豬繁殖與呼吸綜合征(PorcineReproductiveandRespiratorySyndrome,PRRS)是豬繁殖與呼吸綜合征病毒(Porcine Reproductive and Respiratory SyndromeVirus,PRRSV)引起的,以母豬繁殖障礙、仔豬和生長(zhǎng)育肥豬呼吸道癥狀、公豬生殖系統(tǒng)癥狀為主要特征的病毒性傳染病1。PRRS于1987年初報(bào)道于美國(guó)中西部,于1995年在我國(guó)大陸首次發(fā)現(xiàn),并于2006年在我國(guó)暴發(fā)疫情2-3],給我國(guó)及全球養(yǎng)豬業(yè)造成巨大經(jīng)濟(jì)損失,是目前危害養(yǎng)豬業(yè)最為嚴(yán)重的傳染病之一,我國(guó)將其列為二類動(dòng)物疫病4。PRRSV感染豬常出現(xiàn)耳朵發(fā)紺,故該病又稱豬藍(lán)耳病。PRRSV主要通過呼吸道和生殖/精液(垂直傳播)等途徑感染,以肺泡和各組織的巨噬細(xì)胞為靶細(xì)胞,可逃避宿主免疫應(yīng)答和誘導(dǎo)抗體增強(qiáng)依賴性效應(yīng)[1-3],促使豬出現(xiàn)免疫抑制和增加其他疫病感染風(fēng)險(xiǎn)。本研究旨在掌握內(nèi)江市種豬群中PRRSV的感染情況和免疫狀況,為推進(jìn)該市種豬群豬繁殖與呼吸綜合征的有效防控和凈化提供參考。
1材料與方法
1.1樣品來源
選擇四川省內(nèi)江市10個(gè)種豬場(chǎng),2023—2024年采集種豬群(豬群涵蓋種公豬、后備公豬、生產(chǎn)母豬和后備母豬)血清樣品1097份,流產(chǎn)胎兒組織50份,公豬精液262份,口鼻拭子137份(詳見表1),采樣方式為隨機(jī)抽樣,不同場(chǎng)區(qū)不同群體數(shù)量不一,其中5個(gè)場(chǎng)免疫了豬繁殖與呼吸綜合征商品化疫苗,5個(gè)場(chǎng)未進(jìn)行該病疫苗免疫。
1.2主要設(shè)備和試劑
單道/多道微量移液器(普蘭德)、生化培養(yǎng)箱(天津泰斯特)、離心機(jī)(蜀科)、酶標(biāo)分析儀(普朗)、組織勻漿儀(上海凈信)、Ⅱ級(jí)生物安全柜(青島海爾)、核酸提取儀(西安天隆)、實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀(西安天隆)。
表1內(nèi)江市種豬場(chǎng)樣品采集信息統(tǒng)計(jì)

磁珠法病毒基因組RNA提取試劑盒,分別購(gòu)自天根生化科技(北京)有限公司(批號(hào)W0115)和西安天隆科技有限公司(批號(hào)21112810T035、22120420T332);豬繁殖與呼吸綜合征病毒熒光RT—PCR檢測(cè)試劑盒,購(gòu)自青島立見生物科技有限公司(批號(hào)40022202、41442407);豬繁殖與呼吸綜合征病毒ELISA抗體檢測(cè)試劑盒,購(gòu)自武漢科前生物股份有限公司(批號(hào)20221107、20240402)。
1.3檢測(cè)方法
豬繁殖與呼吸綜合征抗體檢測(cè)采用ELISA方法,操作步驟按照試劑盒說明書進(jìn)行。豬繁殖與呼吸綜合征病毒核酸采用熒光RT—PCR方法,RNA抽提及熒光RT—PCR嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行。
1.4結(jié)果判定
抗體和病毒核酸檢測(cè)結(jié)果判定按照說明書標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行。
1.5數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析
在結(jié)果成立的情況下,根據(jù)檢測(cè)樣品數(shù)及檢測(cè)
出的陽(yáng)性樣品數(shù),采用MicrosoftExcel2007軟件計(jì)算陽(yáng)性率。
2檢測(cè)結(jié)果
2.1總體狀況
一是PRRSV抗體。在10個(gè)場(chǎng)點(diǎn)采集的1097份豬血清中,豬繁殖與呼吸綜合征免疫抗體檢出平均陽(yáng)性率為 74.7% (375/502),2024年免疫抗體陽(yáng)性率較2023年下降 32.09% ;非免疫抗體陽(yáng)性檢出率為46.55% (277/595),2024年非免疫抗體陽(yáng)性率比2023年上升 23.67% (表2)。
二是PRRSV病原。在907份病原學(xué)樣品中,檢出陽(yáng)性7份,個(gè)體陽(yáng)性率 0.77% (7/907),場(chǎng)點(diǎn)陽(yáng)性率30% (3/10),不同年度病原陽(yáng)性率無明顯差異。
2.2不同場(chǎng)點(diǎn)
不同場(chǎng)點(diǎn)檢測(cè)結(jié)果(表3)顯示:2023年度,5個(gè)免疫場(chǎng)PRRSV抗體陽(yáng)性率除B場(chǎng)點(diǎn)僅為 60.98% 外,其余場(chǎng)點(diǎn)抗體水平均達(dá)到 90% 以上;5個(gè)非免疫場(chǎng)PRRSV存在不同程度的抗體陽(yáng)性,G和J場(chǎng)點(diǎn)達(dá) 50% 以上,F(xiàn)、H和I場(chǎng)點(diǎn)抗體陽(yáng)性率在 6%~25% 不等;PRRSV病原陽(yáng)性僅在B和J場(chǎng)點(diǎn)檢出,其余場(chǎng)點(diǎn)均未檢出。2024年度,5個(gè)免疫場(chǎng)中除A和B場(chǎng)點(diǎn)抗體水平較低外,其余場(chǎng)點(diǎn)抗體水平均達(dá) 80% 以上;5個(gè)非免疫場(chǎng)PRRSV存在不同程度的抗體陽(yáng)性檢出,J場(chǎng)點(diǎn)高達(dá) 97.69% ,其余場(chǎng)點(diǎn)在 13.33%~42.16% 不等;PRRSV病原陽(yáng)性僅在A場(chǎng)點(diǎn)檢出,其余場(chǎng)點(diǎn)未檢出。
2.3不同階段
不同階段豬檢測(cè)結(jié)果(表4)顯示,2023—2024年,后備公豬PRRSV免疫抗體水平保持在穩(wěn)定狀態(tài),種公豬、后備母豬和生產(chǎn)母豬PRRSV免疫抗體陽(yáng)性率均呈現(xiàn)下降趨勢(shì);各階段種豬PRRSV非免疫抗體水平均呈現(xiàn)不同程度上升趨勢(shì);生產(chǎn)母豬PRRSV病原陽(yáng)性率增加 1.02% ,后備公豬、種公豬和后備母豬陽(yáng)性檢出率由 1% 左右下降至0。
表2不同年度PRRSV抗體和病原陽(yáng)性結(jié)果

