環泊酚在孕鼠與胎鼠體內的藥動學特征研究

中圖分類號 R97；R969. 文獻標志碼 A 文章編號 00-0408（2025）-348-04

DOI 0.6039/j.issn.00-0408.2025..0

ABSTRACT OBJECTIVE To study pharmacokinetic characteristics ciprol in pregnant and fetal rats，and provide reference for application ciprol in cesarean section. ETHODS Eight pregnant rats were selected. A single dose 2.4 mg/kg ciprol was administered via tail vein. One fetal rat was selected at 2，4，8，12，16，25，35，45，60，and 90 minutes respectively after ciprol administration. Subsequently，whole blood samples were collected simultaneously from both pregnant rats and fetal rats. HPLC-S/S method was used to determine concentration ciprol in bodies pregnant and fetal rats. The ratios fetal-to-maternal blood concentrations（ ratios）at each time point were calculated，and F/Ω -time curves were plotted. Subsequently， non-compartmental pharmacokinetic parameters were computed using DAS 2.0 stware. RESULTS Compared with pregnant rats， c_max ， AUC_0.90min and AUC_∞ ciprol in fetal rats were decreased significantly，while RT was increased significantly（ ?Plt;0.05? ）. The F/ curve ciprol initially increased and n decreased，and between 0.16- 0.84 ，reaching a maximum value 0.84 at 45 minutes. CONCLUSIONS Ciprol can penetrate placental barrier，and re are significant differences in pharmacokinetic parameters between pregnant and fetal rats. oreover， exposure level ciprol in fetal rats is much lower than that in pregnant rats. Therefore，ciprol shows promise as an ideal anestic agent for cesarean section delivery.

KEYWORDS ciprol；pregnant rats；fetal rats；placental barrier；pharmacokinetics；blood concentration

胎盤能維持胎兒生命，對胎兒的生長發育以及母體和胎兒之間的物質交換至關重要[1]。胎盤屏障能有效防止大部分有害物質進入胎兒循環，在臨床常用藥物中，極性大、分子量大、蛋白結合率高的藥物的胎盤屏障透過率較低，而部分小分子脂溶性藥物進入母體循環后可透過胎盤屏障進入胎兒循環，并對胎兒產生影響[2]。在靜脈麻醉過程中，除神經肌肉阻滯藥物因其高解離度和低脂溶性難以透過胎盤屏障外，幾乎所有鎮痛、鎮靜藥都能迅速透過胎盤[3]，因此，臨床上剖宮產麻醉藥物的選擇必須考慮鎮痛、鎮靜藥對胎兒的影響。

丙泊酚（propol）為剖宮產全麻的常用藥物，其常規劑量下雖不會引起明顯的新生兒呼吸抑制[4]，但是會引起新生兒Apgar評分降低[5]。環泊酚（ciprol）是我國自主研發的靜脈麻醉藥物，其在丙泊酚結構的基礎上添加了環丙基，立體選擇性和受體親和力更強，分子量更大，蛋白結合率為 99%^[6] 。但是，目前環泊酚的胎盤屏障透過情況尚不明確。基于此，本研究擬采用高效液相色譜-串聯質譜（HPLC-S/S）法，探究環泊酚在孕鼠與胎鼠體內的藥動學特征，以期為環泊酚在剖宮產中的應用提供理論依據。

1 材料

1.1 主要儀器

LC-20AD 型高效液相色譜儀購自日本Shimadzu 公司； API4000⁺ 型三重四極桿質譜儀購自美國AB Sciex公司；CAP225D 型電子天平購自德國Sartorius 公司；微量注射泵購自美國Harvard公司。

1.2 主要藥品與試劑

環泊酚對照品（批號11220202，純度 ?99.9% ）、環泊酚注射液（國藥準字H20220017，規格 20mL：50mg ）均購自遼寧海思科制藥有限公司；丙泊酚對照品（批號100806-202104，純度 99.9% ，內標）購自中國食品藥品檢定研究院；依托咪酯乳狀注射液（國藥準字H20020511，規格 10mL：20mg ）購自江蘇恩華藥業股份有限公司；甲醇、乙腈均為色譜純，水為超純水。

1.3 實驗動物

本研究所用動物為SPF 級SD 雌性孕鼠（受孕 18d 的大鼠），體重 450±50）g ，購自遼寧長生生物技術股份有限公司，動物生產許可證號為SCXK（遼）2020-0001 。將孕鼠置于溫度 25^°C 、相對濕度 50%～70% 的環境下適應性喂養。本研究經河北醫科大學第二醫院倫理委員會批準（倫理批號為2024-AE288）。

2 方法與結果

2.1 色譜與質譜條件

2.1.1 色譜條件

以 Symmetry C₁₈ 柱（ （150.0mm×4.6mm，3.5μm） ）為色譜柱；流動相A 為 5mmol/L 乙酸銨溶液（以氨水調節pH 值至7.8），流動相B 為乙腈，梯度洗脫 （0～1min ，75%B?99%B ； 1～5.5min ， 99% B； 5.5～6.5min ， 99%B? 75%B;6.5～7.0min，75%B）; 流速為 0.7mL/min ，柱溫為 40^°C ，進樣量為 10μL 。

