楊奎 王惠林 孫思瓊

摘? ? 要：瓜類細(xì)菌性果斑病（Bacterial fruit blotch，BFB）是一種檢疫性病害，其嚴(yán)重危害西瓜產(chǎn)業(yè)的健康發(fā)展。采用BF配方肥（含氮、鋅、錳、鉀）加4種殺菌劑硫酸銅、醋酸銅、可殺得叁千、過氧乙酸，配制成不同的包衣成分，對帶BFB西瓜種子進(jìn)行處理，探究了不同包衣成分對西瓜帶BFB種子在幼苗期的防治效果。結(jié)果表明，在發(fā)病初期，BF+2 g/L硫酸銅處理帶BFB種子在幼苗期的防治效果最好，防治效果為96.03%;在發(fā)病末期，BF+1 g/L醋酸銅處理帶BFB種子在幼苗期的防治效果最好，防治效果為87.18%。從幼苗生長指標(biāo)來看，BF+2 g/L硫酸銅處理幼苗莖粗、第一真葉長×寬顯著高于對照，BF+5 g/L硫酸銅處理幼苗株高最高;第一真葉葉綠素含量各處理組之間沒有顯著性差異。

關(guān)鍵詞：包衣成分;西瓜;細(xì)菌性果斑病;幼苗;防治效果

細(xì)菌性果斑病（BFB）是一種嚴(yán)重為害葫蘆科植物的世界性病害[1-2]。BFB在持續(xù)濕度大的情況下，菌膿從葉片流落在果實上，致使果實形成病斑，失去經(jīng)濟(jì)價值，給瓜農(nóng)帶來嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失，被瓜農(nóng)稱為西瓜、甜瓜的“癌癥”[3]。BFB是一種典型的種傳性病害，如果不加強種子檢測和滅菌處理，病原菌會隨著種子大面積傳播，對整個西瓜、甜瓜種植行業(yè)產(chǎn)生巨大危害。

目前，針對BFB的種子處理方法主要有物理[4]、化學(xué)[5]、生物[6]等。化學(xué)方法主要是采用殺菌劑來消滅病原菌，包括銅制劑、抗生素等。前人研究發(fā)現(xiàn)，銅制劑殺菌劑是一種保護(hù)型殺菌劑，具有殺菌效率高、藥效期長、病菌難以產(chǎn)生抗藥性及經(jīng)濟(jì)環(huán)保等優(yōu)點[7]。劉克貞等研究發(fā)現(xiàn)，過氧乙酸對BFB有一定防效。對于細(xì)菌性果斑病的防治是當(dāng)下研究的熱點，但大多采用單一藥劑處理，針對BFB的復(fù)合藥劑處理研究較少[8]。

前人[9-11]研究表明，一定濃度氮、鋅、錳、鉀肥可以促進(jìn)植物幼苗的生長，檸檬酸可以減輕重金屬鹽的毒害[12]。本試驗以BF配方肥（氮、鋅、錳、鉀）為基礎(chǔ)，加入4種殺菌劑，分別為硫酸銅（CuSO4）、醋酸銅（（CH3COOH）2Cu）、可殺得叁千、過氧乙酸（CH3COOOH），配制成不同的西瓜種子包衣成分，從中篩選出能夠?qū)ξ鞴螧FB產(chǎn)生防治效果的包衣成分，為西瓜BFB的防治提供參考。

1? ?材料與方法

1.1? ?材料

1.1.1? ?供試種子

供試西瓜品種為“西域四號”，由新疆西域種業(yè)有限公司提供，于2019年生產(chǎn)。供試西瓜細(xì)菌性果斑病病原菌由新疆農(nóng)業(yè)大學(xué)林學(xué)與園藝學(xué)院植物生理學(xué)實驗室提供。

