李瑞午 李翠紅 郭 瑩
(中國中醫研究院針灸所形態室,北京100700)
摘 要 應用HRP神經示蹤法對乳鼠胃經不同部位腧穴和相同部位不同經脈腧穴的節段性分布進行研究。結果:胃經與胃相關其不同部位的腧穴聯系的途徑可能有所不同。腹部腧穴與胃相關的聯系途徑主要在外周神經,頭面部和下肢腧穴與胃相關的聯系途徑可能在更高的神經系統。相同部位不同經脈的腧穴在脊髓的節段性分布大致相同又略有差異。同神經節段的不同經脈腧穴其功能有差異也有共性,腧穴的功能具有相對特異性。
主題詞 脊神經 穴位,胃經/神經支配 辣根過氧化物酶以往很多學者曾經對體表穴位的神經節段性分布進行了研究和報道[1,2],但主要是對單個穴位進行研究。有關胃經腧穴的研究主要是從足三里后根節的節段性分布進行[2~5],本項研究主要從(A)胃經不同部位的腧穴入手,觀察整個胃經的神經節段性分布;(B)觀察交感鏈上胃經腧穴的節段性分布的特點;(C)觀察胃經的神經節段性分布與其他相關經穴的節段性分布的異同點。
1 材料與方法1.1 實驗動物中國中醫研究院動物室提供的新出生3~4天大白鼠36只,體重25~30g,雌雄不拘。動物隨機分為兩組,胃經組23只:"足三里"穴區(包括"犢鼻"、"足三里"、"上巨虛"、"條口")7只,"梁門"穴區(包括"不容"、"承滿"、"梁門"、"關門"、"太乙"、"天樞")6只,"四白"穴區(包括"承泣"、"四白"、"巨")10只。非胃經組13只:"陽陵泉"穴區(包括"陽陵泉"、"陽交"、"外丘")7只,"胃俞"穴區(包括"脾俞"、"胃俞"、"三焦俞")6只。
1.2 藥物及注射方法辣根過氧化物酶(HRP)Pz=6.0為上海化學試劑公司產品,四甲基聯苯氨(TMB)、硝普鈉均為美國SIGMA公司產品,其他多聚甲醛、戊二醛、硫酸二氫鈉、硫酸氫二鈉、過氧化氫、鉻明礬、明膠等均為北京化學試劑公司產品。
取HRP的10%生理鹽水溶液10μl,應用微量注射器,根據比較解剖學的測量方法,按照穴區的范圍進行緩慢注射,注射深度為肌層。注射后動物存活72h。
1.3 灌流取材動物用1%戊巴比妥鈉過量麻醉后,經主動脈插管灌流,依次注入4%枸緣酸鈉少許,0.9%氯化鈉溶液10ml,1%多聚甲醛+1.25%戊二醛的磷酸鹽緩沖液50ml和10%的0.1M(pH7.4)的磷酸鹽緩沖液20ml,固定液灌流時間不少于20min,灌流后選取整個脊柱和腦干及周圍組織,分別放入20%的蔗糖0.1M(pH7.4)磷酸鹽緩沖液,貯存過夜。
連續整體冰凍切片40μm,切片裱于涂有鉻明礬明酸的玻片上,切片經蒸餾水沖洗后,經四甲基聯苯胺(TMB)顯色[6],中性紅復染,上行脫水后二甲苯透明,樹脂膠封固,光學顯微鏡下觀察。
2 觀察和結果標記細胞的確定:標記神經元的胞漿內充滿黑藍色的小圓形顆粒,其胞核區無標記物存在形成中空的圓形缺損,未被標記的細胞胞漿內有中性紅復染后可顯粉紅色顆粒。
(1)"足三里"穴區組(包括"犢鼻"、"足三里"、"上巨虛"、"條口"):在L5~S2的脊髓前角、L4~S2的后根節見到大量的標記細胞,交感鏈的神經節未見。
(2)"陽陵泉"穴區組(包括"陽陵泉"、"陽交"、"外丘"):同樣在L5~S2的脊髓前角、L4~S2的后根節見到大量的標記細胞,交感鏈的神經節未見。其標記細胞出現的高峰比足三里偏于尾側,多見于S1~S2。(3)"梁門"穴區(包括"不容"、"承滿"、"梁門"、"關門"、"太乙"、"天樞"):在T6~T9的脊髓前角、T6~T10的后根節見到大量的標記細胞,交感鏈的神經節(T6~T11)。(4)"胃俞"穴區組(包括"脾俞"、"胃俞"、"三焦俞"):在T9~T11的脊髓前角、T9~T12的后根節見到大量的標記細胞,交感鏈的神經節(T9~T12),其標記細胞的數量明顯不同,膀胱經的標記細胞數量明顯多于胃經。
