蘇州工業園區市售鴨血產品基于PCR技術的檢測結果分析

摘 要：目的：通過檢測蘇州工業園區市售鴨血產品中的動物源性成分，了解園區中鴨血產品是否存在動物源性摻假現象。方法：本研究采用多重PCR方法對鴨血樣本進行定性篩查，并對結果異常樣本采用相關動物源性的單重PCR方法進行二次復檢，比對標簽配料表信息，進行摻假分析和判定。結果：在所收集的86份鴨血樣品中，共檢出17份摻入雞血，占總樣本量19.7%；1份摻入豬血；1份為純雞血；1份與配料表信息不符，各占總樣本量1.2%。結論：本文研究了目前蘇州工業園區市場上鴨血產品的質量狀況及常見摻假肉源種類，并為市場監管部門提供新的檢測方法和監管思路。

關鍵詞：鴨血；動物源性成分；PCR技術；線粒體DNA

Abstract： Objective： To investigate whether there is animal derived adulteration in duck blood products sold in Suzhou Industrial Park by detecting animal derived components. Method： This study used multiplex PCR to qualitatively screen duck blood samples， and used relevant animal derived single PCR methods for secondary retesting of samples with abnormal results. The label ingredient list information was compared for adulteration analysis and judgment. Result： Among the 86 collected duck blood samples， a total of 17 were found to contain chicken blood， accounting for 19.7% of the total sample size; only 1 sample was mixed with pig blood， 1 sample was pure chicken blood， and 1 sample did not match the information on the ingredient list， each accounting for 1.2% of the total sample size. Conclusion： This article studies the quality status of duck blood products and common types of adulterated meat sources in the current Suzhou Industrial Park market， and provides new testing methods and regulatory ideas for market supervision departments.

鴨血受其產量與市場需求等因素的影響，其價格比其他血制品價格高，在利益驅動下，不良商家將雞血、豬血等低價血制品摻入鴨血中進行售賣，致使“假鴨血”事件層出不窮[1]。因此，對鴨血制品進行動物源性成分檢測，是維護食品安全的重要環節。

我國針對動物源性產品摻假情況先后發布了《常見畜禽動物成分檢測方法 液相芯片法》（GB/T 35024—2018）、《常見動物源性成分快速測定 膜芯片法》（GB/T 35917—2018）、《動物制品中動物源性檢測基因條碼技術 Sanger測序法》（GB/T 35918—2018）和《常見畜禽動物源性成分檢測方法 實時熒光PCR法》（GB/T 38164—2019）這4種國家標準檢測方法，其中液相芯片法、膜芯片法和Sanger測序法因其技術復雜、檢測周期長、檢測成本高等原因，實際應用較少。目前，該領域仍以PCR系列技術為主流應用，而國家標準中的qPCR法因其檢測通量低，每次反應均只能檢測一種靶標，不便用于大批量動物源性樣品的定性篩查[2]。

本研究采用多重PCR檢測方法[3-4]，以牛、羊、豬、雞、鴨、驢、馬、鼠、狐貍、兔子和狗這11種動物線粒體DNA（Mitochondrial DNA，mtDNA）為檢測靶基因，對分布于蘇州市工業園區的64家餐飲店，7家麻辣燙及鴨血粉絲店，11家農貿市場商戶和4家線上生鮮平臺商戶隨機取樣，共收集86份鴨血制品進行多重篩查檢測，對篩查結果異常的樣品通過單重PCR的相關方法進一步復檢確認。本研究掌握了目前蘇州工業園區市場上鴨血產品所存在的動物源性摻假情況，并為市場監管部門提供新的檢測方法和監管思路。

1 材料與方法

1.1 儀器

普通聚合酶鏈式反應（PCR）儀，杭州朗基科學儀器有限公司；凝膠成像儀，杭州朗基科學儀器有限公司；DYY-6C型電泳儀，北京六一儀器場；Nanodrop 2000/2000C分光光度計，Thermo scientific公司；微量移液器，德國Eppendorf公司。

1.2 試劑

DNA提取試劑（PCR級柱式動物線粒體DNAout）盒，天恩澤基因科技有限公司；TAE（50×）凝膠電泳液，BioSharp公司；瓊脂糖，BIOWEST維百奧生物科技公司；本研究所用引物均購自GENEWIZ生物科技有限公司；DreamTag Green PCRMaster Mix、GeneRuler"100 bp DNA ladder及DNAloading Dye，Thermo Scientific公司；SuperRedGelRed核酸染料，BioSharp公司；PBS溶液，HyClone公司。

1.3 抽檢樣品

本次抽檢的鴨血制品分別來自蘇州市工業園區中陽澄湖度假區、金雞湖商務區、獨墅湖科創區、高端貿易制造區的64家餐飲店，7家麻辣燙及鴨血粉絲店，11家農貿市場商戶以及4家“食行生鮮”網絡平臺商戶，共收集86份鴨血制品。按其樣本狀態分類，有20份包裝鴨血（13份配料表為鴨血，7份配料表為雞鴨血）與66份散裝鴨血。

1.4 樣品前處理與核酸提取

取1 g鴨血樣本，放入含600 μL PBS緩沖液的2 mL離心管中，使用勻漿機將鴨血打碎，7 000 r·min-1離心5 min，棄上清，后續操作步驟按照PCR級柱式動物線粒體提取試劑盒說明書進行。

