礬冰納米乳調節Wnt/β-catenin通路對糖尿病型 肛瘺術后創面愈合的影響

[摘要]目的觀察礬冰納米乳對糖尿病型肛瘺術后大鼠創面愈合及Wnt/B-連環蛋白（β-catenin）信號通路相關蛋白表達的影響，探討其促進創面修復的作用機制。方法將72只SPF級SD雌性大鼠隨機分為假手術組、模型組、礬冰納米乳組和濕潤燒傷膏組（每組18只），均建立糖尿病大鼠模型。除假手術組外，其余各組再建立糖尿病肛瘺術后創面模型。模型組每天予局部覆蓋生理鹽水紗條，礬冰納米乳組每天予局部覆蓋礬冰納米乳紗條，濕潤燒傷膏組每天予局部覆蓋濕潤燒傷膏紗條，連續干預 21d_o 分別于第7、14、21天觀察各組大鼠體質量、精神狀態、活動能力及創面愈合率;HE染色檢測創面組織病理變化及毛細血管計數;Westem blot檢測創面組織中 w_nt1，β -catenin、細胞周期蛋白D1（CyclinD1）、癌基因C-myc（C-myc）、血管內皮生長因子（VEGF）、血管內皮生長因子受體2（VEGFR2）及糖原合酶激酶 3β（GSK-3β） 蛋白表達水平。結果與假手術組比較，模型組大鼠體質量、創面愈合率降低（ Plt; 0.05）;組織炎癥浸潤增加，毛細血管計數減少（ （Plt;0.05） ；第21天 Wnt1.β -catenin、CyclinD1、C-myc蛋白表達水平升高（ Plt;0.05，Plt; 0.01），VEGF、VEGFR2和GSK-3β表達水平下降 （Plt;0.01） 。與模型組比較，礬冰納米乳組與濕潤燒傷膏組大鼠體質量、創面愈合率上升 ）；炎癥細胞減少、毛細血管計數增加（ Plt;0.05） ；第21天Wnt1 β，β -catenin、C-myc、CyclinD1、VEGF與VEGFR2蛋白表達水平升高 Plt;0.05，Plt;0.01 ），GSK-3β表達水平下降 。結論礬冰納米乳可能通過激活 Wnt/β -catenin通路的相關蛋白，從而改善創面組織病理狀態，促進創面愈合。

本文引用：，.礬冰納米乳調節 Wnt/β -catenin通路對糖尿病型肛瘺術后創面愈合的影響[J].湖南中醫藥大學學報，2025，45（5）：810-817.

[關鍵詞］礬冰納米乳； Wnt/β. -catenin信號通路；糖尿病；肛瘺；術后創面 [中圖分類號]R275 [文獻標志碼]A [文章編號]doi：10.3969/j.issn.1674-070X.2025.05.005

