不同方法檢測特殊醫(yī)學用途嬰兒配方食品中硒含量

郭美娟，張 斌，張春林，李俊娣，張?zhí)m天，史國華

（河北省食品檢驗研究院，河北省食品安全重點實驗室，河北 石家莊 050200）

硒是人體必需的微量元素之一，它是多種蛋白質和酶的必要組成部分，具有抗氧化、抗炎和調節(jié)甲狀腺激素等功能[1]。研究表明，硒對新生兒，尤其是早產兒的健康和發(fā)育有至關重要的作用[2]。嬰兒食用含硒量低的乳粉可能會引起硒缺乏，對嬰兒健康造成影響，近年來，嬰幼兒配方乳粉中有強化硒的傾向[3-4]，因此準確測定嬰幼兒配方乳粉、特殊醫(yī)學用途嬰兒配方食品中硒的含量非常重要。GB 25596—2010《食品安全國家標準 特殊醫(yī)學用途嬰兒配方食品通則》[5]中規(guī)定，特殊醫(yī)學用途嬰兒配方食品中硒的限量為0.48～1.90 μg/100 kJ。

特殊醫(yī)學用途嬰兒配方食品與嬰幼兒配方食品的基質區(qū)別較大[6-8]。GB 5009.93—2017《食品安全國家標準 食品中硒的測定》[9]可用于食品包括嬰幼兒配方乳粉中硒的檢測，并沒有針對特殊醫(yī)學用途嬰兒配方食品的檢測方法，因此在特殊醫(yī)學用途嬰兒配方食品中的適用性有待研究。國內外關于硒檢測方法的研究很多，目前文獻已報道的檢測方法有原子吸收光譜法[10]、原子熒光光譜法[11]、熒光法[12]、電感耦合等離子體-質譜法[13-14]及電感耦合等離子體-發(fā)射光譜法[15]等。其中，原子熒光光譜法和電感耦合等離子體-質譜法為檢測乳粉中硒最常用的測定方法。本研究聯合7 家實驗室分別采用以上2 種常見方法對不同種類和配方特殊醫(yī)學用途嬰兒配方食品中的硒含量進行測定，研究硒檢驗方法的適用性，以推動特殊醫(yī)學用途嬰兒配方食品檢測方法的完善[16]。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

選用市售嬰兒配方乳粉參考樣品和不同品牌、不同配方的特殊醫(yī)學用途嬰兒配方食品，分別為乳蛋白部分水解配方乳粉3 種、早產/低出生體質量配方乳粉2 種、無乳糖配方乳粉1 種。特殊醫(yī)學用途嬰兒配方食品的樣品編號及具體配方信息如表1所示。共7 個實驗室，每個實驗室6 個樣品，共42 個樣品。

表1 樣品信息Table 1 Information about samples tested in this study

1.2 方法

樣品前處理及硒含量測定分別采用GB 5009.93—2017第一法（氫化物原子熒光光譜法）和GB 5009.93—2017第三法（電感耦合等離子體-質譜法）。

1.3 數據處理

使用Microsoft Office Excel 2007軟件和SPSS軟件進行數據處理。

2 結果與分析

2.1 嬰兒配方乳粉參考樣品硒含量測定結果

采用嬰兒配方乳粉參考樣品作為參考，參考值由具有ISO 17043資質的實驗室基于EN14122、EN14152、EN14164和EN15652的內部檢測方法，依據能力驗證統(tǒng)計方法計算得出。

由表2可知，7 家實驗室采用GB 5009.93—2017第一法測得的硒含量普遍偏低，采用GB 5009.93—2017第三法測得的硒含量均與參考值相近，2 組數據的標準偏差比相同。

表2 嬰兒配方乳粉參考樣品硒含量測定結果Table 2 Results of determination of selenium content in reference samples of infant formula

Z值=（測試結果－中位值）/測試結果的標準四分位數間距，|Z|≤2為滿意結果，2＜|Z|＜3為可疑或有問題結果，|Z|≥3為不滿意結果。Z值用來衡量測試結果在一組數據中相對于中位值的偏離程度，|Z|越大，表明該結果的偏離程度越高[17]。

由表3可知，除實驗室2采用GB 5009.93—2017第一法測得的Z值為－2.0以外，其余|Z|＜2，證明檢測結果滿意。通過嬰兒配方乳粉參考樣品的檢測結果，驗證了2 種檢測方法在嬰兒配方乳粉中的適用性，同時驗證了參與的7 家實驗室的檢驗能力能夠滿足本研究的要求。

表3 嬰兒配方乳粉參考樣品Z值測定結果Table 3 Z values for selenium content in infant formula

2.2 采用GB 5009.93—2017第一法檢測特殊醫(yī)學用途嬰兒配方食品中硒含量測定結果

根據GB/T 27404—2008《實驗室質量控制規(guī)范 食品理化檢驗》[18]中對精密度的要求，被測組分含量為1 mg/kg時，實驗室內變異系數為11%。由表4可知，實驗室間變異系數為8.5%～14.2%，說明實驗室間結果存在一定差異性。