1.5 多重PCR體系對鴨血制品的動物源性篩查

本研究采用前期構建的多重PCR方法對鴨血制品進行初篩，該多重PCR方法由四重PCR[5]和八重PCR[6]雙聯合多重體系組成，可以檢測樣品中是否含有牛、羊、豬、雞、鴨、驢、馬、鼠、狐貍、兔子和狗這11種肉源成分，具體引物及檢測方法等參照文獻內容。對于多重PCR篩查出的含鴨源外動物源性的樣本，再采用單重PCR復檢驗證，單重PCR引物、反應體系與程序設置見表1、表2、表3和表4。

2 結果與分析

2.1 單重PCR驗證

經多重PCR定性篩查，檢測結果顯示部分樣本除鴨源性外，還存在雞豬源性與豬源性。再通過鴨、雞和豬的單重PCR方法二輪復檢，部分樣本的復檢結果如圖1所示。圖1（a）泳道1—8均出現鴨源性條帶，圖1（b）中1、5、7和8泳道均出現雞源性條帶，圖1（c）中1泳道出現豬源性條帶。

2.2 樣本檢測結果

86份檢測樣品中，共檢出20份樣品有摻入其他動物血或與標簽配料表不符的情況，占總檢測樣本量的23.3%。由表5可知，從抽檢區域上看，陽澄湖度假區13份，獨墅湖科創區2份，金雞湖商務區3份，高端貿易制造區1份，“食行生鮮”網絡平臺1份。由表6可知，從摻入血源上看，17份摻入雞血，占總樣本量19.7%；僅有1份摻入豬血，1份為純雞血，均占總樣本量1.2%。由表7可知，從樣本狀態上看，在20份包裝鴨血中，除已注明為雞鴨血的7份包裝產品（6份確為雞鴨血；1份未檢測到雞源性，為純鴨血，與配料表不符）。其余13份包裝注明為鴨血的產品中有1份為鴨血摻入豬血，異常結果在包裝產品中的占比為5%；在66份散裝鴨血中，有11份為鴨血摻入雞血，1份為純雞血，異常結果在散裝產品中的占比為18.2%。

3 討論與結論

基于20份包裝鴨血與66份散裝鴨血的檢測結果分析蘇州工業園區的鴨血摻假情況，在20份包裝鴨血樣品中，有7份包裝樣本已注明為雞鴨血，其中餐飲店5份，農貿市場商戶及線上商戶各1份。對于在餐飲店所收集到的此類雞鴨血包裝樣本，店內卻當鴨血進行加工銷售，這涉及對消費者的欺詐行為。此外，僅有1份包裝已注明為鴨血的產品，實際檢測出豬源性成分，占包裝產品的5%，占總樣本量的1.2%。而在收集到的66份散裝鴨血中，11份樣本摻入雞血，甚至有1份為純雞血，占散裝產品的18.2%，占總樣本量的14.0%。可見散裝鴨血產品較包裝鴨血產品的動物源性摻假情況更為嚴峻，且摻入的動物血主要為雞血，其次為豬血。

實際上，我國鴨血摻假事件早已屢見不鮮。2012年，北京稻香村就被爆出售用豬血勾兌的假鴨血豆腐。2021—2024年，山東省濟南市，四川省南充市、遂寧市等地均爆出使用雞血或豬血摻入或冒充鴨血進行售賣的案件。由此可見，蘇州工業園區本次鴨血產品抽樣檢測所發現的鴨血摻假問題在全國各地普遍存在。

因而，維護食品安全任重而道遠，應當及時更新便捷、高效、成本低的國家標準檢測方法作為指導方法，并進一步加強抽樣檢驗工作，加大市場監管力度，對摻假行為進行嚴厲打擊，從而維護食品與藥品的市場秩序與消費者權益。

參考文獻

[1]于文瑩，遲凱月，徐寧，等.鑒定鴨血及摻假品種的多重PCR方法的建立及應用[J].食品科技，2022，47（12）：307-312.

[2]丁威.一種POCT核酸快檢技術研發及在摻假肉檢測中的應用[D].蘇州：蘇州大學，2022.

[3]孫萬平，劉婉婉，陶靜.一種用于快速檢測肉源食品的多重PCR檢測試劑盒：201810482987.3[P].2018-08-17.

[4]顧炳仁，孫萬平，劉婉婉，等.一種快速檢測肉源食品用多重PCR檢測試劑盒：201810016749.3[P].2020-10-16.

[5]LIU W W，WANG X N，TAO J，et al.A Multiplex PCR assay mediated by universal primers for the detection of adulterated meat in mutton[J].Journal of Food Protection，2019，82（2）：325-330.

[6]LIU W，TAO J，XUE M，et al.A multiplex PCR method mediated by universal primers for the identification of eight meat ingredients in food products[J].European Food Research and Technology，2019，245（11）：2385-2392.

作者簡介：付群（1987—），男，江西樟樹人，碩士。研究方向：流行病與統計學。

通信作者：張玲（1986—），女，黑龍江大慶人，碩士。研究方向：食品安全檢測與質量控制。E-mail： zling0812@126.com。