[Abstract]Objective Toobservetheeffectsof alum-icenanoemulsion onpostoperative wound healing in diabeticrats with analfistulaandtheexpresionofproteinsrelatedtotheWnt/B-cateninsignalingpathwayinratsaftersurgeryfordiabeticanal fistulaadtoexploreitsmechanismofactioninpromotingwoundrepair.MethodsSeventytwoSPF-gradefemaleSDratswere randomlydivided intosham-operated group，model group，alum-icenanoemulsiongroup，and Moist Burn Ointment （MBO）group， with18ratsineach group.Adiabeticrat modelwas establishedinall groups.Subsequently，a postoperative wound modelof diabeticanalfistulawascreatedinallgroups exceptthesham-operated group.Themodel groupreceiveddailylocalcoverage with saline-soaked gauze，thenanoemulsion groupreceived alum-icenanoemulsion-soaked gauze，andthe MBO groupreceivedMBOsoakedgauze.Thetreatmentswereapliedfor21consecutivedays.Thebodyweight，mentalstatus，activityabilityandwound healingrateoftheratsineachgroupwereobservedonthe7th14thand21stdaysrespectively.HEstainingwasusedtoexamine the pathologicalchangesandcapillrydensityinthe woundtisue.Westem blotwasemployedtochecktheexpressionlevelsof Wnt1， β -catenin，CyclinD1，C-myc，vascularendothelial growthfactor（VEGF），vascularendothelialgrowth factorreeptor2 （VEGFR2），and glycogen synthase kinase3β （GSK-3β）proteins inwound tisse. Results Compared with the sham-operatedgroup， ratsintemodelgroupsoweddcreasedodyweightandwoundalingate（5），increasedinflmmatorycelifltration reduced capillary count in the wound tissue （ P- lt;0.05）.On day 21， the expression levels of Wnt1， β -catenin， Cyclin D1，and C-myc proteinswere significantly elevated（ P lt;0.05， P lt;0.01），while the expression levels of VEGF，VEGFR2，and GSK-3β significantly decreased （ P： lt;0.01）.Compared with the model group，both the alum-ice nanoemulsion groupand the MBO group showed increased body weight and wound healing rate （ P lt;0.05），reduced inflammatory cell infiltration，and increased capillary count （ Plt;0.05 ）. Onday 21，the expression levels of Wnt1， β -catenin， Cyclin D1， C-myc，VEGF，and VEGFR2 proteinswere significantly upregulated （ Plt; （20 0.05， Plt;0.01 ），while GSK-3β expression was significantly downregulated（ PQ.01 ）. Conclusion Alum-ice nanoemulsion may promote woundhealingbyactivatingproteinsrelatedtotheWnt/β-cateninsignalingpathway，therebyimprovingthehistopathological condition of the wound tissue.

[Keywords]alum-icenanoemulsion;Wnt/β-catenin signaling pathway；diabetes；anal fistula;postoperativewound

肛瘺是一種慢性肛周疾病，典型特征為肛管或直腸與肛周皮膚之間形成異常的瘺管，通常由慢性感染所致，瘺管多伴有上皮化；作為肛腸科常見病之一，其主要治療方式為手術治療。流行病學數據顯示，2020年全球糖尿病患者總數為4.63億，預計到2030年將增加至5.78億，2045年將達到7億。長期的病理性血糖升高會導致體內晚期糖基化終產物的生成，為細菌生長提供良好的營養環境，增加傷口感染與組織壞死的風險，阻礙傷口愈合，所以糖尿病是導致肛瘺手術后傷口愈合緩慢的風險因素之一[3]。在治療肛瘺術后創面愈合等方面，中醫藥外治法憑借其良好的臨床療效和安全性被廣泛應用4。其中，濕潤燒傷膏被證實在促進肛瘺術后創面黏膜愈合、預防感染、水腫及滲血等方面具有顯著療效，是目前臨床用于肛瘺術后創面愈合最為常見的藥物之二[5-6]。前期研究表明，礬冰納米乳通過調節創面微環境、促進細胞生長和血管生成等方式可促進創面愈合[7-9]。臨床研究表明，礬冰納米乳有利于肛瘺患者手術創面的恢復[，但其在糖尿病型肛瘺術后創面中的作用機制尚不明確。

研究表明， Wnt/β- 連環蛋白（ β -catenin）信號通路在創面修復中起重要作用[]。因此，本研究擬從Wnt/β -catenin信號通路入手，分析礬冰納米乳對糖尿病型肛瘺術后創面愈合的影響及干預機制作用，旨在為臨床制訂相關治療方案提供循證依據。

1材料與方法

1.1 實驗動物

實驗選用SPF級6＼～8周齡SD雌性大鼠72只，體質量 （200.00±15.00 ） g_o 大鼠均購自湖北貝恩特生物科技有限公司，動物質量合格證編號為：SCXK（鄂）2021-0027。在室溫（ 22±1 ） C 、相對濕度 50%±5% 、^12h 晝夜交替的環境條件下飼養。實驗方案已通過湖北省安評中心實驗動物倫理委員會審核批準[受理編號：IACUC（準）-BNT-2022-005]。