2.1.2 質譜條件

采用電噴霧離子源在負離子模式進行多反應監測掃描，離子源電壓為 -4500V ，離子源溫度為 500^°C 。環泊酚和丙泊酚的定量離子對分別為 m/z203.2?175.1 和 m/z176.7?161.1 。

2.2 溶液配制

分別精密稱取環泊酚及丙泊酚對照品適量，用甲醇配制成質量濃度均為 1mg/mL 的儲備液。取適量環泊酚儲備液，用甲醇稀釋成質量濃度分別為 400，1000. 、2000，4000，10000，20000，40000，6000000ng/mL 的系列工作液以及定量下限和低、中、高質量濃度（400、1 000、10000、48000ng/mL ）的質控工作液。取適量丙泊酚儲備液，用甲醇稀釋成質量濃度為 15μg/mL 的內標工作液。

2.3 血漿樣本處理

取血漿樣品 100μL ，加入內標工作液 10μL 渦旋混勻；加入乙腈 300μL 沉淀蛋白，渦旋 3min ，再以 10 900r/min 離心 15min ，取上清液進樣分析。

2.4 方法學考察

2.4.1 專屬性試驗

取空白血漿、空白血漿 + 環泊酚工作液（10 000ng/mL ）、給藥后血漿樣品（給藥后 8min 血漿樣品），按“2.3”項下方法處理后進樣分析。結果（圖1）顯示，環泊酚及丙泊酚的保留時間分別為 4.48AA.4.31min ，血漿中內源性物質對環泊酚及丙泊酚的測定無干擾，表明本方法專屬性良好。

圖1 血漿中環泊酚及丙泊酚的HPLC-S/S色譜圖

2.4.2 標準曲線與定量下限考察

取“2.2”項下系列環泊酚工作液 5μL ，均加入空白血漿 95μL 配制成環泊酚質量濃度分別為20、50、100、200，500，1000，2000，3000ng/mL 的血漿樣品，按照“2.3”項下方法處理后進樣分析。以環泊酚質量濃度為橫坐標 （x） 、環泊酚和丙泊酚峰面積比值為縱坐標 （y） ，采用加權最小二乘法進行回歸分析，得環泊酚的回歸方程為 y=0.001 98x+0.031 3（ 0（ R²=0.9997 ），線性范圍為 ，定量下限為 20ng/mL 。

2.4.3 精密度與準確度試驗

取系列環泊酚質控工作液 5μL ，以空白血漿 95μL 配制定量下限和低、中、高質量濃度（20、50、500、2 400ng/mL ）的質控樣品，每個濃度5 份，于同一天內按“2.3”項下方法處理后進樣分析，計算日內精密度；連續3 d處理樣品并測定，計算日間精密度。以實測質量濃度與理論質量濃度的相對誤差（RE）考察準確度。結果（表1）顯示，環泊酚日內和日間精密度試驗的RSD 均小于10% ，且RE均不超過 ±3.60% ，符合相關要求。

表1 大鼠血漿中環泊酚的精密度與準確度試驗結果

2.4.4 提取回收率與基質效應考察

按“2.4.3”項下方法制備低、中、高（50、500、2 400ng/mL ）質量濃度的質控樣品，每個樣本5 份，按“2.3”項下方法處理后測得峰面積 A ；空白血漿沉淀蛋白后取上清液，分別加入不同質量濃度的質控工作液及內標工作液，然后進樣分析測得峰面積 B ；將生物基質替換為甲醇，配制低、中、高質量濃度的樣品溶液進樣測得峰面積C 。按公式[提取回收率 （%）=A/B×100% ，基質效應（%）=B/C×100%] 計算提取回收率和基質效應。結果（表2）顯示，環泊酚提取回收率和基質效應的RSD均在10% 以內。

表2 大鼠血漿中環泊酚的提取回收率和基質效應考察結果（ n=5 ）

2.4.5 穩定性試驗

按“2.4.3”項下方法制備低、中、高（50、500、2 400ng/mL ）質量濃度的質控樣品，每個濃度5 份，分別在-40^°C 冰箱冷凍7 d、反復凍融（ -40^°C? ～室溫）3 次、4°C 條件下放置6 h，考察不同條件下樣品的穩定性。結果顯示，在上述條件下，環泊酚實測質量濃度的RSD 均在 10% 以內，樣品穩定性良好。

2.5 孕鼠與胎鼠體內環泊酚的藥動學研究

2.5.1 給藥與樣品收集

取孕鼠8只，實驗前禁食 8h 、禁水 2h 。尾靜脈單次給予 2.4mg/kg 環泊酚（劑量參考文獻[6]設置），隨即靜脈輸注 90μg/（μg?min） ）依托咪酯（劑量參考文獻[7]設置）維持麻醉狀態。給藥期間孕鼠自主呼吸，體溫正常。將孕鼠仰臥位固定，腹部正中線切口，暴露兩側子宮角，從一側子宮角開始，剪開子宮壁，分別于環泊酚給藥后2，4，8，12，16，25，35，45，60，90min 取出1 只胎鼠（每只孕鼠共有 10～12 只胎鼠），術中用生理鹽水浸潤紗布覆蓋于切口，保持腹部濕潤。胎鼠取出后，迅速轉移至操作臺，剝除表面胎膜，剪斷臍帶，用濾紙擦干表面羊水及血水后剪開頸部血管，采集全血。按上述相同的時間點在采集胎鼠血樣的同時采集孕鼠眼內眥靜脈全血，置于含肝素的采血管中，離心后取上清液，然后按“2.3”項下方法處理后進樣分析。