1.1.2? ?供試藥劑

供試藥劑有BF配方肥（含氮、鋅、錳、鉀，由新疆農(nóng)業(yè)大學(xué)林學(xué)與園藝學(xué)院園藝系提供）、KH2PO4（天津市光復(fù)科技發(fā)展有限公司生產(chǎn)，分析純）、檸檬酸（天津市光復(fù)科技發(fā)展有限公司生產(chǎn)，分析純）、（NH4）2SO4（天津市致遠(yuǎn)化學(xué)試劑有限公司生產(chǎn)，分析純）、ZnSO4（天津市致遠(yuǎn)化學(xué)試劑有限公司生產(chǎn)，分析純）、MnSO4（天津市北聯(lián)精細(xì)化學(xué)品開發(fā)有限公司生產(chǎn)，分析純）、CuSO4（天津市致遠(yuǎn)化學(xué)試劑有限公司生產(chǎn)，分析純）、醋酸銅（天津市福晨化學(xué)試劑廠生產(chǎn)，分析純）、46%可殺得叁千（美國杜邦公司生產(chǎn)）、CH3COOOH（天津市致遠(yuǎn)化學(xué)試劑有限公司生產(chǎn)，濃度≥15%）。

1.2? ?試驗方法

1.2.1? ?試驗設(shè)計

本試驗以BF配方肥為基礎(chǔ)，加入CuSO4、（CH3COOH）2Cu、可殺得叁千、CH3COOOH，配制成種子包衣成分。其中CuSO4、（CH3COOH）2Cu、可殺得叁千、CH3COOOH各設(shè)置3個濃度梯度，共計12個處理組，以清水處理為CK。BF配方肥藥劑的濃度為4 g/L（NH4）2SO4 、0.75 g/L ZnSO4、0.5 g/L MnSO4、4.5 g/L KH2PO4、8 g/L檸檬酸。添加藥劑濃度及包衣成分編號見表1。

1.2.2? ?細(xì)菌性果斑病病原菌活化及培養(yǎng)

病原菌活化用KMB固體培養(yǎng)基（20 g胰蛋白胨、1.5 g K2HPO4、1.5 g MgSO4·7H2O、10 g甘油、10 g瓊脂粉，定容1 L，pH值7.2），病原菌活化后于28 ℃恒溫培養(yǎng)箱培養(yǎng)24 h，挑取單菌落接種NB（5 g/L胰蛋白胨、3 g/L牛肉粉，pH值7.2）于液體培養(yǎng)基中，在220 r/min、28 ℃條件下培養(yǎng)16～18 h。用分光光度計測定菌懸液的OD值，并用滅菌水將菌懸液濃度調(diào)到OD600為0.2～0.5備用[13]。

1.2.3? ?種子處理

試驗所用的種子先在75%酒精中浸種3 min消毒處理，用濾紙吸干水分后放在通風(fēng)處迅速陰干。將消毒過的種子于室溫下在提前準(zhǔn)備好的菌液中浸泡2 h，人工接菌，將接菌完成的種子用濾紙吸干水分，放在通風(fēng)處迅速陰干，裝袋備用。用配制好的包衣成分對種子進(jìn)行拌種處理。拌種時用小型噴霧器對藥劑進(jìn)行噴施，并不斷攪拌，直至種子表面均勻沾滿藥劑，每種包衣成分播50粒種子，設(shè)置3次重復(fù)，以人工接菌后清水拌種處理為對照組。

1.2.4? ?播種

育苗基質(zhì)采用楊樹鋸末和蛭石并以5∶1的比例混合配比，將基質(zhì)用100 ℃的水高溫滅菌，然后將基質(zhì)裝入規(guī)格為5×10個穴的育苗盤中，每穴播兩粒。播種前將基質(zhì)澆透水，播種后育苗盤上蓋塑料薄膜保持充分的溫度，每天澆水保持基質(zhì)的適宜濕度，在苗期噴施營養(yǎng)液，以供幼苗生長。