1.2 主要藥品及試劑

礬冰納米乳（湖南中醫藥大學第一附屬醫院制劑室，批號：20230730）；濕潤燒傷膏（汕頭美寶制藥有限公司，批號：2301012A）。

鏈脲佐菌素（北京索萊寶科技有限公司，批號：20221015）；水合氯醛（北京鼎國生物技術有限公司，批號：09180023）;HE染色、總蛋白提取、Westernblot印跡熒光發光檢測試劑盒（江蘇凱基生物技術股份有限公司，批號：0318-8、1002-2、0824-11）；BCA蛋白濃度測定試劑盒、Trizol試劑盒（上海碧云天生物公司，批號：100231、231109）；預染蛋白maker（美國MBI公司，批號：231010009）;CyclinD1抗體 β.β -catenin抗體、GSK3β抗體、Wnt1抗體、GAPDH抗體（武漢三鷹生物技術有限公司，批號：10060004、222693901、23091125、22001041、100674471）；PVDF膜（美國MILLIPORE 公司，批號：21012-005）。

1.3 主要儀器

組織破碎勻漿機（武漢賽維爾生物科技有限公司，型號：Kz-II）;倒置熒光顯微鏡（德國蔡司股份公司，型號：zEIssAxiovertA1）；蛋白電泳儀[伯樂生命醫學產品（上海）有限公司，型號：Mini-PRO-TEANTGX]；電子分析天平（德國賽多利斯股份公司，型號：BT-124s）;烤箱（上海惠泰儀器制造有限公司，型號：HG-9140A）；全波長酶標儀、酶標儀（美國賽默飛生物有限公司，型號：VarioskanLUX、Mul-tiskanFC）；石蠟切片機（上海徠卡儀器有限公司，型號：RM2016）；凝膠成像系統（廣州博鷺騰生物科技有限公司，型號：GelView ）。

1.4 藥液制備

根據團隊前期研究[12]，本課題組采用優化后的礬冰納米乳制備方法，具體方法如下：取冰片 2.5g 研細后加入乙酸乙酯 溶解，加入乳化劑聚氧乙烯醚氫化蓖麻油 16g 攪拌均勻，加入蒸餾水，混合物隨水量增加從黏稠凝膠逐漸變稀，最終呈透明至半透明狀，帶淡藍色乳光。另取白礬 _13.8g 和氯化鈉 g_g 溶于適量蒸餾水中過濾后緩緩加入上述混合液，并用蒸餾水補至總容量 ，攪拌均勻后過濾、灌封， 115.5°C 滅菌 30min ，制得濃度為16.3mg/mL 的礬冰納米乳。成品粒徑均勻（平均26.1nm ，包封率超過 80% ，藥物載藥量為 16.3mg/mL 外觀透明至半透明，穩定性和透皮吸收性能顯著優于傳統制劑，置于 4‰ 冰箱保存備用。

1.5 造模方法

參照文獻[13]建立糖尿病大鼠模型。糖尿病模型通過腹腔注射 50mg/kg 的鏈脲佐菌素進行誘導，注射前禁食 12h ，注射后 24h 內監測血糖水平。鏈脲佐菌素成功誘導糖尿病后，血糖水平持續大于16.7mmoL/L，確認模型建立成功[13]。

糖尿病模型建立后，在大鼠肛周臀部進行手術操作：依次切開皮膚全層、皮下組織及淺筋膜，直至肌層，形成直徑約 2.0cm 的圓形手術切口。隨后，將1.0McFarland單位金黃色葡萄球菌與大腸埃希菌按1：1比例混合的菌液浸濕紗布，覆蓋于創面，以模擬肛瘺術后感染性環境。術后 24h 移除紗布，并觀察創面情況。若出現膿性分泌物、紅腫等典型感染表現，表明類糖尿病肛瘺術后創面模型構建成功[14]。為維持創面持續感染狀態，于每次治療前 0.5h 向創面滴加 0.1mL 上述標準混合菌液。為防止大鼠相互舔舐及撕咬影響創面，每只大鼠單獨飼養。