2.5.2 數據處理及分析

采用 GraphPad Prism 9.5 軟件繪制孕鼠與胎鼠體內環泊酚的血藥濃度-時間曲線，然后計算不同時間點胎鼠血藥濃度（記為 F ）與孕鼠血藥濃度（記為 ）的比值，并繪制F/時間曲線，結果見圖2；采用DAS 2.0軟件計算非房室模型藥動學參數，結果見表3。采用SPSS 21.0軟件對藥動學參數進行統計學分析，采用獨立樣本 t 檢驗進行組間比較[峰濃度（ 和藥-時曲線下面積（AUC）經對數轉換后按上述方式進行比較]。檢驗水準α=0.05 。

由圖2可知，孕鼠體內環泊酚的血藥濃度迅速下降；胎鼠體內環泊酚血藥濃度在 10min 左右達峰，整體呈先上升后下降的趨勢；環泊酚在胎鼠體內的血藥濃度始終低于孕鼠；環泊酚的 F/ 時間曲線呈先上升后下降的趨勢， F/ 值在 0.16～0.84 之間，且在 45min 時達到最大值（0.84）。由表3 可知，與孕鼠相比，胎鼠體內環泊酚的c_max，AUC_{0-90min，AUC0-α} 均顯著降低，平均滯留時間（RT）顯著升高（ ?Plt;0.05 ）。

圖2 孕鼠與胎鼠的血藥濃度-時間曲線和F/ 時間曲線 n=8. ）

表3 環泊酚在孕鼠與胎鼠的藥動學參數比較 ，n=8. ）

a：與孕鼠比較， Plt;0.05， 。

3 討論

本研究選用孕18 d 的SD 大鼠進行實驗，是由于此類大鼠處于孕晚期，胎盤及胎鼠發育完全，經不同采血點取血后，可以動態觀察不同時間點環泊酚在孕鼠與胎鼠體內的分布關系。本研究結果發現，環泊酚在孕鼠體內分布與起效迅速；環泊酚在胎鼠體內的藥動學行為與孕鼠不同，其在胎鼠體內的血藥濃度呈先上升后下降的趨勢，約在 10min 達峰，隨后緩慢下降，提示環泊酚透過胎盤的速度和從胎鼠體內消除的速度均較慢。與孕鼠相比，胎鼠體內的環泊酚血藥濃度較低，其 c_max 僅為孕鼠c_max 的1/4，說明環泊酚的胎盤透過率低，胎鼠體內血藥濃度遠低于孕鼠。本研究中環泊酚在胎鼠與孕鼠中的AUC比值約為0.45，低于既往研究中丙泊酚在胎鼠與孕鼠中的AUC比值[8]，說明環泊酚透過胎盤屏障到達胎兒體內的比例低于丙泊酚。

目前，通常采用胎兒娩出時的F/值來反映藥物的胎盤轉運情況[]，雖然單一時間點取血能反映藥物在母體與胎兒體內的瞬時分配水平，但是無法反映麻醉過程中藥物在母體與胎兒體內不斷變化的分布與轉運情況[10]。因此，檢測麻醉過程多個時間點的血藥濃度并計算F/ 值更能反映藥物在母體與胎兒體內的分布與轉運情況。本研究結果顯示，基于環泊酚在孕鼠體內先快速消除后緩慢消除和在胎鼠體內緩慢消除的特點， F/ 時間曲線呈先上升后緩慢下降的趨勢。呂卓辰等 研究發現，丙泊酚在妊娠大鼠體內的 F/ 值為 0.2～2.1 ，而本研究中環泊酚在孕鼠體內的F/ 值為 0.16～0.84 ，說明與丙泊酚相比，環泊酚在孕鼠體內的胎盤透過率更低，且環泊酚在胎鼠體內的血藥濃度始終低于孕鼠體內的血藥濃度。

綜上所述，環泊酚在孕鼠與胎鼠體內的藥動學參數存在較大差異，其雖能透過胎盤屏障，但是在胎鼠體內的暴露量遠低于孕鼠，有望成為剖宮產理想的麻醉用藥。但本研究仍存在一些不足之處：（1）雖然大鼠和人同屬血絨毛膜型胎盤[11―12]，但具體結構存在差異，環泊酚在人體胎盤中的轉運情況還需要進一步探究；（2）麻醉常聯用多種鎮痛或鎮靜藥物，其他藥物是否會影響環泊酚透過胎盤也還有待進一步探究。

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（編輯：唐曉蓮）