1.3? ?指標(biāo)測定

在出苗后第5天，真葉長出前，統(tǒng)計出苗率。在第一片真葉平展后，測量第一真葉長、寬，葉綠素含量，莖粗，株高。出苗率（%）=出苗數(shù)/播種數(shù)×100。

出苗后第14天幼苗開始發(fā)病，發(fā)病初期（出苗后16 d）、發(fā)病末期（出苗后25 d）分別進(jìn)行發(fā)病率及病情調(diào)查統(tǒng)計，共統(tǒng)計兩次。病情鑒定參照萬秀琴等人的方法。0級：植株無病斑;1級：葉片病斑較少，病斑面積占整棵植株面積的20%以下;3級：病斑較多，病斑面積占總面積的21%～40%;5級：病斑較多，病斑面積占總面積的41%～60%;7級：病斑很多或融合成大斑，病斑面積占總面積的61%～80%;9級：病斑很多，胚軸或莖部有病斑，病斑面積占總面積的 81%以上，植株死亡。病情指數(shù)=（∑發(fā)病級數(shù)×發(fā)病株數(shù)）/（最高病級×總株數(shù)）×100。防治效果（%）=（對照病情指數(shù)-處理病情指數(shù)）/對照病情指數(shù)×100[14-15]。

1.4? ?數(shù)據(jù)處理

試驗均采用Microsoft Excel進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計和制圖，數(shù)據(jù)處理時采用IBF SPSS Statistics 23軟件進(jìn)行單因素方差分析。

2? ?結(jié)果與分析

2.1? ?不同包衣成分處理帶BFB西瓜種子對出苗率的影響

不同包衣成分處理對西瓜帶菌種子出苗率的影響如圖1所示，所有處理組出苗率均大于85%，但BF+高濃度銅制劑對帶菌西瓜種子出苗表現(xiàn)出一定抑制作用，T3、T6、T9處理組出苗率均低于T1、T4、T7。BF+高濃度硫酸銅對出苗的影響最大，T3處理組出苗率為86.67%，顯著低于CK;BF+過氧乙酸對帶菌種子的出苗影響最小，與對照無顯著性差異;T10出苗率最高，為98.00%。

2.2? ?不同包衣成分處理帶BFB西瓜種子對幼苗生長指標(biāo)的影響

不同包衣成分處理帶BFB西瓜種子對幼苗莖粗、第一真葉長×寬、株高的影響如表2所示。由表2可知，T1幼苗莖粗顯著高于CK;T1～T3處理組，隨著硫酸銅濃度的增高，幼苗莖粗逐漸減小;T8幼苗莖粗最小，其他處理組與CK之間沒有顯著性差異。T1、T2、T3、T5處理組第一真葉長×寬顯著高于CK，最大值為T1處理組，高于CK 57.03%;其他處理組與CK之間沒有顯著性差異。T3、T5、T8處理組株高顯著低于CK，T3處理組株高最低，其他處理組與CK無顯著性差異，株高最高處理組為T2。各處理組對葉綠素含量影響較小，且各處理組之間無顯著性差異，葉綠素含量最高為T4處理組。

2.3? ?不同包衣成分處理帶BFB西瓜種子對幼苗期發(fā)病率的影響

不同包衣成分處理對西瓜幼苗細(xì)菌性果斑病發(fā)病率的影響如圖2、圖3所示，BF+4種殺菌劑處理帶菌種子，均可降低BFB在幼苗期的發(fā)病率。在發(fā)病初期，CK發(fā)病率為19.72%，BF+硫酸銅處理帶菌種子，BFB在幼苗期的發(fā)病率最低，T1～T3發(fā)病率為1.4%～2.31%，均顯著低于CK;在發(fā)病末期，CK發(fā)病率為49.30%，BF+可殺得叁千處理帶菌種子，幼苗期BFB的發(fā)病率最低，T7～T9發(fā)病率為12.68%～20.04%，顯著低于CK。