表3不同場(chǎng)點(diǎn)PRRSV抗體和病原陽(yáng)性分布

表4不同階段PRRSV抗體和病原陽(yáng)性分布

表5不同規(guī)模PRRSV抗體和病原陽(yáng)性分布

2.4不同規(guī)模
不同規(guī)模檢測(cè)結(jié)果(表5)顯示,2023—2024年,種豬存欄規(guī)模在500頭 ~1 000 頭的PRRSV免疫抗體陽(yáng)性率均為 100% ;種豬存欄規(guī)模在2000頭以上的PRRSV免疫抗體陽(yáng)性率由 89.01% 下降至 47% ;種豬存欄規(guī)模在500頭以下的PRRSV非免疫抗體陽(yáng)性率由 10.43% 上升至31.48% ;種豬存欄規(guī)模在1 001~2 000 頭的PRRSV非免疫抗體陽(yáng)性率從 55.45% 上升至 72.81% ;種豬存欄規(guī)模在1000頭以下無病原學(xué)陽(yáng)性檢出,存欄規(guī)模在1000頭以上病原陽(yáng)性率約為 1% 。
3分析與討論
本試驗(yàn)分別對(duì)2023—2024年10個(gè)場(chǎng)點(diǎn)采集的樣品進(jìn)行了豬藍(lán)耳病的檢測(cè),結(jié)果顯示,在PRRSV免疫豬群中,免疫抗體平均陽(yáng)性率達(dá) 70% 以上,各個(gè)場(chǎng)點(diǎn)(A和B除外)、各個(gè)階段、不同規(guī)模抗體陽(yáng)性率均高于 80% ,表明該次采集的種豬群總體免疫抗體效果較好;2024年較2023年抗體水平大幅度下降,主要體現(xiàn)在A和B場(chǎng)點(diǎn)抗體水平直線式下降,B場(chǎng)點(diǎn)兩年免疫抗體水平均不高,A場(chǎng)點(diǎn)由免疫抗體陽(yáng)性率 92.5% 下降至22.5% ,存在部分點(diǎn)位免疫抗體保護(hù)薄弱情況,可能與兩場(chǎng)飼養(yǎng)管理水平和免疫程序有關(guān),表明兩個(gè)場(chǎng)點(diǎn)需要加強(qiáng)飼養(yǎng)管理,實(shí)行豬藍(lán)耳病動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè),根據(jù)監(jiān)測(cè)結(jié)果結(jié)合場(chǎng)內(nèi)情況綜合分析,制定最佳免疫接種計(jì)劃,合理調(diào)整免疫程序;從不同規(guī)模種群來看,種豬存欄在500~1000頭的場(chǎng)免疫抗體陽(yáng)性率高于2000頭以上的種豬場(chǎng),這與種豬規(guī)模化程度成負(fù)相關(guān),規(guī)模越小越易于飼養(yǎng)管理和疫病防控。
在PRRSV非免疫的豬群中,檢測(cè)出非免疫抗體平均陽(yáng)性率不同年度分別為 31.48% 和 55.15% ,5個(gè)非免疫豬場(chǎng)和不同階段豬均有不同程度的抗體陽(yáng)性檢出,其中兩個(gè)豬場(chǎng)2023年非免疫抗體率達(dá) 50% 以上,2024年個(gè)別場(chǎng)點(diǎn)高達(dá) 90% 以上,表明在豬群中均存在較大的野毒感染情況,可能與兩場(chǎng)種源管理不當(dāng)、生物安全制度落實(shí)和細(xì)節(jié)把控不嚴(yán)有關(guān);2023—2024年,除B場(chǎng)點(diǎn)外,其余場(chǎng)點(diǎn)非免疫抗體結(jié)果均呈現(xiàn)不同程度的上升,可能與檢測(cè)樣品數(shù)量增加有關(guān),本次調(diào)查中J場(chǎng)點(diǎn)非免疫抗體陽(yáng)性率從2023年的 66.67% 上升至2024年的 