1.6 分組及給藥方法

72只健康SPF級SD大鼠適應性喂養1周后，隨機分為假手術組、模型組、礬冰納米乳組、濕潤燒傷膏組，每組18只，均建立糖尿病大鼠模型。除假手術組外，其余3組在糖尿病模型的基礎上制備肛瘺感染性創面模型。假手術組則不進行細菌感染處理，僅在同一解剖部位按相同方法制備直徑約 2.0cm 的創面，保持無菌操作，以模擬單純創傷環境。模型組滴加混合菌液后覆蓋生理鹽水紗條；礬冰納米乳組與濕潤燒傷膏組同樣滴加混合菌液，并分別覆蓋礬冰納米乳紗條或濕潤燒傷膏紗條。各組換藥2次/d，連續換藥3周。在干預結束后的第7、14、21天，對大鼠進行稱重。通過注射過量麻醉藥將其處死，分別采集創面內部組織及其毗鄰皮膚組織的樣本，以進行后續實驗分析。

1.7 觀察各組大鼠一般情況

記錄各組大鼠精神狀態、活動能力、攝食與飲水量，以及籠內墊料潮濕情況。在干預結束后的第7、14、21天，記錄每組大鼠的體質量，以評估大鼠的整體健康狀況和實驗干預的效果。

1.8 觀察各組創面愈合情況

觀察并記錄創面出血、滲液及水腫情況，同時觀察肉芽組織的生長進度以及愈合狀態。計算各組大鼠干預第7、14、21天后的創面愈合率。此過程采用透明膠片描記法測定各組動物的局部創面面積，并對所得數據進行詳細記錄，用以評估各組創面的動態愈合情況。創面愈合率=[（原始創面面積-未愈合創面面積）/原始創面面積 ]×100% 。

1.9HE染色觀察創面組織的病理變化

分離并收集創面組織樣本，固定在 4% 多聚甲醛中，隨后嵌入石蠟。嵌入的組織切片，在 100% ？ 95% ！80% 和 70% 的乙醇中浸泡，每次 5min ，然后在蒸餾水中浸泡 5min 進行再水化。組織切片使用HE染色試劑盒進行染色，所有步驟均嚴格按照操作規定流程進行。切片在蘇木精染液中染色 5min ，自來水中沖洗 5min;1% 鹽酸-乙醇溶液中分化 30s ，自來水沖洗 1min ；伊紅染液染色 1min ，自來水沖洗 1min 然后，切片依次在 70%.80%.95%.100% 的乙醇中脫水，每次 5min ；二甲苯透明2次，每次 10min ;最后用中性樹膠封片。所有步驟均嚴格按照操作規定流程進行。所有切片由兩名病理學專家盲法評估，在200倍光鏡下隨機選取5個非重疊視野，計數每個視野中管腔結構完整（內皮細胞圍合、含紅細胞）的毛細血管，取平均值作為毛細血管密度（個/視野）;在400倍光鏡下采用Image-ProPlus軟件計算單位面積 （mm²） 內梭形或星形細胞核的成纖維細胞數量。