(5)"四白"穴區組(包括"承泣"、"四白"、"巨"):在交感神經的頸上節、上頸髓的前角(副神經核)、面神經核、三叉神經咀嚼核、三叉神經中腦核和三叉神經半月節。
實驗中發現乳鼠的神經系統發育要早,尤其外周神經和植物神經。外周神經節和脊髓大小的比例乳鼠明顯大于成年鼠,星狀神經節的大小比例也明顯大于成年鼠。星狀神經節在乳鼠期間異常發達,跨越3~4個脊柱節段(C8~T3)。3 討論以往我們對胃經的研究主要從單個腧穴后根節的研究入手,觀察腧穴和臟腑的神經節段性分布,來研究經脈臟腑的相關聯系。本實驗的目的是從整個胃經入手來觀察胃經的腧穴與胃的神經節段性分布情況。實驗采用乳鼠作為實驗動物,主要是乳鼠的骨骼尚未發育,可以進行整體切片,有利于對脊神經節與交感鏈上的神經節進行觀察。其結果提示:(1)胃經的腧穴能夠治療胃部疾患的機理,不同部位可能有所不同。腹部的梁門穴區與胃的神經節段性分布有明顯的重疊現象。因此,梁門穴區與胃相關的聯系途徑可能主要在外周神經,而足三里穴區和四白穴區的神經節段性分布與胃的神經支配節段無重疊現象,因此,這些腧穴與胃相關的聯系途徑可能主要在更高部位的神經系統,而不是在外周神經。
(2)相同部位的不同經脈的腧穴在脊髓的節段性分布大致相同又略有差異。胃經的足三里穴區與膽經的陽陵泉穴區的神經節段性均出現在L4~S2節段,但是,膽經陽陵泉穴區的標記細胞出現的高峰比足三里穴區的更偏于尾側。因此,同樣神經節段的腧穴其功能具有相對特異性,雖有差異也有共性。足三里穴區和陽陵泉穴區側重面有所不同,一個是胃經,一個是膽經,但均屬消化系統。腹部的胃經和背部膀胱經腧穴,雖治療胃的疾患側重面有所不同,但均可治療胃的疾患。
(3)在梁門穴區組交感鏈上的標記細胞可見于T6~T10節段與膀胱經胃俞穴區的T9~T12節段大致相同。對討論胃經與胃相關的聯系途徑是否在交感鏈的交感神經節上形成交會,還有待于對以后的胃的研究結果進行綜合分析。本實驗足三里穴區的研究未能在交感鏈上見到標記細胞,主要因為在腰骶部的這段交感鏈位置不太固定,遠離于脊髓和后根節,也易于脫落。
(4)乳鼠外周神經節的大小與中樞神經的脊髓比例明顯與成年鼠不同。其外周神經更為發達。這是否能解釋經絡的有些功能在嬰幼兒時期表現更為明顯,因其中樞神經系統發育不完全,低級中樞神經活動尚未受到來自高級中樞的控制,因而低級中樞的神經活動則更能顯現出來。這種現象有待進一步證實。
4 小結胃經與胃相關聯系途徑的研究中,其不同部位的腧穴聯系的途徑可能有所不同。腹部的腧穴與胃相關的聯系途徑主要在外周神經,而頭面部和下肢的腧穴與胃相關的聯系途徑可能在更高的神經系統。
相同部位的不同經脈的腧穴,其在脊髓的節段性分布大致相同又略有差異。同樣神經節段的不同經脈的腧穴其功能有差異也有共性,腧穴的功能具有相對特異性。
5 參考文獻1 陶之理,席時元,張祖萍."間使"穴區傳入神經元的節段性分布.針刺研究,1986;(11):402 陶之理,等.足三里穴區感覺神經元的節段性分布.
針刺研究,1983;(2):1363 張家駒,等.家兔"足三里"穴與盲腸傳入神經元節段性分布---HRP研究.針刺研究,1992;(3):1234 李瑞午,陶之理.胃副交感內臟運動節前纖維的發端---HRP法研究.針刺研究,1983;(8):1825
MesulamMM:TracingNeuralConnectionwithHorseradishPeroxidase,IBROHandbookSeries:MethodsintheNeurosciences,NewYork,JohnWileyandSons,
1982;2:36(收稿日期:19991229,成平發稿)