97.69% ,且該場(chǎng)點(diǎn)在2023年度檢測(cè)出病原學(xué)陽(yáng)性,可能該場(chǎng)點(diǎn)生物安全防控體系存在漏洞,導(dǎo)致豬感染豬藍(lán)耳病后持續(xù)在場(chǎng)內(nèi)擴(kuò)散蔓延;從不同規(guī)模來看,種豬存欄在1001~2000頭規(guī)模的場(chǎng)感染抗體陽(yáng)性率顯著高于規(guī)模在500頭以下的種豬場(chǎng),這可能與規(guī)模化程度成正相關(guān),規(guī)模集約化程度越高,飼養(yǎng)密度越大,疫病防控難度越大。
從病原陽(yáng)性率看,豬群中PRRSV病原陽(yáng)性率不同年度分別為 0.8% 和 10.77% ,有三家養(yǎng)殖場(chǎng)檢測(cè)出病原陽(yáng)性,其中兩個(gè)為PRRSV免疫場(chǎng),但免疫抗體陽(yáng)性率僅為 22.5% 和0,這說明兩個(gè)場(chǎng)點(diǎn)免疫屏障薄弱,不能保護(hù)豬只抵抗PRRSV的侵襲,這提示該場(chǎng)應(yīng)加強(qiáng)監(jiān)測(cè),選擇合適的疫苗,優(yōu)化免疫程序,同時(shí)注重豬場(chǎng)生物安全管理5;另一個(gè)為PRRSV非免疫場(chǎng),該場(chǎng)為本次檢測(cè)的5個(gè)非免疫場(chǎng)中野毒抗體陽(yáng)性率最高的場(chǎng),建議該場(chǎng)可重點(diǎn)加強(qiáng)飼養(yǎng)管理,采取疫苗免疫和種源凈化相結(jié)合的綜合防控措施;有4個(gè)非免疫養(yǎng)殖場(chǎng),野毒抗體為陽(yáng)性,但病原檢測(cè)為陰性,可能與樣品采集和檢出率有一定的關(guān)系,也可能兩年單一結(jié)果不能很好地反映出野毒抗體陽(yáng)性與病原陽(yáng)性存在的聯(lián)系,需要進(jìn)行長(zhǎng)期系統(tǒng)地監(jiān)測(cè);從生長(zhǎng)階段來看,各個(gè)階段種豬群均有PRRSV病原檢出,表明豬藍(lán)耳病的防控是一項(xiàng)系統(tǒng)性工程,每個(gè)階段的豬群健康都不能忽視;從不同規(guī)模豬群來看,病原學(xué)陽(yáng)性在種豬存欄1000頭以上的場(chǎng)點(diǎn)檢出,表明規(guī)模集約化程度越高,疫病傳播風(fēng)險(xiǎn)越高。
結(jié)語(yǔ)
綜上所述,四川省內(nèi)江市種豬群PRRSV整體免疫抗體水平較高,具有一定的保護(hù)水平,但個(gè)別場(chǎng)免疫抗體水平低下,存在點(diǎn)狀疫病發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)。不同非免疫場(chǎng)點(diǎn)存在不同程度的病毒感染現(xiàn)象,且有上升趨勢(shì)的風(fēng)險(xiǎn)。提示應(yīng)健全生物安全管控體系,加強(qiáng)飼養(yǎng)管理,強(qiáng)化場(chǎng)群監(jiān)測(cè),根據(jù)不同場(chǎng)群實(shí)際情況制定個(gè)性化防控方案,分類分層有序推進(jìn)該病的凈化。
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收稿日期:2025-04-15
作者簡(jiǎn)介:雷明霞(1988—),女,漢族,碩士,高級(jí)獸醫(yī)師。研究方向:動(dòng)物疫病監(jiān)測(cè)與防控。*通訊作者:徐凱(1984—),男,漢族,碩士,正高級(jí)獸醫(yī)師。研究方向:動(dòng)物疫病監(jiān)測(cè)診斷與防控。