1.10Westernblot檢測創面組織中相關的蛋白表達

將新鮮或冷凍的組織樣本切成小塊，在預冷的RIPA緩沖液中使用勻漿器勻漿。離心去除未裂解的組織。收集上清液，采用BCA蛋白濃度測定試劑盒測定蛋白濃度。取 20μg 樣本 100^qC 煮沸，通過 12% SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳分離，并轉移到硝酸纖維素膜上。將膜置于含有 5% milk/TBST緩沖液中，室溫搖床封閉 ¹h 。繼續用含有一抗的雜交袋將膜封閉， 4°C 冰箱過夜。所用一抗及其稀釋比例如下：抗β -catenin抗體（1：1000）糖原合酶激酶-3β抗體（glyco-gen synthase kinase- ^-3β ，GSK- ^?3β ） 1：1 000 ）、細胞周期蛋白D1抗體（Cyclin D1）（1：1 000）、癌基因 C-myc抗體（C-myc）（1：1000）、血管內皮生長因子抗體（vas-cular endothelial growth factor， VEGF）（1：1 OoO）、血管內皮生長因子受體2抗體（vascularendothelial gro-wth factor receptor 2， VEGFR2）（1：1 O0O）、甘油醛 ^-3- 磷酸脫氫酶抗體（glyceraldehyde-3-phosphate dehyd-rogenase，GAPDH）（1：200O）。二抗使用辣根過氧化物酶標記的抗兔IgG抗體（horseradish peroxidase-con-jugated anti-rabbit IgG antibody， HRP- ?IgG ）（1：5 000），于室溫下孵育。利用化學發光成像系統檢測目標蛋白的表達量。

1.11 統計學分析

采用GraphPadPrism10.1軟件進行數據分析。計量資料以“x±s\"表示，符合正態性和方差齊性時，采用one-wayANOVA進行組間比較;對于重復測量數據，統計檢驗采用雙因素方差分析，并進行Tukey事后檢驗評估不同時間點的差異。若數據不符合正態性和（或）方差齊性時，采用Kruskal-WallisH 檢驗進行組間比較，且對于重復測量數據，采用Friedman檢驗。以 Plt;0.05 表示差異有統計學意義。

2結果

2.1各組大鼠一般情況比較

與假手術組比較，模型組大鼠體質量第7、14、21天降低（ Plt;0.05） ，精神萎靡、活動減少、攝食飲水量下降；與模型組比較，礬冰納米乳組和濕潤燒傷膏組大鼠體質量第7、14、21天升高 （Plt;0.05） ，精神狀態改善，活動量及攝食飲水量接近正常水平。與第7天比較，第14、21天假手術組、模型組、礬冰納米乳組和濕潤燒傷膏組大鼠體質量升高 （Plt;0.05） ；與第14天比較，第21天假手術組、模型組、礬冰納米乳組和濕潤燒傷膏組體質量升高（ Plt;0.05 ）。詳見表1。

2.2 各組大鼠創面愈合率比較

與假手術組比較，模型組大鼠創面愈合率第7、14、21天降低 （Plt;0.05） ；與模型組比較，礬冰納米乳組和濕潤燒傷膏組大鼠創面愈合率第7、14、21天升高 （Plt;0.05） 。與第7天比較，第14、21天假手術組、模型組、礬冰納米乳組和濕潤燒傷膏組大鼠創面愈合率升高 （Plt;0.05） ；與第14天比較，第21天假手術組、模型組、礬冰納米乳組和濕潤燒傷膏組大鼠創面愈合率升高 。詳見圖1、表2。

2.3 各組大鼠創面病理學觀察

假手術組大鼠創面組織排列較為整齊，結構規整，組織形態保持相對完整，未見顯著炎癥細胞浸潤，提示其創面愈合處于相對穩定狀態。模型組大鼠創面組織結構顯著紊亂，伴大量炎癥細胞浸潤，肌纖維可見壞死碎片、空泡樣變性，肉芽組織增生紊亂，且存在顯著的膠原纖維腫脹、斷裂及溶解等病理變化，反映出顯著的組織損傷及炎癥反應。濕潤燒傷膏組大鼠創面亦可見一定程度的炎癥細胞浸潤，部分區域組織纖維呈現腫脹、橫斷、溶解及空泡樣變性等病理改變。礬冰納米乳組大鼠創面組織中，僅可見輕度炎癥細胞浸潤，散在分布少量成纖維細胞，膠原纖維結構相對完整，斷裂程度顯著減輕，且基本未見空泡變性現象。詳見圖2。