2.4? ?不同包衣成分處理帶BFB西瓜種子對幼苗期病情指數(shù)的影響不同包衣成分處理帶菌種子后幼苗期BFB病情指數(shù)如圖4、圖5所示，在發(fā)病初期，CK病情指數(shù)為4.76，T1病情指數(shù)最低;處理組中，病情指數(shù)最高的為T7，其與T1呈顯著性差異。在發(fā)病末期，CK病情指數(shù)為17.71，T4病情指數(shù)最低，T12病情指數(shù)最高，其與T4呈顯著性差異。

2.5? ?不同包衣成分處理帶BFB西瓜種子對幼苗期防治效果的影響

不同包衣成分處理對西瓜細(xì)菌性果斑病的防治效果如圖6、圖7所示，BF+4種殺菌劑處理帶菌種子均可對BFB在幼苗期產(chǎn)生一定的防治效果。在發(fā)病初期，防治效果最好的為BF+硫酸銅處理，T1～T3防治效果為84.01%～96.03%;防治效果最差的為BF+可殺得叁千，T7～T9防治效果為74.16%～84.03%。防治效果最好的處理組是T1、T5，其防治效果顯著高于其他處理組。在發(fā)病末期，BF+醋酸銅對BFB的防治效果最好，T4～T6防治效果為71.22%～87.18%;防治效果最差的為BF+過氧乙酸處理，T10～T12防治效果為52.18%～64.22%。發(fā)病末期防治效果最好的處理組為T5，其防效為87.18%。

3? ?討論

國內(nèi)外對細(xì)菌性病害的防治主要集中在銅制劑、農(nóng)用抗生素類藥劑等方面。

銅制劑具有殺菌廣譜、藥效持續(xù)時間長、可以防治多種真菌和細(xì)菌性病害等特點，是防治細(xì)菌性病害最常見的藥物[16]。銅制劑在其他作物的細(xì)菌性病害防治中也有廣泛應(yīng)用，宋曉兵等研究發(fā)現(xiàn)，3%噻霉酮微乳劑和77%氫氧化銅水分散粒劑對柑橘潰瘍病菌有較強的抑制效果和較好的田間防治效果[17]。郭永斌等研究發(fā)現(xiàn)，倍量式波爾多液對蘋果樹腐爛病菌分生孢子萌發(fā)的抑制率最高，藥后20 d抑菌率仍達(dá)87.97%[18]。黃小威等研究發(fā)現(xiàn)，氫氧化銅等3種銅制劑對辣椒青枯病均有一定的防治效果[19]，本文與以上研究結(jié)果相似。

趙廷昌等研究發(fā)現(xiàn)，加瑞農(nóng)處理帶菌種子可以對BFB產(chǎn)生一定的防治效果[20]。王爽等通過室內(nèi)藥效測定發(fā)現(xiàn)，噻霉酮對BFB病原菌的抑菌效果最好，氧化銅和琥膠肥酸銅等銅制劑抑菌效果最差[21]，這與本試驗結(jié)果不同。

本試驗發(fā)現(xiàn)，在發(fā)病末期，BF+1 g/L醋酸銅對BFB的防治效果最好，可能是由于試驗方法與環(huán)境不同所造成的差異。

4? ?結(jié)論

本試驗研究發(fā)現(xiàn)，BF+4種殺菌劑均可對西瓜帶菌種子在幼苗期BFB產(chǎn)生一定的防治效果。在發(fā)病初期，T1處理組幼苗期BFB的發(fā)病率、病情指數(shù)最低，防治效果最好，達(dá)到96.03%;在發(fā)病末期，T7的發(fā)病率最低，T1的病情指數(shù)最低，T5處理組的防效最高，防治效果為87.18%。

從試驗中幼苗生長指標(biāo)來看，T1處理下的幼苗莖粗、第一真葉長×寬顯著高于對照，T2處理組幼苗株高最高，第一真葉葉綠素含量在各處理組之間沒有顯著性差異。

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