正相關(guān)。

為了更好地了解煙草根際微生物群落變化的內(nèi)部原因，本研究利用PICRUSt功能預(yù)測(cè)，分析了煙草根際真菌在不同階段微生物功能的差異。通過對(duì)根黑腐病侵染的煙草根際土壤微生物的代謝通路注釋結(jié)果表明，在感病樣本中代謝活動(dòng)更加活躍，核糖核酸酶HIII、DNA結(jié)合反應(yīng)調(diào)節(jié)因子、核苷-二磷酸-糖環(huán)合酶、阿拉伯糖外流滲透酶等多個(gè)通路在感病樣本中顯著上調(diào)表達(dá)。這說明感病樣本中代謝更加活躍，有益于病原真菌的定植。

4 結(jié)論

本研究結(jié)果表明，煙草根黑腐病侵染后煙株根系土壤理化性質(zhì)發(fā)生改變，土壤的酶活性也隨之變化，為病原菌的入侵與傳播創(chuàng)造了有利條件。侵染后，土壤原有的細(xì)菌群落結(jié)構(gòu)和多樣性被破壞，有益菌屬的相對(duì)豐度有所下降。同時(shí)，根際土壤中有利于病原菌生長的代謝更加旺盛。這說明多樣化、穩(wěn)定的煙草根際微生物群落結(jié)構(gòu)，對(duì)于維持煙株根際微生態(tài)抗性、抵御病原菌侵染至關(guān)重要。因此，通過對(duì)比分析根黑腐病侵染的煙草根際土壤與健康煙株根際土壤細(xì)菌和真菌的菌落結(jié)構(gòu)及多樣性差異，分析優(yōu)勢(shì)菌群與病原菌及其他有益微生物之間的內(nèi)在聯(lián)系，開展病原菌拮抗微生物的篩選、鑒定及拮抗機(jī)理研究，對(duì)于利用煙草根際微生態(tài)調(diào)控等手段綠色防控?zé)煵莞诟【哂兄匾睦碚撝蝺r(jià)值。

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收稿日期：2024-01-29 修回日期：2024-03-09

基金項(xiàng)目：陜西省煙草公司漢中市公司科技項(xiàng)目烤煙病蟲害流行模式分析和病蟲害預(yù)測(cè)預(yù)報(bào)系統(tǒng)構(gòu)建（HZYC-KJXM-2021-02）。

第一作者簡介：譚嘉琦（1994-），男，初級(jí)農(nóng)藝師，主要從事煙草病蟲害綠色防控工作。

通信作者：杜鴻波。