與假手術組比較，模型組第7、14、21天毛細血管數量減少（ Plt;0.05） ；與模型組比較，礬冰納米乳組、濕潤燒傷膏組第7、14、21天毛細血管數量增加 Plt;0.05） ；與濕潤燒傷膏組比較，礬冰納米乳組毛細血管計數第7、21天降低（ （Plt;0.05） ，第14天升高 （Plt;0.05） 。與第7天比較，第14天假手術組、濕潤燒傷膏組毛細血管計數升高 （Plt;0.05） ；第21天礬冰納米乳組、濕潤燒傷膏組毛細血管計數升高（ Plt; 0.05），假手術組毛細血管計數降低（ _{（Plt;0.05）} 。與第14天比較，第21天假手術組、濕潤燒傷膏組毛細血管計數降低 （Plt;0.05） 。詳見表3。

2.4各組大鼠創面組織 Wnt/β -catenin信號通路相 關蛋白表達量比較

與假手術組相比，模型組第7、14、21天 Wnt1 、β -catenin升高（ Plt;0.01? ，VEGF和VEGFR2降低（ Plt; 0.01）;第21天CyclinD1升高 （Plt;0.05） ；第14、21天C-myc升高 （Plt;0.05，Plt;0.01），GSK-3β 降低（ Plt; 0.05）。與模型組比較，礬冰納米乳組第14、21天Wnt1 升高 （Plt;0.01） ，濕潤燒傷膏組第14天 Wnt1 降低 （Plt;0.05） 、第21天升高 _{（Plt;0.05）} ；礬冰納米乳組、濕潤燒傷膏組第7、14、21天 β -catenin ，C-myc，VEGF VEGFR2升高 （Plt;0.05，Plt;0.01 且GSK-3β降低（ Plt; 0.01），第21天CyclinD1升高 （Plt;0.05） 。與礬冰納米乳組比較，濕潤燒傷膏組第14、21天 Wntl 、C-myc降低 （Plt;0.05） ；第7天 β -catenin降低 （Plt;0.05） ，VEGF升高 （Plt;0.05） ；第14天VEGFR2升高（ Plt;0.01 ），GSK-3β 降低 （Plt;0.05） 。詳見圖3、圖4。

3討論

創面修復是機體恢復組織完整性和功能的關鍵過程，有效的創面修復可防止創面細菌感染，并恢復肛門括約肌的正常收縮功能、局部感覺功能及皮膚屏障保護作用，對健康至關重要。臨床上，創面愈合不良可能導致慢性傷口和其他并發癥，增加患者痛苦和經濟負擔。因此，研究創面修復機制并開發有效的治療方法具有重要意義。 Wnt/β? -catenin信號通路在調控細胞增殖、遷移和分化方面發揮關鍵作用，可促進傷口愈合[15-1。本研究分析了礬冰納米乳在糖尿病型肛瘺術后創面愈合中的作用，發現其干預后，大鼠體質量未受影響，創面愈合率提高，炎癥細胞浸潤減少，組織纖維斷裂改善。此外，礬冰納米乳通過激活 Wnt/β. -catenin信號通路，可能促進糖尿病型肛瘺術后創面的愈合。