表4 GB 5009.93—2017第一法硒含量測定結果Table 4 Results of determination of selenium content in real samples by hydride generation atomic fluorescence spectrometry

ZB值是指實驗室間測定結果的Z值，用來衡量實驗室間測試結果的系統(tǒng)誤差。由表5可知，除實驗室3的早產/低出生體質量配方樣品D檢測結果ZB值為3.6、實驗室7的乳蛋白部分水解配方樣品A和B的檢測結果ZB值為－2.1和－2.2外，其他檢測結果|ZB|≤2，精密度符合檢測要求。

表5 GB 5009.93—2017第一法硒含量測定結果ZB值Table 5 ZB value for selenium content in real samples determined by hydride generation atomic fluorescence spectrometry

2.3 采用GB 5009.93—2017第三法檢測特殊醫(yī)學用途嬰兒配方食品中硒含量測定結果

根據GB/T 27404—2008規(guī)定，實驗室內變異系數應小于11%。由表6可知，只有無乳糖配方樣品C和乳蛋白部分水解配方樣品F的變異系數低于11%，其他樣品測定結果的實驗室間變異系數均大于11%，說明各實驗室間檢測結果存在差異。

表6 GB 5009.93—2017第三法硒含量測定結果Table 6 Results of determination of selenium content in real samples by inductively coupled plasma mass spectrometry

由表7可知，除實驗室3的早產/低出生體質量配方樣品D和實驗室7的乳蛋白部分水解配方樣品E的測定結果|ZB|大于2，其余所有7 個實驗室檢測結果的|ZB|≤2，說明檢測結果精密度符合實驗要求。

表7 GB 5009.93—2017第三法硒含量測定結果ZB值Table 7 ZB value for selenium content in real samples determined by inductively coupled plasma mass spectrometry

2.4 加標回收率實驗結果

分別對乳蛋白部分水解配方樣品A、早產/低出生體質量配方樣品B和無乳糖配方樣品C進行加標回收率實驗，標準物質添加量與樣品含量基本一致，驗證2 種方法的測定準確度。

GB/T 27404—2008規(guī)定，被測組分含量在1～100 mg/kg時，實驗室加標回收率應為90%～110%。由表8可知，采用GB 5009.93—2017第一法的硒加標回收率測定結果，乳蛋白部分水解配方樣品A，有4 家實驗室超出90%～110%的范圍，早產/低出生體質量配方樣品B有2 家實驗室為85%，其余均符合要求，無乳糖配方樣品C僅有實驗室2加標回收率為75%，較低。采用GB 5009.93—2017第三法的硒加標回收率測定結果，乳蛋白部分水解配方樣品A測定結果實驗室1、2均高于110%，早產/低出生體質量配方樣品B實驗室1、2、6均高于110%，無乳糖配方樣品C同樣是實驗室1、2高于110%。從實驗室角度看，實驗室1的檢測結果加標回收率均高于100%，4 個樣品的加標回收率高于110%，可能與實驗室檢測過程中存在系統(tǒng)誤差有關。實驗室2采用GB 5009.93—2017第一法的加標回收率均低于90%，第二法的加標回收率均高于110%，也可能是由于實驗室檢測過程中存在系統(tǒng)誤差。特殊醫(yī)學用途嬰兒配方食品加標回收率達不到國標要求的原因主要是由于特殊醫(yī)學用途嬰兒配方食品基質特殊且復雜，與普通嬰兒配方乳粉基質也有著很大區(qū)別，且各配方之間差異性較大。

表8 各實驗室加標回收率測定結果Table 8 Spiked recoveries of selenium obtained by different laboratories

3 結 論

除了本研究中的乳蛋白部分水解配方、早產/低出生體質量配方和無乳糖配方，常見的特殊醫(yī)學用途嬰兒配方食品還包括無乳糖配方或低乳糖配方、乳蛋白深度水解配方、氨基酸配方、嬰兒營養(yǎng)補充劑和氨基酸代謝障礙配方[19]。無論從配方還是基質來看，特殊醫(yī)學用途嬰兒配方食品是一類既特殊又復雜的食品。每類特殊醫(yī)學用途嬰兒配方食品均有其自身的配方特點[20-21]。本研究選取的3 種配方是特殊醫(yī)學用途嬰兒配方食品中較常見且較有代表性的配方。本研究結果表明，GB 5009.93—2017第一法和GB 5009.93—2017第三法均適用于嬰兒配方乳粉中硒含量測定，在特殊醫(yī)學用途嬰兒配方食品各種配方中的適用性有待進一步研究。