礬冰納米乳是一種新型中藥納米制劑，將傳統中藥與現代納米技術相結合，在創面修復領域具有潛在應用價值，其主要成分為白礬與冰片。白礬在中醫學中歸肝經、胃經，具有收斂固護、燥濕止癢、消腫解毒的作用，適用于濕熱毒邪引起的疾病；冰片具有通竅散結、清熱消腫、止痛明自的作用，并能改善局部微循環，促進組織再生[8]。二者藥性互補，配伍使用可產生協同增效作用，從而通過同時實現收斂和散邪，改善創面微環境，促進肉芽組織生成，加速傷口修復[。借助納米乳技術，白礬被加工成納米級液滴，顯著提高了其滲透性、穩定性和溶解性，從而提升了生物利用度和治療效果[20]。實驗和臨床研究均表明，礬冰納米乳可促進細胞增殖、遷移和分化，調控炎癥反應，從而有效加速創面愈合和組織再生[2]。臨床數據顯示，在肛瘺術后使用礬冰納米乳可顯著減輕水腫和疼痛，減少滲液，縮短愈合時間，并提高總體治療效果[22]。曹暉等[23]發現，在大鼠肛瘺模型中礬冰納米乳能提高創面愈合率并縮短愈合時間。本研究結果提示礬冰納米乳組在創面愈合過程中，表皮細胞分化、增殖及遷移均優于對照組，并在干預后第7、14、21天，病理切片顯示成纖維細胞和新生毛細血管的數量顯著增加，進一步證實其通過促進膠原蛋白合成，加速傷口修復，與形態學觀察結果相符。

研究表明， Wnt/β? -catenin信號通路在傷口愈合過程中通過促進成纖維細胞增殖、遷移及膠原合成發揮重要作用，并可通過調控VEGF及其受體VEG-FR，促進血管新生與成熟[13]。本研究首次探討礬冰納米乳對 Wnt/β -catenin-VEGF信號軸的調控作用，結果顯示其可顯著激活該通路，促進糖尿病型肛瘺術后創面修復。CyclinD1與C-myc為該通路關鍵下游基因，參與細胞周期調控與增殖，是組織再生的重要分子基礎[24。本研究證實，礬冰納米乳可顯著上調 Wnt1 ） .β -catenin、Cyclin D1和C-myc 的表達，增強細胞增殖能力，改善創面愈合效果。同時，在大鼠肛瘺模型中，礬冰納米乳亦能上調轉化生長因子 -β （transforming growth factor- ?β ，TGF- ）表達，進一步促進創面愈合并縮短修復時間[23]。研究表明，TGF- 與 Wnt/β -catenin通路在細胞分化及組織修復中協同作用，聯合促進成纖維細胞活化、血管生成及細胞外基質重建。因此，礬冰納米乳可能通過協同激活TGF- 與 Wnt/β -catenin信號通路，加速糖尿病創面的愈合進程。

綜上所述，本研究探討了礬冰納米乳在創面愈合中的作用及其相關機制，首次明確了礬冰納米乳通過激活 Wnt/β -catenin信號通路促進創面愈合，并激活創面纖維化反應。本次研究結果為礬冰納米乳在糖尿病慢性創面等難愈性創面治療中的潛在臨床應用提供了實驗依據。

參考文獻

[1] TYRELL S，COATESE，BROWN SR，et al.A systematic re-viewof the quality of reporting of interventions in the surgicaltreatment of Crohn's anal fistula： An assessment using the TI-DiER and Blencowe frameworks[J]. Techniques in Coloproctology，2021，25（4）：359-369.

[2]WILLIAMS R， KARURANGA S，MALANDA B， et al.Globalandregional estimates and projections of diabetes-related healthexpenditure： Results from the International Diabetes FederationDiabetes Atlas，9th edition[J]. Diabetes Research and ClinicalPractice，2020，162：108072.

[3]尹和宅，金燁，沈麗冬，等．肛瘺合并糖尿病患者病原菌分布及耐藥性分析[J].中國衛生檢驗雜志，2023，33（9）：1063-1066.

[4]王昆.中醫治療肛瘺20例療效分析[J].齊齊哈爾醫學院學報，2015，36（7）： 978-979.

[5]翟敏，盛衛星，張永安.濕潤燒傷膏在肛瘺術后創面的臨床應用[J].中國燒傷創瘍雜志，2010，22（6）：455-457.

[6]劉飛，董黎艷，王曉，等.濕潤燒傷膏在肛瘺術后創面中的應用效果分析[J].中國燒傷創瘍雜志，2024，36（6）：477-481.

[7]范洪橋，劉麗芳，吳雨薇，等.基于Notch信號通路探討礬冰納米乳對增生性瘢痕的影響[J]．國際中醫中藥雜志，2023，45（3）：308-314.

[8] 范洪橋，胡金輝，劉麗芳，等.礬冰納米乳對增生性瘢痕VEGF、Ang-1、TGF-β1與 MMP-2表達的影響[J].湖南中醫藥大學學報，2022， 42（3）： 361-366.

[9]劉麗芳，張琳玲，周亮，等．礬冰納米乳對大鼠燙傷模型的療效及創面EGF表達的影響[J].中成藥，2011，33（4）：574-577.

[10] 范洪橋，李松蓮，劉麗芳，等．礬冰納米乳對肛瘺術后創面愈合影響的臨床研究[J].中醫藥導報，2019，25（20）：109-111.

[11]唐銥，李春，黎湘君，等.龜板提取物激活 wnt/β -catenin通路促大鼠觸須部皮膚創面修復[J]：中藥新藥與臨床藥理，2017，28（3）： 298-303.

[12] 高雙雙，劉麗芳，楊春萍．礬冰納米乳外治丹毒70例的療效觀察[J]．湖南中醫藥大學學報，2016，36（5）：58-60.

[13]李為明，孫大力，李奕俊，等．深層海水促進糖尿病模型小鼠創面愈合：激活 Wnt/β -catenin通路的機制研究[J].中國組織工程研究，2019，23（31）：5017-5022.

[14]王進，許向彤，曹勇，等.熏洗I號對 SD大鼠肛瘺術后創面EGF表達影響[J].遼寧中醫藥大學學報，2017，19（4）：26-29.

[15]袁忠行，陳麗，丁雅容，等．解毒生肌膏調控GSK-3β/β-catenin 減輕炎癥反應促糖尿病 SD 大鼠慢性創面修復的影響[J]重慶醫科大學學報，2023，48（9）：1069-1077.

[16]徐鳳英，梁萍萍，廖若夷.基于 Wnt/β -catenin信號通路探討益氣生肌合劑對慢性難愈性創面大鼠模型修復愈合的影響及作用機制[J].環球中醫藥，2023，16（3）：453-459.

[17]子建文，高峰，黃文祥.白礬對厭氧菌和真菌的抑制作用研究[J].云南中醫雜志，1990，11（3）：26.

[18]姚美村，邵建芳，鄒佳麗，等.冰片作用特點研究綜述[J].臨床醫藥實踐，2009，18（8S）：1977-1980.

[19]范洪橋.礬冰納米乳對低位單純型肛瘺術后創面促愈作用的臨床觀察[D].：湖南中醫藥大學，2014.

[20] 張冀莎.礬冰納米乳的制備處方優化及質量標準的研究[D].：湖南中醫藥大學，2011.

[21]劉麗芳，張陽德，周青，等.礬冰納米乳治療淺Ⅱ度燒傷60例臨床觀察[J].中醫雜志，2010，51（10）：895-897.

[22]曹暉，賓東華，王愛華.礬冰納米乳促肛瘺術后創面修復 50例臨床分析[J].中國中醫藥現代遠程教育，2016，14（10）：57-59.

[23]曹暉，賓東華，劉麗芳，等.礬冰納米乳對大鼠肛瘺術后創面愈合中TGF-β1的影響[J].中醫藥導報，2016，22（2）：37-39.

[24] 鐘清玲.糖尿病大鼠表皮干細胞 β -catenin和cyclinD1的表達及其在創面修復中的作用研究[D].南昌：南昌大學，2011.

（本文編輯田夢妍）